Name: 이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및 생체 내 T 셀 모니터링 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: 배우세요 생체 내 T 세포 이동 및 축적 패턴을 연구하는 이식-대-호스트 질병 유도 방법을 마우스 모델에서. 생체 발광 영상 기술로 면역 반응을 실시간 모니터링하여 이식 결과 개선에 기여합니다.

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우리는 그의 뛰어난 기술 지원, 지적 입력 및 정신적 지원 앞서 연구를 이동하는 역할을했다 앨리스 고간과 자오 - 징 왕에게 빚을 졌네. 이러한 연구 GAH에 NIH 보조금 AI036532에 의해 지원되었다.

1. 치명적인 조사 <ol><li> 사용되는 irradiator와 호환 microisolator 케이지에 10받는 마우스까지 넣습니다. </li><li> 총 복용량을 (BALB.B 수신자에 대한 총 투여 량 = 9 cGy)의 합계가 2 회에 걸쳐 동일한 비추다. 두 번째 조사는 먼저 한 후 3 시간이어야합니다. 사출 최종 조사 후 4-6 시간 사이에 발생합니다. C를 137 소스 나 RS2, 000, irradiator 하나를 비추다 마우스. </li><li> 이식 때까지 산성화 물과 microisolator 케이지에서 두 번째로 방사선 선량, 상점 쥐를 따라. </li></ol> 2. Splenocyte 준비 <ol><li> 기관 지침에 따라 한 기증자 마우스를 안락사시켜야. 125x10 6 splenocytes - 각 기증자는 일반적으로 75x10 6 산출. 12x10 6 CD8 T 세포 - CD8 정화 키트를 사용하여 각 마우스는 일반적으로 6x10 6 산출. </li><li> 첫번째 오른쪽 바로 중간 선에 수직 2cm 절개 2cm을 만들어 비장을 제거흉곽 아래에. 모피, 피부와 내장의 막으로 자른다. </li><li> 비장을 제거 5 % FBS와 1640 RPMI로는 배양 접시에 40 μl 메쉬 화면에서 비장을 배치하여 단일 세포 현탁액을 만듭니다. 전체 비장이 메쉬 화면 통과 될 때까지 비장을 분리 부술 수있는 주사기 플런저를 사용하십시오. </li><li> 각 WT와 L2G85.B6 기증자에 대해이 과정을 반복합니다. 1-50 ML 원뿔 튜브에있는 모든 WT 단세포 정지를 수집하고, 별도의 50 ML 원뿔 튜브에있는 모든 L2G85.B6 단세포 정지를 수집합니다. </li><li> 4에 10 분에 1,200 rpm으로 세포를 원심 분리기 ° C. 5% FBS와 카운트 세포와 1,640 RPMI에 Resuspend 펠릿. </li></ol> 3. 골수 준비 <ol><li> 기증자 마우스 중 하나 뒷다리에서 피부를 제거합니다. </li><li> 대퇴골과 경골주의 / 비골에서 가능한 한 많은 근육 조직으로 떼어. </li><li> 엉덩이 관절에서 떨어져 대퇴골을 절단하여 뒷다리를 제거합니다. 단 경골 / 비골 교차로 아래 뒤쪽 손을 떼어. 모든 뼈 인하는 튼튼한 가위를 사용하여야한다. </li><li> 주의 깊게 남아있는 근육 조직을 제거합니다. 비골 - 비교적 적은 골수가 비골에서 발견하고 노력을 가치가되지 않습니다 잘라. </li><li> 두 번째 뒷다리와 추위 1,640 RPMI 5퍼센트 FBS를 반복 과정에서 뒷다리를 배치합니다. 40x10 6 골수 세포 - 각각의 마우스는 20x10 6 시까 얻을 수 있습니다. </li></ol> 4. 골수 제거 <ol><li> 추운 미디어 (~ 1 ML)의 적은 양으로 큰 배양 접시에있는 미디어 및 장소에서 한 뒷다리를 제거합니다. </li><li> 무릎 관절을 떼어. 경골에 주사기 (볼륨&gt; 5 ML), 삽입 피하 바늘을 사용하여 모든 빨간색 자료는 경골의 내부에서 제거 될 때까지 주사기를 놓으면 되죠. 대퇴골과 과정을 반복합니다. 골수이없는 나머지 뼈를 폐기하십시오. 둘째 뒷다리와 과정을 반복합니다. </li><li> 대형 페트리 접시 및 사용 주사기 플런저와 μl 40로 골수를 포함하는 pipetting 미디어에 의해 단일 ​​세포 현탁액을 만듭니다화면을 조화. 피펫 단세포 50 ML 원뿔 튜브에 서스펜션과 얼음 계속. </li></ol> 5. 3 번 CD 고갈 골수에서 3 번 CD + 세포를 고갈하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 우리 연구실은 Miltenyi Biotec (- 130-093-021에는 3 번 CD-비오틴)에서 만든 키트를 사용합니다. 제조업체의 프로토콜에 따라 골수에서 3 번 CD + 세포를 고갈시킵니다. Miltenyi 키트에 대한 버퍼는 지금의 맥 버퍼 (2 MM EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산), PBS, pH를 7.2에서 0.5 % BSA)라고합니다. <ol><li> 4에 10 분 ° C 및 count 세포에 1,200 rpm으로 splenocytes 및 골수 세포를 centrifuging하여 세포를 씻으십시오. </li><li> 모든 표면에 뜨는을 제거합니다. Resuspend 골수 맥 버퍼 1 천만 골수 세포 당 100 μl의 세포. </li><li> 사용에는 3 번 CD 고갈로 계속은 &#39;프로토콜을 생산하고 있습니다. </li><li> 멸균 PBS로 3 번 CD 소모의 골수 세포에게 3 번 씻으십시오. 카운트 3 번 CD는 골수 세포를 고갈과 10 7 세포를 삽입 할 수있는 적절한 볼륨에 resuspend. </li></ol> L2G85.B6 마우스에서 CD8 T 세포를 정화하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 또한, WT splenocyte 기증자에서 CD8 T 세포를 고갈하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 우리 연구실은 Miltenyi Biotec (- 130-049-401, CD8 정화 - 130-095-236 CD8 고갈)에서 키트를 사용합니다. <ol><li> 10 7 세포 당 90 μl 맥 버퍼에 WT 펠렛을 Resuspend. &#39;프로토콜 (- 130-049-401 CD8 고갈) 제조에 따라 CD8 T 세포 고갈를 계속합니다. </li><li> 10 7 세포 당 40 μl 맥 버퍼에 L2G85.B6 펠렛을 Resuspend. &#39;프로토콜 (- 130-095-236 CD8 정화) 제조​​에 따라 CD8 T 세포 정화를 계속합니다. </li><li> 각 셀 인구를 산출하고 멸균 PBS 각 인구에게 3 번 씻는다. 18x10 6 WT (CD8 소모) splenocytes 및 2x10 6 CD8 T 세포를 정화 L2G85.B6를 삽입하기 위해 적절한 볼륨에있는 각 인구 Resuspend. </li></ol>7. 사출 준비 <ol><li> microcentrifuge 관에서 CD8 T 세포를 정화 10 7 3 번 CD 고갈 골수 세포, 18x10 6 WT (CD8 소모) splenocytes, 그리고 2x10 6 L2G85.B6 조화를 이루고 있습니다. 300 μl에 멸균 PBS와 resuspend로 씻으십시오. </li><li> 받는 마우스의 꼬리 정맥에 셀 준비를 삽입. 주사는 28 게이지 바늘을 사용하여 수행해야합니다. </li><li> 산성화의 물 microisolator 케이지에 저장 마우스. 점수 마우스는 매일 쿡 외 1 개발 점수 GVHD 점수 시스템을 사용합니다. </li></ol> 8. 발광 생물 이미징 <ol><li> 여섯 일 후 이식, 4 MG D-luciferin을받는 쥐를 주입. luciferin 5 분 루시 페라 제와 반응 할 수 있습니다. </li><li> 작은 binning 5 분 동안 bioluminescence의 영상 및 이미지 수신자의 isoflurane 챔버에 마우스를 마취. 가능한 한 많은 이벤트로 수집하는 동안이 고해상도 이미지를 생성합니다. </li><li> 생활을 사용하여 데이터를 분석이미지 소프트웨어. 의사 색 이미지의 규모는 최상의 결과를 얻을 수 있도록 변경 될 수 있습니다. 그러나, 같은 규모의이 실험에서 사용하는 것이 필수적입니다. </li><li> 관심 영역은 관심의 각 지역에서 방출되는 자속을 (광자 / 초) 계산하여 정량화 할 수 있습니다 생활 이미지 소프트웨어 및 조명 emittance를 사용하여 생성 할 수 있습니다. </li></ol> 9. 대표 결과 약 7-10일 게시물 이식, 쥐 GVHD의 임상 징후를 보여주는 시작합니다. 마우스 미용 부족으로 단 정치 못한 인해 나타납니다. 수신자는 7~10일 게시물 이식 사이에 체중을 잃게됩니다. 받는 마우스의 활동과 자세는 약 12​​-14 일 후 이식까지 비교적 정상으로 유지됩니다. 누적 GVHD 점수는 꾸준히 최초의 2-3주 게시물 이식 (그림 1A)를 통해 증가 할 것이다. 질병 과정은 마우스 사이에 매우 변수입니다하지만, 수신자가 균일 30-40 D에 의해 GVHD에 굴복해야합니다ays 후 이식 (그림 1B). 그림 2는 6 일 후 이식을 이미지로 된받는 사람 쥐를 보여줍니다. 의사 색의 규모는 비장과 창자에서 방출되는 높은 광도로 몸 가벼운 emittance를 변화 보여줍니다. 속에서 CD8 T 세포의 축적은 이전 연구 결과 6 일치합니다. 받는 마우스는 이후 시점에서 이미징 또는 전직 생체 이미징에 대한 euthanized 할 microisolator 케이지에 다시 배치 할 수 있습니다. <table border="1"><tbody><tr><td> 기준 </td><td> 등급 0 </td><td> 1 학년 </td><td> 2 급 </td></tr><tr><td> 체중 감량 (wkly.) </td><td> &lt;10 % </td><td> &gt; 10 % - &lt;25 % </td><td> &gt; 25% </td></tr><tr><td> 자세 </td><td> 표준 </td><td> 나머지에서만 Hunching </td><td> 여러 hunching, impairs movemeNT </td></tr><tr><td> 활동 </td><td> 표준 </td><td> 활동 감소를 운영 마일드 </td><td> 자극하지 않는 고정 </td></tr><tr><td> 모피 텍스처 </td><td> 표준 </td><td> ruffling 검토 할 온화한 </td><td> 심한 ruffling / 가난한 정리 </td></tr><tr><td> 피부 질감 </td><td> 표준 </td><td> 손 / 꼬리 크기 조정 </td><td> denuded 피부의 명백한 지역 </td></tr></tbody></table> 표 1. 쿡 외 1996 1이 점수 시스템을 개발했습니다. 마우스는 왼쪽에있는 기준의 각에서 매일 골을해야합니다. 각 마우스는 각 기준에 대해 0-2의 점수를 부여하고 총 점수는 모든 개별 점수의 합입니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3697/3697fig1.jpg" /> 그림 1. Lethally 방사능 BALB.B은 10 7 뼈 이식되었습니다골수 세포 단독으로 또는 L2G85.B6 CD8 T 세포를 정화 18x10 6 CD8 T 세포 고갈 WT splenocytes 및 2x10 6. A) 골수을받는 임상 점수 데이터를 단독으로 또는 CD8 T 세포와 WT splenocytes을 소진하고 L2G85.B6 CD8 T 세포를 정화. B) 골수을받는 단독으로 또는 함께의 서바이벌 데이터 CD8 T 세포 WT splenocytes을 소진하고 L2G85.B6 CD8 T 세포를 정화. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3697/3697fig1large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3697/3697fig2.jpg" /> 그림 2. Lethally 방사능 BALB.B 마우스는 10 7 골수 세포 단독으로 또는 L2G85.B6 CD8 T 세포를 정화 18x10 6 CD8 T 세포 고갈 WT splenocytes 및 2x10 6으로 이식되었다. 받는 사람이 intraperitoneal 주사를 통해 4 MG D-luciferin을 주입 한 작은 binning에서 5 분 동안 Xenogen의 IVIS를 사용하여 이미징했다. PS보라색은 낮은 강도를 나타냅니다, 붉은 관심의 높은 강도 지역별은 전체 마우스와 총 자속 (광자 / 초) 주변에 그려진 된 정량화 된 나타냅니다 eudo 색의 이미지가 표시됩니다. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/3697/3697fig3.jpg" /> 그림 3. Lethally 방사능 BALB.B 마우스는 10 7 골수 세포 단독으로 또는 L2G85.B6 CD8 T 세포를 정화 18x10 6 CD8 T 세포 고갈 WT splenocytes 및 2x10 6으로 이식되었다. 받는 사람이 intraperitoneal 주사를 통해 4 MG D-luciferin을 주입 한 작은 binning에서 5 분 동안 Xenogen의 IVIS를 사용하여 이미징했다. 보라색은 낮은 강도를 나타냅니다과 빨간색이 높은 강도를 나타냅니다 의사 색 이미지가 표시됩니다. 받는 사람이 A) 4 일, B) 일 6, C) 일 8 포스트 송금 이미징했다.

<ol><li>Cooke, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+model+of+idiopathic+pneumonia+syndrome+after+bone+marrow+transplantation%3A+The+roles+of+minor+H+antigens+and+endotoxin%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">An experimental model of idiopathic pneumonia syndrome after bone marrow transplantation: The roles of minor H antigens and endotoxin.</a> Blood. 88, 3230-3239 (1996).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

여기에 제시된 마우스에 GVHD 유도를위한 프로토콜은 손쥐 GVHD의 임상 관련 모델을 나타냅니다. 원래 버거 외에 의해 설립. 1994 년 BALB.B 변형 조합에 C57Bl / 6 의존 CD4, 가장 일반적인 임상 시나리오 3 매우 유사한 CD8 T의 effectors 2에 의해 중재 GVHD 사망률과 MHC-일치합니다.이 그것은 혼자 CD8 T 세포를 이식하면이 모델 GVHD 발생하지 않습니다 알려져 있지만, 질병의 진행은 혼자 CD4 T 세포에 비해 CD4와 CD8 T 세포가 모두 존재하는 경우 훨씬 더 있습니다. 또한,이 모델 10 부 histocompatibility의 불균형에 대한 면역 반응의 immunodominant 계층 구조를 보여주는 다양한 작품이있었습니다. 하지만, GVHD 4 가지 단계 중에 T 세포 하위 집합에 대한 역할에 관한 몇 가지 모호가 남아 있습니다. 저희 연구실에서 게시되지 않은 연...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 </td></tr><tr><td> RPMI 1640 </td><td> Invitrogen </td><td> 12633-012 </td><td></td></tr><tr><td> 태아 혈청 </td><td> Invitrogen </td><td> 10439016 </td><td></td></tr><tr><td> 40 μM 셀 스트레이너 </td><td> BD Biosciences </td><td> 352340 </td><td></td></tr><tr><td> CD3e - 비오틴 </td><td> Miltenyi 생명 공학 </td><td> 130-093-021 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 비오틴 Microbeads </td><td> Miltenyi 생명 공학 </td><td> 130-091-147 </td><td></td></tr><tr><td> CD8a Microbeads </td><td> Miltenyi 생명 공학 </td><td> 130-049-401 </td><td> 비장에서 CD8 T 세포를 고갈하는 데 사용됩니다. </td></tr><tr><td> CD8a 정화 항체 칵테일 </td><td> Miltenyi 생명 공학 </td><td> 130-095-236 </td><td> 정화하는 데 사용비장에서 CD8 T 세포. </td></tr><tr><td> D-Luciferin </td><td> 캘리퍼스 생명 과학 </td><td> 122796 </td><td></td></tr></tbody></table>

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및<em&gt; 생체 내</emmhc 검색 손쥐 모델을 사용&gt; t 셀 모니터링

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

그라프 트 - 대 - 호스트 질환 (GVHD)는 hematological 결함의 다양한 치료 요법으로 골수 이식의 광범위한 사용에 제한 장벽입니다. GVHD는받는 사람에 주입하는 골수 이식에 존재하는 성숙 alloreactive T 세포에 의한와 호스트 장기에 손상을 일으킬 수 있습니다. 그러나 마우스에서 T 세포는 GVHD 원인 골수 inoculum에 추가해야합니다. 광범위한 작업은 T 세포 응답 포스트 이식을 특성화하기 위해 수행되었지만, 발광 생물 이미징 기술은 생체에서 T 세포 거래 패턴을 모니터링 할 수있는 비 침습적 방법입니다. 치명적인 조사 후,받는 사람 쥐들이 기증 마우스의 골수 세포와 splenocytes으로 이식되어 있습니다. L2G85.B6 (constitutively 루시 페라 제 표현 형질 전환 생쥐)에서 T 세포의 하위 집합은 이식에 포함되어 있습니다. 특정 T 세포 하위 집합을 이식함으로써, 하나는 생체에서 특정 T 세포 하위 집합을 추적 할 수 있습니다과 위치에 따라 다양한 시간 지점에서 GVHD 홍보에서 특정 T 세포 하위 집합의 역할에 관한 가설을 개발합니다. 미리 결정된 간격 게시물 이식에서받는 마우스는 Xenogen IVIS CCD 카메라를 사용하여 이미징 있습니다. 빛의 세기가 광자 강도 (빨간색 = 높은 강도, 보라색 = 낮은 강도)을 기반으로 한 의사 컬러 이미지를 생성하는 생활 이미지 소프트웨어를 사용하여 정량화 할 수 있습니다. 4-7일 게시물 이식 사이에받는 마우스는 GVHD의 임상 징후를 보여 시작합니다. 쿡 외. 1받는 사람 쥐 모피 텍스처, 피부 무결성, 활동, 체중 감소 및 자세에 따라 질병의 진행을 quantitate 할 수있는 점수 시스템을 개발했습니다. 마우스는 매일 채점, 그리고 그들이 죽어가는이 될 때 euthanized 있습니다. 받는 마우스는 일반적으로 20-30일 게시물 이식 죽어가는이됩니다. 손쥐 모델은 GVHD의 면역학을 공부를위한 유용한 도구입니다. 선택적으로 특정 T 세포 하위 집합 알을 이식각 하위 집합이 재생 역할에주의 식별 낮은. 비 invasively 생체에서 T 세포 응답을 추적하는 것은 손쥐 GVHD 모델에 가치의 또 다른 레이어를 추가합니다.

손쥐 골수 이식은 인간에 이식 - 대 - 호스트 질병에 관한 면역 메커니즘을 연구 할 수있는 널리 사용되는 기술이다. T 세포 거래 패턴을 모니터링 할 수있는 능력<em&gt; 생체 내</em&gt; 이식 - 대 - 호스트 질병 중 T 세포 응답의 개발 및 영구화에 대한 자세한 분석을 할 수 있습니다.

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및<em&gt; 생체 내</emMHC 검색 손쥐 모델을 사용&gt; T 셀 모니터링

이식편대숙주질환(GVHD)은 다양한 혈액학적 질환의 완치 요법으로서 골수 이식을 광범위하게 사용하는 데 있어 제한 요소가 되는 장벽입니다...

본 절차의 목적은 이식편대숙주병 발생 시 T세포의 이동 및 축적 패턴을 연구하는 것입니다. 이를 위해 먼저 공여자 마우스로부터 골수와 세포를 분리합니다. 두 번째 단계로, 관심 세포 집단을 정제하여 이식 준비를 합니다.다음으로, 정제된 세포 집단들을 결합하여 방사선을 조사한 수용 쥐에 이식합니다. 마지막 단계는 수용 쥐 내의 T 세포 이동 및 축적 패턴을 시각화하는 것입니다. 최종적으로, 생체 발광 이미징을 통해 GVHD 동안의 T 세포 이동 및 축적 패턴을 보여줍니다.기존 기술과 비교하여 생체 발광 이미징의 주요 장점은 특정 부위에서만 림프구를 검출하는 기존 기술과 달리, 마우스 전체에서 림프구를 검출할 수 있는 수단을 제공한다는 점입니다. 수여 마우스는 골수 및 세포 이식 전에 치사량의 방사선 조사를 받아야 합니다. 사용할 조사기와 호환되는 마이크로 격리 케이지에 최대 10마리의 수여 마우스를 넣으십시오.다음으로, cesium 1 37 선원 또는 초기 선량이 4.5 cGy인 조사기인 RS 2000을 사용하여 마우스에 방사선을 조사합니다. 3시간 후, 마우스에 4.5 cGy를 다시 조사하여 총 9 cGy의 방사선을 조사합니다. 두 번째 조사 후, 이식 시점까지 수혜 마우스를 pH 3의 산성수가 제공되는 마이크로 아이솔레이터 케이지에 보관합니다.산성화된 물은 PLE 세포를 얻기 위한 수혜 동물의 기회감염성 질환을 조절하는 데 도움이 됩니다. 안락사시킨 공여자 마우스의 흉곽 바로 아래 정중선에서 오른쪽으로 약 2cm 떨어진 지점에 2cm 길이의 수직 절개를 넣어 피부를 절개하여 비장을 찾습니다. 그 다음 비장을 적출하여 5% FBS가 포함된 1640 RPMI가 담긴 페트리 접시 내의 40 µm 메쉬 그리드 위에 놓습니다.단일 세포 현탁액을 준비하려면, 시린지 플런저를 사용하여 비장 전체가 메쉬 스크린을 통과할 때까지 비장을 으깹니다. 야생형 및 luxe 양성 공여 마우스 각각에 대해 이 과정을 반복합니다. 모든 야생형 단일 세포 현탁액은 하나의 50 milliliter 원심분리관에 수집하고, 모든 luxe 양성 단일 세포 현탁액은 별도의 50 milliliter 원심분리관에 수집합니다.각 튜브에 현탁액을 수집한 후, 세포를 원심 분리하고 펠렛을 5% FBS가 포함된 1640 RPMI에 다시 현탁합니다. 그 다음 세포 수를 측정합니다.공여 마우스의 뒷다리 한 쪽에서 피부를 제거하고, 튼튼한 가위를 사용하여 대퇴골과

induction-graft-versus-host-disease-vivo-t-cell-monitoring-using-an

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 비디오는 동종 조혈모세포와 GvHD 유도 비장 동종성 T 림프구를 사용하여 치사량에 방사선 조사를 받은 마우스에서 장 이식편대숙주병(GvHD)의 유도를 보여줍니다. 이 프로토콜은 중증 급성 장 GvHD 모델을 확립하여 질병의 메커니즘을 이해하고 혁신적인 치료 옵션을 개발하는 데 도움이 됩니다.

동종 골수 및 비장 세포 이식을 통한 마우스 모델에서 이식편 대 숙주 질환 유도

꼬리 피부 이식은 생쥐의 동종 면역 반응 중 T 세포 의존적 거부 및 내성 유도를 연구하기 위한 강력한 모델입니다. 이 프로토콜의 장점은 경미한 침습적 수술과 수용 마우스를 희생할 필요 없이 모니터링이 용이하다는 것입니다.

마우스에 동종 CD4 T 세포 반응을 연구하기 위해 테일 피부 이식

여기에서는 syngeneic CD4+CD45RBhigh T cell을 T 및 B cell 결핍 수용자로 이식하여 마우스에서 결장 염증을 유도하는 프로토콜을 제시합니다. 임상적 및 조직병리학적 특징은 인간의 염증성 장 질환을 모방합니다. 이 방법을 사용하면 결장 염증의 시작과 질병의 진행에 대한 연구를 할 수 있습니다.

이펙터 CD4의 입양 전송하여 쥐과 장내 염증의 유도<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; 높은</sup&gt; 면역 결핍 마우스에게 T 세포

우리는 마우스의 대동맥 삽입 이식을 위한 프로토콜을 설명합니다. 이 프로토콜의 목표는 동맥의 동종면역 반응 및 그에 따른 장기 이식 실패에 기여하는 동맥 변화와 관련된 병리학적 과정 및 치료 전략을 연구할 수 있는 모델을 제공하는 것입니다.

동종 유도 혈관 거부 및 이식 동맥 경화 마우스 모델

쥐의 전체 두께 피부 이식은 동종 설정에 거부 반응을 연구하는 잘 확립 된 모델이다. &gt; C57BL / 6 전층 피부 이식 - 여기, 우리는 BALB / C를 수행에 관련된 각 단계의 튜토리얼을 제공합니다.

쥐의 전체 두께 피부 이식

여기, 선물이 수용자 조 혈 줄기 세포 이식에 설명 합니다 및 원심 콜론의 반복적인 미니 내 시경 평가 존재, 특성, 그리고 라이브 내 저 승 염증의 심각도 대 한 현장에서 프로토콜 쥐 장 이식-비교-호스트 질병에서 고통.

장 이식-비교-호스트 질병 및 라이브 쥐에서 미니 내 시경 평가의 유도

여기서, 우리는 xenogeneic 이식편 대 숙주 질환(xenoGVHD) 모델에서 질병을 유도하고 점수를 매기는 프로토콜을 제시한다. xenoGVHD는 인간 T 세포의 면역 억제를 연구하는 생체 내 모델을 제공한다. 추가적으로, 우리는 면역 억제를 정량화하는 공구로 디지털 PCR를 가진 조직에서 인간 적인 T 세포를 검출하는 방법을 기술합니다.

디지털 PCR을 사용하여 마우스 조직에서 인간 T 세포의 Xegeneic Murine 모델 및 정량화에서 이식편 대 숙주 질환의 유도 및 채점

우리는 인간 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 기술합니다 - 번역형 면역 종양학 연구를 위한 기지를 둔 인간화한 이종이식 마우스 모형. 이 프로토콜은 I-O 치료 평가를 위한 유사한 모형을 설치하고 특성화하기 위한 일반적인 지침으로 봉사할 수 있었습니다.

인간 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 번역 면역 종양학에 대한 인간화 제종이식 모델 (I-O) 연구

이식편 대 숙주 질병은 동종 골수 이식 후에 중요한 합병증입니다. 수지상 세포는 이식편 대 숙주 질환의 발병기전에 중요한 역할을 합니다. 현재 논문은 이식편 대 숙주 질환및 이식편 대 백혈병 효과의 발달에 있는 수지상 세포의 역할을 조사하기 위하여 새로운 골수 이식 플랫폼을 기술합니다.

이식대 숙주 질환에서 수지상 세포의 역할을 조사하는 골수 이식 플랫폼

이 프로토콜은 자발적 당뇨병 NOD 마우스에서 정제된 비장 세포로 도전받은 비만 당뇨병(NOD) 중증 복합 면역 결핍 마우스에서 NIT-1 세포를 이식하고 이미징하기 위한 간단하고 최소 침습적인 방법을 설명합니다.

생쥐에서 자가면역 당뇨병의 입양 이식 모델에서 이식편 생존의 생물발광 모니터링

배우세요 생체 내 T 세포 이동 및 축적 패턴을 연구하는 이식-대-호스트 질병 유도 방법을 마우스 모델에서. 생체 발광 영상 기술로 면역 반응을 실시간 모니터링하여 이식 결과 개선에 기여합니다.

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및

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