쥐의 행동 Audiometry를위한 저비용 설정

이 절차의 전반적인 목표는 저비용 설정을 사용하여 설치류의 청력 역치와 주관적인 이명 지각을 식별하기 위해 청각 놀람 반응의 행동 사전 펄스 억제 데이터를 얻는 것입니다. 이것은 먼저 전체 행동 데이터 세트와 건강한 동물을 획득함으로써 달성됩니다. 다음으로, 청각 손상은 경미한 빈도의 특정 음향 외상으로 유발됩니다.

세 번째 단계는 청각 장애 동물에서도 동일한 행동 데이터를 얻는 것입니다. 그런 다음 데이터를 분석하여 청력 손실과 가능한 이명 지각을 측정합니다. 궁극적으로 결과는 청력 역치 변화뿐만 아니라 빈도별 이명도 보여줄 수 있습니다.

놀란 반응의 행동 측정을 통한 지각은 절차가 SA 박사후 연구원과 제 연구실의 박사 과정 학생인 Z ave에서 상담할 것임을 보여줍니다. 먼저 필요한 장비가 있는 PC를 조립해야 합니다. 이 체제의 총계비는 대략 3, 15, 000 및 20, 000 유로 사이에서 요할 수 있는 표준 장비와 비교하여 500 유로를 위해 조립될 수 있다.

여기에는 브레이크아웃 박스와 증폭기에 연결된 DA 컨버터, 적외선 웹캠, 통합 개발 환경을 실행하는 MATLAB 소프트웨어가 포함됩니다. 증폭기는 웹캠으로 모니터링되는 방음실의 스피커에 연결되며 절연 센서 보드, 피아조 센서 및 방음실 내부에 설치류를 고정하는 챔버가 장착되어 있습니다. 사운드 제어를 위한 마이크도 있습니다.

앰프와 스피커의 품질에 관계없이 시스템의 주파수 전달 기능을 결정하기 위해 측정 앰프로 시스템을 보정해야 합니다. 또한 시스템은 대상 동물의 가청 범위에 맞게 조정되어야 합니다. 집에 있는 우리에서 동물을 꺼내 머리부터 수용관에 넣습니다.

도어를 닫고 튜브를 폼 다리의 챔버에 넣으면 센서가 주변 조명을 끕니다. 챔버 문을 닫고 동물이 설정에 익숙해 질 때까지 15 분 동안 기다립니다. 프로그램을 시작하고 자극에 대한 파라미터를 정의합니다.

자극은 주파수가 다른 순수한 음색으로 구성됩니다. 놀람 자극에 선행하는 테스트 자극은 다양한 빈도와 강도로 제시됩니다. 테스트된 모든 빈도에 대해 고정된 하나의 테스트 자극 수준과 같은 비무작위 접근 방식을 위해 자극 세트 사이에 5분의 회복 시간을 허용합니다.

데이터를 분석하기 전에 데이터셋에서 유효하지 않은 시행(예: 놀람 자극 전에 동물이 움직인 시행)을 제거합니다. 단일 시험의 검증은 동물이 움직인 후 놀람 자극에 대한 반응이 훨씬 더 강해지는 경향이 있기 때문에 매우 중요합니다. 이러한 응답은 폐기해야 합니다.

이제, 놀람 자극 후 처음 50밀리초의 시간 창 내에서 놀람 반응의 진폭과 지연을 구하고, 응답 진폭은 응답의 첫 번째 최대값과 첫 번째 최소값 사이의 거리입니다. 잠복기는 자극 시작부터 반응 시작까지의 시간입니다. 청력 역치는 단일 시도의 사전 자극 강도를 위해 정렬된 하나의 주파수의 전체 응답 진폭 데이터 세트에 볼트맨 함수를 피팅하여 구합니다.

볼트맨 기능의 50% 포인트는 이 자극 주파수에 대한 청력 역치를 나타냅니다. 사전 자극이 없는 순수한 놀람 자극에 대한 반응은 나중에 계산하기 위한 참조로 사용할 수 있습니다. 설치류의 청력에 트라우마를 입히기 위해, 먼저 동물을 마취시켜 아트로핀 덩어리를 포함하여 마취 1kg당 3밀리리터를 피하주사합니다.

5분 정도 기다렸다가 반사 신경을 확인한다. 측정하는 동안 마취를 유지하려면 주사기 펌프에서 동일한 양의 마취 용액을 지속적으로 주입하십시오. 챔버에서 매 시간 동안 동물은 가열 패드로 따뜻하게 유지되어야 합니다.

75분 동안 동물에게 크고 순수한 음색을 가하여 음향 외상을 유발합니다. 동물이 안정될 때까지 5일을 기다린 후 새로운 청력도를 생성하면 신뢰할 수 있는 결과를 얻기 위해 이명 발달을 위해 최소 5일이 중요합니다. 첫 번째 주관적 이명 패러다임에서는 자극을 위해 다음 매개변수를 사용합니다.

놀람 소리 강도를 105데시벨, SPL로 설정하고 단일 oc에서 주파수를 1에서 16킬로헤르츠로 단계적으로 설정합니다. 50밀리초 간격이 있거나 없는 SPL인 SPL의 백색 잡음 배경을 제시하는 것으로 시작합니다. 비무작위 접근법을 사용하는 경우, 서로 다른 자극 세트 사이에 5분의 회복을 허용합니다.

다른 놀람 자극 주파수를 사용하면 인지된 이명 빈도를 대략적으로 추정할 수 있습니다. 두 번째 주관적 이명 패러다임에서는 다음 자극 매개변수, 105데시벨의 놀람 소리 강도, 더블 클릭 자극이 있는 SPL을 사용합니다. 대역 통과 필터링된 노이즈로 시작합니다.

50 데시벨의 배경, SPL. 다시 말하지만, 비무작위 접근 방식을 사용하는 경우 서로 다른 자극 세트 사이에 5분의 회복을 허용합니다. 데이터 세트에서 유효하지 않은 trials를 제거한 후 나머지 각 trial에 대해 다음 계산을 수행합니다.

첫째, 처음 50밀리초 동안입니다. 놀람 자극 후 응답 진폭과 응답 지연을 측정합니다. 둘째, 모든 데이터를 참조 데이터 세트로 정규화합니다.

참조 데이터 세트는 순음 놀람 자극에 대한 응답 진폭입니다.사전 자극이 없으면 테스트 주파수는 순수 톤 또는 대역 통과 필터링된 노이즈의 중심 주파수에 의해 결정됩니다. 각 참조의 평균 응답을 계산합니다. 그런 다음 각 응답 진폭을 참조를 통해 나누어 정규화합니다.

이제 정규화된 갭 없음 조건의 평균값을 사용하여 테스트된 각 조건의 PPI를 계산합니다. 이 시점에서, 테스트된 각 빈도에 대해 외상 후 PPI 변화를 백분율로 계산할 수 있습니다. 마찬가지로, 외상 전과 후의 PPI를 직접 비교할 수 있습니다.

설명된 패러다임을 사용하면 놀람 반응을 쉽게 생성하고 분석할 수 있습니다. 대부분의 임상시험은 유효합니다. 유효하지 않은 임상시험은 쉽게 인식할 수 있습니다.

이러한 사각형은 빨간색 사각형으로 표시되며 분석에서 생략됩니다. 2킬로헤르츠에서 음향 외상 전후에 얻은 전형적인 행동 역치 변화는 2킬로헤르츠에서 명확한 청력 손실을 보여줍니다. 청각 외상을 유발한 후, 외상보다 한 옥타브 아래, 한 옥타브 높은 자극에 대한 정규화된 반응 진폭을 외상 빈도 이하로 조사했습니다.

외상 빈도 이상에서는 반응 패턴의 변화가 발견되지 않았다. 사전 자극 갭의 효과가 사라졌으며, 이는 이 빈도에서 잘못된 인식을 나타냅니다. 이 비디오를 시청한 후에는 청력 역치에 대한 행동 데이터를 얻고 처리하는 방법과 저렴한 비용으로 설치류의 평가를 감지해야 하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.