마우스의 제어 자궁 경부 열상 상해

실험의 전반적인 목표는 쥐 척수의 재현 가능한 열상 병변을 생성하는 것입니다. 이것은 동물이 Louisville 부상 시스템 장치에 위치할 때 경추 층을 후방으로 노출시킴으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로, 특별히 설계된 안정화 장치가 마우스 척추의 목표 척추를 고정하는 데 사용됩니다.

다음으로, 층궁 사이의 표적 척수는 끝의 인대(ligamentum flavum)를 제거한 후 확인됩니다. 0.75mm 깊이의 경추 등쪽 hemi section은 진동 블레이드와 마이크로 드라이버를 사용하여 정밀하게 만들어집니다. 우리가 실험실에서 개발한 기술의 가장 큰 장점은 열상 척수 손상을 일으키는 매우 정확한 방법을 만들었다는 것입니다.

이것은 지금까지 사용된 기술, 즉 가위나 메스가 척수 손상의 불완전하고 부정확한 방법인 문제를 일으켰기 때문에 중요합니다. 이제 우리는 척수의 타박상, 척수가 열상 장치에서 멀어지는 것, 척수 손상에서 발생하는 과도한 출혈을 피할 수 있는 방법을 가지고 있습니다. 이 기술을 사용함으로써, 우리는 척수 손상의 깊이를 시각적으로 추정하는 방법을 피하는 매우 정확한 방법을 만들 수 있습니다.

이 기술을 사용함으로써 우리는 축삭 재생과 척수 손상에 대한 치료법을 찾는 데 본질적으로 중요할 수 있는 열상 모델에 사용된 실험적 척수 손상 방법에 혁명을 일으킬 수 있다고 생각합니다. 본 연구실의 신경외과 연구과학자인 신경외과 전문의 장은(eing Jang) 박사가 수술 기구, 겸자 2-3쌍, 마이크로 가위 3쌍, 30게이지 바늘, 마이크로 URS 봉합사, 바늘 홀더 스킨 클립, 클립 어플리케이터를 살균하여 이 절차를 시작합니다. 그런 다음 척추 안정제를 소독한 후 케타민, 자일라진 또는 트라이 에탄올 복강 내 칵테일로 마우스를 마취합니다.

다음으로 마우스의 목에서 털을 면도합니다. 포비돈 요오드 용액과 70% 알코올로 피부를 청소하십시오. 그런 다음 예열 패드가 있는 수술대에 마우스를 옮깁니다.

각막 건조를 방지하기 위해 눈에 안과 연고를 바르십시오. 마취 유도 후 경추 하부의 피하 뚱뚱한 애완 동물까지 후방 경추 정중선 피부 절개를 합니다. 현미경으로 C 2에서 승모근 사이의 정중선 피부 절개를 만들고 준결승 진출자 capita 근육을 측면으로 후퇴시킵니다.

다음으로, 신뢰할 수 있는 랜드마크 역할을 하는 T 2개의 가시 돌기까지 정중선 근육 절개를 조금씩 확장합니다. T 두 가시 돌기에서 근육을 분리합니다. 그런 다음 T 두 가시 돌기의 연골 부분을 제거합니다.

그 후, 한 쌍의 마이크로 가위를 사용하여 C 4에서 T 2까지 양측으로 층궁에서 척추 주위 근육을 절개합니다. 그것은 가시 돌기에 인접하여 시작하여 두 층류 아치를 넘어 패싯 조인트까지 확장됩니다. 측면 패싯이 노출된 후 마우스 척추 안정기의 U자형 채널에 마우스를 놓습니다.

그런 다음 마우스 안정기의 스테인리스 스틸 암을 노출된 면 아래에 양측으로 놓습니다. 암이 제자리에 고정되면 강철 암의 나비 나사를 조여 현미경 아래에서 척추를 고정합니다. C 5와 C 6 층궁 사이의 인대를 제거하여 층간 공간 사이의 기저에 있는 경막을 노출시킵니다.

30게이지 바늘을 사용하여 작은 듀이이토미를 만들고 듀이이토미를 확장하기 위한 마이크로 가위를 만듭니다. 이제 척수는 조절된 열상 병변을 겪을 준비가 되었습니다. 이 절차에서 척추 안정 장치와 마우스를 Louisville 부상 시스템 장치 스테이지에 놓고 블레이드가 부착되고 위치가 마이크로 드라이버에 의해 제어됩니다.

발진기에 부착된 2.3mm 평평한 블레이드와 함께 C 5-6개의 얇은 판 사이의 등쪽 HEMI 단면 병변을 수행하기 위해 세 가지 동작 범위를 수행할 수 있습니다. 설정 amp진동 블레이드의 amplitude를 0.5mm로 설정하면 진폭이 낮을수록 완전한 코드 열상의 용이성이 줄어들 수 있습니다. 그런 다음 현미경 아래의 블레이드 바이브레이터 스위치를 켜고 마우스의 척수를 진동 블레이드 바로 아래에 놓습니다.

다음으로, 마이크로 운전자 제어 기록이 있는 진동 블레이드 쪽으로 스테이지를 올립니다. 제로 위치: 블레이드가 척수의 등쪽 정맥에 거의 닿지 않을 때 척수 열상의 깊이는 제로 위치를 기준으로 측정됩니다. 그런 다음 마이크로 드라이버 컨트롤로 스테이지 위치를 올리십시오.

마이크로 드라이버 노브를 360도 돌리면 스테이지가 0.25mm 올라갑니다. 따라서 0.75mm 등쪽 편미 단면 병변은 블레이드가 척수를 열상시키기 시작할 때 마이크로 드라이버 손잡이를 세 번 돌려 식염수 세척으로 수술 부위를 윤활합니다. 미리 결정된 깊이에 도달하면 바이브 스위치를 끄고 s를 내립니다.tage 마우스와 cl을 지지합니다.amp 절단 날에서.

수술 부위에 식염수를 세척하여 혈액을 제거합니다. 그런 다음 지혈이 일반적으로 1분 이내에 발생하므로 면 Q-팁으로 해당 부위를 말리십시오. 마지막에 척추 안정기에서 마우스를 제거하고 스테인리스 스틸로 피부를 닫습니다.

미셸 클립. 경추는 팔을 측면 패싯 아래에 놓고 이 그림과 같이 나비 나사를 잠궈 고정하며, 뼈를 제거하지 않고 C 5-6 C, 6-7 및 C 7 대 T 1의 라미네이트 사이에 경막이 노출됩니다. 다음은 0.5, 0.8, 1.1 및 1.4mm 깊이에서 4개의 등쪽 척수 열상의 시상면을 보여줍니다.

그들은이 기술을 사용하여 높은 정밀도를 나타냅니다. 척수 손상의 생성에 내재된 문제 중 하나는 경추의 안정화 부족입니다. 우리 그룹에서 개발한 척추 안정기를 사용하여 이제 완전히 움직이지 않는 경추를 만들 수 있습니다.

이를 통해 척수 타박상, 척수 주사를 사용하여 척수 손상을 개선할 수 있을 뿐만 아니라 척수 연구의 모든 방법을 위해 척수에 세포 이식