경피적 부고환 정자 흡인 및 처리를 위한 기술

정액

에 남성 배우자나 정자가 부족한 상태인 무정자증이 있는 남성 환자부터 시작하십시오.

생식기 부위를 소독하고 드레이프로 덮어 정자를 생성하는 고환을 수용하는 기관인 음낭만 노출시킵니다.

해당 부위를 비추고 정자의 성숙과 저장을 담당하는 구조인 부고환을 식별합니다.

배우자를 위한 특수 배양액이 들어 있는 주사기를 부고환 조직에 삽입합니다.

조직에 구멍을 뚫으면서 음압을 가하여 정자가 포함된 부고환액을 추출합니다.

정자 생존력을 보존하기 위해 수집된 액체를 배양 용액이 들어 있는 접시로 옮깁니다.

현미경을 사용하여 운동성을 나타내는 성숙하고 건강한 정자를 세십시오.

용액을 튜브로 옮긴 다음 원심분리하여 정자를 분리하고 상청액을 제거합니다.

세포를 신선한 배양 용액에 재현탁합니다.

분리

된 정자는 이제 불임 치료 절차에 사용할 준비가 되었습니다.

시작하려면 수술 기구 패키지, 주사기 2개, 소독액, 멸균 고무 장갑 및 접착 드레싱을 수집하십시오. 고압 증기 멸균을 거친 수술 기구 패키지의 손상 여부를 검사합니다. 패키지를 기기 테이블에 놓고 외부 레이어를 엽니다. 다음으로 남성과 전문의에게 멸균 고무 장갑을 착용하도록 요청하십시오.

수술 기구 패키지의 내부 층을 열고 멸균 표시 테이프가 제대로 멸균되었는지 확인하십시오. 그런 다음 마취 및 수술을 위해 0.7밀리리터 바늘이 장착된 5밀리리터 주사기 2개를 준비합니다. 리도카인 주사가 포함된 팽대부를 엽니다. 5밀리리터 멸균 주사기를 사용하여 리도카인 용액을 흡인하고 주사기에서 기포를 제거합니다.

이제 준비된 환자를 수술대 위에 쇄석술 자세로 놓습니다. 바지를 벗은 후 배꼽 위의 상의를 고정하여 배꼽 아래의 회음부와 하복부를 완전히 노출시킵니다. 그런 다음 그림자 없는 램프의 각도를 조정하여 환자의 음낭을 비

춥니다.

타원형 집게를 사용하여 멸균 거즈 볼을 잡습니다. 거즈 볼을 소독액에 완전히 담그십시오. 그리고 하복부부터 시작하여 허벅지 앞쪽과 안쪽, 회음부 부위, 음경, 음낭으로 피부를 소독합니다. 그런 다음 환자의 엉덩이 아래에 멸균 사각 수건을 놓습니다. 멸균 홀드 타월을 수술 부위 주위에 펴서 전체 부위의 음낭을 완전히 노출시킵니다.

멸균 파스퇴르 피펫을 사용하여 약 2밀리리터의 G-MPOS-PLUS 배양액을 배양 접시로 옮깁니다. 뚜껑을 닫은 후 이송 창을 통해 수술실에 있는 간호사에게 접시를 전달합니다. 이제 기구 테이블의 멸균 수건 위에 배양 접시를 놓고 뚜껑을 엽니다.

또 다른 5밀리리터 주사기를 사용하여 약 0.2밀리리터의 G-MPOS-PLUS 배양액을 흡인하고 기포를 제거합니다. 그런 다음 왼손으로 환자의 음낭을 잡고 천자가 필요한 부고환을 고정합니다. 오른손으로 부고환을 촉진하여 외과적 천자 위치를 확인합니다.

그런 다음 오른손에 G-MPOS-PLUS 배양액이 들어 있는 5밀리리터 주사기를 사용하여 부고환 조직에 피부에 수직으로 천공합니다. 음압을 유지하면서 부고환 조직에 반복적으로 구멍을 뚫어 바늘을 통해 체액이 들어갈 수 있도록 한 다음 천자 바늘을 빼냅니다.

추출된 부고환액을 배양 접시에 주입합니다. 그런 다음 근처의 G-MPOS-PLUS 배양액을 흡인하여 주사기를 헹구어 수집된 부고환액의 양을 최대화합니다. 이제 G-MPOS-PLUS 배양액과 부고환액이 들어 있는 배양 접시를 이송 창을 통해 배아 실험실 기술자에게 이송합니다.

배양 접시를 도립 광학 현미경의 스테이지에 놓고 고정합니다. 현미경의 전원 스위치를 켜고 광도를 적절하게 조정하십시오. 그런 다음 도립 광학 현미경의 변환기를 회전시킵니다. 10배 대물 렌즈를 선택하고 거친 초점 나선과 미세한 초점 나선을 회전하여 초점 거리를 조정합니다.

부고환 정자를 찾으면 40배 배율로 관찰하여 그 수와 질을 평가합니다. 멸균 파스퇴르 피펫을 사용하여 충분한 활성 정자를 관찰한 후 배양 접시에서 액체를 15밀리리터 원심분리기 튜브로 옮깁니다. 원심분리기 튜브를 밸런스 트레이에 놓고 멸균수가 들어 있는 동일한 사양의 원심분리기 튜브를 사용하여 수평을 유지합니다.

그런 다음 원심분리기 도어를 엽니다. 튜브를 카드 슬롯에 대칭으로 놓고 도어를 닫습니다. 시작 버튼을 눌러 원심분리 과정을 시작합니다. 공정이 완료되면 부고환액이 들어 있는 튜브를 원심분리기에서 제거합니다. 그런 다음 멸균 파스퇴르 피펫으로 상청액을 부드럽게 흡인하고 채취된 상청액을 버립니다.

멸균 파스퇴르 피펫을 사용하여 원심분리기 튜브 바닥의 침전물을 약 2밀리리터의 G-IVF Plus 배양 용액이 들어 있는 새 원심분리기 튜브로 옮깁니다. 용액을 부드럽게 피펫팅하여 침전물을 완전히 재현탁시킵니다. 약 0.5밀리리터의 G-IVF Plus 배양 용액을 원심분리기 튜브로 옮깁니다. 부고환 정자를 바닥에 부드럽게 불어 완전히 매달아 ICSI 시술에 사용합니다.