Name: 당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 45 s
Description: 학습하세요 쥐의 열통각 역치 측정법을 통해 당뇨병성 신경병증의 통각 민감도 변화를 평가하는 방법을. 이 기법은 통증 연구 및 진통제 효능 검증에 활용됩니다.

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이 작품은 미국 당뇨병 협회 (ADA), 그랜트 JF1-10-14 (MDiF)에 의해 재정 지원되었다. 우리는 WSU에서 동물 자원 연구소의 인원을 감사드립니다. 저자는 기꺼이 그 닐 Paton 박사로부터 데이터의 통계 분석에 도움을 인정

생쥐와 쥐의 TNTs은 사용에 의해 결정되는 증분 핫 플레이트 무통 m [iHPAM, IITC 주식 회사 생명 과학 (우드랜드 힐스, 캘리포니아)]. ; 데이터 수집을위한 열 조절 장치, 소프트웨어 (IITC 파트 # 소프트 시리즈 8), PC (개인용 밑에 난방 시스템 이상 플렉시 글라스 관측 챔버와 알루미늄 판 (10 × 20cm) : 장비는 여러 구성 요소로 구성되어 컴퓨터)와 footswitch 원격 출발, 중지 또는 장치의 제어를 재설정하십시오. 난방 시스템은 또한 시작 / 중지 / 장비 앞에서 키패드를 통해 수동으로 가열 과정의 재설정 가능합니다. iHPAM 다양한 가열 속도, 대기 / 컷오프 온도로 설정할 수 있습니다. 1. 장비 설정 <ol><li> 시험 동물 전에 시각적으로 선택한 가열 속도 (예, 6 ° C / 분), 초기 대기 및 컷 - 오프 최종 온도 (예, 28 ° C와 55 ° C, 각각) 거였는데 장치를 검사한다. </li><li> 모든 연결을 확인합니다. 결과의 전자 복사본을 유지하려면, 장치는 소프트웨어 시리즈 8을 실행중인 컴퓨터에 연결되어 있어야합니다. 또는 결과의 하드 카피는 기기의 시리얼 포트를 통해 밖으로 인쇄할 수 있습니다. </li><li> 장비를 테스트합니다. 초기 대기, 최종 컷오프 온도 컷 - 오프 온도에 도달하는 데 필요한 초 단위 시간 : 소프트웨어 시리즈 8 기록 데이터를 확인하기 위해 한번 footswitch을 누르십시오. </li><li> 추가 제어 테스트로 실험에 참여 조사관은 자신에 장치를 체험 할 수 있습니다. 통증 지각의 순간 (46-48 ℃)에서 금속 접시에서 손을 철수하는 것은 둘 다 피부에 악영향을하지 않으며 나중에 불편을 생산해야합니다. </li><li> 장치가 설정하고 단계 1.3과 1.4의 결과가 기록되면 그들은 비교할 수 있습니다. 이것은 장치의 사용을 무효화 수있는 잠재적인 문제를 감지하는 도움이됩니다. 예를 들어, 초기 최종 / 대기 컷 - 오프 템피 간의 불일치ratures와 실제 단위의 읽기 및 / 또는 장치와 핸드 탈퇴에 필요한 실제 플레이트 온도에 의해 표시되는 온도 사이의 차이. </li></ol> 2. 정상 동물 테스트 어느 젊은이나 어른 Wistar 쥐 [포스트 산후 (P) 연령은 21-25일] 또는 다른 유전적 배경이나 성별의 생쥐 (p21-25)을 사용할 수 있습니다. 실험에 사용된 생쥐가 변형 C57BL/6J 라구요. <ol><li> 실험이 수행되어야 밤 전에 iHPAM가 게재된 벤치에 자신의 새장을 배치하여 동물을 적응. 테스트를 수행하기 전에 두 시간은 기기의 잡음과 함께 동물에 익숙해 iHPAM 켜십시오. 이 시점에서 iHPAM가 설정하고 (단계 1 참조) 적절한 기능을 확인하는 테스트를 할 수 있습니다. 음식과 물이 동물 (단계 2.1를 참조) 관측 챔버에있는 경우를 제외하고, 시험 전반에 걸쳐 광고 libitum를 제공합니다. 참고 :이 꼬마 도깨비입니다행동 실험에서 실험 조건은 기본적으로 제어되는 것으로 가정하지 않도록 ortant. 특별한주의는 행동 연구 (7 검토)의 결과에 영향을 줄 수 유전 및 환경 요인에 지불되어야합니다. </li><li> 부드럽게 기기의 가열판 위에 플렉시 글라스 관측 실에서 일반 마우스 / 쥐를 놓습니다. 동물이 편안하게 동작을 보여줍 때까지 동물이 따뜻하게 표면 (° C ~ 28에서 설정)에 적응하도록 허용합니다. 참고 :이 조건에서 정상 성인 쥐 냄새 동안 때때로 관찰 챔버의 뚜껑을 향해 서서, 초기 탐험 동작을 보여줍니다. 몇 분 후에 쥐가 정리의 캐주얼 관찰하고 편안한 동작을 보여줄 수 있습니다. 부담없이 주변을 킁킁하면서 때로는 쥐가 편안한 몸의 자세 (자주 발생하는 확장자)와 동침. 일반 마우스는 보통 쥐보다 더 활성 상태입니다. 그러나, 마우스는 제가 몇 분 후 편안한 답사의 행동을 보여관측 실 그렇죠. 그것도 (예, 점프, 전망대 챔버로부터 벗어나려고 노력) 이스케이프 동작이나 방어적인 태도를 (예, 비명을 지르며 죽어) 관찰하는 매우 드문 경우입니다. 생쥐 한 마우스에서 다른 8 고통을 통신할 수 없습니다하는 것도 중요합니다. 따라서 별도의 새장에 배치 테스트 마우스에 중요있을 수 있습니다. </li><li> 장소는 모든 각도에서 관찰을 허용하기 위해 관찰 챔버의 뒷면에 반사. 디지털 비디오 카메라를 들고 삼각대는 nocifensive (고통이 피할 수) 문제가 발생했던되는 정확한 순간을 결​​정하는 데 도움이 될 수 있습니다. </li><li> 일단 동물 footswitch을 눌러 접시까지 관측 챔버 더위에 편안한입니다. 플레이트 온도가 6 ° C / 분의 속도로 가열하면, 정상적인 동물 중 뒷다리-앞발을 포함한 nocifensive 동작 46에서 48 ° C에서 3,5,9,10에 성난 * 일반적으로 온도. 따라서 동물 observ 전형 제거한 형태입니다약 3 분 후에 ation 챔버. 참고 : 떨고 및 / 또는 리프팅하면서 쥐의 드나 마우스 IE의 전형 nocifensive 반응을 관찰, 뒷다리 - 앞발로 땅을 차다, 핥아, 열 자극을 종료할 수있을만큼이다. 이것은 footswitch을 눌러 이루어진다. 이때 소프트웨어는 접시의 온도를 기록하고 번호판은 즉시 대기 온도 (28 ° C)까지 내려 냉각 (~ 0.5 분)에 도달한다. 이 온도 즉, 어떤 nocifensive 반응과 끝, 하나는 정상적인 (제어) 동물의 유해 열 임계값 (TNT)로 간주된다. * 가끔은, 특히 마우스에 유해 온도 nocifensive 문제는 첫 번째에서 관찰 또는 두 forepaws (예, 앉아있는 동안 핥아), 몇 초 뒷다리-발냄새 전에 수 있습니다. 그러나 이물-다쳤구나 핥아도 돌보는 행동의 정상적인 구성 요소입니다. 그러므로 오직 뒷다리 - 발자국 반응이 평가됩니다. 행사의 생쥐뿐 그들의 뒷다리 - 발 넣기 수 있습니다. 그러나, 정상적인 정리는 n을 할몇 초보다는 마지막으로 더 많은 양도, 핥아 집중 포함되지 않고 보통의 발톱 청소 후에 끝납니다. </li><li> 부드럽게 접시에서 동물을 제거하고 각각의 케이지에 넣습니다. 열 임계값 측정 그런 다음 다른 컨트롤 (일반) 동물에 대해 반복됩니다. 참고 : TNTs는 관측 챔버에서 동물을 제거하지 않고 1-2분의 간격으로 하나의 동물에서 확인할 수 있습니다. 쥐 또는 생쥐에서 TNT의 결정은 몇 일 동안 여러 번 반복 수 있습니다. 이것은 평균 각 동물의 TNT뿐만 아니라 나이와 그 변화를 결정하는 데 특히 유용합니다. </li><li> 컨트롤 동물 TNT는 세 개 이상의 임계값 ± SEM의 평균으로 표시됩니다. </li><li> 획득 데이터의 통계 분석은 생쥐 또는 쥐의 다른 치료 그룹을 비교하기 위해 수행됩니다. 분산 분석을 포함한 파라메 트릭 절차는 적절히 데이터가 정상적으로 배포되는 곳에 사용되며 치료 그룹은 호모가 어딘지 수 있습니다skedastic, 이러한 조건은 다음과 같은 접근 방법을 적용할 수있는 만족되었을 때. 와 / 치료없이 또는 다른 시간 지점 (예, 그림 3의 데이터)에서 개별 TNTs을 반복 여러 측정 즉 차이를 감지 뉴먼-Keuls 시험 뒤에 분산 분석. 이점 학생의 T-테스트는 약물 치료 후 비교하기 전에 두 데이터 그룹 즉, TNTs을 비교하는 데 사용될 수 있으며, T-테스트 unpaired는 (예 : 차량 취급 동물 수와 약물 치료의 TNT 변화의 차이를 결정하는 데 사용할 수 있습니다 , 그림 4의 데이터). </li></ol> 3. 당뇨병 동물 테스트 streptozotocin (STZ) 유발 당뇨병 쥐들은 PDN의 메커니즘을 연구하고 진통 약물과 치료법 11,12을 평가하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 동물 모델이다. 쥐은 STZ의 단일 intraperitoneal 복용량 (60 밀리그램 / ㎏) 수 B에 의해 당뇨했다전자는 당뇨병 발병 후 11 제 3 주일 동안 열 hyperalgesia에 대한 검사. 그것은 모든 당뇨병 환자의 쥐가 PDN을 개발 점에 유의하는 것이 중요합니다. 그러나 hyperalgesia를 (~ 50 %) 개발 않는 동물은 쉽게 확인할 수 있습니다. 실제로, 그들의 TNTs 정상 * 이하입니다. C 대신 28 * STZ-당뇨 쥐의 TNTs을 확인하려면 15 시작 플레이트 온도 ° ° C가 사용됩니다. 이러한 변화의 이유는 PDN와 대부분의 당뇨병 동물 hyperalgesic 2,11 것으로 예상되고있다. 그러므로, 그들은 정상적인 유해 열 임계값보다 낮은 것이다 (예를 들어, &lt;45 ° C). <ol><li> 당뇨병 쥐들은 테스트 장치 위에 전망대 챔버에 배치됩니다. 동물은 동물이 편안하게 동작을 보여줍 때까지 플레이트 표면에 적응하도록 허용됩니다. 참고 : 일반적으로 당뇨병 쥐가 정상적인 행동의 정도를 표시하지 않습니다. 당뇨병 쥐들은 기면, 보통 hypoactive이므로 자주 보여주는제한된 움직임과 느린 정리. 그것은 관찰 챔버의 뚜껑으로 순위를 관찰하는 드문 것입니다. 몇 분 후, 당뇨병 쥐들은 침착하게 캐주얼 분위기의 스니핑과 챔버의 일각에 남아 있습니다. </li><li> 당뇨병 동물 관찰 실에서 편안한되면 당뇨 쥐가 뒷다리 / 앞 - 앞발로 땅을 차다 중 하나를 포함한 nocifensive 동작이 수 단계 2.3에서와 같이 플레이트가 가열된다. 이것은 보통 비 유해 플레이트 온도 (예를 들어, &lt;45 ° C)이나 6 ° C / 분, 온도 상승과 챔버에서 더이상 5 달러 분 후에 발생합니다. 참고 : 젊은 성인 당뇨 쥐의 nocifensive 응답은 정상 쥐의 차이가되지 않습니다. 그러나 그런 행동을 evoking 최저 기온이 크게 저하됩니다. </li><li> 단계 2.4 참조 </li><li> 실험 하루 복용량보다 3 임계값의 말은 °로 표현 C ± SEM은 diabeti의 유해 열 임계치로 간주됩니다C 동물. 참고 : 하나와 유사한 패러다임은 정상이나 당뇨 쥐에 대한 설명은 열 임계값에 대한 진통제의 열 방지 nocifensive 효과를 확인하기 위해 미행 수 있습니다. </li></ol> 4. 테스트 진통제 약물의 안티 nociceptive 속성 (예 : 진통제)뿐 아니라 최소한의 효과적인 복용량과 같은 pharmacologic 매개 변수의 결정은 쉽게 위의 설명한 단계를 사용하여 얻을 수 있습니다. 그것은 쥐 / 생쥐에게 투여 진통제의 적절한 복용은 크게 자신의 TNTs을 높일 것이라고 예측하고 있습니다. 이것은 열 hyperalgesia 3 동물 특히 민감합니다. 그러나, 결과의 해석에 편견을 피하기 위해, 동물 단체의 행동 관찰에 관련된 수사관 알고 있거나 동물 치료 여부를 받았다면 인식해서는 안됩니다. 또한, 관찰자​​에 의해 주입되는 약물은 다른 수사관에 의해 준비와 라벨 수A, B는 C 등을 투여가 확인된 동물마다 개별 접종을 나열, 인쇄물로 제공됩니다. 테스트중인 약물에 따라 잠재적인 진통제의 다른 복용은 정상이나 당뇨병 동물 5-15 분 전에 동작 테스트를 실시 수 있습니다. 적절한 컨트롤이 포함되어 있습니다 (즉, 차량을 주사 연령 유사한 동물 실행형 및 / 또는 PDN없이 당뇨 쥐)와 (접시의 예 : 동일한 시작하는 온도) 동일한 조건을 사용하여 테스트해야합니다. 약물의 만성 효과는 물론 테스트할 수 있습니다. 5. 대표 결과 젊은 성인 정상이 아닌 취급 쥐 또는 생쥐의 양쪽 뒷다리-한것 땜 nocifensive 반응을 evoking 최저 플레이트 온도는 2-6으로 다음과 같은 단계를 2-1으로 결정됩니다. 그림 1은 정상 젊은 성인 쥐 및 생쥐의 TNT와 같이 있었 47.2 ± 0.2 ° C와 47.5 ± 0.5 ° C, 각각. 우리는 obse가개인의 TNTs (그림 2A)이나 같은 연령의 개인 (그림 2B) 중에서 TNTs의 중요한 변화 rved도 상당한 매일 변화. 성별에 의한 TNT의 차이점은 (보이지 않음) 관찰되지 않았다. 젊은 성인 STZ-당뇨 쥐의 TNTs 정상 쥐 (단계 3.1-3.3)에 관해서는 유사한 방식으로 결정됩니다. 그러나 시작 플레이트의 온도가 15로 설정했습니다 ° C ~ 대신 28 ° C. STZ-당뇨 쥐의 nocifensive 행동은 개인과 십일일 후 STZ 주사를 시작하는 일상 패션에 적어도 세 번 평가되었다. 그림 3, STZ-당뇨 쥐의 TNT에 큰 방울 (P &lt;0.01)에 나타난 것은 분명 이주 후 STZ 분사됩니다. STZ-당뇨의 쥐의 평균 TNT는 45.6이었다 ± 0.1 ° C (N = 16 일 14-23에서 풀링된 값). 노마보다 훨씬 낮은 TNT을 전시 당뇨 쥐나는 PDN가로 간주되었다. 이러한 쥐들은 진통제의 급성 방지 nociceptive 속성 (복합)를 테스트하기 위해 사용되었습니다. TNTs 5 분 검사 전 혼자 화합물이나 차량 중 하나 복용량을 주사 정상과 당뇨 쥐에서 결정됩니다. 차량에 혼자 (45.6 ° C 대 47.6 ° C, 각각)로 치료 쥐에 비해 그림 4와 같이, 화합물의 단일 내부 복막 선량 크게 당뇨 쥐의 TNTs 증가했습니다. 화합물의 안티 nocifensive 효과도 정상 쥐에서 관찰되었다;. 상당 (P &lt;0.01), 그것은 덜 발음 (47.4 ° C 대 48.0 ° C, 각각 이전) 비록 <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig1.jpg" /> 1 그림. 정상 젊은 성인 쥐 또는 생쥐들의 TNTs의 결정 : 젊은 성인 쥐 (p21-24) 또는 마우스 (p20-21)의 TNTs는 단계 ABO 설명한 다음 iHPAM에서 테스트되었습니다같군. 12 쥐 25 생쥐의 총 테스트되었습니다. 측정은 몇 일 동안 수행되었으며 결과는 풀링된되었다. 결과는 말은 ± SEM을로 표현됩니다. 이 쥐에 기록된 최소 및 최대 TNT 값은 46.2 ° C와 48.6 ° C에서 각각 있었다. 생쥐의 경우 기록된 최대 및 최소 TNT 값은 각각 48.8 ° C와 44.9 ° C 있었다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig2.jpg" /> 그림 2. 쥐 및 생쥐의 TNTs의 연령 의존성 :) 꾸몄다는 5 일 동안 적어도 세 번 매일 결정 연령 21 일 사 정상 쥐 (N = 4)의 TNTs입니다 B)를 생쥐의 TNTs는 지적에 한 번 결정 littermates. 나이. 각 결정 포인트의 꼭대기에서 숫자가 사용되는 littermates의 수를 나타냅니다. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig3.jpg" /> 그림 3. 당뇨병 쥐들이 hyperalgesic 세 된 우리당뇨병 발병 후 eks 여섯 (N = 6) 연령 일치하는 젊은 성인 STZ-당뇨 쥐의 TNTs은 11일 당뇨병 포스트 유도부터 매일 결정됩니다. 일일 TNT의 평균 (± SEM을 의미) 표시됩니다. 11~13일 후 STZ 분사 사이에 결정 당뇨병 TNTs가 정상 범위 (빨간 선) 내에 있었다. STZ 주입 TNTs는 45.1로 크게 감소 2 주 후에 ± 0.4 ° ​​C, (P &lt;0.05). <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig4.jpg" /> 4 그림. STZ-당뇨 쥐의 화합물 B의 급성 방지 nocifensive 효과. 젊은 성인 정상 쥐 (파란색 그룹 N = 12)과 연령은 STZ-당뇨 hyperalgesic의 쥐 (녹색 그룹 N = 6)은 차량의 intraperitoneal 주사 후 iHPAM에서 테스트되었습니다 일치 (어두운 바) 또는 화합물 (조명 바). 각 처리 (차량 제어 또는 화합물-대우)에 대한 의미 TNT ± SEM이 표시됩니다. 별표는 통계적 차이를 나타내는(P &lt;0.05).

<ol><li>Baron, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+neuropathic+pain%3A+From+mechanisms+to+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+J.+Pain%22%5BJournal%5D)">Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms.</a> Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).</li>
<li>Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tactile+allodynia+and+formalin+hyperalgesia+in+streptozotocin-diabetic+rats%3A+Effects+of+insulin%2C+aldose+reductase+inhibition+and+lidocaine%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine.</a> Pain. 68, 293-299 (1996).</li>
<li>Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noxious+heat+threshold+measured+with+slowly+increasing+temperatures%3A+Novel+rat+thermal+hyperalgesia+models%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models.</a> Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).</li>
<li>Ankier, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+hot+plate+tests+to+quantify+antinociceptive+and+narcotic+antagonist+activities%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities.</a> Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).</li>
<li>Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+resiniferatoxin+on+the+noxious+heat+threshold+temperature+in+the+rat%3A+A+novel+heat+allodynia+model+sensitive+to+analgesics%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics.</a> Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).</li>
<li>Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+injury-induced+drop+of+the+noxious+heat+threshold+measured+with+an+increasing-temperature+water+bath%3A+A+novel+rat+thermal+hyperalgesia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model.</a> Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).</li>
<li>Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+ranking+of+genetic+and+laboratory+environment+factors+influencing+a+behavioral+trait%2C+thermal+nociception%2C+via+computational+analysis+of+a+large+data+archive%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).</li>
<li>Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312, 1967-1970 (2006).</li>
<li>Hunt, S. P., Koltzenburg, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHunt%2C+SP+%22The+neurobiology+of+pain%22">The neurobiology of pain</a>. , Oxford University Press. New York. (2005).</li>
<li>Willis, W. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWillis%2C+WD+%22The+pain+system+%3A+The+neural+basis+of+nociceptive+transmission+in+the+mammalian+nervous+system%22">The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system</a>. , Basel, New York, Karger. (1985).</li>
<li>Calcutt, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCalcutt%2C+N+%22Modeling+diabetic+sensory+neuropathy+in+rats.+In%3A+Methods+in+molecular+medicine.+Pain+research%3A+Methods+and+protocols%22">Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols</a>. , Humana Press. Totowa, N.J. (2004).</li>
<li>Bars, D. L. e, Gozariu, M., Cadden, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+nociception%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models of nociception.</a> Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).</li>
<li>Shaikh, A. S., Somani, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+and+biomarkers+of+neuropathy+in+diabetic+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents.</a> Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).</li>
<li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32, 77-88 (1988).</li>
<li>Hardy, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+the+rapid+measurement+of+skin+temperature+during+exposure+to+intense+thermal+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation.</a> J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).</li>
<li>Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+of+small+myelinated+%26quot%3Bwarm%26quot%3B+fibers+to+noxious+heat+stimuli+applied+to+the+monkey%27s+face%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Responses of small myelinated &quot;warm&quot; fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey's face.</a> Brain Res. 62, 260-263 (1973).</li>
<li>Hammond, D. L., Ruda, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+alterations+in+thermal+nociceptive+threshold+and+the+distribution+of+immunoreactive+calcitonin+gene-related+peptide+and+substance+p+after+neonatal+administration+of+capsaicin+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Lett%22%5BJournal%5D)">Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat.</a> Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).</li>
</ol>

우리는이 실험에서 사용되는 진통제의 신원을 공개하지 않기로 결정했습니다. 여기에 표시된 결과의 일부는 미국 당뇨병 협회 (샌디에고 캘리포니아)과 당뇨병 (리스본, 포르투갈)의 연구를위한 유럽 협회의 47 번째 연례 회의 71 일 과학 세션에서 발표되었습니다.

마찬가지로 열 hyperalgesia 4,13를 정할 클래식 핫 플레이트 테스트로 nociception의 분석은 여기에서 설명한 쥐 및 생쥐의 nocifensive 행동을 계량하기위한 빠르고 안정적인 방법을 허용합니다. 그러나 고전 검사와는 반대로, 증분 핫 플레이트 방식은 비침습와 거의 스트레스는 무료입니다. 구속 일부가 (즉, 동물 관찰 실에 있어야합니다) 테스트를 수행할 필요가 있지만, 쥐 또는 생쥐가 유사한 분야 (예, 주택 연습장)에 익숙해있다. 설명된 조건에서 정상 젊은 성인 쥐 및 생쥐는 47 ° C를 주위 온도에서 nocifensive 행동을 보여주었다 이러한 임계값은 다른 조사관 3,5,13에서보고 그보다 약간 높은 있지만, 우리의 결과는 46-48의 열 nociceptive 임계값과 합의에 ° C에서 인간 14 관찰, 원숭이 15 다른 동물 모델 <...

<table border="1"><tbody><tr><td> 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> 증분 핫 플레이트 진통제 측정기 </td><td> IITC 주식 회사 생명 과학 </td><td> 부품 # PE34 </td></tr><tr><td> 소프트 시리즈 8 </td><td> IITC 주식 회사 생명 과학 </td><td> 부품 # Series8 </td></tr><tr><td> Streptozotocin </td><td> Calbiochem </td><td> 572,201 </td></tr></tbody></table>

당뇨병 쥐의 열전달 nociceptive 본부 신속한 결정

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

고통스런 당뇨병의 신경 장해 (PDN)는 hyperalgesia 즉, 유해 자극에 대한 민감성 증가, 그리고 allodynia 즉, 일반적으로 무해한 자극에 1 ~ 과민성이 특징입니다. Hyperalgesia와 allodynia은 당뇨병 2의 다양한 설치류 모델에서 공부했습니다. 그러나, 같은 Bölcskei 외, 동물 모델에서 &quot;고통&quot;의 결정에 의해 명시하는 것은 그것의 주관적 성격 3 ~ 인해 도전한다. 또한, 유해 열 자극에 대한 행동 반응을 결정하는 데 사용되는 전통적인 방법은 일반적으로 재현성과 pharmacological 감도 3 부족합니다. 예를 들어, Ankier 4의 핫 플레이트 메서드를 사용하여, 움찔, 금단 증상 및 / 또는 두 뒷다리와 / 또는 이물-발냄새 핥아는 일정한 높은 온도 자극 (52-55 ° C)에서 반사 대기 시간으로 계량합니다. 그러나, 열 자극에 hyperalgesic있는 동물 reproducibly 재의 차이를 표시하지 않습니다그 위에 - 임계 온도 3,5를 사용하는 플렉스 대기. Bölcskei 외. 6 최근에 설명한 방법으로, 여기에 설명된 절차는 생쥐와 쥐에서 열 nociceptive 임계값의 신속한 민감하고 재현성 결정 (TNTs)에 있습니다. 방법은 마우스 / 쥐 발바닥 표면의 피부에 주로 적용 서서히 증가하고 열 자극을 사용합니다. 방법은 같은 PDN 같은 hyperalgesic 주들 중에 안티 nociception를 공부할 특히 민감합니다. 우는 설명한 절차 Almási 외 5 Bölcskei 외 3 자세하게 출판 것들을 기반으로합니다. 절차는 실험실 동물 관리 및 사용위원회 (LACUC), 라이트 주립 대학의 승인되었습니다 여기에 설명했다.

여기서는, 쥐가이나 쥐가 nocifensive 동작 표시되는 최저 온도를 결정하는 빠른 안정적이고 간단한 절차를 설명<em&gt; 즉</em&gt;<em&gt; 열 nociceptive 임계값</em&gt; (TNT). 어떤 경우에이 방법은 동물, 스트레스를 최소로 TNTs의 정확하고 재현성 평가있게 천천히 증가 열 자극을 적용합니다.

당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정

통증성 당뇨병성 신경병증(PDN)은 유해 자극에 대한 민감도가 증가하는 통각 과민(hyperalgesia)과 과민 반응인 이통증(allodynia)이 특징입니다.

본 절차의 전반적인 목적은 대조군 및 당뇨병 쥐의 열성 통각 임계값을 결정하는 것입니다. 첫 번째 단계는 동물을 점진적 가열판 및 진통 측정기에 배치하는 것입니다. 다음으로, 표면이 가열되는 동안 가열판의 온도를 점진적으로 높입니다.동물에게서 혐오 행동이 나타나는지 관찰합니다. 이러한 행동이 관찰되면 가열을 중단하고 그 순간의 플레이트 온도를 기록합니다. 결과적으로 진통제를 투여받았거나 통증성 당뇨병성 신경병증을 앓고 있는 동물의 열성 통각 역치 변화를 확인할 수 있습니다.일반적으로 초임계 온도로 설정되는 핫 플레이트와 같은 기존 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은, 본 방법은 플레이트의 온도를 점진적으로 높여 열성 통각 역치를 정확하게 결정할 수 있다는 점입니다. 열성 통각 역치(TNT)는 증분 핫 플레이트 진통 측정기(IHpam)를 사용하여 결정합니다. 이 시스템의 구성 요소로는 플렉시글라스 관찰 챔버, 온도 조절 알루미늄 플레이트, 프로그래밍용 키패드, 그리고 장치의 원격 제어를 위한 풋 스위치가 포함됩니다.데이터는 근처 컴퓨터에 설치된 맞춤형 소프트웨어를 사용하여 수집합니다. 또는 기기에 위치한 시리얼 포트를 사용하여 하드카피를 출력할 수 있습니다. 동물의 행동 가시성을 높이기 위해 플렉시글라스 챔버 뒤에 거울을 배치하십시오.다음으로, 원하는 가열 속도와 초기 대기 온도 및 최종 차단 온도를 설정하십시오. 풋 스위치를 눌러 시스템을 시작하거나 중지합니다. 초기 대기 온도와 최종 차단 온도, 그리고 최종 온도에 도달하는 데 걸리는 시간이 기록되었는지 확인하십시오.원하는 경우, 실험자는 본인에게 시스템을 테스트할 수 있습니다. 통증이 느껴지는 순간 금속판에서 손을 뗍니다. 지각 과정에서 피부에 손상을 주거나 이후에 불편함이 발생해서는 안 됩니다.테스트가 진행될 벤치 위에 케이지를 배치하여 전날 밤부터 순응을 시작하십시오. 테스트 2시간 전에 IH pan을 켜서 동물들이 장비의 배경 소음에 익숙해지도록 하십시오.이 단계에서 시스템은 앞서 살펴본 것과 같이 설정하고 테스트할 수 있습니다. 동물이 환경에 적응한 후, 따뜻한 표면 위에 있는 플렉시글라스 챔버에 쥐를 조심스럽게 넣으십시오. 동물이 몇 분 동안 챔버를 탐색하도록 둡니다.테스트를 시작합니다. 동물이 시험을 시작하기에 적절한 상태가 되면, 풋 스위치를 눌러 플레이트 가열을 시작하십시오. 플레이트가 가열되는 동안 동물의 행동을 관찰하십시오.일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 개인은 대량 공격 행동의 식별이 항상 간단하지 않고 연습이 필요하기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 공격 행동에는 두 뒷구멍의 핥기, 떨기 또는 들어 올리기가 포함되지 않습니다. 처음으로 관찰되는 행동은 네 개의 구멍을 핥는 것일 수 있으며, 이후 뒷구멍의 반응이 뒤따른다는 점에 유의하는 것이 유용합니다.가장 강한 혐오 반응이 관찰되면, 풋 스위치를 눌러 실험을 종료하고 동물을 홈 케이지로 옮깁니다. 이 반응을 유발하는 온도를 대조군 동물의 열성 통각 역치 또는 TNT로 간주합니다. 장치를 세척한 후 다음 동물에 대해 테스트를 반복합니다.정상 성체 쥐와 생쥐의 열성 통각 역치 값은 다음과 같습니다. 본 데이터는 4일의 테스트 기간 동안 쥐의 TNT(열성 통각 역치)에 변화가 없었음을 보여줍니다. 마찬가지로, 생쥐의 TNT는 연령대에 관계없이 일정하게 유지되었습니다.이 예시에서는 젊은 성체 STZ 당뇨 쥐의 TN TS를 반복적으로 측정하였습니다. 당뇨 유도 2주 후부터 열성 통각 역치가 지속적으로 감소하는 것을 확인할 수 있습니다. 여기서는 진통 화합물의 급성 항통각 특성을 테스트하기 위해 IH pam을 사용하였습니다.A 화합물은 대조군 동물에서 용매를 투여한 동물과 비교하여 가벼운 진통 효과를 나타냈습니다. 그러나 당뇨 동물에서는 용매 대조군과 비교하여 A 화합물을 투여했을 때 진통 효과가 더 뚜렷하게 나타났습니다. 이 절차를 수행할 때는 동물의 행동, 특히 동물의 수용체 인근에서 발생하는 행동을 지속적으로 관찰하는 것이 매우 중요합니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

인간의 학습 과목의 실험적 염증 피부에 열 및 기계적 통증 임계값을 평가 알고리즘이 표시됩니다. 두 통증 테스트 패러다임이 독립적으로 통증을 전달하는 두 가지 주요 말초 신경 섬유 집단에 의해 nociceptive 처리를 검토, 즉 비 myelinated C 섬유와 작은 A - 델타 섬유를 myelinated.

열과 인간 주제에 염증이 피부에 기계적 통증 임계값 결정

수술의 단순하고 강력한 행동 결과로 인해 좌골 신경의 만성적인 수축이 neuropathic 고통의 사전 저명한 동물 모델 중 하나입니다. 수술에 따라 24 시간 내에 통증 과민성 설립되고 양적 폰 프라이 aesthesiometer (기계적 시험)과 발바닥 진통제 측정기 (온도 시험)를 사용하여 측정할 수있다.

좌골 신경 및 쥐의 통증 과민성 시험의 만성 수축

우리는 아편 유발 통각 과민과 생쥐의 관용의 개발을 검토하는 프로토콜을 설명합니다. 순진과 모르핀 처리 된 동물의 열 및 기계적 통각 반응의 측정을 바탕으로, 그것은 고통의 감도 (통각 과민)의 증가를 정량화 및 만성 아편 관리와 관련된 진통제 (허용 오차)이 감소 할 수 있습니다.

열 및 기계를 침해 수용성 모달리티를 사용하여 마우스의 모르핀에 의한 통각 과민과 진통 공차의 평가

이 작품 당뇨병 neuropathic 신경의 활동 전위를 차단 하 고 강도 집중 된 초음파를 적용 한 방법론을 제공 합니다.

당뇨병 쥐 모델에서 신경 전도 대 한 초음파 도구 차단

여기에 제공된 프로토콜은 만성 허혈 후 통증(CPIP)의 동물 모델을 확립하는 단계를 상세히 설명합니다. 이것은 인간 복잡한 지역 고통 증후군 유형-I를 모방하는 잘 인식된 모형입니다. 기계적 및 열적 과민성은 CPIP 래트 모델에서 관찰된 캡사이신 유도 노시펜스 거동뿐만 아니라 추가로 평가된다.

쥐에 있는 복잡한 지역 고통 증후군 타입-I를 위한 만성 포스트 허혈 고통 모형

수정된 수술은 생쥐 또는 쥐 보존 신경 손상 모델에 대한 단순화된 방법으로, 일반 비골 신경과 천성 신경을 모두 손상시키기 위해 한 번의 결찰과 한 번의 절개만으로 됩니다.

마우스의 신경병증성 통증에 대한 수정된 보존 신경 손상 수술 모델

요통의 예방 및 관리를 위한 새로운 치료적 개입을 개발하기 위해 동물 모델은 번역 관점에서 이러한 치료법의 메커니즘과 효과를 조사해야 합니다. 현재 프로토콜은 쥐의 기계적 민감도를 평가하기 위한 표준화된 방법인 BMS 테스트를 설명합니다.

만성 요통의 기계론적 조사를 위한 쥐의 등 기계적 민감도 평가

이 프로토콜은 조작 기반 구강 안면 통증 평가 장치를 사용하여 신경 병증 성 구강 안면 통증의 쥐 모델에서 기계적 과민 반응의 평가를 설명합니다.

구강 안면 조작 통증 분석을 사용한 쥐의 신경 손상 유발 기계적 과민증 평가

부분 좌골 신경 결찰술은 열 및 기계적 자극에 대한 과장된 반응을 특징으로 하는 오래 지속되는 만성 신경병성 통증을 유발합니다. 이 신경병성 통증 마우스 모델은 일반적으로 통증 관리를 위한 혁신적인 치료법을 연구하는 데 사용됩니다. 이 기사에서는 표준화 및 재현성을 개선하기 위한 수술 절차에 대해 자세히 설명합니다.

부분 좌골 신경 결찰: 새로운 치료법의 항통각수용 효과를 연구하기 위한 만성 신경병성 통증의 마우스 모델

경미한 만성 수축 손상 쥐에 대해 "Three-Manipulation and Three-Acupoint" tuina 요법을 수행하기 위해 tuina 조작 시뮬레이터를 사용하여 프로토콜을 제시하고, 행동 분석을 통한 통증 변화와 효소 결합 면역 흡착 분석을 사용하여 염증 인자 발현의 변화를 테스트하여 24시간 이내에 tuina의 효과적인 진통 시점을 평가합니다.

신경 손상이 있는 쥐의 통증 변화의 특성: 1회 Tuina 중재 후 24시간 이내

최근 통증 연구의 발전은 녹색 발광 다이오드(GLED)를 비약물적 치료법으로 사용하는 광신경조절의 잠재력을 강조합니다. GLED는 통증 경로를 조절하여 효과적인 통증 완화를 제공합니다. 이 논문은 GLED 노출 프로토콜을 표준화 및 개선하여 연구 전반에 걸쳐 일관성을 개선하고 이 요법의 임상 적용을 발전시키는 것을 목표로 합니다.

통증 관리에서 녹색 발광 다이오드의 역할을 평가하기 위한 광신경조절 기법 최적화

학습하세요 쥐의 열통각 역치 측정법을 통해 당뇨병성 신경병증의 통각 민감도 변화를 평가하는 방법을. 이 기법은 통증 연구 및 진통제 효능 검증에 활용됩니다.

당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정

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