마우스 모델에서 뇌 저산소증-허혈에 의해 유도된 뇌 손상 이미징

마취된 마우스를 가져와 노즈콘을 사용하여 산소를 공급합니다.

마우스의 우측 총경동맥은 우뇌 반구로의 혈류를 감소시키기 위해 결찰되어 저산소증으로 인한 손상에 걸리기 쉬웠습니다.

카테터를 삽입하여 방사성 표지 포도당을 정맥 주사합니다.

스캐너에 마우스를 배치하여 양전자 방출 단층 촬영(PET)을 사용하여 포도당 대사를 동시에 이미지화하고 자기 공명 영상(MRI)을 사용하여 구조적 변화를 동시에 이미지

산소를 감소시켜 저산소증을 유도하여 취약한 반구의 세포 스트레스를 악화시킵니다. 스트레스는 세포 내 수분 축적으로 이어져 세포외 공간에 비해 부어오른 세포 내에서 물 분자의 움직임을 제한합니다.

MRI 이미지에서 제한된 물 분자 움직임은 영향을 받은 반구의 어두운 영역으로 나타나 저산소증으로 인한 손상을 나타냅니다.

동시에 주입된 방사성 표지 포도당은 뇌에 도달하여 건강한 세포에 흡수됩니다.

PET 영상은 방사성 표지된 포도당 분포를 보여주며, 영향을 받은 반구의 어두운 영역은 저산소증으로 인한 손상으로 인한 포도당 흡수 감소를 나타냅니다.

먼저 산소 및 질소 오류 소스를 켜서 산소 및 질소 유량계의 작동을 확인하십시오. 그런 다음 유량계의 전원을 켭니다. 분당 1리터의 유속에서 산소의 유량을 분당 114.3mg으로, 질소의 유량을 분당 1.150g으로 설정합니다.

다음으로, 마취, 호흡 패드 및 히터 시스템이 안전하고 기능적으로 배치되었는지 확인하여 동물 침대를 준비합니다. 그런 다음 방사성 추적자가 포함된 기준 마커를 시야 내의 동물 침대에 부착합니다. 이소플루란으로 마우스를 마취하고 꼬리를 예열하여 카테터 삽입을 준비합니다.

준비가 되면 헤파린 처리 식염수로 미리 채워진 PE-10 카테터를 최대 5cm까지 삽입합니다. 시아노아크릴레이트 접착제 한 방울로 삽입 부위에 IV 라인을 고정합니다. 그런 다음 동물을 준비된 동물 침대로 옮깁니다. 건조를 방지하기 위해 마우스의 눈에 안용 연고를 다시 바르고, 위쪽 앞니를 치아 막대 주위에 놓고 이어 바를 제자리에 놓아 동물의 머리를 안정시킵니다.

분당 0.5에서 1리터 사이에서 1%에서 2% 이소플루란 흐름을 시작합니다. 직장 프로브 온도계를 삽입합니다. 체온 및 호흡 판독값이 작동하는지 확인하십시오. 다음으로, 200마이크로리터의 식염수에 약 600마이크로큐리의 방사성 추적자 용량을 1밀리리터 주사기에 넣고 주사기 펌프에 넣습니다.

약 3미터의 헤파린화 PE-10 튜브를 주사기에 연결하고 다른 쪽 끝을 꼬리 정맥 카테터 라인에 연결합니다. MRI 코일과 라인 및 케이블, 특히 마취 튜브의 위치

뇌의 중심이 MRI 코일, 애완동물 시스템 및 MRI 자석의 중심과 정렬되어 있는지 확인하십시오. 그런 다음 동물 침대를 자석의 구멍 안으로 조심스럽게 앞으로 밀어 넣습니다. 임피던스와 주파수 불일치를 최소화하기 위해 코일의 조정 손잡이를 돌려 MRI 코일의 튜닝 및 매칭을 수행합니다.

그런 다음 희귀한 시도 파일럿 시퀀스를 선택하고 스캔 제어 창에서 시퀀스를 실행하여 스카우트 이미지를 획득합니다. 동물의 위치를 확인하고 뇌가 중앙에 오를 때까지 필요한 경우 위치를 조정하십시오. 그런 다음 shim을 0 값으로 재설정합니다. 이제 3.9mm x 6mm x 9mm의 직사각형 부피를 사용하여 뇌 내에서 점 분해 분광 스캔 시퀀

CalcLinewidth 매크로 명령을 사용하여 수선 폭을 확인합니다. 절반 최대값의 전체 너비가 허용되는 경우 기하학적 편집기를 사용하여 확산 가중 이미징 스캔을 위한 슬라이스 계획을 배치합니다. 결과 슬라이스 계획이 원하는 대로 정렬되면 모든 후속 스캔에 대해 스캔 제어 창에서 이 슬라이스 계획을 복사하고 이미지 획득을 시작합니다.

다음으로, 애완동물 획득이 준비되고 시작할 준비가 되면 주입 펌프를 시작합니다. 카테터의 식염수를 주입한 후 방사성 추적자의 유입을 포착하기 위해 애완동물 수집을 시작합니다. 계수율을 모니터링하고 성공적인 주입을 나타내는 계수가 점진적으로 증가하는지 확인하십시오. 10-15분 후 의료용 공기 흐름을 끄고 즉시 산소 및 질소 유량계의 전원을 켜서 8% 산소와 92% 질소를 공급하여 저산소 문제를 시작합니다.

이 시점에서 이소플루란을 0.8%로 줄입니다. 저산소 챌린지를 시작한 직후 이전 스캔 설정을 사용하여 확산 가중 이미지 획득을 시작합니다. 첫 번째 스캔이 완료된 직후 두 번째 확산 가중 이미지 획득을 시작합니다.

유량계의 전원을 끄고 의료용 공기 흐름을 복원하고 이소플루란 농도를 1%에서 2%로 되돌려 저산소 문제를 끝냅니다. 저산소증 후 확산 강조 영상 스캔을 획득한 다음 주입 펌프를 끄고 축 및 시상면에서 해부학적 이미지를 획득합니다. 지오메트리 편집기를 사용하여 획득 시야가 뇌를 덮는지 확인합니다.