프로 그레시브 - 비율 쥐의 Palatable 높은 지방과 높은 설탕 음식에 대한 응답

다음 실험의 목적은 점진적 비율 강화 일정을 사용하여 음식 동기 부여 작업에서 마우스를 훈련하고 테스트하는 것입니다. 이것은 첫 번째 음식을 통해 생쥐의 Ad Liam 음식 섭취량을 60-70%로 제한하고 체중을 5-10%의 안정적인 감소로 제한함으로써 달성됩니다. 음식에 대한 동기 부여 레버 누르기 동작의 획득을 향상시키기 위해 마우스는 자동 성형 절차를 사용하여 고정 비율로 고지방, 고설탕 식품 보상을 위해 레버 프레스를 훈련합니다.

그런 다음 Miser는 고정 비율 5를 포함하여 더 복잡한 강화 일정으로 음식에 반응하는 훈련을 받았고, 마지막으로 음식의 보상 효과에 대한 신뢰할 수 있는 측정을 제공하는 점진적 비율 과제에 대해 훈련했습니다. 다음으로, 누진적 비율 일정에서 안정적인 성능을 발휘한 후, 이 마우스는 12시간 내지 24시간 동안 음식을 먹지 않거나 복강내 주사를 통해 강화의 점진적 비율 일정에서 음식 동기 부여 행동의 변화를 검증합니다. 이 실험의 결과는 음식 결핍이 음식 동기 행동을 증가시키는 반면, 레틱 호르몬 렙틴의 투여는 고지방 및 고당 음식 보상에 대한 음식 동기 행동을 감소시킨다는 것을 보여줍니다.

상급 조건화 과제는 다양한 자극과 행동의 보상 및 동기 부여 효과를 평가하는 유용한 수단을 제공합니다. 점진적 비율 과제는 약물 남용의 보상 효과와 음식과 같은 자연적 보상을 평가하는 데 널리 사용되어 온 잘 검증 된 강화 일정이지만, 적색 연구에서 더 일반적으로 사용되지만 유전자 조작 마우스 모델의 세대가 증가함에 따라 마우스에 대한 점진적 비율 오페라 작업의 적용이 점점 더 중요 해지고 있습니다. 특히, 비만 연구에서 마우스 모델의 사용과 칼로리가 풍부한 음식의 보상 효과가 과식과 비만에 크게 기여한다는 인식은 마우스에서 음식 보상을 측정할 필요성을 강조했습니다.

여기서 우리는 시작하기 전에 점진적 비율의 강화 일정에 따라 맛이 좋은 고지방, 고당 식품을 간 프레스로 훈련하고 테스트하는 데 사용되는 방법을 설명하고 논의합니다. 이 프로토콜은 동물 사용과 관련된 모든 절차가 기관 동물 관리의 승인을 받았는지 확인합니다. 사용 위원회에서는 필요한 경우 밝은 어두운 주기의 어두운 단계에서 테스트하는 것이 좋습니다.

생쥐를 7-10일 동안 역광(康公)의 어두운 주기에 적응시킵니다. 이 시점에서, 생쥐는 이 10일의 적응 기간 후에 표준 차우와 물에 대한 임시적 접근을 제공받습니다. 생쥐는 단독으로 수용되며 자유 사료 체중의 90-95%에 도달할 때까지 60-70%의 자유 음식 섭취량을 제공함으로써 음식을 제한합니다.

이것은 휴가 언론 반응, 매일 쥐의 무게를 잰 것을 용이하게 합니다. 5-10%의 체중 감량에 도달하면, 첫 번째 훈련 세션 3일 전에 남은 훈련 기간 동안 하체 체중을 안정화하기 위해 할당된 일일 음식을 조정하고, 가정용 케이지에 있는 마우스를 시험장으로 운반한 다음 각 마우스를 케이지에서 한 번에 하나씩 꺼냅니다. 그리고 2-3분 동안 마우스를 다루십시오. 취급 후에는 마우스를 가정용 케이지로 되돌리고 마우스를 방에 적응시키고 훈련 시작 전날 3일 연속으로 취급합니다.

10-15개의 고지방 고당 펠릿을 가정용 케이지에 넣어 음식의 잠재적인 영향을 방지합니다. 작동 성능에 대한 Neo phobia, 20mg의 고지방, 고당도, 49%의 살인 암소를 지방으로 함유한 먼지가 없는 정밀 식품 펠릿이 여기에 사용됩니다. 각 마우스 조작실은 환기 팬이 있는 소음 감쇠 칸막이 내부에 보관됩니다.

마우스 조작실에는 식품 용기의 양쪽에 위치한 두 개의 초경량 개폐식 레버가 장착되어 있습니다. 자극 조명은 각 레버 위에 있으며 케이지 상단에는 하우스 조명이 있습니다. 항소 서기는 재판소 밖에 있습니다.

챔버는 스마트 제어 인터페이스 캐비닛을 통해 Med PC four 소프트웨어가 설치된 PC 컴퓨터에 연결됩니다. 생쥐는 조작실로 유입됩니다. 초기 교육 패러다임은 고정된 비율의 강화 일정으로 구성되며, 한 번의 레버 프레스로 식품 펠릿이 용기로 전달되도록 유도합니다.

하나의 레버만 활성으로 지정되며 음식 보상 배달을 트리거합니다. 오른쪽 및 왼쪽 레버의 할당은 마우스 간에 균형을 이룹니다. 교육에는 레버 누르기 동작을 향상시키기 위해 으깬 음식 알갱이를 레버에 놓는 성형 절차도 필요합니다.

이 초기 훈련 중에는 능동적 레버 반응이 음식 보상 전달을 트리거하고 레버 누르기와 음식 전달 사이에 지연이 없습니다. 마우스가 레버를 5초 동안 누르는 방법을 배우면 타임아웃이 시작되며, 그 동안 추가 누름 휴가로 인해 펠릿이 전달되지 않습니다. 타임아웃 기간은 마우스가 펠릿을 소비할 수 있도록 합니다.

활성 레버를 눌러 타임아웃 기간 후에 필요한 경우 더 긴 타임아웃 기간을 사용할 수 있습니다. 다시 한 번, 각 고정 비율 1 5 초의 식품 펠릿이 방출됩니다. 타임아웃 교육 세션은 1시간 동안 지속되거나 50개의 펠릿이 전달되었을 때 지속됩니다.

오페라와 훈련은 7일에서 10일 동안 계속되며, 먹이를 얻고, 오페라와 반응하는 쥐가 활성 레버와 비활동 레버에 대해 3 대 1 이상의 차별을 보이고 세션당 20개 이상의 보상을 획득할 때까지 계속됩니다. 3회 이상의 연속 세션은 획득 기준을 달성한 것으로 간주됩니다. 7-10일 기간까지 획득 기준에 도달하지 못한 마우스는 추가로 5-7일 동안 추가 훈련을 받습니다.

생쥐는 5번째 훈련일까지 진전이 없을 경우 테스트에서 제외됩니다. 조작적 획득 장애는 특정 약리학적 및 유전적 중재의 결과일 수 있으므로 문서화해야 한다는 점을 명심하는 것이 중요합니다. 20개 이상의 펠릿을 획득하는 세 번의 연속 세션 후, 일정은 5개의 활성 휴가 프레스가 식품 펠릿의 전달을 트리거하는 FR 5 T oh 5초 프로토콜로 증가했습니다.

FR five T oh five seconds 스케줄에 따른 훈련은 반응이 안정될 때까지 약 3일에서 5일 동안 지속됩니다. 그런 다음 마이스터는 보강의 점진적 비율 일정에 대해 훈련했습니다. PR 테스트 중 응답 비율 일정은 Richardson과 Roberts에 따라 계산할 수 있으며, 여기서 R은 이미 얻은 음식 보상의 수에 1을 더한 값과 같습니다.

따라서 음식 보상을 받기 위해 필요한 응답 수는 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95 등의 순서로 진행됩니다. 완료된 최종 비율이 중단점입니다. PR 세션은 최대 1시간 동안 지속되며 10분 동안 레버를 누르지 않습니다.

결과적으로 세션이 종료됩니다. PR 작업에서 조작적 반응을 유지한 식품을 검증하기 위해 1시간 세션에서 얻은 보상 수가 최소 3일 연속 20% 이하로 벗어날 때 강화의 PR 일정에 대한 성과는 안정적인 것으로 간주되며, 식품 보상을 조절하는 것으로 알려진 조작에 따른 중단점 응답이 평가됩니다. 비교적 쉽게 수행할 수 있는 테스트는 음식 결핍으로, 음식에 대한 마우스의 동기 부여 상태를 증가시켜 중단점을 증가시킵니다.

마우스는 마지막 기준선일 다음 날 안정적인 기준선 성능이 달성될 때까지 광고 리버톤 공급 기간 동안 PR 작업에서 먼저 테스트됩니다. 음식은 가정 우리에서 제거되고 쥐는 단식 시작 후에 12-24 시간 후에 PR 과제에서 테스트되거나 중단 점 임계 값에 대한 반대 효과를 조사하기 위해 익살스러운 호르몬의 말초 투여를 테스트 할 수 있습니다. 렙틴 PR 테스트는 하루 동안 PBS를 IP 주입한 후 다음 날 렙틴 킬로그램당 5밀리그램을 주입한 후 수행됩니다.

렙틴은 여기에서 볼 수 있듯이 PR 테스트 1시간 전에 주입됩니다. 단식은 24시간 단식하는 음식의 보상 효과를 증가시키고, 여기에서 볼 수 있듯이 마우스의 점진적 강화 비율 일정에서 중단점을 크게 증가시킵니다. 렙틴은 말초 렙틴 투여가 중단점 반응 임계값을 감소시켰기 때문에 마우스의 음식 보상을 감소시킵니다 이 절차를 시도하는 동안, 정기적인 훈련과 음식 제한 요법을 구현하여 마우스의 동기 부여 상태를 증가시킴으로써 식품 유지 조작 반응을 유지하는 식품 획득이 크게 향상된다는 것을 기억하는 것이 중요합니다.

또한 마우스가 더 복잡한 일정으로 이동하기 전에 하나의 강화 일정에서 비교적 안정적인 반응을 보이도록 하는 것은 테스트 중 가변 성능을 최소화하는 데 중요합니다. 비만 및 비만 관련 질병은 관련된 분자와 신경 경로를 식별해야 하는 시급성을 증가시킨 점점 더 커지는 문제입니다. 누진적 비율 일정은 신경생물학적, 유전적, 약리학적 조작이 식품의 보상 효과에 미치는 영향을 측정하는 데 유용한 도구입니다.