Name: 마우스의 단기 및 장기 전위의 활동은 영상 추적 소프트웨어에 의해 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-20T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 15 s
Description: 학습하세요 마우스의 단기 및 장기 운동 활동을 비디오 추적 소프트웨어로 분석하는 방법을. 비침습적 기법으로 신경과학 및 행동 연구에서 치료 효과를 정밀하게 평가할 수 있습니다.

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지원 :이 연구는 건강의 국립 연구소 (DK064862, NS058525 및 GGF에 AA019357)에 의해 지원되었다.

1. 단기 LMA 세트 업 및 절차 <ol><li> 단기 LMA 케이지 설정 <ol><li> 단일 보관 마우스의 홈 케이지에서 단기 LMA를 테스트합니다. VTS에 의존하는 이미지 분석을 용이하게하기 위해 마우스 색상 (흰색 쥐와 검은 쥐에 대한 밝은 색의 침구 즉, 어두운 색의 침구)와 높은 콘트라스트의 침구를 사용합니다. </li><li> 단기 LMA 테스트 기간 동안, 11 X ¼ 직경 구멍에 적절한 통풍을 지원하기로 플렉시 유리에 일반 ¼로 새장을 포함한다. </li></ol></li><li> 단기 LMA 테스트 실 <ol><li> 그들이 적어도 24 시간 전 8 풍토에 순화되어있는 깨끗한 환경에서 마우스를 테스트합니다. </li><li> 테스트 환경을 조명하기 위해, 빨간색 전구 (&lt;125 루멘)과 육추 클램프 등을 사용합니다. 비디오 그래피에 앞서, 플렉시 유리 케이지 정상에서 눈부심이나 반사를 제거하는 빛의 각도와 위치를 조정합니다. </li><li> 객실의 소음을 제거하거나 방지70dB 이상. 간헐적 인 소음 마우스 테스트 중에 피할 수없는 경우 화이트 노이즈 생성기를 사용합니다. </li><li> 케이지는 케이지 침구에 정육점 또는 유사한 색상의 실험실 벤치 종이로 시험 방에 배치되는에 따라 시험 표면을 커버, 경우에 케이지 바닥 비디오 촬영 중 노출됩니다. </li></ol></li><li> 단기 LMA 비디오 촬영 <ol><li> 센터와 테스트 실에서 녹음 영역 위 이상의 메모리 120 GB의 천장에 장착 된 야간 시계를 지원하는 비디오 카메라를 배치합니다. 비디오 카메라 뷰 프레임 (Noldus 정보 기술 (리스 VA)에 의해 예를 들어, Ethovision XT 7을 동시에 실시간으로 8 쥐를 추적 할 수 있습니다) 내에 너무 많은 새장을 배치하여 사용 VTS의 해상도 능력을 초과하지 마십시오. </li></ol></li><li> 단기 LMA 테스트 절차 <ol><li> 라이트 사이클의 어두운 / 활성 단계에서 단기 LMA를 테스트합니다. 빛의주기를 기준으로 시간을 일 있는지 확인모든 그룹에 걸쳐 동일한 전자, LMA는 어두운주기 1 초 이상 기간 동안 더 많은 활동 어두 컴컴한 패턴을 다음과 같이. 최소화 LMA의 시간적 차이의 잠재적 영향을 확인하기 위해 기록 된 생쥐의 각 그룹 모두 실험 및 제어 과목을 포함합니다. </li><li> 개인적으로 집과 순응 마우스 적어도 24 LMA 테스트 8 시작하기 전에 시간. </li><li> 직접 카메라에서 케이지 분할기와 케이지 (개인 마우스 포함) 놓습니다. 이 마우스의 뷰 (마우스 굴 / 중첩 재료 자체를 포함하는 경우 등) 방해 및 VTS의 정확성을 방해 할 수 있으므로, 케이지에서 모든 중첩 / 농축 물질을 제거합니다. 기록 된 각 케이지 명확한 플렉시 유리 뚜껑을 놓습니다. </li><li> 동시에 여러 개의 케이지있다 videoing 때, 해상도가 선택한 VTS와 호환되는지 확인하십시오. VTS 분석을 쉽게하기 위해 (즉, 오른쪽 상단) 각 분할 내에 동일 케이지의 위치를. </li><li> 녹음을 시작합니다. 추가 비디오가 아닌 문서의 독립적 인 비디오의 적절한 식별을 보장하기 위해 모든 관련 실험 정보를 식별 슬레이트 각 비디오를 시작합니다. LMA 테스트 (5-10 분)의 기간을 추적하기 위해 타이머, 스톱워치를 사용합니다. 타이밍 정보가 손실 된 경우, 영상 기록에서 복구 할 수 있습니다. </li><li> 단기 LMA 방법을 사용하여 반복 측정의 경우, 마우스가 아닌 측정 간격 동안 음식과 물에 접근 할 수 있습니다. </li><li> 테스트하는 동안 생쥐의 눈에 띄지 않도록 외부의 시각적 인 역할을하는 어떤 실험자를 유지합니다. </li><li> 테스트가 완료되면 반환 / 둥지 / 농축 물질을 대체, 불안과 같은 행동 8의 개발 가능성을 줄일 수 있습니다. </li></ol></li><li> 단기 LMA 분석 <ol><li> 테스트 세션에서 사용 된 VTS와 호환 아카이브 미디어에 비디오 녹화를 저장합니다. Ethovision XT 7, 하드 드라이브 디스크 (HDD)를 사용. </li><li> 실시간으로 비디오를 분석, 관련 미디어 플레이어를 사용하여 VTS에서 동영상을 재생합니다. 그림 1에서 검출 변수는 : 2cm / 초 추적을 시작, 1.75 cm / 초 정지 추적. </li><li> 처음에, 추적을위한 관심 영역 (ROI)로 전체 케이지 바닥을 선택합니다. 이러한 thigmotaxis의 평가와 같은 고급 분석을 위해 여러 내부 케이지 ROI를 만듭니다. </li><li> 높은 처리량 연구에 대한 개별 모든 케이지 바닥 ROI를 동시에 비디오 내의 모든 새장을 분석합니다. </li><li> 총 거리 (cm) 이동 속도 (cm / 초)과 움직임의 지속 시간 (초) 이동 계산 VTS를 사용합니다. Ethovision XT 7, 저장, 추가 분석을 위해 마이크로 소프트 엑셀로 생성 된 데이터를 내보낼 수 있습니다. </li></ol></li></ol> 2. 장기 LMA의 테스트 설정 및 절차 <ol><li> 장기 LMA 테스트 케이지 건설 <ol><li> 짧은 끝 벽에 5.5 cm 직경 구멍을 잘라표준 마우스 케이지. 직류 전기를 통한 강철 메쉬 ¼로 구멍 덮개를 만들 수 있습니다. 음식에 마우스 접근을 허용하기 위하여 오프닝에서 여러 ½을 만드는 메쉬를 잘라. 날카로운 모서리를 제거하는 절단 메시를 닦다. </li><li> 직접 5.5 cm의 구멍을 커버하는 데 사용되는 메쉬에 연결된 외부 호퍼를 생성하기 위해 추가 메쉬를 사용합니다. 구멍을 커버하는 데 사용되는 메쉬 호퍼를 연결하고, 알루미늄 리벳을 사용하여 케이지 어셈블리를 연결합니다. </li><li> 표준 50 ML 원뿔 (코닝)와 노 드립 sipper 튜브의 삽입 (역 퓨어 시스템)를 허용하는 오버 뚫은 1 홀 고무 마개 (피셔)에서 물 한 병을 구축합니다. 벨크로 테이프와 케이지 (3M)에 물병을 확보하고 메쉬 커버 구멍을 통해 sipper 튜브를 삽입합니다. </li><li> 장기 LMA 테스트 기간 동안, 11 X ¼ 직경 구멍에 적절한 통풍을 지원하기로 플렉시 유리에 일반 ¼로 새장을 포함한다. </li></ol></li><li> 장기 LMA 테스트 실<ol><li> 설정 장기 LMA 테스트 실 단기 LMA와 동일합니다. 절차에 대해서는 1.2 절을 참조하십시오. </li></ol></li><li> 장기 LMA 비디오 촬영 <ol><li> 센터 직접 테스트 실에서 녹음 영역 위 PC에 연결된 천장에 장착 된 적외선 보안 스타일, 카메라를 배치합니다. 만 (예 : Ethovision XT 7 동시에 실시간으로 8 쥐를 추적 할 수 있습니다)를 사용 VTS의 기능 내의 개별 케이지 해상도 번 그 결과를 케이지의 수를 기록한다. </li></ol></li><li> 장기 LMA 테스트 절차 <ol><li> 라이트 사이클의 어두운 / 활성 단계 동안 장기 LMA를 테스트합니다. LMA는 어두운주기를 1 초 이상 기간 동안 더 많은 활동 어두 컴컴한 패턴을 다음과 같이 빛을주기에 상대적으로 시간이 모든 그룹에서 동일한 지 확인합니다. 기록 된 생쥐의 각 그룹 모두 실험 및 제어 과목 가능성을 최소화하기 위해 테스트LMA의 시간적 차이의 효과. </li><li> 개인적으로 집에 적어도 24 시간 동안 수정 된 새장에서 테스트 쥐를 적응. </li><li> 직접 카메라에서 케이지 분할기와 케이지 (개인 마우스 포함) 놓습니다. 마우스보기의 방해를 보장하기 위해 케이지에서 모든 중첩 / 농축 물질을 제거합니다. 둥지 재료로 굴을 마우스 마우스를 추적하는 VTS의 기능을 방해합니다. 기록 할 케이지의 각 명확한 플렉시 유리 뚜껑을 놓습니다. </li><li> 한 번에 여러 새장을 녹음 할 때, 해상도가 선택한 VTS와 호환되는지 확인합니다. 각 분할 내에서 동일 VTS 분석, 위치 새장을 쉽게하기 위해 (즉, 오른쪽 상단). </li><li> 장기 LMA 테스트는 일반적으로 실시간으로 분석하고, 영상 기록은 일반적으로 생성되지 않습니다. 영상 기록은 보조 카메라를 사용하거나 기본 카메라에 연결된 DVD 레코더를 통해 기록 할 수 있습니다. 개인의 상세한 기록을 보관해야마우스 및 그룹 정보를 제공합니다. </li><li> 실시간 분석을위한 VTS를 설정합니다. 전체 케이지 바닥 추적을위한 투자 수익 (ROI)을 포함한다. 기록되는 모든 케이지에 대한 ROI를 설정. 총 거리 (cm) 이동 속도 (cm / 초)과 움직임의 지속 시간 (초) 이동 계산 VTS를 사용합니다. 그림 2에서 검출 변수는 : 2cm / 초 추적을 시작, 1.75 cm / 초 정지 추적. </li><li> 마우스 장기 LMA를 녹음을 시작합니다. 분석 컴퓨터와 관련된 시계를 통해 장기 LMA 테스트의 기간을 모니터링합니다. </li><li> 테스트하는 동안 생쥐의 눈에 띄지 않도록 외부의 시각적 인 역할을하는 모든 실험자를 유지합니다. </li><li> 테스트가 완료되면 반환 / 둥지 / 농축 물질을 대체, 불안과 같은 행동 8의 개발 가능성을 줄일 수 있습니다. </li></ol></li><li> 장기 LMA 분석 <ol><li> 장기 LMA 분석 영상 기록의 생성없이 실시간으로 발생. Ethovision XT 7을 사용하는 경우, 저장 및 분석 용 Microsoft Excel로 데이터를 내보낼 수 있습니다. </li><li> 장기 LMA에 대한 영상 기록을 생성하려면, 보조 카메라를 사용합니다. 보조 카메라가 잠재적으로 긴 기록 (들)을 저장하기에 충분한 충분한 저장 용량을 가지고 있어야합니다. </li></ol></li></ol>

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</ol>

저자는 관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

마우스에서 질병의 증상은 혼수, 사회적, 환경 적 환경에 대한 관심의 상실, 권태감 및 식욕 부진 2-3 이용하실 수 있습니다. 마우스 및 기타 설치류에, LMA는 면역 활성화에 4-5 후 질병을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 또한, 장기 LMA는주기 동작이나 잠자기 / 깨우기 패턴의 장애에 치료에 의한 변화의 분석을 허용, 24 시간 (또는 그 이상) 동안 움직임을 추적 할 수있는 기능을 제공합니다. 이 비 침습 쉽게 반복 측정 또는 연속 양상으로 수행하고 최소한의 혼란입니다 때문에 LMA는 질병에 대한 다른 시험에 비해 몇 가지 장점을 제공합니다. 여러 케이지가 기록 / 동시에 분석 할 수 있기 때문에 다른 방법 및 시스템 (예 : Phenotyper, Intellecage, photobeam 시스템), VTS와 LMA 분석에 비해 상대적으로 저렴합니다. 여기에 사용되지 않지만, 양육 및 벽 등반과 같은 LMA 활동의 추가 분석의 사용을 통해 달성 될 수있다측면에 ...

<table><tbody><tr><td>비디오 카메라</td><td>Sony</td><td>HDR-XR500V</td><td>다른 유사한 비디오 카메라도 작동할 수 있습니다. 파일 저장소 형식(코덱/컨테이너)은 사용된 VTS와 호환되어야 합니다. VTS를 처음 설정할 때 VTS를 먼저 선택하고 특히 파일 형식 및 비디오 해상도 호환성과 관련하여 공급업체와 함께 적절한 카메라를 선택하는 것이 좋습니다.</td></tr><tr><td>불투명 케이지 칸막이</td><td></td><td></td><td>: 특정 케이지 치수에 따라 맞춤 제작됩니다. 이미지 분석을 용이하게 하기 위해 칸막이는 케이지 침구와 유사한 색상이어야 합니다. 구조적으로 고정된 분배기는 반복 측정과 관련된 실험과 같은 다중 마우스 실험 간의 설정 속도를 높이기 때문에 선호됩니다. 견고한 운반 가능한 케이지 칸막이는 1/2인치 불투명 플라스틱으로 구성할 수 있으며 일련의 크로스 랩을 통해 결합할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>라이트 또는 다크 침구(마우스 코트 색상의 반대)위치에</td><td></td><td></td> <td>따라 여러 실험실 동물 용품 유통업체에서 구할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>클리어 플렉시 글라스 케이지 탑</td><td></td><td></td><td>케이지 치수에 따라 맞춤 제작됩니다.</td></tr><tr><td>자동 비디오 추적 소프트웨어(EthoVision XT 7)</td><td>Noldus 정보 기술</td><td></td><td>다양한 VTS 제조업체가 존재하며 다른 소프트웨어를 사용하는 것으로 충분할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>PC</td><td>델 Inc.</td><td></td><td>VTS 소프트웨어 제공업체 참조 최소 PC .요구 사항</td></tr><tr><td>백색 잡음 발생기</td><td>Dohm</td><td>DS</td><td>필요에 따라 다양한 백색 잡음 발생기를 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr>빨간 전구<td></td><td></td><td>가 있는 육추기 클램프 조명</td><td>여러 크기와 스타일을 사용할 수 있습니다. 필요한 수는 객실 크기/조명 요구 사항에 따라 다릅니다. 시험장에서 125루멘을 초과하지 마십시오.</td></tr><tr><td>실험실 벤치 또는 정육점 종이</td><td></td><td></td><td>종이는 케이지 침구와 색상이 일치하거나 매우 유사해야 합니다.</td></tr></tbody></table>

마우스의 단기 및 장기 전위의 활동은 영상 추적 소프트웨어에 의해 분석

Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software

전위의 활동 (LMA)는 마우스 및 기타 설치류 행동의 간단하고 쉽게 수행 측정이다. 비디오 추적 소프트웨어 (VTS)의 개선은 수동 득점으로 선 횡단 방법에 비해 획기적으로 특이성과 감도를 향상 LMA 테스트를 결합 할 수있다. 또한, VTS는 높은 처리량 실험을 할 수 있습니다. 열기 필드 테스트 (OFT)에 사용되는 자동 비디오 추적 유사한 LMA 테스트 고유 동안한다는 점에서 쥐가 자신의 홈 케이지에 남아있는 것을 허용하고 빛을 어둠의 활성 단계 밝은 조명 anxiogenic 자극을 사용하지 않습니다 주기. 이상 운동 연구 (시간 - 일) 자주 사용하는 송신기 및 biotelemetry를 이식하는 동안 전통적으로, LMA는 시간 (분)의 짧은 기간 동안 사용되었다. 실시간 추적 옵션과 함께, 장기, 단기 LMA 테스트처럼, 지금은 비디오 그래피를 사용하여 수행 할 수 있습니다. 장기 LMA 테스트는 전문이 필요합니다하지만, 음식과 물 (어떤은 일반적으로 케이지 상단에 위치) 비디오 촬영을 방해하지 않도록 쉽게 케이지를 구축. 중요한 것은, 비디오 그래피와 VTS가 어렵거나 선 교차점 및 / 또는 biotelemetry로 측정으로 실행할 수 있습니다 같은 마우스 움직임의 경로와 매개 변수의 정량화 할 수 있습니다. 결론적으로, VTS에 연결된 LMA 테스트는 마우스 동작에 대한 자세한 설명과 오랜 기간 동안 운동을 검사 할 수있는 능력을 준다.

반복 측정 결과의 예를 들어, 단기 LMA 시험은 그림 1에 표시됩니다. 이 그림은 리포 다당류 (LPS) 투여 후, 마우스는 빠르게 주위 환경 동물 수용 (AEC) 6에 보관 쥐보다 ​​단기 전위의 활동을 복구 개별적으로 환기 동물 수용 (IVC)에 보관되어 있음을 보여줍니다. 전위의 활동의 초기 손실이 LPS 주입 군간에 유사하지만, 기초 LMA에 복구 IVC - 보관 쥐에서 더 빠르다는 운동의 속도 (그림 1b)과 움직임 (그림 1C)의 기간이었다. 이 짧은 기간 LMA 테스트와 반복 측정 모델의 사용은 다른 그룹 사이의 시간에 관찰 및 복구의 비교를 할 수 있습니다. 장기 LMA 테스트 예제는 그림 2에 표시됩니다. 이 그림은 2 개의 분리하지만, 연속적인 일 동안 매일 테스트를 12 시간 동안 마우스 운동력을 보여줍니다. 유의 ...

전위의 활동 (LMA)는 생쥐의 행동을 간단하고 쉽게 수행 측정이다. 비디오 추적 소프트웨어 (VTS) 및 LMA의 커플 링 LMA 분석 설명서, 라인 교차 방식에 비해 특히, 특이성 및 감도 개선 할 수 있습니다. 또한 VTS 마우스 LMA의 장기 추적을 할 수 있습니다.

Locomotor  activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice  and other rodents. Improvements in video tracking software ...

다음 실험의 전반적인 목표는 실험적으로 처리된 서로 다른 마우스 그룹 간의 단기 및/또는 장기 운동 활성 차이를 검출하는 것입니다. 이는 마우스 홈 케이지 내의 활동을 실시간으로 비디오 녹화함으로써 이루어집니다. 두 번째 단계로, 비디오 추적 소프트웨어를 사용하여 동물의 운동 활성을 실시간으로 분석하거나 녹화된 영상을 통해 분석합니다.다음으로, 점수가 매겨진 운동 능력 파라미터를 통계 분석을 위해 보조 소프트웨어로 가져옵니다. 이러한 절차를 통해 이동 거리, 이동 속도 및 이동 지속 시간과 같이 평가된 파라미터를 기반으로 처치나 조건이 단기 및 장기 운동 능력에 미치는 영향을 규명할 수 있습니다. 라인 크로싱(line crossing)이나 이미터 식립(emitter implantation)과 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은, 침습적이며 잠재적으로 혼란 변수가 될 수 있는 수술 과정 없이도 마우스의 운동 능력을 더욱 철저하게 검토할 수 있다는 점입니다.일반적으로 이 방법을 처음 접하는 연구자는 어려움을 겪을 수 있는데, 이는 후속 비디오 추적을 위한 최적의 이미지 품질을 확보할 수 있도록 케이지와 장비를 설정하는 과정이 까다롭고 습득하는 데 시간이 걸리기 때문입니다. 단기 운동 활성도는 동물의 코드 색상과 대비가 높은 깔짚이 깔린 격리된 마우스의 홈 케이지에서 테스트합니다. 실험 전, 동물들은 최소 24시간 동안 해당 깔짚에 적응해야 합니다.테스트실을 준비하려면 먼저 최소 120 gigabytes의 메모리가 탑재된 야간 투시 가능 비디오 카메라를 기록 영역 상단에 설치하십시오. 실험실 내의 주변 소음은 70 decibels를 초과해서는 안 됩니다. 간헐적인 배경 소음을 피할 수 없는 경우에는 화이트 노이즈 발생기를 사용하여 해당 소음을 상쇄하십시오.또한 테스트실의 환경 조건이 동물의 일반적인 사육 조건과 유사한 것이 중요합니다. 새로운 실험군을 배치하기 전에 기록 영역을 청소한 다음, 케이지 바닥재와 비슷한 색상의 정육지나 실험대용 종이로 표면을 덮으십시오. 다음으로, 0.5인치 플라스틱으로 제작된 불투명한 케이지 구분대를 배치하십시오. 테스트 표면 위의 구분대는 바닥재와 비슷한 색상이어야 하며 깨끗한 상태여야 합니다.이제 마우스를 테스트 구역으로 옮기고 케이지를 구분벽 사이에 배치합니다. 분석의 편의를 위해 케이지는 항상 동일한 방식으로 배치하십시오. 테스트를 위해 케이지를 1/4인치 두께의 투명 플렉시글라스로 덮습니다.적절한 환기를 위해 플렉시글라스에 최소 11개의 1/4인치 구멍을 뚫어야 합니다. 다음으로, 케이지를 비추기 위해 적색 전구를 장착한 브루더 클램프 라이트를 설치하십시오. 이제 비디오 추적 시스템의 성능 범위를 초과하지 않도록 카메라의 시야를 테스트 케이지 중앙에 맞추십시오.이 시스템은 최대 8마리의 마우스를 실시간으로 추적하는 것으로 제한됩니다. 이제 비디오 카메라 디스플레이를 보면서, 플렉시글라스 케이지 상단의 눈부심이나 반사를 제거하도록 조명의 각도와 위치를 조정하십시오. 시각적 아티팩트가 없는 깨끗한 마우스 영상을 확보하는 것이 좋은 결과를 얻기 위한 가장 중요한 단계입니다.LMA의 시간적 차이로 인한 잠재적 영향을 최소화하기 위해 각 그룹에 실험군과 대조군 피험자를 항상 모두 포함하십시오. 테스트 직전에 케이지에서 둥지 재료와 풍부화 재료를 제거하십시오. 이러한 재료들이 마우스의 시야를 가릴 수 있기 때문입니다. 비디오 촬영 시, 관련 실험 정보가 기재된 슬레이트와 함께 녹화를 시작하십시오.비디오를 정확하게 식별하려면 카메라 디스플레이의 타이머를 사용하여 테스트 지속 시간을 추적하고, 동물의 시야 밖으로 벗어나십시오. 녹화 시간 동안 주의하십시오. 테스트가 완료되면 모든 재료를 각 케이지에 다시 넣으십시오.동물을 다시 테스트해야 하는 경우, 테스트 사이에 먹이와 물을 다시 제공하십시오. 테스트 세션의 비디오 녹화본을 하드 디스크 드라이브와 같이 비디오 추적 시스템과 호환되는 보관용 매체에 저장하십시오. 비디오 추적 시스템에서 비디오를 실시간으로 분석하십시오. 처음에는 케이지 바닥 전체를 추적을 위한 관심 영역 또는 ROI로 설정하십시오.Figma tax 평가와 같은 심층 분석을 위해, 고처리량 연구를 위한 다수의 케이지 내 ROI를 생성하십시오. 개별 케이지 바닥 ROI를 사용하여 비디오 내의 모든 케이지를 동시에 분석하십시오. VTS가 총 이동 거리, 이동 속도 및 이동 지속 시간을 계산하도록 설정하십시오. 계산이 완료되면 데이터를 스프레드시트 파일로 내보내어 저장하고 추가 분석을 수행하십시오.장기 테스트는 단기 테스트와 동일한 방식으로 수행됩니다. 다만, 먹이와 물을 공급하기 위한 새로운 진입점이 마련된 수정된 케이지가 필요합니다. 먼저, 표준 케이지의 짧은 쪽 끝벽에 직경 5.5 centimeter의 구멍을 뚫습니다.다음으로, 1/4인치 아연 도금 강철 망에 1/2인치 크기의 개구부를 내고, 동일한 망을 사용하여 날카로운 모서리를 다듬어 매끄럽게 만든 뒤, 개구부 위의 망에 연결할 수 있는 사료 펠릿용 외부 호퍼를 제작합니다. 그다음 리벳용 구멍을 뚫습니다. 이후 알루미늄 리벳과 스테인리스 스틸 와셔를 사용하여 케이지의 구멍을 망과 연결된 호퍼로 덮어 고정합니다.수분을 공급하기 위해, 표준 50 milliliter 삼각 플라스크와 노드립 흡입 튜브를 삽입할 수 있도록 구멍을 크게 뚫은 1구 고무 마개를 사용하여 급수병을 제작하십시오. 이 급수병을 케이지에 고정하십시오.벨크로 테이프를 사용하여 시퍼 튜브(sipper tube)를 메시로 덮인 개구부를 통해 삽입해야 합니다. 이제 케이지를 플렉시글라스 덮개로 덮어두면, 단기 운동성 분석(short term locomotor assay)에서 설명한 것과 동일한 절차에 따라 마우스가 음식과 물을 계속 섭취할 수 있습니다. 장기 분석은 보통 12시간 동안 또는 현재 명암 주기의 해당 단계가 끝날 때까지 진행됩니다.장기 운동 능력 테스트는 일반적으로 비디오 녹화를 하지 않고 실시간으로 분석합니다. 하지만 보조 카메라를 사용하거나 주 카메라에 연결된 DVD 레코더를 통해 녹화가 가능합니다. 비디오 추적 시스템의 처리 용량이 허용하는 한 마우스를 계속 테스트할 수 있으며, 단기 테스트와 마찬가지로 옥수수 속대나 톱밥 깔개는 그대로 두고 둥지 재료로 사용된 풍부화 물질만 케이지에서 제거합니다.VTS에서 실시간 분석을 위해 비디오 추적 시스템을 설정합니다. 기록되는 각 케이지의 바닥 전체를 포함하도록 추적 ROI를 설정합니다. 단기 분석과 마찬가지로, 총 이동 거리, 이동 속도 및 이동 시간을 계산하도록 시스템을 설정합니다.그 다음 분석 후, 데이터를 스프레드시트로 내보내 저장하고 반복적인 단기 운동 능력 분석을 통해 분석하십시오. 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide) 주입 후, 개별 환기 케이지(IVC)에서 사육된 마우스가 일반 환경 케이지(EC)에서 사육된 마우스보다 주입으로 인한 단기 LMA 손실로부터 더 빠르게 회복되는 것으로 나타났습니다. LPS가 주입된 그룹 간의 초기 운동 능력 손실은 비슷했으나, 기저 운동 능력으로의 회복은 더 빠르게 나타났습니다. IVC에서 사육된 마우스의 경우, 이동 속도와 이동 지속 시간 또한 더 빠르게 회복되었습니다.본 분석에서는 검출 변수를 사용하여 초당 2cm의 움직임이 감지되면 추적을 시작하고, 초당 1.75cm가 되면 추적을 중단하도록 설정하였습니다. 2회 연속의 12시간 활동 주기에 걸쳐 이동성에 대한 소규모 테스트를 수행하였습니다. 정상 마우스에서는 이동 거리, 이동 속도 또는 이동 지속 시간에서 유의미한 차이가 발견되지 않았습니다.측정 가능한 차이가 없는 추세가 큰 표본 크기로 반복했을 때도 계속된다면, 해당 데이터는 이 분석법이 장기 운동 능력 분석에 사용되는 이식형 송신기를 대체하여 사용될 수 있음을 시사할 것입니다. 이 절차를 시도할 때는 실험 전 사육 조건에 특히 유의하는 것이 중요합니다. 모든 실험군 및 대조군 동물은 특히 광주기, 실내 온도 및 상대 습도와 관련하여 유사한 환경 조건에 있어야 합니다.또한, 이 절차를 마친 후에는 소음 및 냄새 자극에 대한 노출을 최소화해야 합니다. 특정 실험의 처리가 전반적인 운동 능력에 영향을 주지 않으면서 우울증 유사 행동을 유발하는지 등 추가적인 질문에 답하기 위해 강제 수영 검사와 같은 다른 방법들을 사용할 수 있습니다.

mouse-short-long-term-locomotor-activity-analyzed-video-tracking

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

이 프로토콜 열 필드 활동 분석 결과에 마우스 ambulation를 측정 하기 위한 유연 하 고, 저렴 한 비용 시스템을 설명 합니다. 우리는이 시스템에 따라 6 분 ambulation 분석 결과 mdx 마우스에서 자발적인 운동 감소를 감지 하 고 정확 하 게 구별이 동물의 근육 특정 구조에 개선 보여.

근이 영양 증의 마우스 모델에서 Ambulation를 측정 하기 위한 간단 하 고 저렴 한 비용 분석 결과

이 연구에서 우리 복 부 비행기 모터 조정 마우스 모델 (예를 들어, endophilin 돌연변이 나이 진출 neurodegeneration의 진행에 미묘한 변화를 모니터링 하 이미징 기반 운동학 걸음 걸이 분석의 사용을 보여 줍니다. 마우스 라인)입니다.

연령에 따라 모터 손상 Neurodegeneration와 쥐의 걸음 걸이 분석

현재의 연구는 쥐에 있는 모터 적자의 정량화를 자동화 목적입니다. 초기 평가 모델 모터 손해는 intracortical microelectrode 주입 모터 피 질에서 평가 합니다. 우리는 개발에 쉽게 적응할 수 있는 간단 하 고 쉽게 사용할 수 코딩 소프트웨어를 사용 하 여 추적 알고리즘의 사용을 보고 합니다.

소설 동물 모터 기능 추적 간단 하 고 쉽게 사용할 수 있는 소프트웨어를 사용 하 여 시스템

여기 우리는 개별적으로 시간의 긴 기간 동안 동물을 추적 하는 프로토콜을 제시. 컴퓨터 비전 사례 연구, 집, 하는 방법에 정보를 제공 하는 동시에로 랍 스타의 그룹을 사용 하 여 수동으로 생성 된 태그의 집합을 식별 하는 방법을 조작 및 표시는 랍 스타를 사용 합니다.

Cohoused 수 중 동물의 장기 비디오 추적: 노르웨이 가재 (Nephrops norvegicus)의 매일 운동 활동의 사례 연구

이 프로토콜은 작고 다재다능한 비디오 카메라를 구축하는 방법과 작동 컨디셔닝 챔버 내부의 동물의 위치를 추적하는 신경망을 훈련하기 위해 비디오에서 얻은 비디오를 사용하는 방법에 대해 설명합니다. 이는 작동 컨디셔닝 테스트에서 얻은 데이터 로그의 표준 분석을 보완하는 데 유용합니다.

다재다능한 수제 비디오 카메라와 DeepLabCut을 사용하여 오페라 컨디셔닝 챔버에서 쥐 추적

본 프로토콜은 시뮬레이션된 불사용 환경에 노출된 후 쥐의 보행 동작 변화를 묘사하기 위한 3차원 동작 추적/평가를 설명합니다.

설치류의 비활동으로 인한 보행 변화에 대한 포괄적인 이해

현재 프로토콜은 속도, 거리 등의 매개변수를 계산하기 위해 고화질 비디오 녹화를 기반으로 각 프레임의 픽셀을 분할하는 플러그인과 호환되는 오픈 소스 소프트웨어 피지를 사용하여 손으로 만든 경기장에서 파리의 움직임을 추적 및 분석하여 초파리 의 운동 활동을 평가합니다.

초파리에서 운동 활동을 분석하는 간단한 기술

마우스워커(MW) 툴박스를 사용하여 자유롭게 걷는 쥐의 운동 패턴을 정량적으로 설명하는 실험 파이프라인이 제공되며, 초기 비디오 녹화 및 추적에서 정량화 후 분석에 이르기까지 다양합니다. 생쥐의 척수 타박상 손상 모델은 MW 시스템의 유용성을 입증하기 위해 사용됩니다.

MouseWalker를 사용하여 척수 손상 마우스 모델에서 운동 기능 장애 정량화

현재 연구는 기계 학습을 사용하여 TgF344-AD 쥐를 포함한 설치류 모델의 운동 결함을 검사하기 위한 미세 운동 행동 테스트를 설명합니다.

신경퇴행성 질환의 전임상 모델에서 관절 운동학을 연구하기 위한 소근육 운동 과제

이 프로토콜은 딥러닝 기반 다중 관절 궤적 자동 라벨링과 함께 마커리스 러닝머신 테스트를 사용하여 쥐 하지의 운동학 평가 파이프라인을 구축하여 재현 가능한 동작 정량화를 가능하게 합니다.

쥐의 후肢 운동 운동학을 객관적으로 정량화하기 위한 딥러닝 기반 다중 관절 동기 추적

우리는 DeepLabCut을 사용하여 자유롭게 움직이는 쥐의 자발적인 보행과 이동을 정량화하는 저비용 마커 없는 워크플로우를 제시합니다. 이 프로토콜은 단일 카메라 비디오 획득, 해부학적 랜드마크의 무마커 추적, 시공간적 운동 매개변수 추출을 통합하여 전문 장비 없이도 비침습적이고 접근 가능한 운동 행동 분석 프레임워크를 제공합니다.

자유롭게 움직이는 쥐의 자발적 보행 및 이동 분석을 위한 저비용 마커리스 DeepLabCut 기반 워크플로우

학습하세요 마우스의 단기 및 장기 운동 활동을 비디오 추적 소프트웨어로 분석하는 방법을. 비침습적 기법으로 신경과학 및 행동 연구에서 치료 효과를 정밀하게 평가할 수 있습니다.

마우스의 단기 및 장기 전위의 활동은 영상 추적 소프트웨어에 의해 분석

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