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Determinación de la balsa de lípidos Partición de las sondas marcadas con fluorescencia en las células vivas mediante espectroscopia de correlación de fluorescencia (FCS)
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JoVE 신문 생물학
Determination of Lipid Raft Partitioning of Fluorescently-tagged Probes in Living Cells by Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS)
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Determinación de la balsa de lípidos Partición de las sondas marcadas con fluorescencia en las células vivas mediante espectroscopia de correlación de fluorescencia (FCS)

DOI:
10.3791/3513-v

•

10:59 min

•

April 06, 2012

•

, ,
1Centre de Recherche de l’Institut du Cerveau et de la Moelle Épinière,Hôpital de la Pitié-Salpêtrière, 2Institut des Sciences Moléculaires d’Orsay,Université Paris-Sud, 3Centre de Photonique Biomédicale du Centre Laser,Université Paris-Sud

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:48Calibration of the FCS Setup
  • 03:45FCS Data Analysis
  • 05:50Staining of Living Cells with Lipid-rafts Marker
  • 06:51FCS Data Acquisition on Living Cells
  • 08:07Representative FCS Analysis
  • 10:18Conclusion

Summary

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Una técnica para sondear la compartimentación balsa lipídica de proteínas fluorescentes en la membrana plasmática de las células vivas se describe. Se aprovecha de la disparidad en los tiempos de difusión de proteínas localizadas dentro o fuera de las balsas lipídicas. Adquisición puede llevar a cabo dinámicamente en condiciones de control o después de la adición del fármaco.

Tags

Lipid Raft PartitioningFluorescently-tagged ProbesLiving CellsFluorescence Correlation SpectroscopyCell MembranesMicrodomainsCholesterolSphingolipidsSignallingTraffickingDiseasesControversyLipid Raft SizeMicroscopy Resolution LimitDirect ImagingTechniquesDetergent Resistant MembranesCo-patching With AntibodiesArtefactsSensitive AnalysisPlasma Membrane

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