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JoVE Journal Biology
Detection of Protein Interactions in Plant using a Gateway Compatible Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) System

게이트웨이 가능 Bimolecular의 형광 Complementation (BiFC) 시스템을 사용하여 공장에서 단백질 상호 작용의 검출

Full Text
26,011 Views
08:21 min
September 16, 2011

DOI: 10.3791/3473-v

Gang Tian1, Qing Lu2, Li Zhang2, Susanne E. Kohalmi1, Yuhai Cui2

1Department of Biology,University of Western Ontario, 2Southern Crop Protection and Food Research Centre,Agriculture and Agri-Food Canada

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리는 공장에서 단백질 - 단백질 상호 작용을 테스트하는 기술을 개발했습니다. 노란색 형광 단백질 (YFP은) 2 비 중복 조각으로 분할합니다. 각 조각은 융합 단백질의 표현을 활성화, 게이트웨이 시스템을 통해 관심의 유전자에 프레임에 복제됩니다. 심리 단백질이 상호 작용을 때 YFP 신호의 Reconstitution에만 발생합니다.

두 단백질 간의 상호 작용을 테스트하려면 gateway longing 기술을 사용하여 두 개의 관심 유전자를 BF와 벡터에 클로닝해야 합니다. 이 구조체는 에어륨 GV 3 1 0 1로 변형됩니다. 구축하기 위해 함유된 GV 3 1 0 1 박테리아 배양물을 혼합하여 잎에 공동으로 침투시킨다.

두 후보 단백질이 서로 상호 작용하는 경우 결과 초점 멕시코를 사용하여 YFP 신호를 관찰할 수 있습니다. BFC 기술의 주요 목적은 두 단백질 간의 상호 작용을 테스트하는 것입니다. vavo에서는 연구자에게 BFC 및 ISTO 두 가지 하이브리드 분석을 모두 수행할 수 있는 사용하기 쉬운 도구를 제공하는 일련의 게이트웨이 호환 BFC 및 IS 두 가지 하이브리드 벡터를 만들었습니다.

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