허혈성 뇌졸중의 마우스 모델에서 경색 형성을 감지하기 위한 TSPO-PET/CT 이미징

마취된 대조군 마우스와 체감각 피질로의 혈류가 제한된 마우스를 복용하십시오.

이러한 제한은 뇌에서 신경 세포 사멸과 경색 형성을 유발하여 미세아교세포 활성화와 말초 면역 세포 침윤을 유발합니다.

면역 세포는 미토콘드리아 전이체 단백질(TSPO)을 과발현합니다.

PET/CT 스캐너 베드에 마우스를 고정합니다.

마우스 몸체를 통해 X선을 통과시키는 회전하는 X선 소스를 사용하여 CT 스캔을 수행합니다.

검출기는 X선을 캡처하여 주요 해부학적 랜드마크의 이미지로 처리합니다.

꼬리 정맥을 통해 TSPO 방사성 추적자를 주입합니다.

방사성 추적자는 경색 부위로 이동하여 면역 세포의 TSPO에 결합합니다.

PET 스캔을 수행합니다.

방사성 추적자는 양전자 붕괴를 겪으며 근처 전자와 충돌하여 감마선을 생성하는 양전자를 방출합니다.

검출기는 이러한 광선을 포착하고 방사성 추적자 분포의 3D 이미지를 재구성합니다.

오버레이된 PET/CT 이미지를 시각화하여 추적자 흡수율이 높은 경색 부위를 식별합니다.

취된 쥐를 PET/CT 스캐너 침대에 엎드린 자세로 배치하여 곧게 펴고 코뿔에 단단히 고정되도록 하는 것부터 시작합니다. 부드러운 수술용 테이프로 각 마우스의 머리와 몸을 침대에 테이프로 붙여 테이프 배치로 인해 호흡이 제한되지 않도록 합니다. 동물이 침대에 고정되고 호흡이 안정되면 레이저 십자선을 켜고 스캐닝 베드를 움직여 네 마리의 쥐 모두의 뇌와 정렬

마우스의 뇌가 시야 중앙에 최대한 가깝게 되도록 스캐너 베드를 획득 위치로 이동합니다. 마우스의 스카우트 뷰 이미지를 획득하여 위치를 확인하고 필요한 경우 인터페이스의 시야 상자를 드래그하여 위치를 조정합니다. 마지막으로 스캐너 소프트웨어에서 워크플로 시작을 클릭하여 CT 스캔을 시작하고 대화형 사용자 프롬프트 표시를 선택하여 추적자 주입 전에 PET 스캔을 수동으로 시작할 수

마우스가 자동으로 CT에서 PET로 진행되면 방사성 추적자 주입을 위해 스캐너 뒷면을 설정합니다. 선반에 보호용 흡수 패딩을 놓고 가위와 라이터가 준비되어 있는지 확인하십시오. 밀봉된 카테터 튜브를 가위로 잘라냅니다. 카테터 라인에 기포가 없는지 확인하고 10-20마이크로리터 식염수 세척을 수행하여 캐뉼라가 여전히 정맥 내에 있는지 확인합니다. 그런 다음 이전에 측정된 용량 주사기를 4개의 카테터 각각에 로드하고 각 마우스에 어떤 용량이 주어졌는지 추적합니다.

PET 스캔을 시작할 준비가 되면 확인을 클릭하고 동시에 10초 타이머를 시작합니다. 스캐너 뒤쪽에 두 명의 연구원이 용량 주사기를 들고 타이머가 0에 도달하면 네 마리의 마우스를 동시에 주사하도록 합니다. 각 카테터를 50-100마이크로리터의 식염수로 세척하여 전체 용량이 꼬리 정맥에 들어가도록 하고 라이터를 사용하여 튜브를 다시 한 번 다시 밀봉합니다.

다음으로, 선량 교정기를 사용하여 선량 주사기를 측정하여 잔류 방사능 값을 얻습니다. 값과 기록된 시간을 기록해 둡니다. 스캔이 완료되면 모션 컨트롤 패널 내의 수평 홈 버튼을 사용하여 PET 침대를 원래 위치로 되돌립니다. 스캐너에서 마우스를 제거하고 카테터를 조심스럽게 제거합니다. 과도한 출혈을 방지하기 위해 캐뉼라 삽입 부위에 부드럽게 압력을 가하십시오. 그런 다음 용량 교정기를 사용하여 카테터의 잔류 활성을 측정합니다.

마지막으로, 후처리 관리 소프트웨어를 열어 데이터를 재구성하면 첫 번째 파일에서 생성된 히스토그램 데이터를 사용하여 각 스캔을 자동으로 재구성합니다. PET 분석의 경우 먼저 이미지 분석 소프트웨어를 엽니다. Open Data 아이콘을 클릭하여 CT 이미지를 로드합니다. 그리고 데이터 추가 아이콘을 선택하여 동적 PET를 로드합니다. 드롭다운 메뉴의 시계열 연산자를 통해 데이터의 시각적 품질 관리를 수행합니다. 참조 및 전역을 선택하고 색상 스케일에 적절한 최소 및 최대를 적용합니다.

동적 PET 데이터를 프레임별로 시각화하여 방사능 흡수를 확인하고 스캔 내에서 모션 혼란을 확인합니다. 그런 다음 산술 함수를 사용하여 평균 PET 이미지를 만듭니다. 평균 선택을 선택하고 참조를 선택 취소한 다음 입력 하나를 확인합니다. 입력 2 및 입력 별이 선택되어 모든 PET 프레임의 평균을 생성합니다.

데이터 관리자 탭으로 이동하여 평균 이미지를 입력 한 위치까지 드래그하여 평균 PET 이미지를 사용하여 PET 신호를 시각화할 수 있습니다. 그런 다음 MinMax 도구에서 자동 계산을 클릭하여 색상 스케일을 재분배합니다. 다음으로 자동 3D 기능을 사용하여 CT를 평균 PET 파일에 등록합니다. 방향 변경 등록 드롭다운 메뉴에서 참조 및 입력 1을 선택한 다음 강성 고속 입력 1을 선택하여 참조 등록을 선택합니다.

세 차원 모두에서 정합을 육안으로 확인하고 필요한 경우 수동 3D 탭에서 이동 및 회전 기능을 사용하여 수동으로 조정합니다. 등록이 만족스러우면 입력 2 및 입력 별을 선택하고 확인 표시를 클릭하여 모든 애완 동물 프레임에 적용합니다. DM에서 CT 및 PET 파일을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 원시로 저장합니다. 그런 다음 드롭다운 메뉴에서 자르기를 선택하고 이미지 경계를 드래그하여 뇌간 아래에 한 번에 한 마리의 마우스 머리를 자릅니다.

두개골이 모든 치수에서 직선이 되도록 PET 및 CT 이미지의 방향을 수동으로 변경합니다. 인터페이스의 왼쪽 상단에 있는 데이터 추가 버튼을 사용하여 해당 마우스의 MR 이미지를 로드합니다. 수동 3D 방향 변경을 사용하여 MR을 이동하고 CT 이미지 내의 두개골에 맞춥니다. 그런 다음 시각적 컨트롤러 탭 내에서 PET 시각화를 선택 취소하여 PET 시각화를 끄고 MR 및 CT만 사용하여 관심 영역 또는 ROI를 그립니다.

3D ROI 도구에서 ROI 추가 버튼을 클릭하여 새 ROI를 만들고 이름을 infarct로 지정합니다. 스플라인 도구를 선택하고 마우스 왼쪽 버튼을 클릭하여 ROI 테두리를 그리고 마우스 오른쪽 버튼을 클릭하여 닫습니다. 그런 다음 새 ROI를 생성하고 반대쪽으로 레이블을 지정합니다. 경색 ROI를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 내보내기를 선택합니다. 그런 다음 ROI를 위치 2, 입력 1로 이동하여 새 ROI를 시각화하고 수동으로 방향을 변경할 수 있습니다.

입력 하나만 선택한 상태에서 ROI 상자를 선택하고 보기만을 선택하여 경색 ROI의 방향을 바꾸지 않고 시각화할 수 있습니다. 방향 변경 등록 메뉴 내에서 연산자 기능을 사용하여 왼쪽 오른쪽 플립을 적용하고 새 ROI를 반대쪽의 동일한 영역으로 수동으로 이동합니다. 그런 다음 산술 연산자를 선택하고 새 ROI에 스칼라 곱셈 2를 적용하여 ROI를 독립적으로 정량화할 수 있습니다.

3D ROI 도구로 돌아갑니다. 내보내기 및 실험 탭으로 이동하여 ROI 가져오기 버튼을 클릭합니다. 대화 상자에서 입력 하나를 선택하여 새 볼륨을 반대쪽 ROI로 로드합니다. 마지막으로 평균 PET 이미지를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 언로드한 다음 PET를 다시 켭니다. 3D ROI 도구 내의 내보내기 결과 아이콘을 사용하여 정량적 흡수 결과를 생성합니다.