Name: 태아 마우스 모델에서 Bioactive 에이전트의 Intratracheal 관리를위한 소설 외과 접근 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-10-31T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 12 s
Description: 배우세요 태아 마우스 기관 내 생물학적 제제 투여를 위한 새로운 외과 기법을. 자궁 절개를 통해 태아 머리를 외부로 노출시키고 수직 목 절개로 기관을 시각화하여 형광 비드나 바이러스 벡터를 효율적으로 투여하는 방법입니다.

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MC와 AVdP는 플랜더스의 과학 기술 (IWT-Vlaanderen)을 통해 혁신의 추진 연구소에서 보조금에 의해 지원 박사 동문 있습니다. JT는 UZ Leuven에서 파트 타임 임상 연구 휄로 십 (KOOR)를 보유하고 있습니다. DV는 구 Leuven, DBOF/10/062의 교부금으로 지원하는 박사 동료입니다. MMdC는 Conselho Nacional 드 Pesquisa 전자 Desenvolvimento (CNPq)와 에라스무스 (Erasmus) Mundus의 교부금으로 지원하는 박사 동료입니다. 연구는 EC 부여 DIMI (LSHB-CT-2005-512146)와 구 Leuven에서 생체 분자 이미징 연구 그룹 (IMIR)에 의해, IWT-Vlaanderen로 운영되었습니다. 우리는 rAAV 벡터 생산을위한 플라스미드 AAV6.2 포장의이 같은 선물 제임스 M. 윌슨에 의해 설립 UPenn 벡터 코어를 인정하고 싶습니다.

<ol><li>Willson, D. F., Notter, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+future+of+exogenous+surfactant+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Care%22%5BJournal%5D)">The future of exogenous surfactant therapy.</a> Respir. Care. 56, 1369-1388 (2011).</li>
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<li>Thebaud, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+endothelial+growth+factor+gene+therapy+increases+survival%2C+promotes+lung+angiogenesis%2C+and+prevents+alveolar+damage+in+hyperoxia-induced+lung+injury%3A+evidence+that+angiogenesis+participates+in+alveolarization%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Vascular endothelial growth factor gene therapy increases survival, promotes lung angiogenesis, and prevents alveolar damage in hyperoxia-induced lung injury: evidence that angiogenesis participates in alveolarization.</a> Circulation. 112, 2477-2486 (2005).</li>
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<li>Waddington, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+transgene+expression+by+administration+of+a+lentivirus-based+vector+to+the+fetal+circulation+of+immuno-competent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Long-term transgene expression by administration of a lentivirus-based vector to the fetal circulation of immuno-competent mice.</a> Gene Ther. 10, 1234-1240 (2003).</li>
<li>Waddington, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permanent+phenotypic+correction+of+hemophilia+B+in+immunocompetent+mice+by+prenatal+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Permanent phenotypic correction of hemophilia B in immunocompetent mice by prenatal gene therapy.</a> Blood. 104, 2714-2721 (2004).</li>
<li>Senoo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenovirus-mediated+in+utero+gene+transfer+in+mice+and+guinea+pigs%3A+tissue+distribution+of+recombinant+adenovirus+determined+by+quantitative+TaqMan-polymerase+chain+reaction+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Genet.+Metab%22%5BJournal%5D)">Adenovirus-mediated in utero gene transfer in mice and guinea pigs: tissue distribution of recombinant adenovirus determined by quantitative TaqMan-polymerase chain reaction assay.</a> Mol. Genet. Metab. 69, 269-276 (2000).</li>
<li>Carlon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+gene+transfer+into+the+mouse+lung+by+fetal+intratracheal+injection+of+rAAV2%2F6.2%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Efficient gene transfer into the mouse lung by fetal intratracheal injection of rAAV2/6.2.</a> Mol. Ther. 18, 2130-2138 (2010).</li>
<li>Schmiedl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipopolysaccharide-induced+injury+is+more+pronounced+in+fetal+transgenic+ErbB4-deleted+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lipopolysaccharide-induced injury is more pronounced in fetal transgenic ErbB4-deleted lungs.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol Physiol. 301, L490-L499 (2011).</li>
<li>Buckley, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+influencing+adenovirus-mediated+airway+transduction+in+fetal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Factors influencing adenovirus-mediated airway transduction in fetal mice.</a> Mol. Ther. 12, 484-492 (2005).</li>
</ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

중요 단계 <ul><li> 그들은 새끼의 풍부한 수 (평균 쓰레기 크기 14.4 ± 1.8, 자신의 데이터)를 가지고 있기 때문에 우리가 함께 작동하도록 선택 마우스 스트레인 NMRI 마우스입니다 잘 개입을 용인하고 좋은 어머니의 특성을 갖추고 있습니다. </li><li> 만 외상을 유발하지 않고 거의 불가능 그렇지 않으면 재배치, 태아 머리가 아닌 어깨를 노출 원하는대로 자궁 벽과 태아 멤브레인을 통해 지갑 문자열을 배치하는 것은 중요한 단계입니다. </li><li> 태아 머리의 최적의 위치는 큰 혈관 (목 혈관) 기관과 병렬 실행 방지 있도록 하위 정확히 기관 위의 절개를 할 필수적입니다되었다. </li><li> 그것은 시각적으로 잘못된 주사를 피하기 위해 수술 현미경으로 태아 기관에 바늘의 삽입을 수행하는 것이 중요합니다. </li><li> 외상을 유발하지 않고 자궁 주머니에 태아 머리를 교체하면 같은 중요내부 - 자궁 또는 출생 후의 사망률을 증가 태아 머리를, 부상 방지하고 싶습니다. </li><li> 이 부정적인 ...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 (선택 사항) </td></tr><tr><td> NMRI 마우스 </td><td> 비어 르 Genest 세인트 섬, 프랑스 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> Isoba, Intervet / Schering-북두칠성 동물 건강, 밀턴 케인즈, 영국 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolene 6-0 </td><td> Ethicon, Groot Bijgaarden, 벨기에 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 5-0 </td><td> Ethicon, Groot Bijgaarden, 벨기에 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 50 μl 해밀턴 유리 주사기, 모델 1710.5 TLLX SYR </td><td> 해밀턴, 리노, 네바다, 미국 </td><td> 5495-20 </td><td></td></tr><tr><td> 30g의 날카로운 바늘 </td><td> 해밀턴, 리노, 네바다, 미국 </td><td> 7762-03 </td><td></td></tr><tr><td> 2퍼센트 xylocaine </td><td> 아스트라 제 네 카, Zoetermeer, 네덜란드 </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

태아 마우스 모델에서 bioactive 에이전트의 intratracheal 관리를위한 소설 외과 접근

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

세포, 유전자 또는 pharmacologic 요원이 태아 폐 배달 유전자와 획득 질병의 다양한 새로운 치료 전략을위한 기반을 제공 할 수 있습니다. 이외에도 단기 유전자 발현이나 약리 개입이 치료 효과를 달성하기에 충분한 전달 유전자, 여러 가지 비 상속 perinatal 조건의 장기 표현에 대한 요구가있는 선천성 또는 상속 이상에서이에 대한 미래의 징후로 간주됩니다 접근 방식의 종류. 단기 태아 치료의 응용 프로그램에 대한 후보 질병은 신생아 호흡 곤란 증후군의 1,2 또는 신생아 폐 3 hyperoxic 부상의 원인이 계면 활성제 단백질 B의 과도 신생아 결핍이 될 수 있습니다. 영구 치료 교정하기위한 후보 질병은 낭포 성 섬유증 (CF) 4, 계면 활성제의 결함 5 α1-antitrypsin 결핍증 (6)의 유전자 변형입니다. &lt;P 클래스는 = &quot;jove_content&quot;&gt; 일반적으로, 태아 유전자 치료의 중요한 장점은 따라서 개인에 치유 할 수없는 손상을 방지, 환자의 임상 발현 이전에 또는 초기 개발에 치료 개입을 시작하는 능력입니다. 태아에 더 효율적인 유전자 나 줄기 세포 전송을 허용 할 수 성인 기관, 비교 또한, 태아 기관은 증가 세포 증식 속도를 갖추고 있습니다. 또한, 자궁 유전자 전달에 개인의 면역 체계가 완전히 성숙하지 않을 때 수행됩니다. 따라서, 올바른 버전이 아닌 기능이나 결석 단백질의 heterologous 셀이나 보완의 이식은 최근 세포와 유전자를 모두 치료 7의 경우로 입증 된 셀, 벡터 또는 transgene 제품에 면역 sensitization을 야기해서는 안됩니다 . 본 연구에서, 우리는 직접 마우스 m의 태아 기관을 타겟팅 할 가능성을 조사odel. 이 절차는 토끼와 양 팔, 심지어는 임상 설정 9에서와 같이 큰 동물 모델에서 사용하지만, 마우스 모델에서 이전에 수행되지 날짜로되어 있습니다. 등 CF와 같은 유전 질환에 대한 태아 유전자 치료의 가능성을 연구 할 때 마우스 모델 때문에 다른 유전자 변형 마우스 변종, 잘 문서화 embryogenesis와 태아 개발, 덜 엄격한의 넓은 가용성의 증명 개념 첫째로 매우 유용합니다 윤리 규정, 짧은 회임과 대형 쓰레기 크기입니다. 다른 액세스 경로가 간 양수 주입 10-12, 난황 주머니 선박 15,16 또는 배꼽 정맥 17로 (초음파 - 가이드) intrapulmonary 주입 13,14 및 정맥 주사 관리를 포함하여 태아 쥐 폐를 타겟으로 설명되어 있습니다. 우리 소설 수술은 직접 수있는 태아 마우스 기관으로 선택하는 에이전트를 주입 연구자 수기존의 기술 18보다기도에 더 효율적 제공을위한.

우리는 마우스 태아에 bioactive 대리인의 intratracheal 관리에 대한 새로운 수술 방법을 개발했습니다. 배달 경로는 일반적으로 사용되는 내부 - 양수 주입보다 태아 마우스 폐를 타겟으로 더 효율적입니다. 이 절차는 마우스 모델에서 설명되지 않은 날짜로되어 있습니다.

태아 마우스 모델에서 Bioactive 에이전트의 Intratracheal 관리를위한 소설 외과 접근

세포, 유전자 또는 약물을 태아의 폐로 전달하는 것은 다양한 유전성 및...를 위한 새로운 치료 전략의 기초가 될 수 있습니다.

다음 실험의 전반적인 목적은 선택한 약물을 마우스 태아의 기관으로 직접 주입하는 것이며, 이는 기존 기술보다 기도로 더 효율적인 전달을 가능하게 합니다. 이는 자궁 절개술을 통해 태아의 머리를 외부로 노출시킨 후 태아의 기관에 접근함으로써 달성됩니다. 그다음, 기관을 시각화하기 위해 목에 수직 절개를 가하고 시각적 안내에 따라 바늘을 삽입합니다.그런 다음, 선택한 물질을 태아 기도로 효율적으로 전달하기 위해 형광 비드 또는 바이러스 벡터를 기관에 주입합니다. 처리된 폐 조직 절편의 현미경 분석 결과, 기관 내 주입이 가장 일반적으로 사용되는 양막 내 전달 경로에 비해 형광 분자 또는 바이러스 벡터를 태아 기도로 더 효율적으로 전달하는 것으로 나타났습니다. 태아 양막 내 주입과 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은 주입된 물질이 양수 내에서 희석되는 것을 방지할 수 있다는 점입니다.이를 통해 태아 생쥐 폐에 존재하는 입자의 양적 효과를 최대화할 수 있습니다. 일반적으로 이 기술에 익숙하지 않은 연구자는 완벽한 기관 내 주사를 수행하는 것이 매우 어렵다고 느낄 것입니다. 이는 태아의 기관이 매우 취약하여 쉽게 천공될 수 있기 때문입니다.이렇게 하면 기관 내 주사를 시행하게 되어 결과적으로 태아 폐를 표적으로 삼는 데 실패하게 됩니다. 하지만 언제나 그렇듯 연습을 통해 숙달할 수 있습니다. 기관 내 또는 폐내 주사를 준비하기 위해 임신한 MRI 마우스를 준비하십시오. 수술 시점을 기준으로 임신 18일 차여야 하며, 수술 전후 상태를 확인하십시오.마우스는 일반적인 실온과 일조 조건의 필터 탑 케이지(filter top cage)에서 사육하며, 물과 사료를 자유롭게 섭취하게 합니다. isof fluorine으로 마우스를 마취시킨 후, 체온 유지를 위해 37 °C의 가열 패드 위에 올리고 발가락 꼬집기(toe pinch)를 통해 마취 수준을 확인합니다. 복부를 포비돈 요오드(povidone iodine)로 소독하고 정중선 개복술을 시행하여 임신한 자궁을 노출시킨 다음, 두 개의 자궁각을 외부로 꺼내어 임신낭(gestational sacks)의 수를 측정합니다.태아 머리를 외부로 노출시키기 위한 최적의 위치를 기준으로 각 자궁각당 한 마리의 태아를 수술합니다. 자궁 내에 태아를 고정하기 위해, 태아 머리가 노출될 부위의 자궁벽과 태아막을 통해 직경 약 1cm의 purse string 봉합법으로 6-0 proline 봉합사로 어깨 부분을 고정합니다. 다음으로, 끝이 날카로운 작은 가위를 사용하여 purse string 내부의 자궁벽에 약 0.8cm의 절개를 가합니다.다음으로, 자궁 절개부를 통해 태아의 머리와 목 부분을 부드럽게 밀어냅니다. 그 다음 주머니 끈 봉합사를 부드럽게 당겨 목 주위를 단단히 봉합하고, 두 개의 마이크로 모스키토 포셉을 사용합니다. 위치를 고정하기 위해 5-0 poly actin을 사용합니다.실체 현미경 하에서 태아의 머리를 과신전 상태로 유지하기 위해, 두 개의 포셉에 10번 봉합사 9개를 사용하여 위턱 주변의 입 부분에 고정합니다. 예리한 가위와 둔탁한 도구를 이용한 박리로 기도를 시각화하고, 목에 수직 절개를 가한 뒤 하부 조직을 추가로 박리하여 기도에 도달합니다. 30 gauge의 날카로운 바늘이 장착된 50 microliter Hamilton 유리 주사기를 사용하여, 물질 30 microliters의 총 부피를 주입합니다.바늘을 제거했을 때 주입된 액체의 유출이 최소화되어야 주입이 적절하게 수행된 것입니다. 머리를 자궁 내로 다시 밀어 넣으려면 코 부분에 부드럽게 압력을 가하십시오. 목 부분이 먼저 자궁으로 들어가고 그 다음 머리 부분이 들어갑니다.마지막으로 코 부분입니다. 퍼스스트링(purse string) 내부의 절개 부위에 생리식염수가 담긴 바늘을 삽입합니다. 퍼스스트링을 조여 자궁절개부를 폐쇄하고, 양수과소증을 방지하기 위해 양막강 내에 총 약 500 µL의 생리식염수를 주입합니다.자궁을 복강 내로 다시 넣은 후, 5-0 Vicryl 봉합사를 사용하여 두 개의 별도 층으로 연속 봉합합니다. 모체 복벽을 닫기 위해, 수술 후 통증 완화를 목적으로 절개 부위에 0.2%Xylocaine을 침윤시킵니다. 태아 양막 내 또는 IA 주사를 시행하기 전까지 마우스가 완전히 회복될 때까지 가열 패드 위에 둡니다.임신한 마우스를 마취시킨 후, 포비돈 요오드를 사용하여 복부를 소독하고 정중선 개복술을 시행합니다. 임신한 자궁을 노출시키기 위해 두 자궁각을 외부로 꺼내고 게실의 수를 측정합니다. 30 gauge 날카로운 바늘이 장착된 50 µL Hamilton 유리 주사기를 사용하여, 태아와 접촉하지 않도록 주의하며 태아의 입 근처 게실 내로 바늘을 삽입합니다. 그런 다음 양수 내로 30 µL의 용액을 주입합니다.모든 태아에 대한 주입이 완료되면 자궁을 복강 내 원래 위치로 되돌리고 5-0 Vicryl 봉합사를 사용하여 복벽과 피부를 봉합합니다. 태아 처치 36시간 후 모체(dam)를 안락사시킨 뒤, 제왕절개술을 통해 태아를 분만하고 심박수 유무, 분홍색 피부색 및 자발적 움직임을 확인하여 생존 여부를 평가합니다. 호흡과 산소 섭취를 자극하기 위해 새끼들을 산소 공급 장치 근처에 둡니다.그 후 새끼 쥐의 꼬리 기부에 표식을 남깁니다. 중국 잉크(Chinese ink)를 사용하여, 수술을 받은 태아 한 마리를 안락사시킨 후 폐를 절개하여 주입되지 않은 대조군 폐와 비교해 폐 내에 염료가 육안으로 보이는지 확인함으로써 주입 성공 여부를 평가할 수 있습니다. 다음으로, 생존 기준을 충족하는 나머지 새끼 쥐들을 덮어줍니다.생후 1일 된 새끼들과 함께 있는 대리모의 분변과 소변이 포함된 베딩 재료를 준비하고, 새끼들을 대리모의 무리에 함께 둡니다. 대리모의 무리에 총 10마리 이하의 새끼만 남겨둡니다. 그 후 케이지를 조용하고 방해받지 않는 환경에 12시간 동안 두고, 대리모 육아의 생존율을 평가하여 최적의 양을 결정합니다.100 nm 적색 형광 분자를 10, 20 및 30 µL 부피로 주입하는 조건을 경험적으로 선택하였습니다. 여기에는 핵 염색을 거친 고정된 폐 절편의 공초점 이미지가 나타나 있습니다. 태아 수술 당시 30 µL를 주입했을 때만 역류가 감지되어 과도한 유체가 주입되었음을 나타냈음에도 불구하고, 여기에 제시된 상대적 형광 측정 결과와 같이 30 µL 주입 시 폐 실질에서 가장 높은 형광 신호량이 확인되었습니다. 또한, 이 주입 방식은 IA 경로와 비교하여 태아 폐로의 형광 구체 전달 효율이 유의미하게 더 높았습니다.IT 및 IA 투여 동물 모두 위장관에서도 양성 반응이 나타났습니다. 처리된 태아의 다른 조직이나 음성 대조군 동물에서는 적색 형광이 관찰되지 않았습니다. 주입 후 바이러스 형질전환 효율을 평가하기 위해, 생후 1주차에 닭 beta actin 프로모터 제어하에 firefly luciferase를 코팅한 RAAV 벡터를 IT 및 IA로 투여하였습니다. IT 그룹의 총 광자 속(total photon flux)은 IA 새끼 쥐 및 음성 대조군보다 유의하게 높았습니다.정확한 IT 주입과 부정확한 주입을 구분하기 위해 자기공명영상(MRI)과 생체발광영상(BLI)을 병행하여, 여기에 표시된 바와 같이 표면 BLI 신호와 MRI의 심부 해부학적 구조 시각화를 결합한 오버레이 영상을 얻었습니다. 생후 1주일째에 BL 영상 분석 결과, 목과 흉부 지역에서 신호가 방출되는 것이 확인되었습니다.MRI와 BLI의 공동 등록 결과, 정확하게 주입한 경우에는 폐 영역에서 루시페라제 유전자 발현이 확인되었으나, 잘못 주입한 경우에는 목과 복부 영역에서 발현이 확인되었습니다. ex gal 염색을 통한 조직학적 분석으로 in vivo 공동 등록을 확인하였습니다. 전체 절차를 숙달하면 모체 동물의 절개부터 봉합까지 모든 정맥 내 주입 과정을 30분 이내에 완료할 수 있습니다.수술 시간을 단축하면 태아의 생존율이 높아지며, 출생 후 연구 가능한 동물의 수를 늘릴 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 비디오는 실험제를 원위 우측 및 좌측 폐에 선택적으로 투여하는 기관지 내 접근법을 설명합니다. 주요 프로토콜에서는 폐 섬유증에 대한 더 나은 모델을 얻기 위해 블레오마이신을 마우스에 기관지 내로 투여할 것입니다.

기관지 내 전달: 실험 제제를 쥐의 폐에 선택적으로 투여하는 기술

출처: Venuprasad, K., et al. 기도 염증을 연구하기 위한 마우스 모델에서 헤모필루스 인플루엔자의 기관내 투여. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 하기도 감염을 모델링하기 위해 마취된 마우스에 폐 병원성 박테리아 접종물을 기관내 전달하는 방법을 보여줍니다.

마우스 모델에서 기관내 박테리아 전달 수행

이 비디오는 임신한 마우스에서 마우스 태아의 경자궁 기관 폐색 절차를 보여줍니다. 이 모델은 폐색된 기관이 폐 발달에 미치는 영향을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

Imaging Transuterine Fetal Tracheal Occlusion in Murine Model: A Surgical Procedure for Ligation of the Fetal Trachea Within a Pregnant Mouse(쥐에서 경자궁 태아 기관 폐색 모델링: 임신한 마우스 내 태아 기관 폐합을 위한 수술 절차)

우리는 2.0 mm 검경과 이경을 사용하여 직접 후두경을 통해 마우스에서 기관 내 삽관을위한 간단하고 신뢰할 수있는, 그리고 상대적으로 저렴한 방법을 개발했습니다. 이 기술은 atraumatic이고 만성 실험에서 반복 측정에 사용될 수있다. 우리는 우수한 기관 절개 또는 이전에 비수술 적 방법을보고 찾을 수 있습니다.

마우스의 기관 내 삽관<em&gt;를 통해</em이경 사용&gt; 직접 후두경

인간 폐 질환의 상태를 본뜬 모델의 사용은 특정 질환의 병태 생리학 및 / 또는 병인을 연구 및 치료 적 개입을 개발에 중요하다. 여기에 직접 마우스의 폐에 외인성 물질을 제공 할 수있는 비 침습적 인 기관 내 삽관 방법이 제시된다.

비 침습적 기관 내 삽관 마우스 폐의 병리학 및 생리학을 연구하는

이 문서에서는 삽관을 통해 마우스 기관에 직접 블레오 마이신 관리를위한 신속하고 간단한 방법을 제공합니다. 이러한 방법의 주요 장점은 마스터 높은 재현성 쉽고, 특수 장비 나 긴 회복 시간을 요구하지 않는다는 점이다.

마우스의기도 신속 삽관 용 개선 된 방법

쥐에서 실험제의 INTracheal (IT) 투여는 종종 말단 폐에 비대칭 전달을 초래한다.  이 보고에서는, 우리는 살아있는 마우스에 있는 각 폐를 비 작동가능하게 캐뉼기 위하여 직접적인 기관내 (IB) 접근을 기술합니다.  이러한 접근법은 하나의 폐에 제제를 선택적으로 투여하기 위해 사용될 수 있거나 또는 두 폐에 대한 대칭에이전트 전달을 개선하기 위해 적응될 수 있다.

마우스 폐 내 선택적 에이전트 침착을 개선하기 위한 직접 기관내 투여

신생아 설치류의 기관에 약물을 직접 주입하는이 기술은 국소 투여 약물 또는 생물학이 신생아 폐 질환에 미치는 영향을 연구하는 데 중요합니다. 추가적으로, 이 방법은 또한 동물 모델에서 폐 손상을 유도하는데 사용될 수 있다.

폐 질환을 치료하기 위해 신생아 설치류에 약물을 기관 내 점적하는 최소 침습적 방법

선천성 횡격막 탈장 및 태아 기관 폐색의 다양한 동물 모델은 윤리적 문제, 비용, 수술 어려움, 크기, 생존율 및 유전 도구의 가용성에 관한 장점과 단점을 제시합니다. 이 모델은 기관 폐색과 폐 발달에 대한 증가된 발광 압력의 영향을 연구하는 새로운 도구를 제공합니다.

쥐의 트랜스테린 태아 기관 폐색 모델

여기에서 우리는 비침습적 구인두 기관내 삽관을 통한 기관내 지질다당류(LPS) 전달을 위한 프로토콜을 제안합니다. 이 방법은 동물에 대한 수술 절차의 외상을 최소화하고 LPS를 기관으로 정확하게 전달한 다음 폐로 전달합니다.

Noninvasive Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation in Mice

이 프로토콜은 마우스를 최적으로 배치하고 카메라 기반 검이경을 경구로 삽입하면 성문을 시각화하고, 조직 외상을 최소화하면서 신속한 삽관을 수행하며, 폐에 액체를 일관되게 전달할 수 있는 방법을 보여줍니다.

쥐의 폐에 액체를 전달하기 위한 개선된 방법론: 소비자 검이경을 사용한 삽관

배우세요 태아 마우스 기관 내 생물학적 제제 투여를 위한 새로운 외과 기법을. 자궁 절개를 통해 태아 머리를 외부로 노출시키고 수직 목 절개로 기관을 시각화하여 형광 비드나 바이러스 벡터를 효율적으로 투여하는 방법입니다.

태아 마우스 모델에서 Bioactive 에이전트의 Intratracheal 관리를위한 소설 외과 접근

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