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마이크로피펫터 소개
마이크로피펫터 소개
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JoVE Science Education General Laboratory Techniques
An Introduction to the Micropipettor

1.5: 마이크로피펫터 소개

637,396 Views
09:15 min
November 10, 2012
AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

마이크로 파이프는 액체 용액의 마이크로 볼륨을 전송하는 데 사용되는 일반적인 실험실 기기입니다. 마이크로파이프는 0.5~5000μl 사이의 정확한 체적 이동을 위해 다양한 크기로 제공되며 각 계측기는 세 가지 크기의 일회용 팁 중 하나를 필요로 합니다. 마이크로피펫토르는 파이펫 샤프트에서 공기를 대체하여 액체를 생성된 진공으로 끌어들이도록 합니다. 그들의 사용은 다양한 세포 기반 분석법에 대한 세포 현탁액을 전송하고, 다른 분석 기술에 대한 샘플을 적재하고, 조직을 단일 세포 현탁액으로 기계적으로 방해하는 것을 포함합니다. 마이크로 파이프토르는 약간의 지시와 연습으로 사용하기 쉬운 매우 유용한 실험실 도구입니다. 이 비디오에서 JoVE는 처음 사용자에게 실험실에서 마이크로 파이프를 사용하는 모든 팁, 트릭 및 사용 및 아웃을 보여줍니다.

Procedure

마이크로 파이프는 소량의 액체를 정확하게 측정하는 데 사용되는 중요한 기기입니다. 전 세계 수많은 연구 실험실에서 찾을 수 있는 이 연구 도구는 여러 모양과 크기로 제공됩니다. 그러나 마이크로 파이프터 간의 변화에도 불구하고 모든 액체는 마이크로 리터 양의 액체를 정확하게 측정하는 유사한 방식으로 작동합니다. 마이크로 파이프는 일회용 팁과 함께 사용되며, 마이크로 파이프토르와 같은 다양한 크기로 제공됩니다.

모든 마이크로 파이프는 액체를 흡입하고 분배하기 위한 동일한 기본 구성 요소를 공유합니다. 플런저는 파이펫터 의 상단에서 발견되며 우울하거나 방출되는 위치에 따라 액체를 끌어들이거나 추방하는 데 사용됩니다.

볼륨 조정 다이얼은 전송할 액체의 부피로 변경하는 데 사용됩니다.

볼륨 판독 디스플레이는 위에서 아래로 읽습니다. 사용되는 마이크로 파이프에 따라 숫자는 볼륨 측정의 다양한 크기의 순서를 반영합니다. 여기에서 370 마이크로리터에 대한 측정값을 볼 수 있습니다.

일회용 팁은 마이크로파이프터 의 바닥에 로드됩니다.

팁 꺼내기 버튼과 팁 배출 샤프트는 함께 작동하여 버려야 할 때 파이펫 팁을 배출합니다.

마이크로파이프터 제품군에는 정확한 볼륨 범위를 전송하는 다양한 크기의 여러 구성원이 포함됩니다.

여기에서 가족이 각각 전송할 수 있는 볼륨 범위에 따라 줄지어 있는 것을 볼 수 있습니다. 예를 들어, 파파 P-1000은 200-1000 μl 사이를 제공하며, 무리의 아기인 P-2는 0.2-2 μl 사이를 전달합니다.

각 가족 구성원은 플런저 상단의 숫자와 색상으로 인식할 수 있으며, 이는 그들이 누구인지, 얼마나 많은 볼륨을 편안하게 옮길 수 있는지를 분명하게 합니다.

때때로, 다른 마이크로 파이프 친척은 삼촌 P5000, 아줌마 P100, 사촌 P10과 같은 실험을 위해 나타납니다. 이 확장 제품군은 함께 0.2-5000 μl 의 부피에서 액체를 이동하는 데 도움을 줄 수 있습니다.

액체의 정확하고 정확한 전송을 보장하기 위해, 피펫 팁의 다른 크기, 종종, 항상, 인식의 용이성을 위해 색상 코딩및 피페토의 다른 크기에 사용된다. 전송된 볼륨과 관련하여 흰색 마이크로파이프터 팁은 일반적으로 0.5-2.5 μl 사이를 전송하며 노란색 팁은 1-200 μl, 파란색 팁은 200에서 1000 μl로 전송됩니다.

마이크로 파이프를 사용하는 경우 먼저 전송하려는 볼륨에 적합한 범위의 계측기를 선택합니다. pipettor의 올바른 선택은 성공하거나 실패한 실험의 차이를 의미할 수 있습니다.

먼저 다이얼을 원하는 볼륨으로 조정합니다. 포부 볼륨을 늘리려면 다이얼을 시계 반대 방향으로 돌려 원하는 볼륨을 1/3 회전으로 전달한 다음 최종 마크로 천천히 감소합니다. 볼륨을 줄이려면 다이얼을 시계 방향으로 돌립니다.

볼륨 판독의 이러한 숫자는 마이크로 파이프에 따라 크기가 다릅니다. 예를 들어 왼쪽에는 P1000이 370 μl을 읽는 것을 볼 수 있습니다. 수천 개의 장소에 는 0, 수백 개의 장소에 3, 그리고 수십 개의 장소에 7이 있습니다. 오른쪽에는 P200이 있으며, 159 μl과 수백 개의 장소에 1, 수십 개의 장소에서 5, 9를 표시합니다.

볼륨이 설정되면 팁을 선택합니다.

이제 손의 손바닥에 몸의 좁은 부분과 검지 손가락 위에 돌출이있는 수직 위치에 마이크로 파이프를 잡고,

라이트 압력을 사용하여 플런저를 첫 번째 정류장의 중간쯤에 누르거나 더 많은 저항을 느끼기 시작할 때.

이 동작은 파이펫 끝에서 공기를 대체합니다.

플런저를 우울하게 유지하여 1-3mm 사이의 팁을 샘플에 담급합니다. 플런저를 나머지 위치로 부드럽게 풀어 놓고 액체가 팁으로 이동할 때까지 1초 기다린 다음 샘플에서 파이펫을 제거합니다.

플런저가 나머지 위치로 다시 방출되면 변위 된 공기에 의해 생성된 진공으로 액체가 그려집니다.

팁을 검사하여 원하는 양의 액체가 작성되었으며 팁에 기포가 포함되어 있지 않은지 확인합니다.

시료를 원하는 용기로 옮길 때, 수신 용기의 내부 벽에 대해 10-45° 각도로 마이크로파이프를 고정하십시오. 이렇게 하면 끝에 거품이 형성되는 것을 방지할 수 있습니다. 액체를 1번 정지시로 가볍게 배출하고 액체를 분배하기 시작한 다음, 더 강한 저항을 적용한 다음 플런저를 두 번째 정류장까지 우울하여 끝에서 마지막 액체비트를 "날려버리십시오".

용기에서 팁을 완전히 제거한 다음 플런저를 나머지 위치로 다시 놓습니다.

이제 배출 버튼을 사용하여 파이펫 팁을 적절한 리셉터클에 조심스럽게 버리십시오. 배출 된 팁은 투사체 역할을 할 수 있으며 잠재적으로 동료 실험실 동료를 다치게 할 수 있기 때문에 무엇을하고 있는지에주의를 기울이십시오.

마이크로파이프터가 잘 작동하고 내부 볼륨 조정 메커니즘을 유지하려면 볼륨 다이얼을 마이크로파이프터의 특정 범위 위 또는 아래에 설정하지 마십시오. 계측기를 파손할 수 있습니다.

샘플 간의 교차 오염을 방지하려면 각 볼륨 전송 후 팁을 변경합니다.

마이크로 파이프터로 작업할 때 작업자 일관성이 중요합니다. 매끄러운 플런저 압력은 최적의 실험 결과를 얻을 것이다. 마지막으로, 마이크로 파이프를 최고 성능상태로 유지하려면 사용하지 않을 때항상 장비를 똑바로 세워 두십시오.

이제 마이크로 파이프토르 사용의 기본 작동 및 원칙을 다루었으니, 마이크로 볼륨 전송을 위한 몇 가지 일반적인 실험실 응용 프로그램과 이 기기의 변형에 대해 살펴보겠습니다.

마이크로 파이프는 다양한 실험을 위해 세포 현탁액을 배양 판으로 옮기는 데 자주 사용됩니다.

특수 한 팁과 함께, 마이크로 파이프를 사용 하 고 DNA 젤 전기 포 와 같은 분석 기술에 대 한 샘플을 주의 하 게 로드 하는 데 사용할 수 있습니다.

마이크로 파이프는 또한 단일 세포 현탁액을 얻기 위해 조직을 분해 역학할 수 있습니다.

공기 변위를 기반으로 작동하는 마이크로 파이프터의 변종도 실험실에서 찾을 수 있습니다.

리피터 파이펫을 사용하면 더 큰 양의 솔루션에 대한 초기 포부 후 더 작은 볼륨의 직렬 파이펫팅을 허용합니다. 파이펫은 동일한 양의 샘플을 많은 수의 리셉터클로 전송하는 데 정말 유용합니다.

멀티채널 파이펫은 일반적으로 20-200 μl 볼륨 범위에서 볼륨을 전송하는 데 사용되며 96개의 웰 플레이트의 전체 행을 적재하는 데 유용합니다.

마이크로 파이프토르에 대한 JoVE 소개를 방금 시청했습니다.

이 비디오에서는 마이크로 파이프터가 무엇이며 어떻게 작동하는지, 액체 볼륨 샘플을 흡습하고 분배하는 방법, 일부 안전 예방 조치 및 마이크로 파이프터의 다양한 응용 분야가 검토되었습니다. 보고 주셔서 감사하고 실험에 적합한 파이펫을 선택 기억하십시오.

Transcript

마이크로피펫터는 소량의 액체를 정밀하게 측정하는 데 사용되는 중요한 기기입니다. 전 세계 수많은 연구소에서 찾을 수 있는 이 연구 도구는 여러 모양과 크기로 제공됩니다. 그러나 마이크로피펫터의 다양성에도 불구하고 모든 마이크로파이펫터는 마이크로리터 양의 액체를 정확하게 측정하기 위해 유사한 방식으로 작동합니다. 마이크로피펫터는 일회용 팁과 함께 사용되며, 마이크로피펫터와 같이 다양한 크기로 제공됩니다.

모든 마이크로피펫터는 액체를 흡입하고 분주하기 위한 동일한 기본 구성 요소를 공유합니다. 플런저는 피펫터 상단에 있으며 액체가 눌리거나 방출되는 위치에 따라 액체를 빨아들이거나 배출하는 데 사용됩니다.

볼륨 조정 다이얼은 전송할 액체의 양을 변경하는 데 사용됩니다.

볼륨 판독값 디스플레이는 위에서 아래로 읽습니다. 사용된 마이크로파이펫터에 따라 숫자는 부피 측정에서 다른 크기의 순서를 반영합니다. 여기에서 370마이크로리터에 대한 측정값을 볼 수 있습니다.

일회용 팁은 마이크로파이펫터 바닥에 적재됩니다.

팁 배출 버튼과 팁 배출 샤프트는 함께 작동하여 폐기해야 할 때 피펫 팁을 배출합니다.

마이크로파이펫터 제품군에는 정확한 범위의 부피를 전달하는 다양한 크기의 여러 제품이 포함되어 있습니다.

여기에서 가족이 각각 전송할 수 있는 볼륨 범위에 따라 정렬된 것을 볼 수 있습니다. 예를 들어, Papa P-1000은 200-1000 ?l를 전달하는 반면, 무리의 새끼 P-2는 0.2-2 ?l을 전달합니다.

각 가족 구성원은 플런저 상단의 숫자와 색상으로 알아볼 수 있으며, 이는 그들이 누구인지, 얼마나 많은 부피를 편안하게 전달할 수 있는지 명확하게 합니다.

때때로, P5000 아저씨, P100 아줌마, P10 아줌마, P10 사촌과 같은 다른 마이크로피펫터 친척들이 실험을 위해 나타나기도 합니다. 이 확장된 제품군은 함께 액체를 0.2-5000 ?l의 부피로 이동시키는 데 도움이 될 수 있습니다.

액체의 정확하고 정밀한 이송을 더욱 보장하기 위해, 항상 그런 것은 아니지만 다양한 크기의 피펫 팁은 종종 인식이 용이하도록 색상으로 구분되며 다양한 크기의 피펫에 사용됩니다. 전달되는 부피와 관련하여, 흰색 마이크로피펫터 팁은 일반적으로 0.5-2.5μl, 노란색 팁은 1-200μl, 파란색 팁은 200-1000μl를 전송합니다.

마이크로파이펫터를 사용할 때는 먼저 전송하고자 하는 부피에 적합한 범위의 기기를 선택하십시오. 올바른 피펫 선택은 실험의 성공 또는 실패의 차이를 의미할 수 있습니다.

시작하려면 다이얼을 원하는 볼륨으로 조정하십시오. 흡입 볼륨을 높이려면 다이얼을 시계 반대 방향으로 돌려 원하는 볼륨을 1/3 바퀴 돌린 다음 최종 표시까지 천천히 줄입니다. 볼륨을 줄이려면 다이얼을 시계 방향으로 돌립니다.

부피 판독값의 이러한 숫자는 마이크로파이펫터에 따라 크기가 다르다는 점을 명심하십시오. 예를 들어, 왼쪽에서 P1000을 볼 수 있으며 370 ?l을 읽습니다. 천 자리에는 0, 백 자리에는 3, 10 자리에는 7이 있습니다. 오른쪽에는 P200이 있으며 159 μl을 표시하며 100 자리에 1, 10 자리에 5, 1 자리에 9가 있습니다.

볼륨이 설정되면 팁을 선택합니다.

이제 몸의 좁은 부분을 손바닥에 놓고 검지 손가락 위의 돌출부를

가벼운 압력으로 첫 번째 정지의 절반 정도에서 또는 더 많은 저항을 느끼기 시작할 때 플런저를 누르도록 마이크로파이펫터를 똑바로 세웁니다.

이 작업은 피펫 팁에서 공기를 대체합니다.

플런저를 누른 상태에서 팁을 1-3mm 사이로 담그십시오.amp르. 플런저를 다시 정지 위치로 부드럽게 해제하고 액체가 팁으로 이동할 때까지 1초 동안 기다린 다음 샘플에서 피펫을 제거합니다.

플런저가 다시 정지 위치로 해제되면 액체는 변위된 공기에 의해 생성된 진공 속으로 빨려 들어갑니다.

팁을 검사하여 원하는 양의 액체가 빨려 나갔는지, 팁에 기포가 없는지 확인합니다.

샘플을 원하는 용기로 옮길 때 마이크로피펫터를 10-45? 수용 용기의 내벽에 대한 각도. 이렇게 하면 팁에 기포가 형성되는 것을 방지할 수 있습니다. 액체를 배출하려면 플런저를 1번째 스톱으로 가볍게 누르고 액체를 분배하기 시작한 다음 더 강한 저항을 가하여 플런저를 두 번째 스톱까지 끝까지 눌러 ?불어내? 끝에서 마지막 액체 조각.

용기에서 팁을 완전히 제거한 다음 플런저를 정지 위치로 다시 놓습니다.

이제 배출 버튼을 사용하여 피펫 팁을 적절한 용기에 조심스럽게 폐기합니다. 배출된 팁은 발사체로 작용할 수 있으며 잠재적으로 동료 실험실 동료에게 부상을 입힐 수 있으므로 자신이 하는 일에 주의하십시오.

마이크로피펫터가 잘 작동하도록 하고 내부 부피 조정 메커니즘을 유지하려면 부피 다이얼을 마이크로피펫터의 특정 범위 위나 아래로 돌리지 마십시오. 악기가 파손될 수 있습니다.

시료 간의 교차 오염을 방지하려면 각 부피 이송 후에 팁을 교체하십시오.

작업자의 일관성은 마이크로파이펫터로 작업할 때 중요합니다. 부드러운 플런저 압력은 최적의 실험 결과를 얻을 수 있습니다. 마지막으로, 마이크로파이펫터를 최상의 상태로 유지하려면 기기를 사용하지 않을 때는 항상 똑바로 세워 보관하십시오.

이제 마이크로피펫터 사용의 기본 작동 및 원리에 대해 다루었으므로 마이크로볼륨 전달을 위한 몇 가지 일반적인 실험실 응용 분야와 이 기기의 변형에 대해 논의해 보겠습니다.

마이크로피펫터는 다양한 실험을 위해 세포 현탁액을 배양 플레이트로 옮기는 데 자주 사용됩니다.

특수 팁과 함께 마이크로피펫터를 사용하여 DNA 겔 전기영동과 같은 분석 기법을 위한 샘플을 신중하게 로드할 수 있습니다.

마이크로피펫터는 또한 단일 세포 현탁액을 얻기 위해 조직을 기계적으로 분해하는 데 사용할 수 있습니다.

공기 치환을 기반으로 작동하는 마이크로피펫터의 변형도 실험실에서 찾을 수 있습니다.

리피터 피펫은 더 큰 부피의 용액에 대한 초기 흡입 후 더 작은 부피의 연속 피펫팅을 가능하게 합니다. 피펫은 동일한 부피의 샘플을 많은 수의 용기로 옮기는 데 매우 유용합니다.

위치

멀티채널 피펫은 일반적으로 20-200μl 부피 범위의 부피를 전달하는 데 사용되며 96웰 플레이트의 전체 열을 로드하는 데 유용합니다.

당신은 방금 마이크로피펫터에 대한 JoVE 소개를 시청했습니다.

이 비디오에서는 마이크로파이펫터의 정의 및 작동 원리, 액체 부피 시료를 흡인 및 분주하는 방법, 몇 가지 안전 예방 조치 및 마이크로파이펫터의 다양한 Application에 대해 검토했습니다. 시청해 주셔서 감사드리며, 실험에 적합한 파이펫을 선택하신 것을 잊지 마십시오.

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마이크로피펫터 연구 도구 액체 측정 마이크로리터 수량 일회용 팁 플런저 부피 조정 다이얼 부피 판독 표시 측정 마이크로피펫터 제품군 정확한 부피 범위 Papa P-1000

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