Use of Interferon-&gamma; Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

Xuelian Wang; William W. Greenfield; Hannah N. Coleman; Lindsey E. James; Mayumi Nakagawa

doi:10.3791/3657

인간 Papillomavirus의 소설 T-세포 Epitopes를 특성화하기 위해 인터페론-γ 효소 연결된 Immunospot 분...

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Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Use of Interferon-γ Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

인간 Papillomavirus의 소설 T-세포 Epitopes를 특성화하기 위해 인터페론-γ 효소 연결된 Immunospot 분석의 이용

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13:41 min

March 8, 2012

DOI: 10.3791/3657-v

Xuelian Wang¹, William W. Greenfield², Hannah N. Coleman³, Lindsey E. James³, Mayumi Nakagawa³

¹Department of Microbiology and Parasitology, College of Basic Medical Sciences,China Medical University , ²Department of Obstetrics and Gynecology, College of Medicine,University of Arkansas for Medical Sciences , ³Department of Pathology, College of Medicine,University of Arkansas for Medical Sciences

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

인유두종 바이러스와 같은 국소 감염을 유발하는 병원체의 T 세포 항원결정기를 특성화하는 것은 순환하는 T 세포의 수가 제한되어 있기 때문에 어려운 일입니다. 희귀 T 세포를 분리하고 매우 적은 수의 세포로 시작하여 특성화하는 방법이 설명됩니다.

이 절차의 전반적인 목표는 환자로부터 HPV 항원 특이적 T 세포 클론을 분리, 성장 및 분석하는 것입니다. 먼저 CD 8 T 세포주를 확립하고 SBOT 분석을 수행하며 항원 특이적 T 세포의 빈도를 추정합니다. 인터페론 감마 분비를 기반으로 항원 특이적 T 세포 클론을 분리한 후, 고처리량 스크리닝 인터페론 감마 스봇 분석을 수행하여 항원결정기 특이적 T 세포 클론을 식별합니다.

최소 최적 펩타이드를 위해 T 세포 클론을 계속 특성화합니다. 항원결정기 서열은 또한 항원결정기가 내인성으로 처리되었는지 여부를 결정합니다. HLA 제한 요소를 식별하고 다른 고위험 HPV 유형에 대한 교차 반응성을 평가합니다.

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