2013년 1월 10일
프로브 기반 공 촛점 레이저 endomicroscopy은 휴대 해상도 방광 암과 같은 병적 인 상태의 동적, intravital 이미지를 제공 cystoscopy 동안 인간의 비뇨기 기관의 실시간 현미경 할 수 있습니다. Endomicroscopy 표준 하얀 빛 내시경의 진단 정확도를 증가, 외과 절제술을 향상시키기 위해 intraoperative 이미지지도를 제공 할 수 있습니다.
다음 실험의 목적은 방광 종양의 경요도 절제술을 받는 환자에서 프로브 기반 컨포칼 레이저 엔도 현미경을 사용하여 생체 내 현미경을 시연하는 것입니다. 이는 먼저 백색광 방광경을 사용하여 방광의 전체 요로상피를 시각화하고 비정상적이거나 의심되는 점막 병변을 기록함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로, 컨포칼 레이저 엔도 현미경으로 시각화하는 데 필요한 형광 대비를 제공하는 조영제를 동맹 내부에 주입하고, 세 번째 단계에서 각 관심 영역에 대한 생체 내 현미경 검사를 수행하고, 조직의 세포, 미시, 구조 및 혈관 특징을 기록합니다.
궁극적으로, 생체 내 현미경 검사 결과는 관심 영역의 생검에 대한 조직병리학적 분석과 비교할 수 있습니다. 이 절차를 시연하는 것은 비뇨기과 외과 의사인 Joseph Leal 박사가 수술실에서 요로를 위한 프로브 기반 컨포칼 레이저 내시경 검사의 응용 프로그램을 개발한 것입니다. 피험자가 쇄석술 자세를 취한 후, 표준 백색광 방광경을 사용하여 요도를 통해 단단한 방광경을 삽입하여 백색광 아래에서 방광 영역을 관찰하는 것으로 시작합니다.
절제 루프로 컨포칼 레이저 엔도 현미경 검사의 관심 영역을 표시합니다. 이 단계에서는 형광 방광경 및 협대역 이미징과 같은 다른 거시적 광학 이미징 방식을 사용하여 추가 의심 영역을 식별할 수 있으며, 이제 60ml 카테터를 사용하여 멸균 요로 카테터를 방광에 삽입합니다. 팁 주사기, 중력에 의해 희석된 조영제를 주입합니다.
다음으로, 요로 카테터를 고정하여 조영제를 집에 고정합니다. 5분 후 방광에서 약제를 배출합니다. 그런 다음 240-300ml의 생리식염수를 60ml 주사기에 부어 플루오레세인 정맥 주사를 위해 방광의 잔류 조영제를 씻어냅니다.
플루오레세인 1밀리리터를 주사기에 넣습니다. 주사기를 정맥 주사 액세스 포인트에 부착하고 0.5-1ml의 플루오레세인을 볼루스로 정맥 주사하여 일반 식염수로 라인을 씻어냅니다. 조영제를 주입한 후 포장에서 멸균 컨포칼 레이저 엔도 현미경 이미징 프로브를 제거하고 레이저 스캐닝 장치에 연결합니다.
그런 다음 제조업체의 지침에 따라 이미징 프로브를 예열하고 보정한 다음 0도 렌즈가 있는 단단한 방광경을 방광에 다시 삽입합니다. 이제 백색광 아래에서 방광경 바로 너머의 팁을 사용하여 방광경의 작업 채널을 따라 컨포칼 내시경 이미징 프로브를 전진시킵니다. 이미징 프로브가 관심 영역을 스캔할 때 이전에 표시된 관심 영역을 찾습니다.
나중에 분석할 수 있도록 이미지를 기록합니다. 그런 다음 작업자의 손을 사용하여 컨포칼 엔도 현미경 이미징을 조작합니다. 관심 영역의 광학 절편을 위해 관심 영역의 빠른 접촉을 위한 프로브.
내부 방광에 위치한 종양에 도달하기 위해 직접 접촉을 유지하면서 이미징 프로브에 대한 압력을 부드럽게 높이거나 낮춥니다. 표준 AL 엘보우 및 브리지를 사용하여 관심 영역과 직접 접촉할 수 있도록 이미징 프로브의 편향을 용이하게 합니다. 원하는 경우, 컨포칼 레이저 내시경(confocal laser endo)으로 스캔한 해당 관심 영역에서 콜드 컷 생검을 얻습니다.
이미징이 완료되면 작업 채널에서 컨포칼 엔도 현미경 이미징 프로브를 제거합니다. 이 절차를 시도하는 동안 이미징 전에 방광 내에서 과도한 플루오레세인을 세척하고 프로브와 점막 표면 사이의 90도 접촉을 유지하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이 첫 번째 이미지는 혈관 내 염색된 유두 종양이 있는 대표적인 백색광 방광경 검사에서 가져온 것입니다.
이미지 하단에서 볼 수 있는 2.6mm 이미징 프로브에 주목하십시오. 이 두 이미지는 각각 방광 내 및 정맥 주사 플루오레세인을 사용하여 두 개의 서로 다른 방광 종양에서 얻은 대표적인 컨포칼 레이저 엔도 현미경 이미지입니다. 이미징 프로브가 다양한 유형의 방광경 컨포칼 레이저 간에 상호 교환될 수 있다는 점을 감안할 때, 내시경 검사는 다른 새로운 이미징 양식과 결합할 수 있으며, 이는 여기에 표시된 형광 방광경 검사 및 여기에 표시된 협대역 이미징을 포함하여 두 기술 자체의 진단 정확도를 향상시킬 수 있습니다.
따라서 이 방법은 방광암에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 상부 요로 상피 암종(upper tract urothelial carcinoma)과 같은 다른 시스템에 적용될 수 있으며, 이는 생검으로 진단하기 어려울 수 있습니다.
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본 연구는 방광경 검사 중 인간 요로의 실시간 이미징을 위한 프로브 기반 공초점 레이저 내시경의 활용을 보여줍니다. 이 기술은 세포 해상도로 방광 종양을 동적으로 시각화할 수 있게 하여, 진단 정확도와 수술 안내를 잠재적으로 향상시킵니다.
프로브 기반 공초점 레이저 내시경(Probe-based confocal laser endomicroscopy)은 방광경 검사 중 요로 조직의 실시간 고해상도 영상을 제공하여, 방광암의 조기 발견을 지원하고 외과적 절제를 안내합니다. 이 기술은 조직병리학적 분석을 보완하는 세포 수준의 시각화를 제공함으로써 진단 신뢰도를 높이고, 병변 특성 규명 시의 불확실성을 줄여줍니다. 표준 내시경 워크플로우와의 통합은 요로상피암 관리의 위험 성층화를 개선하기 위한 중개 연구 경로를 제공합니다.
이 방법은 영상 기반의 표현형 판독 결과물을 제공함으로써, 초기 표적 가설 검증부터 리드 화합물 도출 및 전임상 검증에 이르는 발견 연속체에 통합됩니다.