Name: 2 혈관 폐색 / 저혈압 : 세계적인 두뇌 국소 빈혈의 쥐 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: 학습하세요 쥐에서 양측 경동맥 폐쇄와 전신 저혈압을 이용한 일과성 전뇌 허혈 모델링 방법을. 이 기술은 해마의 신경 손상을 정량화하고 허혈성 뇌손상 메커니즘 연구에 활용됩니다.

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<ol><li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li>
<li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li>
<li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax%2FBcl-XL+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+%28PERK%29+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li>
<li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li>
<li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li>
<li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia%2C+resuscitation%2C+and+reperfusion%3A+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li>
<li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion%3A+a+proposed+biochemical+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li>
<li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978(2011).</li>
<li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li>
<li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest%3A+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li>
<li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li>
<li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Death+by+design%3A+apoptosis%2C+necrosis+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li>
<li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li>
<li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39(1999).</li>
<li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li>
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<li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage%3A+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li>
<li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li>
<li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li>
</ol>

저자는 이익에 대한 재무 충돌이 없습니다.

여기에 설명 된 모델은 인간에서 발견 된 것과 유사한 부상을 제공, 심장 마비와 심폐 소생술의 결과로 발생할 수있는 뇌에 허혈성 모욕을 생산하고 있습니다. 세계적인 뇌 허혈을 생산하는이 방법은 여러 프로토콜 중 하나입니다. 우리는 그것의 비교적 낮은 사망률, 빠른 복구 및 재현성 결과를 제일이 프로토콜을 사용합니다. 심장 마비 / 소생 모델 그러나 기술적으로, 틀림없이 지속적으로 재현하기 가장 어려운 가장 임상 적으로 관련성이 모델입니다. 세계적인 뇌 허혈의 4VO 모델은 네 개의 기여 혈관 허혈 가려하고 있다는 사실 가치있는 또 다른 일반적으로 사용되는 프로토콜입니다. 이 모델은 여러 수술 및 신경 재관류의 가능성을 포함 단점을 가지고 있습니다. 4VO 모델은 하나의 절차를 수행하는 동안 네 개의 혈관의 일시적 폐쇄가 허혈을 생성 할 수 있도록 적응되었다, 그러나 수술 기술 유지LY 30을 요구. 2VOH에 변화는 결과 31,32의 범...

심장 마비와 뇌졸중의 결과로 뇌 손상 죽음 및 장기 장애의 주요 원인이다. 심장 마비의 피해자를위한 심폐 소생술은 환자의 60 % 이후에 병원에서 사망 적어도 광범위한 뇌 손상의 결과로 미국의 7,8에서 연간 약 70,000 환자의 자발 순환 회복에 성공하면서 만 3-10% 소생 환자의 9,10은 그들의 이전 생활을 다시 시작할 수 있습니다. 분명히, 글로벌 뇌 허혈 다음과 신경 외상을 최소화하기 위해 치료 개입을 설계 뇌 손상으로 이어질 메커니즘을 이해하는 것은 매우 중요합니다. 뇌 허혈 여러 방법을 이용하여 모델링 할 수 있습니다. 가장 일반적으로, 뇌 허혈 따라서 초점 허혈성 뇌졸중 11,12 생산, 두뇌, 중대 뇌동맥의 주요 혈관을 폐색하여 설치류에서 생산된다. 임상 적으로 중요한 반면,국소 뇌 허혈은 심장 마비 / 소생술 의해 뇌 손상을 연구하는 정확한 방법이 아닙니다. 이 임상 패러다임을 모델링하기 위해 전체 뇌 허혈성 혈액 흐름의 재 도입에 선행되어야한다. 밀접하게이 임상 프레 젠 테이션을 모방하기 위해 수사관들이 실험적으로 심폐 소생술 및 제세동 13,14와 심폐 소생술 다음 심장 마비를 유도. 이 모델은 임상 적으로 관련이 있지만 예측할 수없는 심폐 소생술 시간은 변동성을 증가시킬 수하고 해석하는 데이터 분석을 어렵게 만들 수 있습니다. 또한이 모델은 더 이상 가설을 테스트하기 위해 필요한 동물의 수를 증가 높은 사망률과 연관됩니다. 더 재현성, 일관성 있고, 존속 모욕의 허혈 및 / 또는 재관류에 대한 뇌 반응을 조사하는 것이 바람직 할 수있다. 체계적 일부 혈액의 흐름을 유지하면서 허혈은 뇌에 유도 할 수 있습니다. investigatio을 허용하면서이 사망률을 감소N 뇌 2 조직 손상의 메커니즘. 세계적인 뇌 허혈을 생산하기 위해, 중단 또는 크게 뇌, 내부 경동맥 동맥과 척추 동맥을 공급하는 모든 네 개의 혈관의 흐름을 제한 할 필요가있다. 이러한 혈관 문합 루프를 형성 윌리스의 원이라는 혈관 구조를 통해 혈액의 흐름과 뇌를 제공합니다. 이 혈관 구조는 뇌가 근위부 혈관 폐색의 경우에 관류를 유지 할 수 있습니다. 따라서 모든 기여 혈관을 통해 뇌 혈류의 완전한 허혈을 유도하는 것은 발생해야합니다. 경동맥 폐색이 원하는 기간 동안 동맥류 클립의 최소 침습 복부 목 컷 아래로 응용 프로그램을 사용하여 수행 할 수 있습니다. 그들은 척추의 가로 foramina에 incased대로 척추 동맥을 통해 혈액의 흐름 중단이 어려울 수 있습니다. 연구자들은 경동맥 이전에 척추 동맥에게 24-48 시간을 electrocauterizing하여이를 해결했다폐색 및 뇌 허혈 (4VO 모델) 15. 이 방법과는 대조적으로, 스미스 등은. 줄임으로써 글로벌 뇌 허혈을 유도하는 혈액의 흐름이 2 손실 또는 크게 감소 점에 척추 동맥을 통해 혈류를 줄이기 위해 40 mmHg로에 체계적 동맥 혈압 (MAP)을 의미하는 방법을 개발 . 경동맥 폐색과 함께 사용할 경우,이 메소드는 밀접하게 심장 마비 생존자의를 모방 뇌 손상의 패턴의 결과로, 전뇌에 걸쳐 국소 빈혈을 생산하고 있습니다. 이 방법의 추가 정제에, 우리가 여기에 존재하는 모델은 30 mmHg로에 꽉 MAP 규제 ± 1mHg 허혈의 전체 8 분 동안 필요합니다. 우리는 스미스 등에 의해 설계된 독자적인 기술의 낮은 사망률을 유지하면서이 변경이 모델에 의해 유도 된 뇌 손상의 재현성을 향상하였습니다. 세포의 죽음과 조직 손상의 전체 범위의 정확한 표현형에 의한여기에 제시된 모델은 허혈성 기간 16 직접 따라 달라집니다. CA1 뉴런은 재관류 단계 15,17 동안 치료 적 개입에 대한 시간적 창 있다는 것을 제안, 세포 죽음을 지연 허혈 8 분을 나타내는 다음. 재관류의 발병, 신경 신속하게 기능을 회복하고 직접적인 세포의 죽음은 18 감지되지 않습니다. 그러나이 모욕 원인이 세포 죽음 계곡의 유도 (세포 사멸)는 재관류 3,19 ~ 6 시간 사이의 시토크롬 C를 포함한 미토콘드리아에서 apoptogenic 단백질의 방출에 절정에 달하다.에게 재관류 시간 6 사이 24 CA1 해마의 신경 세포 죽음에 최선을 다하고 있고, 사멸 세포 죽음 프로그램은 19 실행됩니다. 그것은 허혈성 손상에 대한 책임이 세포 사멸 표현형은 매우 논쟁 주목해야한다. 다른 사람이 apopt을보고하면서 초기 연구는 괴사는 기본 세포 사멸 표현형 20,21입니다 제안주요 메커니즘 22,23으로 OSIS. 전체에서 현재의 증거는 셀 고전 고사에서 괴사에 이르기까지 셀 죽음 표현형의 스펙트럼 죽을 것이 좋습니다. 세포 죽음의 특정 모드는 각 표현형의 기여의 정도가 다른 요인 24,25 사이, 모욕의 정도에 따라서, 여러 요인에 따라 달라집니다. 재관류 24 시간으로 죽어가는 세포 pyknotic 핵, 집계 세포 내용의 명확한 증거 응축 세포질 및 기능 미토콘드리아 형태의 손실을 가지고있다. 죽은 세포는 더욱 세분화 식세포 및 / 또는 미세 아교 세포와 같은 면역 세포에 의해 침몰하고, CA1 해마 영역에서 삭제됩니다. 재관류 4-7 일까지, 죽은 세포를 제거하고, 모든 남아 염증 세포이며, glial 세포에게 17,26을 활성화됩니다. 따라서 재관류 7 일 CA1 해마 신경 세포의 죽음에 간단한, 비 특​​정 세포 얼룩을 사용하여 정량화 할 수있는 최적의 시간을 나타냅니다크레 실 바이올렛 hemotoxylin - 에오신을 CLUDING 및 형태 학적 포함 기준에 따라 계산. 이 말 재관류 간격으로 나머지 세포는 따라서 뇌 손상의 인덱스를 제공, 생존 세포로 간주 될 수 있습니다. 이 모델은 치료 개입을 테스트하기 위해 활용 될 경우, 실험 설계는 계단 기준 (행정 치료 학술 산업 원탁 회의) 27를 따라하는 것이 좋습니다. 설계 및 연구를 수행 할 때 다음 지침을 준수해야한다 그러나 여기에서 설명하지 않습니다.

<table><tr><tbody><td colspan="4">재료 이름</td></tr><tr><td>5-0 VICRYL 봉합사, 역방향 </td><td>절단 Ethicon</td><td>J391H</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel, No.10</td><td>Swann-Morton</td><td>6601</td><td></td></tr><tr><td>Gauze Sponges</td><td>Fisher</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>18G x 1 &frac12; in needle</td><td>BD</td><td>305201</td><td></td></tr><tr><td>23G x 1 in needle</td><td>BD</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 3/8 in 바늘</td><td>BD</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>18 G x 1 &#188; 카테터</td><td>EXEL</td><td>26735</td><td></td></tr><tr><td>1 ml 주사기</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>10 ml 주사기</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>60 ml 주사기</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>Surgilube</td><td>Henry Schein</td><td>1152666.9</td><td></td></tr><tr><td>% 식염수, 플라스틱 IV bag</td><td>Henry Schein</td><td>1537468</td><td></td></tr><tr><td>봉합사 3-0 실크</td><td>Henry Schein</td><td>1007842</td><td></td></tr><tr><td>Puralube 안과 연고</td><td>Henry Schein</td><td>3390017</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Henry Schein</td><td>6903564</td><td></td></tr><tr><td>멸균 수건 드레이프</td><td>Moore Medical</td><td>14170</td><td></td></tr><tr><td>폴리에틸렌 튜브, 50</td><td>인트라</td>메<td>427411</td><td></td></tr><tr><td>스톱콕, 3 웨이</td><td>Smiths medical</td><td>MX9311L</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Drug Name</td></tr><tr><td>AERRANE (isoflurane)</td><td>Henry Schein</td><td>2091966</td><td></td></tr><tr><td>Mapap Liquid (Tylenol)</td><td>Major Pharmaceuticals</td><td>1556</td><td></td></tr><tr><td>Kedavet (ketamine)</td><td>Ketathesia Butney</td><td>NDC 50989-996-06</td><td></td></tr><tr><td>Butorphic (butorphannol)</td><td>Lloyd Labs</td><td>4881</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>504011</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Chemical Name </td></tr><tr><td>Paraformaldehyde prills</td><td>Elecron Microscopy Sci.</td><td>19202</td><td></td></tr><tr><td>2-메틸부탄</td><td>시그마</td><td>270342</td><td></td></tr><tr><td>크레실 바이올렛 아세테이</td>트 <td>시그마</td><td>C5042</td><td></td></tr><tr><td>자당</td><td>시그마</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Software</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

2 혈관 폐색 / 저혈압 : 세계적인 두뇌 국소 빈혈의 쥐 모델

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

소생 뒤에 심장 마비는 종종 허혈 뇌의 후속 재관류에 의한 극적인 뇌 손상 발생합니다. 글로벌 두뇌 국소 빈혈 빈혈 1에 매우 민감한 것으로 나타 특정 뇌 영역에 손상을 생산하고 있습니다. 해마의 뉴런은 특히 다른 세포 집단과 비교하여 허혈성 모욕 높은 감도를 가지고 해마의 CA1 지역은 허혈 / 재관류 2에 특히 취약합니다. 치료 개입, 또는 뇌 손상에 관련된 메커니즘 연구의 설계는 임상 상태와 유사한 재현 방식으로 손상을 생산하는 모델을 필요로한다. 저혈압과의 양자 경동맥 혈관 폐색 (2VOH) 심장 마비와 심폐 소생술 중에 발생할 수있는 대뇌 이벤트를 에뮬레이트 가역 전뇌 허혈을 생산하는 모델입니다. 우리는 스미스 등의 수정 모델에 대해 설명합니다. (1984) 2같은 첫 번째 샌더슨 등. (2008) 3, 선택적으로 취약한 뇌 영역 3-6 재현성 부상을 생산하고있는 현재의 형태로 제시. 이 모델의 신뢰성은 적용 성 저혈압, 허혈 기간, 주변 온도 제어, 특정 마취 요법, 그리고 근면 수술 후 치료 기간 동안 전신 혈압의 정밀 제어에 의해 결정됩니다. 덜 취약 뇌 영역이 절약되는 동안 8 분 허혈성 모욕, 재관류 6 ~ 24 시간의 과정을 통해 진행 CA1 해마 신경 세포의 죽음을 생산하고 있습니다. 이 진보적 인 세포의 죽음은 쉽게 CA1 뉴런의 가까운 완전한 손실이 시점에서 분명로서, 재관류 7-14일 후 계량입니다. 이 뇌 손상 모델 이외에, 우리는 간단하면서도 철저한 방법론을 사용 CA1 손상을 정량화하기위한 방법을 제시한다. 중요한 것은, 정량화는 간단한 카메라 장착 현미경을 사용하여 수행 할 수 있습니다다 무료 ImageJ에 (NIH) 소프트웨어 플러그인, 엄청난 비용 stereology 소프트웨어 프로그램의 필요성 및 손상 평가를위한 전동 현미경 스테이지를 미연에 방지.

세계적인 뇌 허혈 / 재관류 2VOH 모델은 해마의 CA1 영역에서 신경 세포의 죽음의 원인이됩니다. 그림 2이 14 일 재관류 후 처리 세계적인 뇌 허혈 8 분에 의해 생성 부상을 나타냅니다. 그림 2A와 2B는 가짜의 해마를 비교하고 크레 실 바이올렛으로 염색 후 허혈성 뇌. 그림 2A는 그대로 CA1 등 정상적인 형태를 전시 가짜로 작동하는 쥐의 해마를 보여줍니다. 그림 2B는 허혈 / 재관류에 해마 주제를 보여줍니다 곳 이가있는 이랑, CA2와 CA3 최소한의 형태에 영향을. CA1 해마 선택적으로 취약한 신경 허혈 / 재관류 손상을 생존하지 만 흩어져 신경이 남아있다. 그러나 침투 대식 세포 및 / 또는 미세 아교 세포 (이바-1), 종양 세포와 반응성 성상 세포 (GFAP-양성 세포)의 극적인 증가는 CA1 H에 분명ippocampal 필드입​​니다. 노이 앤, 대식 세포 / 미세 아교 세포 이바...

전신 저혈압과 함께 양측 경동맥 폐색 재현 심각도 해마에 손​​상 쥐 세계적인 뇌 허혈을 생산하고 있습니다. 동물의 주제는 뇌 손상의 예측 패턴 장애인, 그들은 적당하게 복구하고, 사망률은 상대적으로 낮다.

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

전체적인 목표는 뇌에 일시적인 허혈성 이벤트를 유발하여 심정지 및 소생술로 인해 발생하는 뇌 손상을 모사하는 것입니다. 먼저 대퇴동맥에서 혈액을 추출하여 전신 저혈압을 유도합니다. 그다음, 경동맥을 폐쇄하여 뇌로 가는 혈류를 제한합니다.전신 혈압의 정밀한 조절을 통해 뇌를 8분 동안 허혈 상태로 유지합니다. 마지막으로, 클립을 제거하고 빼두었던 혈액을 다시 주입합니다. 최종적으로, 허혈 발생 후 서로 다른 시간대에서 신경세포 손상 정도를 정량화할 수 있습니다.심정지 및 소생술과 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은 전신 허혈과 관련된 사망률 및 동반 질환 없이 뇌 허혈 이벤트를 시뮬레이션할 수 있다는 점입니다. 이 수술의 시각적 시연을 통해 재현성을 보장하기 위한 특정 절차적 세부 사항의 중요성을 강조할 수 있습니다. 먼저 혈관 카테터를 제작하십시오. 이를 위해 8인치 길이의 polyethylene 50 튜브를 자르고 한쪽 끝에 끝이 뭉툭한 23 gauge 바늘을 삽입합니다.이 바늘을 3방향 스톱콕(three-way stop cock)의 한쪽 포트에 고정하고, 반대쪽 포트에 또 다른 3방향 스톱콕을 장착합니다. 헤파린 식염수를 전체적으로 흘려주어 스톱콕과 카테터를 헤파린 처리합니다.다음으로, 카테터와 수직 방향의 말단 쪽에 10 milliliter 생리식염수 시린지를 스톱콕에 연결합니다. 카테터 말단 쪽의 스톱콕을 압력 트랜스듀서 튜브에 연결합니다. 시스템에 생리식염수를 채우고 기포를 모두 제거합니다.마취제 지속 투여를 위해 마취된 쥐를 기관 내 삽관합니다. 케타민을 복강 내(IP) 주사한 후, 이소플루란 농도를 1.5%로 낮추고 시술 전 과정 동안 마취 수준을 모니터링합니다. 마취가 완료되면 목 부위와 허벅지가 복부와 만나는 오른쪽 골반 부위를 제모하고, 쥐를 가열 패드 위에 배를 위로 향하게 하여 눕힙니다.안구에 윤활제를 도포하고 직장 체온계를 삽입한 후, 절개 부위를 Betadine과 70% ethanol로 반복해서 문질러 소독합니다. 쥐 위에 수술 포를 덮고 절개 부위가 드러나도록 구멍을 뚫습니다. 마취 깊이가 적절한지 확인한 후, 메스로 목을 따라 정중선 절개를 가하고 조직을 둔성 박리하여 흉골설골근과 흉골유돌근에 도달합니다.총경동맥이 보일 때까지 둔성 박리를 통해 근육을 조심스럽게 분리합니다. 실크 봉합사를 아래로 통과시켜 양측 경동맥을 격리합니다. 뒷다리 근육이 복부와 만나는 오목한

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

쥐에서 허혈성 뇌 손상 외과 유도는 뇌졸중 연구 널리 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 중간 대뇌 동맥의 폐색에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈의 유도를 보여줍니다. histological 얼룩 및 자기 공명 영상에 의해 발생하는 경색의 시각화도 표시됩니다.

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

이 비디오는 허혈성 뇌졸중을 모델링하기 위해 노화된 쥐에서 총경동맥 또는 CCA 결찰술을 사용하여 영구 원위 중대뇌동맥 폐색(MCAO)을 수행하는 절차를 보여줍니다. 이는 뇌로 가는 혈류를 차단하여 신경 세포의 사멸로 이어지며 뇌졸중 메커니즘과 잠재적 치료법을 연구하기 위한 모델을 생성합니다.

쥐 모델에서 중추 및 일반 경동맥 폐색을 통한 허혈 유도

출처: Larpthaveesarp, A., et. al입니다. P10 쥐에서 신생아 뇌졸중의 일시적인 중간 대뇌 동맥 폐색 모델. J. Vis. 특급. (2017)이 비디오는 새끼 쥐에서 Middle Cerebral Artery Occlusion 모델을 설정하는 방법을 보여줍니다. 내부 경동맥(ICA)이 노출되고 결찰자가 고정되어 혈액 범람을 제한합니다. 폐색은 ICA를 통해 삽입되어 중대뇌동맥에 도달합니다. 그런 다음 추가 분석 전에 강아지가 회복할 수 있습니다.

국소 뇌허혈을 유발하기 위해 새끼 쥐에서 중대뇌동맥 폐색을 생성하는 것

우리는 설치류의 주요 뇌 혈관의 영구 폐색에 대한 높은 재현성 방법을 설명합니다. 이 기술은 거의 주변의 손상을 최소화 혈액 손실, 장기 생존의 높은 속도, 인간의 임상 인구에 상응하는 일관된 경색 볼륨을 수행 할 수 있습니다.

영구적 인 뇌 혈관 폐색<em&gt;를 통해</em&gt; 더블 합자 및 절개

혈전색전성 뇌졸중 모델은 재개통 치료를 최적화하기 위한 중요한 도구입니다. 본 연구에서는 혈전증 및 경색을 유발하는 일과성 대뇌 저산소성 허혈성(tHI) 모욕에 기초한 쥐 혈전성 뇌졸중 모델을 보고하며, 뇌졸중 환자와 유사한 치료 창에서 조직 플라스미노겐 활성제(tPA) 매개 섬유소용해에 호의적으로 반응합니다.

과도 대뇌 저산소증 - 허혈을 기반으로 혈전 성 뇌졸중 모델

이 절차의 전반적인 목표는 비보에 허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 평가 대 한 높은 재현 기법을 제공 하는입니다.

허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 비보에 평가

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 마우스 모델 선의 이상 조사를 설립 하다. 우리는 distally 오른쪽 중간 대뇌 동맥과 바로 일반적인 경 동맥 선 하 고 국 소 빈 혈의 10 또는 40 분 후 혈액 흐름을 복원.

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

현재 프로토콜은 손상을 입히지 않고 뇌 혈관의 해부학적 구조를 보존하는 중대뇌 동맥 폐색/재관류의 쥐 모델을 설명합니다.

대뇌 혈관의 해부학적 구조를 손상시키지 않고 중간 대뇌 동맥 폐색/재관류의 쥐 모델

이 프로토콜은 수정된 4개 혈관 폐색 방법을 사용하여 뇌 허혈성 혼수 모델을 유도하는 과정을 설명합니다.

수정된 4혈관 폐색에 의해 유도된 대뇌 허혈성 혼수 모델

쥐 생체 내 모델은 허혈성 뇌졸중의 병리학적 메커니즘과 치료 표적을 조사하는 데 필수적인 도구입니다. 이 연구는 쥐의 중대뇌동맥 폐색(MCAO) 후 경색된 뇌 절편에서 면역형광 염색을 수행하는 방법을 설명합니다.

허혈성 뇌졸중의 쥐 모델에서 면역형광에 의한 세포 사멸 신호 평가

학습하세요 쥐에서 양측 경동맥 폐쇄와 전신 저혈압을 이용한 일과성 전뇌 허혈 모델링 방법을. 이 기술은 해마의 신경 손상을 정량화하고 허혈성 뇌손상 메커니즘 연구에 활용됩니다.

2 혈관 폐색 / 저혈압 : 세계적인 두뇌 국소 빈혈의 쥐 모델

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