Name: 리그노셀룰로오스성 자료에 대한 높은 처리량 당화 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 39 s
Description: 학습하세요 고처리량 당화 분석 방법을 통해 식물 바이오매스의 소화성을 평가하는 기술을. 산업용 바이오연료 생산을 위한 효율적인 품종 선별에 활용할 수 있습니다.

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저자 cellulolytic 효소의 선물 Viksø - 닐슨 (Novozymes)을 감사드립니다. 이 작품은 FP7 갱신으로하고 BBSRC 프로젝트 BB/G016178 및 BB/G016194에 의해 후원되었다.

1. 샘플 준비 우리는 일반적으로 풀의이나 우디 식물 중 하나에서 비롯된와 함께 작동합니다. 풀의 재료의 경우 우리는 성숙에 식물을 성장하고, 노화가 완료되면 종자 개발은 우리가 마른 줄기를 수집합니다. 줄기는 4mm 세그먼트로 썰어 세 밀링 공 2 ML 튜브에 배치됩니다. 우디 자료의 경우, 샘플은 물론 나무 파일을 거친 톱밥을 접지하고 다음 추가 처리를 위해 공을 공장에 배치. 샘플은 연삭 / 역 (그림 1) 포맷 내에 선반에 배치됩니다. 이 기지는 순차적으로, grinds 믹스, 각 샘플의 무게. 샘플마다 필요한 반복의 수는 특정 입자 크기에 대한 본질적인 다양성이 결정되는 예비 실험의 일련의 지상 자료를 테스트하여 설정됩니다. 2 ML의 튜브는 하단에 피어싱하고 자료 선택된 잘 위에 유리병의 진동에 의해 적절합니다. 진동 팔은 분말의 정확한 분배에 대한 허용의 균형에서 피드백에 의해 제어됩니다. 로봇 표준 분석 / 음 4 MG를 dispenses 4 반복 대부분의 경우에 필요합니다. 이것은 20 식물 샘플 / 플레이트가 분석 수 있습니다. 2. 전처리 샘플 서식되면, 96 - 웰 플레이트는 자동 액체 처리 시스템 (그림 2)에 의해 처리됩니다. 여기 가벼운 전처리가 산성이나 알칼리성 솔루션을 350 μL를 추가하고 적응 블록에 접시를 가열하여 식물 재료에서 수행됩니다. 분석하는 동안 증발을 방지하려면 96 잘 플레이트는 실리콘 매트와 함께 봉인하고 있습니다. 전처리의 온도와 시간은 연구되고있는 재료에 따라 수정할 수 있습니다. 최대 온도는하지만, 100 ° C.입니다 엄격한 pretreatments 테스트를위한 대안 절차는 온라인에서 자료를 pretreat 및 프로세스에서 pretreatmet을 제거하는 것입니다. 3. 가수 분해 <ol><li> 자료 pretreated 후, 로봇이 자동으로 전처리 솔루션, 그리고 세척, 모든 우물, 850 μL 25 MM 아세테이트 버퍼 5 번 제거합니다. rinses은 전처리 솔루션에 버퍼를 추가하고, 이후 예제에서 고체가 정착 있도록 이후 전체 볼륨의 50 %를 제거하여 실시하고 있습니다. 흡인의 높이는 우물의 바닥에서 고체를 aspirating 피하기 위해 액체 질량의 절반에서 설정되며이 방법을 사용하여 고체의 손실이 무시할 수 있습니다. 이들은 세척 후 잘의 산도는 4.5이며, 자료 효소 가수 분해를위한 준비가되었습니다. </li><li> cellulases 및 hemicellulases의 솔루션을 포함하는 효소 혼합물은 로봇에 의해 추가됩니다. 각 우물에, 효소 혼합물의 850 μL이 총동원되고 번호판이 50 ° C 떨고 인큐베이터로 이동합니다. 표준 가수 분해는 8 H에 대해 수행하지만, 이번 실험의 목적에 적용할 수 있습니다. 풀밭에 사용되는 표준 효소 로딩은 자료 7 FPU / g이다. </li></ol> 4. 설탕 줄이는 감지 가수 분해 이후에 릴리스된 설탕 감소의 결정은 수정 3 - 메틸 - 2 - benzothiazolinone hydrozone (MTBH) 방법 3을 사용하여 수행되었습니다. 그것은 자동화와 같은 쉬운 단백질과 같은 성분의 간섭에 대한 이상 감염될 때문에 MBTH가 가장 적합한 방법으로 선정되었습니다. 그것이 정확하게 바이오 매스 hydrolysates에있는 농도에서 설탕을 계량 수 있도록 표준 광학 96 잘 플레이트에 적합합니다 250 μL의 최종 볼륨과 로봇 플랫폼에 사용하기 위해이 매우 민감한 방법을 수정했습니다. 아래의 모든 단계를 자동으로 수행되고 절감 설탕 세 가지 독립적인 결정은 각 당화 반응을 위해 실시되었다. <ol><li> hydrolyzate 30 μL은 깊은 우물을 판에서 가져온와 skirted PCR 96 자 판 25 MM의 아세트산 나트륨 버퍼 45 μL와 혼합되었다. </li><li> 1N NaOH 25 μL 및 0.43 MG / ML MBTH 및 0.14 MG / ML DTT을 포함하는 솔루션을 50 μl가 추가되었습니다. </li><li> 혼합 후, PCR 플레이트는 60 ° 온수했다 모든 96 우물에 열을의 정확히 같은 금액을 제공하는 thermocycler 또는 이와 유사한 장치 20 분 C. </li><li> 그 결과 반응은 광학 판으로 전달했다. </li><li> oxidising 시약 (0.2 % FeNH4 (SO4) 2, 0.2 % sulfamic 산성과 0.1 % HCL) 100 μl를 추가합니다. 최소한 1 H. 위해 잘 혼합하고 개발하기 위해 떠나 </li><li> 각 플레이트는 50 nmol, 100 nmol 150 nmol 포도당의 표준 반응을 포함해야합니다. 광학 접시는 620 nm의에서 읽을 수 있습니다. </li></ol> 5. 대표 결과 : 분석의 종류의 예는 그림 3과 4로 표시됩니다. 모든 결과는 자동으로 플랫폼을 사용하여 얻은되었습니다. 그림 3을 다시cellulolytic 효소의 증가 금액과 지상 포플러에서 8 H의 incubations에 의해 발표 설탕을 감소에서 증가를 제공합니다. 그림 4는 산성 및 포플러 샘플 알칼리 전처리의 효과를 제공합니다. NaOH의 전처리가보다 효율적입니다 가수 분해 동안 당분의 석방을 촉진에 희석 H2SO4 전처리. 가수 분해 후 측정 당분의 금액은 전처리가 1M 이상의 NaOH의 농도를 사용하여 수행할 때 줄어 듭니다. <img src="/files/ftp_upload/3240/3240fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 분쇄 및 바이오 매스의 96 음 형식에 대한 로봇 역 <img src="/files/ftp_upload/3240/3240fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 높은 처리량 당화 분석을위한 액체 취급 역 <img src="/files/ftp_upload/3240/3240fig3.jpg" alt="그림 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 3"> 그림 3. 포플러 샘플에서 설탕에 해당하는 금액을 줄이는 릴리스에 다른 효소 loadings 효과 <img src="/files/ftp_upload/3240/3240fig4.jpg" alt="그림 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 4"> 산성 전처리보다 같은 온도와 시간에 NaOH의 pretreatments 이후에 출시된 90에서 H2SO4의 다른 비율로 pretreament ° 30 분 C 이후에 릴리스된 그림 4. 포플러 샘플 당화에 다른 pretreatments의 효력. A.의 슈거스. B.의 슈거스 .

<ol><li>Carpita, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+Biogenesis+of+the+Cell+Walls+of+Grasses%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Plant+Physiol+Plant+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Structure and Biogenesis of the Cell Walls of Grasses.</a> Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol. 47, 445-476 (1996).</li>
<li>Gomez, L. D., Steele-King, C. G., McQueen-Mason, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustainable+liquid+biofuels+from+biomass%3A+the+writing%27s+on+the+walls%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Sustainable liquid biofuels from biomass: the writing's on the walls.</a> New Phytol. 178, 473-485 (2008).</li>
<li>Anthon, G. E., Barrett, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+reducing+sugars+with+3-methyl-2-benzothiazolinonehydrazone%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">Determination of reducing sugars with 3-methyl-2-benzothiazolinonehydrazone.</a> Anal Biochem. 305, 287-289 (2002).</li>
<li>Gomez, L. D., Whitehead, C., Barakate, A., Halpin, C., McQueen-Mason, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+saccharification+assay+for+determination+of+digestibility+in+plant+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Biofuels%22%5BJournal%5D)">Automated saccharification assay for determination of digestibility in plant materials.</a> Biotechnol Biofuels. 3, 23-23 (2010).</li>
</ol>

표준 당화 프로토콜의 변형 방식은 셀룰로오스 분해 효소의 활성 측정(예: 플레이트에 사용되는 효소 농도의 변화 또는 종이를 기질로 사용), 특정 물질에 대한 여러 효소 혼합물의 효율성 비교, 당화의 시간 경과 분석 등을 위해 동일한 플랫폼에서 활용될 수 있습니다.
서로 다른 식물 소재의 당화 능력을 비교하기 위한 표준 당화 프로토콜은 8시간의 가수분해 과정을 포함합니다(그림 3 및 4). 분석된 대부분의 식물 소재는 4회의 반복 실험이 필요합니다. 이러한 조건 하에서 본 플랫폼은 하루에 80개의 샘플을 처리할 수 있습니다. 이 분석법은 보리, 옥수수 및 brachypodium의 대규모 집단을 스크리닝하여 당화 능력의 변이성과 이를 결정하는 관련 유전자를 규명하는 데 사용되고 있습니다4.

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> 로봇을 연삭 및 무게 </td><td> Labman 자동화 </td><td></td></tr><tr><td> 모자 2 ML 마이크로 튜브 </td><td> Sarstedt (주) </td><td> 72.694 </td></tr><tr><td> 5mm 스테인리스 비즈 </td><td> Qiagen (주) </td><td> 69,989 </td></tr><tr><td> 1.2ml Abgene 스퀘어 웰 저장 플레이트 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> TUL - 050 - 050C </td></tr><tr><td> 96 스퀘어 웰 플레이트에 대한 왓먼 캡 매트 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> 7704-0104 </td></tr><tr><td> 액체 hanling 로봇 </td><td> Tecan 그룹 (주) </td><td> 자유 에보 (Evo) 200 </td></tr><tr><td> Sulphuric 수 소산 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> S/9231/PB17 </td></tr><tr><td> 수산화 나트륨 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> BPE359 - 500 </td></tr><tr><td> 아세트산 나트륨 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> S8750 - 500G </td></tr><tr><td> 초산 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> A/0420/PB17 </td></tr><tr><td> Novozyme 188 </td><td> Novozyme </td><td> DCN00214 </td></tr><tr><td> Celluclast 1.5L </td><td> Novozyme </td><td> CCN03122 </td></tr><tr><td> 96 잘 PCR 전체 스커트 플레이트 </td><td> Sarstedt (주) </td><td> 72.1980.202 </td></tr><tr><td> D - 포도당 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> G/0450/53 </td></tr><tr><td> 3 - 메틸 - 2 - benzothiazolinone hydrazone 하이드로 클로라이드 하이드 레이트 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> 129739 - 25G </td></tr><tr><td> DL - dithiothreitol </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> D9163 - 1G </td></tr><tr><td> 코닝 96 microplate 잘 플랫 바텀 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> TKT - 521 - 050H </td></tr><tr><td> 암모늄 철 (III) 황산의 dodecahydrate </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> F1668 - 250G </td></tr><tr><td> Sulfamic 수 소산 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> 242772 - 500G </td></tr><tr><td> 염산 </td><td> 피셔 과학 (주) </td><td> 12462-0026 </td></tr></tbody></table>

리그노셀룰로오스성 자료에 대한 높은 처리량 당화 분석

High-throughput Saccharification Assay for Lignocellulosic Materials

공장 리그노셀룰로오스성 바이오 매스를 만드는 다당류는 이후 biorefinery를 구축에서 사용할 수있는 당분의 범위를 생산하는 세분 수 있습니다. 이 원료는 화석 연료에 대한 현재 종속성을 대체하기 위해 지속 가능하고 탄소 중립 모두는 새로운 산업 플랫폼을, 구성 것입니다. 리그노셀룰로오스성 자료에 관찰 해체하는 말을 안들음은 식물 세포 벽 몇 가지 본질적인 특성에 의해 생산됩니다. 결정 셀룰로오스는 그러한 xylans 및 arabinoxylans 같은 매트릭스 다당류에 포함된하고, 전체 구조는 1 소화도 어려운 페놀 수지 carbon 폴리머 리그닌에 의해 쌌다입니다. 우리가 당화 2의 다양성을 평가하는 주요 세포 벽의 당화에 대한 병목 현상 또한 화면 돌연변이 및 번식 인구를 발견할 필요가 식물 재료의 소화율을 개선하기 위해. 이러한 작업은 높은 처리량 접근을 필요로하고 여기에 우리는 96 - 웰 플레이트 형식으로 당화 분석을 수행할 수 분석 플랫폼을 제시. 이 플랫폼은 다양한 식물 종 대형 인구의 lignocellulose의 소화율의 심사를 허용하도록 개발되었습니다. 우리는 많은 번호가 자동으로 시스템에 신속하게 평가하도록, 부드러운 전처리, 부분 가수 분해 효소와 설탕의 결정에 대한 반응 볼륨을 축소했습니다. 이것은 자동화된 플랫폼은 재현성 방식으로 표준 입자 크기로 공장 자재를 줄이기 위해 통제 조건 하에서 볼 밀링을 수행, 바이오 매스의 양을 밀리그램와 함께 작동합니다. 샘플 지상되면, 자동 서식 로봇 96 딥 웰 플레이트 (그림 1)의 해당 우물에 물질의 지정 및 기록된 금액을 dispenses. 일반적으로, 우리는 4 분석을 위해 복제가 4 우물에 동일한 자료를 분배. 접시가 원하는 레이아웃에있는 식물로 가득되면, 그들은 수동으로 액체 처리 스테이션 (그림 2)로 이동됩니다. 이 기지에서 샘플은 희석 염산 알칼리 중 하나와 함께 가벼운 전처리의 대상이되며 90 ° C. 최대 온도에서 incubated 전처리 솔루션은 연속적으로 제거되고 샘플은 가수 분해에 적합한 산도에게 반환하는 버퍼로 씻어서 있습니다. 샘플은 다음 50 시간 가변 길이에 대한 효소 혼합 ° C.와 incubated 아르 나누어지는는 hydrolyzate에서 가져온되고 줄이고 설탕이 자동으로 MBTH colorimetric 방법에 따라 결정됩니다.

식물 바이오 매스 샘플을 다수의 당화 잠재력을 결정하는 간단하고 빠른 방법을 설명합니다. 이 분석을 위해 자동화된 플랫폼은 96 접시와 잘 풀어 설탕의 전처리, 가수 분해 및 부량의 후속 성능 분석을위한 식물 바이오 매스의 준비를 포함한다.

식물 리그노셀룰로오스성 바이오매스를 구성하는 다당류는 분해되어 다양한 당을 생성할 수 있으며, 이는 이후 ...을 구축하는 데 사용될 수 있습니다.

안녕하세요, 저는 Kara Ted이고, 저는 Leo입니다. 반갑습니다. 그리고 저는 Simon McQueen Mason입니다.식물 바이오매스의 소화율은 현재 매우 큰 관심을 끌고 있는 주제입니다. 이는 바이오매스를 구성하는 식물 세포벽의 다당류에 많은 당이 결합되어 있으며, 이러한 당을 이용 가능한 형태로 추출할 수 있다면 이를 발효시켜 연료 및 화학 물질과 같은 다양한 제품을 생산할 수 있기 때문입니다. 불행히도 이러한 물질들은 소화시키기가 매우 어려우며, 소화율을 결정짓는 요인에 대해 더 깊이 이해하는 것이 시급한 과제입니다.따라서 재생 가능 그룹 생산에 식물 재료를 사용하기 위해서는, 이러한 식물들의 당화 잠재력을 측정할 수 있어야 합니다. 이에 따라 이곳 요크 대학교에서는 식물 재료의 대규모 집단을 스크리닝하여 그 당화 잠재력을 결정하고 있습니다. 당화는 다양한 산업 공정을 통해 가치 있는 화학 물질을 생산하기 위해 복잡한 탄수화물을 단당류 성분으로 분해하는 과정입니다.당화 가능성을 측정하기 위해, 우리는 바이오매스에 전처리와 효소 가수분해를 적용하여 방출되는 당의 양을 결정하는 마이크로 스케일 수준의 산업 공정을 재현합니다. 이를 통해 유전자형 중 흥미로운 품종을 식별합니다. 이 고처리량 시스템은 IG 6-웰 플레이트 형식으로 작동합니다.유전자형 간의 미세한 차이를 드러내기 위해 완만한 조건의 가수분해가 사용되며, 이는 다양한 기질 재료를 지원하고 서로 다른 효소를 평가하기에 충분히 유연합니다. 본 연구에서 사용하는 방법은 식물 재료를 분말 형태로 가공한 후, 90 °C에서 20분 동안 희석된 산 또는 알칼리로 전처리하는 과정을 포함합니다. 이어서, 상용 셀룰레이스 혼합물을 사용하여 50 °C에서 8시간 동안 효소 소화를 수행합니다.마지막으로, MBTH 방법을 사용하여 환원당의 방출량을 측정합니다. 식물 재료는 건조된 줄기 형태로 수확하며, 이를 4 mm 길이의 세그먼트로 절단합니다. 절단된 세그먼트들을 5 mm 금속 볼 3개와 함께 2 mL 바이알에 넣습니다.바이알에는 바코드가 개별적으로 부착되어 있으며, 샘플의 추적성을 확보하기 위해 이를 스캔합니다. 샘플은 분쇄 및 포맷팅 로봇에 로드됩니다. 샘플은 자동으로 분쇄 및 혼합되어 바이오매스가 96-웰 플레이트에 분주될 수 있도록 합니다.바이알의 뚜껑을 뚫은 후, 바이알을 로봇 암의 위치를 조정하여 분말을 분사하기 위해 진동하는 깔때기 안에 놓습니다. 깔때기의 진동은 웰당 분사되는 목표 질량을 달성하기 위해 저울로 조절됩니다. 바이오매스는 플레이트의 10개 컬럼에 분사하며, 표준 시료를 위해 2개 컬럼을 남겨둡니다.샘플당 4회 반복 실험을 수행하여, 플레이트당 20개의 샘플을 로딩합니다. 이 플레이트의 가수분해물을 PCR 플레이트에 3분할 하여 총 3개의 광학 플레이트를 만듭니다. 이러한 방식으로, 바이오매스 웰당 환원당에 대해 3회의 측정값을 얻게 됩니다.포맷팅이 완료되면, 증발을 방지하기 위해 플레이트를 실리콘 매트로 밀봉합니다. 준비가 되면 액체 핸들링 로봇으로 이동시킵니다. 액체 핸들링 로봇을 통해 전처리, 효소 가수분해 및 방출된 당의 정량이 자동으로 수행됩니다.2미터 길이의 테이블에는 필요한 다양한 시약용 용기와 플라스틱 소모품 보관 공간이 마련되어 있습니다. 전처리와 가수분해를 위한 인큐베이터와 당 정량을 위한 써모사이클러가 구비되어 있습니다. 전처리는 딥웰 플레이트에서 수행합니다.희석된 산성 또는 알칼리성 용액을 바이오매스 분말에 첨가합니다. 플레이트를 가열 블록으로 옮겨 90 °C에서 20분 동안 배양합니다. 배양이 완료되면 500 µL의 아세테이트 버퍼로 5회 세척하여 전처리를 제거합니다.전처리를 헹군 후, 효소 칵테일을 첨가합니다. 이는 표준 혼합물입니다. 여기에는 cellulose와 novozyme 1, 8 8이 4:1 비율로 포함되어 있으며, 농도는 웰당 7 FPU입니다.플레이트를 50 °C에서 8시간 동안 흔들어주며 배양합니다. 결과물인 가수분해액 75 µL를 PCR 플레이트로 옮깁니다. PCR 플레이트의 11번과 12번 컬럼에는 포도당 표준물질을 첨가합니다.다음으로 모든 웰에 1 M sodium hydroxide 25 µL를 첨가합니다. 마지막으로 MBTH 시약 50 µL를 PCR 플레이트에 피펫팅합니다. 가수분해물을 세 번째 PCR 플레이트로 모두 옮긴 후 딥 웰 플레이트를 보관합니다.PCR 플레이트를 써모사이클러로 옮겨 60°C에서 15분 동안 배양합니다. 공정의 마지막 단계는 색상 발색을 위해 반응 혼합물을 광학 플레이트로 옮기는 것입니다. 배양이 완료되면 PCR 플레이트를 써모사이클러에서 꺼냅니다.전이된 반응 혼합물에 100 µL의 산화제가 첨가됩니다. 발색을 촉진하기 위해 액체 핸들링 프로세스가 24시간 동안 4회 실행되며, 전처리 세척 및 효소 첨가에는 약 2시간이 소요됩니다. 효소 가수분해에는 8시간이 소요되며, 당 정량 분석에 추가로 2시간이 소요됩니다.첫 번째 플레이트가 8시간 동안 배양되는 동안, 다음 플레이트의 공정이 시작됩니다. 이러한 로봇 자원 배분을 통해, 방출된 환원당의 양을 결정하기 위해 하루 80개 샘플의 3배 처리량(throughput)을 달성합니다. 광학 플레이트는 620 nanometers에서 측정됩니다.얻어진 결과는 반응 시간당 밀리그램당 나노몰(nanomoles per milligram per hour)로 방출된 당의 양을 정량화하여 분석합니다. 시청해 주셔서 감사드리며, 본 영상이 여러분의 바이오 연료 연구에 도움이 되기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

식물 바이오 매스는 바이오 연료 생산에 사용될 수있는 주요 탄소 중립 되살릴 수있는 자원입니다. 식물 바이오 매스는 주로 세포 벽, lignocellulosics를 칭했다 구조적으로 복잡한 복합 재료로 구성되어 있습니다. 여기서 우리는 콘텐츠와 벽 파생 탄수화물의 구성의 포괄적인 분석을 위해 프로토콜을 설명합니다.

식물 세포 벽의 종합 작곡 분석 (리그노셀룰로오스성 바이오 매스) 2 부 : 탄수화물

이 프로토콜은 대장균의 표현 metagenomic 도서관에서 cellulolytic 활동에 높은 처리량 화면을 설명합니다. 화면이 솔루션을 기반으로하고 고도의 자​​동화, 그리고 흡광도 측정으로 최종 판독과 384 잘 microplates에 한 냄비 화학을 사용합니다.

Metagenomic 도서관에서 Cellulase 활동 Biomining에 대해 높은 처리량 화면

우리의 곰팡이 endoglucanase 활동을위한 화면으로 저렴한 비용, 높은 처리량 방법을...

에서 곰팡이 Endoglucanase 활동의 높은 처리량 검사 대장균</em

이 비디오는 불용성 발색 바이오매스 또는 ICB를 사용하여 식물 바이오매스에서 복합 다당류를 분해하는 데 효과적인 효소를 스크리닝하는 분석을 보여줍니다. 효소는 ICB를 가수분해하여 용해성 염료 결합 올리고당을 방출하고 효소 활성은 반응 생성물의 비색 분석으로 평가됩니다.

불용성 발색 바이오매스 기반 효소 스크리닝: 식물 바이오매스 분해 효소의 분해 활성을 평가하기 위한 분석

산업 폐기물을 수거하고 수정하여 미생물 성장을 분석할 수 있습니다. 리그노셀룰로오스 추출 기술은 특정 생분해 능력을 분석하기 위한 구성 요소를 제공합니다. 가스 크로마토그래피-질량 분석법은 펄프 폐기물에서 자란 미생물의 발효 산물을 식별합니다. 이러한 방법은 펄프 폐기물을 분해하는 미생물의 대사 능력을 결정합니다.

펄프 공장 폐기물 흐름에서 미생물 성장을 촉진하는 방법 및 배양된 미생물의 생분해 잠재력 특성화

식물 세포벽 구조 및 화학적 특성을 평가하여 바이오 연료 및 바이오 재료에 이상적인 공급 원료를 식별합니다. 표준 방법은 대규모 데이터 세트에 적용할 때 제한이 있습니다. 이러한 고처리량 전처리, 효소 당화 및 열분해 분자 빔 질량 분석 방법은 많은 수의 바이오매스 샘플을 비교하여 실험 시간과 비용을 줄입니다.

총 리그닌, 리그닌 단량체, 및 효소 설탕 자료 : 리그 노 셀룰로오스 바이오 매스의 반항의 변화의 높은 처리량 검열

우리는 소규모로 미생물 외다당류의 식별 및 특성화를 위한 자동화된 모듈식 고처리량 방법을 제시합니다. 이 방법은 빠른 사전 선택을 결합하여 분비된 다당류의 총량을 상세한 탄수화물 지문과 결합하여 새로 분리된 박테리아 균주 또는 전체 균주 수집을 빠르게 스크리닝할 수 있습니다.

자동화 모​​듈 높은 처리량 엑소 폴리 사카 라이드 심사 플랫폼은 매우 민감한 탄수화물 지문 분석과 결합

적응 진화와 분리 기술을 설명하고 신속하게 육탄 당과 효소의 오탄당의 혼합 당이 undetoxified 가수 분해물을 당화 및 40g / L의 에탄올을 통해 축적 소비 할 수있는 Scheffersomyces stipitis 변형의 파생 상품 NRRL Y-7124을 얻었다 증명된다.

에탄올에 리그 노 셀룰로즈의 생물에 대한 강력한 펜 토스 발효 효모의 진화를위한 기술

양성자성 저비용 이온 액체로 리그노셀룰로오스 바이오매스를 전처리하여 섬세한 셀룰로오스가 풍부한 펄프와 정제된 리그닌을 얻을 수 있습니다. 펄프는 효소 당화 후 높은 포도당 수율을 발생시킵니다.

저가 이온 성 액체와 리그 노 셀룰로오스 바이오 매스의 전처리

효소 스크리닝을 위한 고처리량 분석에 대해 설명합니다. 즉시 사용 가능한 이 멀티플렉스 분석 키트는 사전 선택된 Chromogenic Polymer Hydrogel (CPH) 기질과 complex Insoluble Chromogenic Biomass (ICB) 기질로 구성됩니다. 표적 효소는 다당류를 분해하는 내효소(endo-enzymes)와 프로테아제(protease)입니다.

소설 불용성 발색 기질 분석 키트를 사용하여 탄수화물 분해 효소의 높은 처리량 검열

OrganoCat은 리그닌, 발효 설탕 및 셀룰로오스 펄프로 온화한 조건하에서 리뇨셀룰로오스의 전처리 및 분획을 위한 방법입니다. 2,5푸란카르복실산을 촉매로 적용한 생원성, 이중성 용매 시스템과 2-메틸테트라하이드로푸란에서 OrganoCat 제품은 간단한 제품 회복을 위해 시상화됩니다.

오가노캣 공정을 이용한 리뇨셀룰로오스 바이오매스의 분획

학습하세요 고처리량 당화 분석 방법을 통해 식물 바이오매스의 소화성을 평가하는 기술을. 산업용 바이오연료 생산을 위한 효율적인 품종 선별에 활용할 수 있습니다.

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