A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

Teresa M. Stoepler; Julio C. Castillo; John T. Lill; Ioannis Eleftherianos

doi:10.3791/4173

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Biology

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A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

야생 유충에서 Hemocytes을 추출하기위한 간단한 프로토콜

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07:35 min

November 15, 2012

DOI: 10.3791/4173-v

Teresa M. Stoepler¹, Julio C. Castillo¹, John T. Lill¹, Ioannis Eleftherianos¹

¹Department of Biological Sciences,The George Washington University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

곤충 hemocytes는 곤충 개발의 모든 단계에 걸쳐 면역 및 비 면역 모두 여러 중요한 기능을, 실시합니다. hemocyte 유형 및 기능의 현재 우리의 지식은 곤충 유전자 모델에 대한 연구에서 비롯됩니다. 여기, 우리는 추출 정량화과 야생 유충에서 hemocytes을 시각화하는 방법을 제시한다.

이 절차의 전반적인 목표는 야생 애벌레에서 세포를 추출, 시각화 및 계수하는 것입니다. 이는 먼저 애벌레를 얼음 위에 올려 마취하고, 항응고제가 함유된 완충 용액을 주입하고, 애벌레를 얼음으로 되돌려 발치 전에 세포가 순환계로 다시 들어갈 수 있도록 함으로써 이루어집니다. 두 번째 단계는 깨끗한 메스를 사용하여 애벌레의 뒤쪽 끝을 얕게 절개

다음으로, 부드러운 집게를 사용하여 애벌레를 부드럽게 짜냅니다. 그런 다음 완충 용액 혈우 림프 혼합물을 마이크로 피펫을 사용하여 흡인하고 마이크로 원심분리 튜브에 수집합니다. 마지막 단계는 혈 림프 용액을 동일한 부피의 완충 용액과 부드럽게 혼합하고 용액 10마이크로리터를 혈구 분석기로 옮겨 세포 수를 시각화하고 계수하는 것입니다.

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