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신경과학
0 조회수 • 3:07 분 • May 29th, 2025
3차원 암세포 응집체인 종양 스페로이드가 포함된 멀티웰 플레이트로 시작합니다.
광학 간섭 단층 촬영 (optical coherence tomography) 또는 OCT 이미징 스테이지에 배치하여 정확한 이미징을 위해 안정화되도록 합니다.
최적의 조명 초점을 위해 렌즈를 조정하고, 스캔 매개변수를 설정하고, 시간이 지남에 따라 이미지 캡처를 시작합니다.
빛이 세포와 상호 작용하면서 세포 구조와 깊이에 따라 다양한 강도로 반사됩니다.
OCT는 이러한 반사광 강도를 캡처하고 서로 다른 평면에서 고해상도 2차원 단면 이미지를 구성합니다.
플레이트를 움직여 모든 웰에서 종양 스페로이드의 이미지를 획득합니다.
소프트웨어를 사용하여 이러한 이미지를 정렬하고 처리하여 3차원 스페로이드 모델을 생성하여 크기, 모양 및 구조를 포함한 형태학적 특성을 드러냅니다.
시간이 지남에 따라 스페로이드의 세포는 죽고 손상된 구조는 빛 산란을 증가시켜 반사된 빛의 강도를 감소시킵니다.
이는 생존 가능한 세포와 생존 불가능한 세포를 구별하여 생리학적 상태를 모니터링할 수 있게 합니다.
종양 스페로이드 이미징 당일, 인큐베이터에서 멀티웰 플레이트를 제거합니다. OCT 이미징 시스템 아래로 옮겨 플레이트 어댑터에 놓습니다. 플레이트의 높이를 조정하려면 변환 단계의 z 방향을 따라 이동합니다. 맞춤형 이미징 소프트웨어에서 발달 단계에 따라 전체 종양 스페로이드를 커버하도록 원하는 OCT 스캐닝 범위를 설정하고 매개변수 저장을 클릭하여 설정을 저장합니다.
그런 다음 종양 스페로이드의 최적화된 xz 및 yz OCT 미리보기를 보여줍니다. 스페로이드가 포함된 플레이트의 모든 웰에 대해 종양 스페로이드의 3D OCT 이미지를 하나씩 획득합니다. 미리보기 이미지를 보려면 미리보기 버튼을 클릭합니다. 그리고 OCT 이미지를 획득하려면 획득 버튼을 클릭하십시오. OCT 데이터 수집의 전체 스테이지 이동 프로세스를 기록합니다.
- 모든 종양 스페로이드에 대해 최적의 이미지 품질을 보장하려면 플레이트 어댑터를 정확하게 조정해야 하며 중간 볼륨은 동일해야 합니다.
- 사용자 정의 C++ 처리 코드를 사용하여 종양 스페로이드의 3D OCT 데이터 세트를 처리하여 OCT 구조 이미지를 생성합니다. 스페로이드의 중심을 가로지르는 3개의 단면 xy, xz 및 yz 평면에서 2D OCT 이미지를 사용하여 스페로이드 이미지의 콜라주를 생성합니다.