이식 동맥 경화에 대한 마우스 모델

다음 실험의 전반적인 목표는 기증자 혈관을 수혜자의 복부 대동맥에 이식하는 것입니다. 첫 번째 단계는 기증자 마우스에서 흉부 대동맥을 해부하는 것입니다. 다음으로, 문합 부위는 수용 마우스의 복부 대동맥에 생성됩니다.

그런 다음 기증자 혈관을 수혜자 복부 대동맥에 이식합니다. 궁극적으로, 성공적인 이식은 이식 마우스의 손상되지 않은 뒷다리 운동 기능에 의해 접근할 수 있습니다. 따라서 이 모델은 이식편 동맥 경화증의 발병 기전을 이해하는 데 도움이 될 것입니다.

그리고 그것은 기술적으로 도전이며, 많은 실습과 환자가 완벽해야 합니다. 따라서 절차를 시연하는 것은 Chen 박사와 Louanne의 조수가 될 것입니다. 먼저 기증자 마우스의 적절한 마취 깊이를 확인합니다.

마취가 끝나면 마우스를 작동 현미경 아래 트레이의 누운 위치에 놓습니다. 심장을 노출시키고 식염수로 씻어낸 후 요오드와 알코올을 반복적으로 문질러 가슴을 청소하고 심장과 폐를 제거하여 흉부 대동맥의 전체 길이를 노출시킵니다. 시각화가 완료되면 흉부 대동맥을 주변 조직에서 멀리 떨어뜨려 조심스럽게 절개하기 시작합니다.

요추 가지에 닿으면 자르기 전에 실크 봉합사로 대동맥 근처에 결찰하십시오. 주변 조직에서 분리되면 흉부 대동맥 전체를 절제합니다. 일단 분리되면 공여자 대동맥을 헤파린 식염수로 씻어내고 이식할 때까지 얼음 위에 이 용액에 보관하십시오.

수혜자 마우스에서 적절한 마취를 확인한 후 복부 앞쪽의 털을 면도합니다. 안과 연고로 눈을 가리고 앞에서 본 것처럼 해당 부위를 깨끗이 닦습니다. 준비가 되면 작동 현미경 아래 트레이의 누운 위치에 마우스를 놓습니다.

xipoid에서 치골까지 정중선의 복벽을 절개한 다음 견인기를 사용하여 벽을 벌리고 복강을 노출시킵니다.노출되면 장을 식염수에 적신 거즈로 감싸고 복강에서 위로 밀어 올립니다. 식염수를 적신 거즈를 더 많이 사용하여 남은 복부 부위를 감싸고 이를 사용하여 직장을 복부 오른쪽으로 수축시킵니다. 다음으로, 생식 기관을 열등하게 움직입니다.

식염수를 도포하여 노출된 조직을 촉촉하게 유지하는 것을 잊지 마십시오. 정기적으로 신장 혈관 근위부에 위치한 대동맥 대동맥을 확인하고 대동맥 분기 둔탁 원위부에 위치합니다. 조심스럽게 해부하여 하대정맥과 분리하십시오.

대동맥의 이 분절에서 유래한 모든 작은 가지를 식별하고 절단합니다. 대동맥 분절이 분리되면 양쪽 끝에 약 5mm 간격으로 혈관 클램프를 놓습니다. 다음으로, 클램프 사이에 복부 대동맥을 횡단하여 문합 부위를 만듭니다.

날카로운 마이크로 가위를 사용하여 기증자의 대동맥 이식편을 수용하기 위해 절단된 한쪽 끝에서 대동맥의 작은 부분을 절제합니다. 잔여 혈액을 제거하기 위해 헤파린 식염수를 사용하여 클램프 사이의 대동맥 분절을 세척합니다. 절차 전반에 걸쳐 두 대동맥 샘플에 헤파린 식염수를 주기적으로 세척하는 것을 잊지 마십시오.

다음으로, 공여자 대동맥의 양쪽을 절제하여 이식을 위한 2.5mm 길이의 분절 이식편을 만듭니다. 지속적인 봉합을 위해 기증자 대동맥 이식편을 근위부 및 원위 말단과 나란히 배치하십시오. 먼저 양쪽 끝의 3시 방향과 9시 방향에 스테이 봉합사를 놓습니다.

다음으로, 3-4개의 러닝 봉합사로 절단된 가장자리를 결합하고 중단 봉합사를 위해 이중 매듭으로 러닝 봉합사를 스테이 봉합사에 묶습니다. 이식편 양쪽의 3시 및 9시 위치에 4개의 문합 부위를 구성합니다. 첫. 다음으로, 이러한 각 부위 사이에 3-4 개의 스티치를 배치하여 절단 가장자리를 결합합니다.

봉합사가 제자리에 놓이면 원위 클램프를 풀어 이식편으로 역행 흐름이 들어갈 수 있도록 합니다. 출혈 부위를 확인하고 3분 이내에 추가로 꿰매십시오. 만족스러운 지혈이 이루어지면 근위 cl을 해제하십시오.amp amp amp.

이식편 개통은 격렬한 맥동의 존재에 의해 확인될 수 있습니다. 맥동이 감소하면 혈전증을 예방하기 위해 혈관에 헤파린을 주입하십시오. 준비가 되면 장을 복강으로 되돌려 놓고 근육과 피부층을 봉합합니다.

이식된 쥐를 따뜻하고 깨끗한 케이지에 넣고 의식이 돌아올 때까지 1-2시간 동안 모니터링합니다. 회복 후 마우스의 운동 기능을 평가하고 두 번째 날에는 뒷다리의 기능 장애가 관찰되지 않으면 이식 수술이 성공적입니다. 수술 4주 후 실시한 동맥 이식편에 대한 조직학적 분석에서 남성 기증자의 여성 수혜자에서 혈관 벽의 두께가 증가한 것으로 나타났습니다.

그러나 이식편 동맥경화증은 남성 대 남성 그룹에서 관찰되지 않았다. 이 예시에서, 남성 기증자의 흉부 동맥을 인터페론 감마 녹아웃 마우스에 이식한 다음, 인터페론 감마 발현을 이식 마우스에 유도했습니다. 샘플을 채취하기 전에.

몇 주 후, 동맥 이식편에 대한 조직학적 분석은 치료군에서 이식편 동맥경화증이 관찰되지 않았음을 보여줍니다. 이제 이 수술을 하는 방법을 알게 되었습니다. 계속 노력하세요.