유기형 마우스 뇌 절편에서 종양 성장을 평가하기 위한 생물 발광 이미징

종양 세포가 있는 기관형 마우스 뇌 절편이 포함된 멀티웰 플레이트를 가져 와십시오. 이 세포는 효소 루시페라아제를 발현합니다.

인서트를 들어 올려 루시페린 용액을 배지에 넣고 잘 섞습니다. 인서트를 웰에 다시 넣습니다.

루시페린은 종양 세포에 들어가 루시페라아제에 의해 산화되어 생물발광을 방출합니다.

샘플에서 방출되는 생물 발광을 포착할 수 있는 생체 내 이미징 시스템의 이미징 챔버 내부에 플레이트를 배치합니다.

외부 조명 간섭을 방지하기 위해 챔버를 잠급니다.

이미지당 하나의 웰을 캡처하도록 카메라 설정을 조정합니다.

스테이지를 이동하여 우물을 카메라 바로 아래에 배치합니다.

방출된 생물발광의 강도에 따라 획득 시간을 최적화합니다.

종양의 모양을 정의한 다음 생물 발광 이미징을 시작합니다.

뇌 절편에서 종양 성장을 평가하기 위해 생물 발광 신호를 정량화합니다.

밀리리터당 30밀리그램의 루시페린 용액 5마이크로리터를 멸균 후드 내부의 인서트 아래 배지에 피펫팅합니다. 고정식 카메라 아래 기기의 이미징 챔버 내부에 뚜껑이 있는 6웰 플레이트를 놓고 챔버 도어를 잠급니다.

소프트웨어를 열고 기기를 초기화합니다. 카메라 설정을 선택하여 이미지당 하나의 웰만 시각화하고 캡처할 수 있도록 한 후 이미징할 웰을 카메라 바로 아래에 배치합니다. ROI 도구를 사용하여 종양 모양과 크기 주위에 맞춥니다. ROI를 측정하고 총 판독값을 보고하여 슬라이스에 있는 각 종양의 생물 발광 신호를 정량화합니다.