Name: Extracellularly의 근육 모터 풀에 모터 뉴런을 확인 Aplysia californica (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 37 s
Description: 학습하세요 Aplysia californica에서 세포외 전극을 이용하여 운동 뉴런 풀의 개별 운동 뉴런을 식별하고 모니터링하는 방법을. 이 기술은 먹이 섭취와 같은 운동 패턴 중 신경 활동을 연구하는 데 유용합니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 연구는 NIH 보조금 NS047073 및 NSF 보조금 DMS1010434에 의해 지원되었다.

<ol><li>McCrohan, C. R., Benjamin, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+relationships+of+the+cerebral+giant+cells+with+motoneurones+in+the+feeding+system+of+Lymnaea+stagnalis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Synaptic relationships of the cerebral giant cells with motoneurones in the feeding system of Lymnaea stagnalis.</a> J. Exp. Biol. 85, 169-186 (1980).</li>
<li>Benjamin, P. R., Rose, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+generation+of+bursting+in+the+feeding+system+of+the+snail%2C+Lymnaea+stagnalis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Central generation of bursting in the feeding system of the snail, Lymnaea stagnalis.</a> J. Exp. Biol. 80, 93-118 (1979).</li>
<li>Peters, M., Altrup, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+organization+in+pharynx+of+Helix+pomatia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Motor organization in pharynx of Helix pomatia.</a> J. Neurophysiol. 52 (3), 389-409 (1984).</li>
<li>Church, P. J., Cohen, K. P., Scott, M. L., Kirk, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptidergic+motoneurons+in+the+buccal+ganglia+of+Aplysia+californica%3A+immunocytochemical%2C+morphological%2C+and+physiological+characterizations%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Peptidergic motoneurons in the buccal ganglia of Aplysia californica: immunocytochemical, morphological, and physiological characterizations.</a> J. Comp. Physiol. A. 168 (3), 323-336 (1991).</li>
<li>Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+extracellular+stimulation+of+individual+neurons+in+ganglia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neural.+Eng%22%5BJournal%5D)">Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia.</a> J. Neural. Eng. 5 (3), 287-309 (2008).</li>
<li>Church, P. J., Lloyd, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+diverse+neuropeptide+cotransmitters+by+identified+motor+neurons+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Expression of diverse neuropeptide cotransmitters by identified motor neurons in Aplysia.</a> J. Neurosci. 11 (3), 618-625 (1991).</li>
<li>Church, P. J., Lloyd, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+multiple+identified+motor+neurons+recorded+intracellularly+during+evoked+feedinglike+motor+programs+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophys%22%5BJournal%5D)">Activity of multiple identified motor neurons recorded intracellularly during evoked feedinglike motor programs in Aplysia.</a> J. Neurophys. 72 (4), 1794-1809 (1994).</li>
<li>McManus, J. M., Lu, H., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+In+Vitro+Preparation+for+Eliciting+and+Recording+Feeding+Motor+Programs+with+Physiological+Movements+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">An In Vitro Preparation for Eliciting and Recording Feeding Motor Programs with Physiological Movements in Aplysia californica.</a> J. Vis. Exp. (70), e4320(2012).</li>
<li>Cullins, M. J., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrode+fabrication+and+implantation+in+Aplysia+californica+for+multi-channel+neural+and+muscular+recordings+in+intact%2C+freely+behaving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Electrode fabrication and implantation in Aplysia californica for multi-channel neural and muscular recordings in intact, freely behaving animals.</a> J Vis. Exp. (40), e1791(2010).</li>
<li>Zhurov, Y., Weiss, K. R., Brezina, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tight+or+loose+coupling+between+components+of+the+feeding+neuromusculature+of+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Tight or loose coupling between components of the feeding neuromusculature of Aplysia.</a> J. Neurophysiol. 94 (1), 531-549 (2005).</li>
<li>Hurwitz, I., Goldstein, R. S., Susswein, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compartmentalization+of+pattern-initiation+and+motor+functions+in+the+B31+and+B32+neurons+of+the+buccal+ganglia+of+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Compartmentalization of pattern-initiation and motor functions in the B31 and B32 neurons of the buccal ganglia of Aplysia californica.</a> J. Neurophysiol. 71 (4), 1514-1527 (1994).</li>
<li>Morton, D. W., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+timing+of+activity+in+motor+neurons+that+produce+radula+movements+distinguishes+ingestion+from+rejection+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">The timing of activity in motor neurons that produce radula movements distinguishes ingestion from rejection in Aplysia.</a> J. Comp. Physiol. A. 173 (5), 519-536 (1993).</li>
<li>Iles, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+synaptic+activation+of+the+fast+coxal+depressor+motoneurone+of+the+cockroach.+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Structure and synaptic activation of the fast coxal depressor motoneurone of the cockroach. Periplaneta americana.</a> J. Exp. Biol. 56 (3), 647-656 (1972).</li>
<li>Westerfield, M., McMurray, J. V., Eisen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identified+motoneurons+and+their+innervation+of+axial+muscles+in+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Identified motoneurons and their innervation of axial muscles in the zebrafish.</a> J. Neurosci. 6 (8), 2267-2277 (1986).</li>
<li>Susswein, A. J., Rosen, S. C., Gapon, S., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+buccal+motor+programs+elicited+by+a+cholinergic+agonist+applied+to+the+cerebral+ganglion+of+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Characterization of buccal motor programs elicited by a cholinergic agonist applied to the cerebral ganglion of Aplysia californica.</a> J. Comp. Physiol. A. 179 (4), 509-524 (1996).</li>
<li>Hurwitz, I., Neustadter, D., Morton, D. W., Chiel, H. J., Susswein, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+patterns+of+the+B31%2FB32+pattern+initiators+innervating+the+I2+muscle+of+the+buccal+mass+during+normal+feeding+movements+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophys%22%5BJournal%5D)">Activity patterns of the B31/B32 pattern initiators innervating the I2 muscle of the buccal mass during normal feeding movements in Aplysia californica.</a> J. Neurophys. 75 (4), 1309-1326 (1996).</li>
<li>Morton, D. W., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+buccal+nerve+activity+that+distinguishes+ingestion+from+rejection+can+be+used+to+predict+behavioral+transitions+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia.</a> J. Comp. Physiol. A. 172 (1), 17-32 (1993).</li>
<li>Warman, E. N., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+chronic+single-unit+extracellular+recording+in+freely+behaving+animals+using+pipette+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A new technique for chronic single-unit extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes.</a> J. Neurosci. Methods. 57 (2), 161-169 (1995).</li>
<li>Nargeot, R. N., Baxter, D. A., Byrne, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contingent-dependent+enhancement+of+rhythmic+motor+patterns%3A+an+in+vitro+analog+of+operant+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Contingent-dependent enhancement of rhythmic motor patterns: an in vitro analog of operant conditioning.</a> J. Neurosci. 17 (21), 8093-8105 (1997).</li>
<li>Kandel, E. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKandel%2C+ER+%22Behavioral+biology+of+Aplysia%22">Behavioral biology of Aplysia</a>. , Freeman. San Francisco. (1979).</li>
<li>Scott, M. L., Govind, C. K., Kirk, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+organization+of+the+buccal+system+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular organization of the buccal system in Aplysia californica.</a> J. Comp. Neurol. 312 (2), 207-222 (1991).</li>
<li>Rosen, S. C., Miller, M. W., Cropper, E. C., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outputs+of+radula+mechanoafferent+neurons+in+Aplysia+are+modulated+by+motor+neurons%2C+interneurons%2C+and+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Outputs of radula mechanoafferent neurons in Aplysia are modulated by motor neurons, interneurons, and sensory neurons.</a> J. Neurophysiol. 83 (3), 1621-1636 (2000).</li>
<li>Rosen, S. C., Miller, M. W., Evans, C. G., Cropper, E. C., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diverse+synaptic+connections+between+peptidergic+radula+mechanoafferent+neurons+and+neurons+in+the+feeding+system+of+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Diverse synaptic connections between peptidergic radula mechanoafferent neurons and neurons in the feeding system of Aplysia.</a> J. Neurophysiol. 83 (3), 1605-1620 (2000).</li>
<li>Weiss, K. R., Chiel, H. J., Koch, U., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+an+identified+histaminergic+neuron%2C+and+its+possible+role+in+arousal+of+feeding+behavior+in+semi-intact+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Activity of an identified histaminergic neuron, and its possible role in arousal of feeding behavior in semi-intact Aplysia.</a> J. Neurosci. 6 (8), 2403-2415 (1986).</li>
<li>Rosen, S. C., Teyke, T., Miller, M. W., Weiss, K. R., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+cerebral-to-buccal+interneurons+implicated+in+the+control+of+motor+programs+associated+with+feeding+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of cerebral-to-buccal interneurons implicated in the control of motor programs associated with feeding in Aplysia.</a> J. Neurosci. 11 (11), 3630-3655 (1991).</li>
<li>Jing, J., Weiss, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+variants+of+a+motor+act+in+a+modular+and+hierarchical+motor+network%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Generation of variants of a motor act in a modular and hierarchical motor network.</a> Curr. Biol. 15 (19), 1712-1721 (2005).</li>
<li>Azizi, F., Lu, H., Chiel, H. J., Mastrangelo, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+neurostimulation+using+pulse+code+modulation+%28PCM%29+microfluidic+chips%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Chemical neurostimulation using pulse code modulation (PCM) microfluidic chips.</a> J. Neurosci. Methods. 192 (2), 193-198 (2010).</li>
<li>Zhurov, Y., Proekt, A., Weiss, K. R., Brezina, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+of+internal+state+are+expressed+in+coherent+shifts+of+neuromuscular+activity+in+Aplysia+feeding+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Changes of internal state are expressed in coherent shifts of neuromuscular activity in Aplysia feeding behavior.</a> J. Neurosci. 25 (5), 1268-1280 (2005).</li>
<li>Baker, B. J., Kosmidis, E. K., Vucinic, D., Falk, C. X., Cohen, L. B., Djurisic, M., Zecevic, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+brain+activity+with+voltage-+and+calcium-sensitive+dyes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Mol.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Imaging brain activity with voltage- and calcium-sensitive dyes.</a> Cell. Mol. Neurobiol. 25 (2), 245-282 (2005).</li>
<li>Fejtl, M., Stett, A., Nisch, W., Boven, K. -H., Möller, A. On Micro-Electrode Array Revival. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFejtl%2C+M+%22Advances+in+Network+Electrophysiology+Using+Multi-Electrode+Arrays%22">Advances in Network Electrophysiology Using Multi-Electrode Arrays</a>. Baudry, M., Taketani, M. , Springer Press. New York. 24-37 (2006).</li>
</ol>

우리는 공개 할 아무 것도 없습니다.

예 mollusks (예를 들어, Lymnaea, 나선형, 그리고 Aplysia), 모터 풀의 분석과 같은 대형 식별 뉴런과 동물에서 일반적으로 세포 내 기록 1,2,3,4를 사용하여 수행됩니다. 이 프로토콜에서는, 우리는 고유 세포 기술을 사용하여 모터 풀의 모터 뉴런을 식별하기위한 프로세스에 대해 설명합니다. 우리는이 과정을 그림으로 힘 측정을 사용했습니다. 하나는 또한 근육 innervations를 측정하는 EMG을 사용할 수 있습니다. 간단히 이렇게하려면 프로토콜은 EMG 녹음에 대한 I1/I3 근육의 다른 지역에 훅 전극을 연결하는 변경해야합니다. 세포 기술은 이미 위에서 설명한 된 일부의 세포 기술, 이상 특정 장점이 있습니다. 첫째, 세포 기술은 적은 시간과 실험에 대한 신경절를 준비하는 뉴런에 덜 손상을 발생할 노력이 필요합니다. 보통,이 buc 준비를 20-30 분 소요됩니다세포 실험에 대한 구강 미사에 부착...

<table border="1"><tbody><tr><td> 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 </td></tr><tr><td> 나트륨 염화물 </td><td> 피셔 과학 </td><td> S671 </td><td> 생물학적, 공인 </td></tr><tr><td> 염화칼륨 </td><td> 피셔 과학 </td><td> P217 </td><td> 인증 ACS </td></tr><tr><td> 마그네슘 염화물 hexahydrate </td><td> Acros의 유기물 </td><td> 19,753 </td><td> 99% </td></tr><tr><td> 황산 마그네슘의 heptahydrate </td><td> 피셔 과학 </td><td> M63 </td><td> 인증 ACS </td></tr><tr><td> 칼슘 염화물 이수화 </td><td> 피셔 Scientifc </td><td> C79 </td><td> 인증 ACS </td></tr><tr><td> 포도당 (덱스 트로 오스) </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> G7528 </td><td> BioXtra </td></tr><tr><td> 걸레는 buffe연구 </td><td> Acros의 유기물 </td><td> 17,263 </td><td> 99% </td></tr><tr><td> Carbachol </td><td> Acros의 유기물 </td><td> 10,824 </td><td> 99% </td></tr><tr><td> 수산화 나트륨 </td><td> 피셔 과학 </td><td> SS255 </td><td> 인증 </td></tr><tr><td> 염산 </td><td> 피셔 과학 </td><td> SA49 </td><td> 인증 </td></tr><tr><td> 단일 질주 모세관 유리 </td><td> AM 시스템 </td><td> 6150 </td><td></td></tr><tr><td> 불타는 브라운 micropipette 풀러 모델 P-80/PC </td><td> 셔터 악기 </td><td></td><td> 필라멘트 사용되는 : FT345B </td></tr><tr><td> 에나멜 코팅 된 스테인레스 스틸 와이어 </td><td> 캘리포니아 정밀 와이어 </td><td></td><td> 0.001D, 코팅 H </td></tr><tr><td> 가정용 실리콘 II 접착제 </td><td> GE </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 겠구나 빠른 젤 superglue </td&gt; <td> 헨켈 주식회사. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 시스템 모델 (1700) 앰프에게 AM </td><td> AM 시스템 </td><td></td><td> 필터 설정 : I2 신경 / 근육에 10-500 Hz에서, 모든 다른 신경에 300-500 Hz에서 </td></tr><tr><td> Pulsemaster 다 채널 Stimulator </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> A300 </td><td></td></tr><tr><td> 자극 아이솔레이터 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> A360 </td><td></td></tr><tr><td> AxoGraph X </td><td> AxoGraph 과학 </td><td></td><td> 레코딩을위한 소프트웨어 </td></tr><tr><td> 골드 커넥터 핀 </td><td> Bulgin </td><td> SA3148 / 1 </td><td></td></tr><tr><td> 골드 커넥터 소켓 </td><td> Bulgin </td><td> SA3149 / 1 </td><td></td></tr><tr><td> Sylgard 184 실리콘 엘라스토머 </td><td> 다우 코닝 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 100 X 15mm Crystalizing 요리 </td><td> Pyrex </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 높은 진공 그리스 </td><td> 다우 코닝 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Pipet 팁 </td><td> 피셔 과학 </td><td> 21-375D </td><td></td></tr><tr><td> Minutien 핀 </td><td> 정밀 과학 도구 </td><td> 26002-10 </td><td></td></tr><tr><td> 모델링 점토 </td><td> 사전 트 아트 </td><td> 22-4400 </td><td></td></tr><tr><td> 에어 펌프를 속삭 </td><td> 테트라 </td><td> 77,849 </td><td></td></tr><tr><td> 수족관 배관 </td><td> Eheim </td><td> 7783 </td><td> 16분의 12 mm </td></tr><tr><td> 엘리트 Airstone </td><td> 하겐 </td><td> A962 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas 봄 가위 </td><td> 정밀 과학 도구 </td><td> 15000-08 </td><td></td></tr><tr><td> 뒤몽 # 5 좋은 포셉 </td><td> 좋은 Scienc전자 도구 </td><td> 11254-20 </td><td></td></tr><tr><td> Kimwipes </td><td> 킴벌리 - 클락 </td><td> 34,155 </td><td></td></tr></tbody></table>

extracellularly의 근육 모터 풀에 모터 뉴런을 확인<em&gt; aplysia californica</em

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

대형 식별 뉴런 (예 : mollusks), 모터 풀의 분석과 동물에서 세포 기술에게 1,2,3,4를 사용하여 수행됩니다. 최근, 우리는 extracellularly 자극하고 Aplysia californica 5 개별 뉴런을 기록 할 수있는 기술을 개발했습니다. 이제 우리는 고유 식별하고 모터 수영장에서 모터 뉴런을 특성화하기 위해이 기술을 사용하기위한 프로토콜을 설명합니다. 이 세포 기술은 장점이 있습니다. 첫째, 세포 전극은 자극하고 기록 뉴런을 피복 1-5하므로 제거 할 필요가 없습니다 수 있습니다. 따라서, 뉴런은 세포들보다 세포 실험에서 건강하게 될 것입니다. 둘째, 신경절 경우하면 집에 걸어주는 적절한하여 회전은, 세포 전극은 쉽고 효율적으로 같은 준비에서 여러 뉴런을 식별 할 수 신경절의 양쪽 뉴런에 액세스 할 수 있습니다. 셋째, extracellu고맙다 전극은 세포를 통과 할 필요가 없습니다, 그래서 쉽게 그들에게 더 적은 손상을 초래 뉴런 사이에 앞뒤로 이동할 수 있습니다. 하나가 단 몇 분 거리에 지속될 수 있습니다 모터 패턴을 반복하는 동안 여러 뉴런을 기록하려고 할 때 특히 유용합니다. 넷째, 세포 전극은 근육 운동 기간 동안 세포들보다 더 유연합니다. 세포 내 전극 꺼내 근육 수축 동안 뉴런가 손상 될 수 있습니다. 세포 전극이 부드럽게 뉴런 위의 집에 눌러되므로 대조적으로, 그들은 일반적으로 근육의 수축시 동일한 뉴런 위 유지, 따라서 더 많은 손상 준비에 사용할 수 있습니다. 소마 크기와 위치, axonal 프로젝션, 그리고 근육 innervation 4 : 고유 세포 전극을 사용하여 모터 풀 (특히, Aplysia의 I1/I3 근육)에 모터 뉴런을 식별하려면, 하나는 기준으로 세포 측정을 필요로하지 않는 기능을 사용할 수 있습니다, 6,7. 기술을 설명하는 데 사용되는 특정 모터 풀의 경우, 우리는 axonal 예측을 측정하기 위해 구강 신경에서 2, 3를 기록하고, 각각의 모터 뉴런에 근육 innervation의 패턴을 결정하기 위해 I1/I3 근육의 수축 힘을 측정. 우리는 빠른 식별을위한 단순화 된 진단 방법을 만들어, 모터 패턴 중에 타이밍을 특성화, 근육 innervation을 사용하여 첫번째 식별 모터 뉴런의 전체 과정을 보여줍니다. 간체 및 더 빠른 진단 방법은 정지 구강 대량 준비 8 또는 생체 9 예를 들어, 더 많은 손상 준비를위한 우수합니다. 이 과정은 2,3,13,14 Aplysia 또는 다른 동물 시스템에서 10,11,12 다른 모터 수영장에서 적용 할 수 있습니다.

그림 4와 5는 두 I1/I3 모터 뉴런을 식별하는 데 사용되는 일반적인 결과를 보여줍니다. 그림 4 egestive 같은과 ingestive 같은 패턴 (인물 4C, 4D) 동안 대형 모터 뉴런, B3의 소마 녹음을 보여줍니다. 일대일의 소마 채널 및 B3 소마 기록의 특이성이 패턴 동안 유지되었다는 ipsilateral BN2 채널 (그림 4E) 쇼에 해당하는 스파이크. B3는 패턴의 중간 - 투 - 늦은 후퇴 단계에서 발생합니다. 그림 4와 다른 결과 (미도시)에서, 우리는 B3의 BN2 단위는 항상 가장 큰 BN2 단위입니다 것으로 나타났습니다. 따라서, 또한 BN2 녹음에서 직접 감지 할 수 있습니다. 그림 5는 egestive 같은과 ingestive 같은 패턴 (그림 5...

대형 식별 뉴런 (과 동물<em&gt; 예</em&gt; mollusks), 모터 풀의 분석은 세포 기술을 사용하여 수행됩니다<sup&gt; 1,2,3,4</sup&gt;. 최근, 우리는 extracellularly에서 개별 뉴런을 자극하고 기록 할 수있는 기술을 개발<em&gt; Aplysia californica</em<sup&gt; 5</sup&gt;. 이제 우리는 고유 식별하고 모터 수영장에서 모터 뉴런을 특성화하기 위해이 기술을 사용하기위한 프로토콜을 설명합니다.

Extracellularly의 근육 모터 풀에 모터 뉴런을 확인<em&gt; Aplysia californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

본 절차의 전반적인 목표는 운동 단위(motor pool)에 속하는 개별 운동 뉴런을 세포 외적으로 식별한 다음, 운동 패턴 중에 이를 모니터링하고 제어하는 것입니다. 이를 위해 먼저 주요 신경에 후크 전극이 부착된 준비된 플레기아(plegia)의 구강 질량체(buccal mass)를 특수 기록 접시에 배치하고, 세포 외 자극 및 기록을 위해 구강 신경절과 뇌 신경절을 준비합니다. 두 번째 단계는 구강 질량체의 주요 신경과 근육에 흡입 전극을 부착하고, 표적 근육에 힘 변환기(force transducers)를 연결하며, 구강 신경절의 외초(sheath) 위에 세포 외 유리 전극을 배치하는 것입니다.다음으로, 세포 외 유리 전극을 사용하여 표적 운동 신경세포의 위치를 찾습니다. 마지막 단계는 근육 수축력을 동시에 측정하면서 표적 운동 신경세포를 세포 외적으로 자극하고 기록하는 것입니다. 궁극적으로, 이 세포 외 자극 및 기록 기술은 개별 운동 신경세포의 식별과 다양한 섭식 유사 운동 패턴 동안의 신경 활동을 보여주는 데 사용됩니다.뉴런의 세포 내 식별과 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은, 근육 운동 중에 동일한 표본 내의 여러 운동 뉴런을 세포 외 유리 전극으로 식별하고 모니터링할 수 있다는 점입니다. 절차 시연을 도와줄 분은 제 실험실의 또 다른 대학원생인 Jeff McManus입니다. 흡입 전극을 준비하는 이 절차에서는 먼저 약 10 centimeters 길이의 폴리에틸렌 튜브 조각을 자릅니다. 튜브의 양 끝을 잡고 번슨 버너에서 발생하는 불꽃에 매우 가깝게 댄 후, 튜브가 부드러워질 때까지 회전시킵니다.그런 다음 튜브를 화염에서 멀리 이동시키면서 조심스럽게 늘려줍니다. 튜브의 중간 부분이 당겨지면서 길어지고 좁아지며, 그 후 튜브를 반으로 잘라 두 개의 섹션 전극을 만듭니다. 이러한 흡입 전극은 일반적으로 절단된 신경이나 근육 끝단에 적용되지만, 때로는 통과하는 상태(passant)로 적용될 수도 있습니다.현미경 하에서 훅 전극(hook electrodes)을 부착한 후, 구강 덩어리(buccal mass)의 부착 지점에서 구강 신경 1번과 식도 신경을 양측으로 절단합니다. 다음으로, I 2 근육의 경로에서 벗어나도록 뇌신경절(cerebral ganglion)을 앞쪽으로 당깁니다. 그 후, 울라낭(ular sac) 상단의 I 2 근육을 절개합니다.절개 부위를 외측과 전방으로 확장하고 I

extracellularly-identifying-motor-neurons-for-muscle-motor-pool

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

의 준비 Aplysia 감각 - 모터의 연결을 셀 문화

실험 근육 구조, 시냅스 반응, 이온 그라디언트 및 막 잠재력에 대한 투자율의 효과를 조사 경험을 얻기 위해 학생들을위한 쉬운 접근 방법을 보여줍니다. 또한, 감각 - CNS - 모터 근육 회로의 연결 회로에서 화합물의 효과를 테스트하는 방법을 보여 제공됩니다.

멤브레인 후보, 시냅틱 응답,의 연결 회로, Neuromodulation과 크레이를 사용하여 근육 조직학 : 학생 실험실 연습

이 새로운 방법은 하나의 성인 마우스 motoneuron과 근육 섬유에 의해 생성 된 힘의 측정의 동시 세포 녹음을 할 수 있습니다. 정상과 유전자 변형 동물의 모터 장치의 전기 및 기계적 성질의 결합 조사 신경 근육 시스템의 연구를위한 돌파구이다.

성인 마우스에서의 모터 단위 제작 룸버 Motoneuron과 포스의 동시 세포 녹화<em&gt; 생체에</em

해양 달팽이 Aplysia californica 널리 행동의 세포와 분자 기초에 연구에 대 한 신경 생물학 모델로 사용 되었습니다. 여기서 방법론은 확인된 신경 회로의 단일 뉴런의 전기 생리및 분자 분석을 위한 Aplysia의 신경계를 탐구하기 위해 설명된다.

아피시아 단일 뉴런의 전기 생리 및 분자 분석을 위한 신경리아 준비

여기에서는 가재의 복부 신경삭 해부에 대해 설명합니다. 우리는 또한 수영 운동 뉴런의 가상 운동을 기록하는 전기 생리학 기술을 보여줍니다.

왕새우의 Swimmeret 시스템 : 신경 코드 및 모터 패턴의 세포 외 녹음의 해부를위한 실무 가이드

근육 내 흡수 및 해당 운동 뉴런으로의 분자 역행 수송의 효능은 모터 엔드 플레이트(MEP)에 대한 주입 부위의 위치에 따라 달라집니다. 여기에서는 운동 뉴런으로의 추적자의 역행 수송을 최적화하기 위해 골격근에서 MEP를 찾는 방법을 설명합니다.

모터 엔드 플레이트 함께 근육 주사 : 직접 모터 뉴런에 셔틀 트레이서에 대한 최소 침습 접근

이 연구는 후기 단계 -16 Drosophila melanogaster 배아의 운동 뉴런 예측을 시각화하기위한 표준 면역 조직 화학 법을 상세히 설명합니다. FasII 항체로 염색 된 고정 배아의 필렛 된 준비는 신경 발달 중에 모터 축삭 돌연변이 및 표적인지에 필요한 유전자를 특성화하는 강력한 도구를 제공한다.

배아 운동 뉴런의 Axonal 투영 패턴의 시각화<em&gt; Drosophila</em

여기에서 우리는 수유 행동 도중 이 근육의 역할을 이해하기 위하여 해양 연체 동물 Aplysia californica의 공급 장치에 내재된 근육의 최소침습 외과 병변을 위한 프로토콜을 제시합니다.

Aplysia 칼리포르니카의 오돈토포어에 내재된 근육에 대한 최소 침습 병변 기술

우리는 친유성 형광 염료를 사용하여 Drosophila 배아 운동 뉴런의 역행 추적방법을 기술한다.

친유성 형광 염료를 사용하여 Drosophila 배아 모터 뉴런의 역행 추적

이 프로토콜은 흡광도 전압에 민감한 염료 및 포토다이오드 어레이를 사용하여 비 형이상무척추동물 종의 단일 세포 분해와 신경 인구 활성을 이미징하는 방법을 제시한다. 이 접근 방식을 통해 하루 동안 이미징 및 분석을 추구할 수 있는 빠른 워크플로우가 가능합니다.

비 트랜스제닉 무척추 동물의 단일 신경 해상도를 가진 네트워크 역학을 기록하기위한 포토다이오드 기반 광학 이미징

당사는 인간 원발성 메소포스트 유래 근투와 인간 유도만능 줄기 세포 유래 모터 뉴런을 공동 배양하여 상업적으로 이용 가능한 미세유체 장치에서 인간 모터 유닛을 생성하는 방법을 설명하며, 이로 인해 기능적으로 활성 신경 근육 접합이 형성된다.

미세 유체 장치에서 기능성 신경 근육 접합을 갖춘 인간 모터 유닛 생성

학습하세요 Aplysia californica에서 세포외 전극을 이용하여 운동 뉴런 풀의 개별 운동 뉴런을 식별하고 모니터링하는 방법을. 이 기술은 먹이 섭취와 같은 운동 패턴 중 신경 활동을 연구하는 데 유용합니다.

Extracellularly의 근육 모터 풀에 모터 뉴런을 확인

더 많은 동영상 탐색