당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정

본 절차의 전체적인 목적은 대조군 및 당뇨병 쥐의 열성 통각 역치를 결정하는 것입니다. 첫 번째 단계는 동물을 점증적 핫플레이트 및 진통 측정기에 배치하는 것입니다. 그다음, 표면이 가열되는 동안 핫플레이트의 온도를 점진적으로 높입니다.

동물에게서 공격적인 행동이 나타나지 않는지 관찰합니다. 이러한 행동이 관찰되면 가열을 중단하고 그 순간의 플레이트 온도를 기록합니다. 결과적으로 진통제를 투여받았거나 통증성 당뇨병성 신경병증을 앓고 있는 동물의 열성 통각 역치 변화를 확인할 수 있습니다.

일반적으로 초임계 온도로 설정되는 핫 플레이트와 같은 기존 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은, 본 방법은 플레이트의 온도를 점진적으로 높여 열성 통각 역치를 정확하게 결정할 수 있다는 점입니다. 열성 통각 역치 또는 TNT는 점증적 핫 플레이트 진통 측정기(incremental hot plate analgesia meter, IHpam)를 사용하여 결정합니다. 이 시스템의 구성 요소에는 플렉시글라스 관찰 챔버, 온도 조절 알루미늄 플레이트, 프로그래밍용 키패드 및 장치의 원격 제어를 위한 풋 스위치가 포함됩니다.

데이터는 인접한 컴퓨터의 맞춤형 소프트웨어를 사용하여 수집합니다. 또는 장치에 위치한 시리얼 포트를 사용하여 하드 копи본을 출력할 수 있습니다. 동물의 행동 가시성을 높이기 위해 플렉시글라스 챔버 뒤에 거울을 배치하십시오.

다음으로, 원하는 가열 속도와 초기 대기 온도 및 최종 차단 온도를 설정하십시오. 풋 스위치를 눌러 시스템을 시작하고 중단하십시오. 초기 대기 온도와 최종 차단 온도, 그리고 최종 온도에 도달하는 데 걸리는 시간이 기록되었는지 확인하십시오.

원하는 경우, 실험자가 직접 시스템을 테스트할 수 있습니다. 통증이 느껴지는 순간 금속판에서 손을 뗍니다. 이때의 지각은 피부에 손상을 주거나 이후에 불편함을 유발해서는 안 됩니다.

테스트가 진행될 벤치 위에 케이지를 배치하여 전날 밤부터 순화를 시작하십시오. 테스트 2시간 전에 IH pan을 켜서 동물들이 장비의 배경 소음에 익숙해지도록 하십시오.

이 시점에서 앞서 살펴본 바와 같이 시스템을 설정하고 테스트할 수 있습니다. 동물이 환경에 적응한 후, 따뜻한 표면 위에 있는 플렉시글라스 챔버에 쥐를 조심스럽게 넣으십시오. 동물이 몇 분 동안 챔버를 탐색하도록 둡니다.

테스트를 시작합니다. 동물이 시험을 시작하기에 적절한 상태로 보이면, 풋 스위치를 눌러 플레이트 가열을 시작합니다. 플레이트가 가열되는 동안 동물의 행동을 관찰합니다.

일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 개인은 대량 공격 행동의 식별이 항상 간단하지 않고 숙련도가 필요하기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 공격 행동이 없는 경우에는 양쪽 뒷구멍을 핥거나, 흔들거나, 들어 올리는 동작이 나타나지 않습니다. 처음으로 관찰되는 행동은 네 개의 구멍을 모두 핥는 것이며, 그 후에 뒷구멍의 반응이 뒤따를 수 있다는 점에 유의하는 것이 유용합니다.

가장 심한 혐오 반응이 관찰되면, 풋 스위치를 눌러 실험을 종료하고 동물을 홈 케이지로 다시 옮깁니다. 이러한 반응을 유발하는 온도를 대조군 동물의 열적 통각 역치 또는 TNT로 간주합니다. 장치를 세척한 후, 다음 동물에 대해 테스트를 반복합니다.

다음은 정상 성체 쥐(rat)와 생쥐(mouse)의 열성 통각 역치입니다. 해당 데이터는 4일의 테스트 기간 동안 쥐의 TNT가 변하지 않았음을 보여줍니다. 마찬가지로, 생쥐의 TNT는 연령대에 관계없이 일정했습니다.

본 예시에서는 젊은 성체 STZ 당뇨 쥐의 TN TS를 반복적으로 측정하였습니다. 당뇨 유도 2주 후부터 열성 통각 역치가 지속적으로 감소하는 것을 확인할 수 있습니다. 여기서는 진통 화합물의 급성 항통각 특성을 테스트하기 위해 IH pam을 사용하였습니다.

A 화합물은 대조군 동물에서 부형제를 투여한 동물에 비해 가벼운 진통 효과를 나타냈습니다. 그러나 당뇨병 동물에서는 부형제 대조군에 비해 A 화합물을 투여했을 때 진통 효과가 더 뚜렷하게 나타났습니다. 이 절차를 수행하는 동안 동물의 행동, 특히 동물의 cept T 부근에서 발생하는 행동을 지속적으로 관찰하는 것이 매우 중요합니다.