일반 실험 기법

원심분리기는 전 세계 거의 모든 연구 실험실에서 사용되는 기기입니다. 원심분리는 원심분리기를 사용하여 복잡한 혼합물의 성분을 분리하는 공정입니다. 실험실 샘플을 매우 빠른 속도로 회전시킴으로써 주어진 혼합물의 구성 요소에 원심력이 가해지고, 이로 인해 더 밀도가 높은 입자는 회전축에서 멀어지고 가벼운 입자는 회전축으로 이동합니다. 이러한 입자는 튜브 바닥에서 펠릿으로 알려진 것으로 침전될 수 있으며, 이 분리된 표본 또는 나머지 용액인 상층액을 추가로 처리하거나 분석할 수 있습니다. 이 비디오는 학생에게 원심분리의 기본 원리와 기기의 기본 작동을 소개하기 위한 것입니다. 예를 들어, 분당 회전수 또는 RPM의 원심분리 속도는 로터 크기와 무관한 원심분리 크기의 측정으로 상대 원심력(RCF)과 대조됩니다. 개념 및 기본 사용 외에도 원심분리와 관련된 안전 예방 조치와 존재하는 원심분리기 및 원심분리기 로터의 유형에 대해 논의합니다.

마이크로 플레이트 판독기는 다양한 실험을 동시에 수행하고 측정할 수 있는 다중 모달 기기입니다. 마이크로플레이트 판독기는 흡수, 형광 및 발광 측정을 할 수 있습니다. 멀티웰 플레이트는 마이크로 플레이트 판독기에게 필수적이며 많은 실험을 한 번에 수행할 수 있습니다. 분석 유형에 관계없이 플레이트 판독기의 실험은 표준 곡선을 사용하여 실험 값을 결정합니다. 이 곡선은 알려진 농도의 샘플을 사용하여 가장 적합한 곡선 또는 표준 곡선의 라인을 생성합니다. 실험값은 곡선으로 추정되거나 선형 회귀에서 방정식을 사용하여 계산됩니다. 다중벽 플레이트에서 실행되는 표준 및 샘플 외에도 양수 및 음수 컨트롤과 함께 공백이 분석에서 올바르게 작동하는지 확인하는 데 사용됩니다. 다중 플레이트 판독기는 단백질, 유전자 발현 및 반응성 산소 종 및 칼슘 플럭스와 같은 다양한 대사 과정을 정량화하는 데 사용됩니다.

용액은 거의 모든 생물학적 연구 응용 분야에서 어느 정도 활용됩니다. 따라서 이를 측정하고 조작하는 방법을 이해하는 것은 모든 실험에 필수적입니다. 이 비디오에서는 솔루션 준비에 대한 개념이 소개됩니다. 용액은 용매에 용해된 용질로 구성되어 분자 물질의 균일한 혼합물을 산출합니다. 솔루션은 일반적으로 구성 요소 및 해당 농도에 의해 식별됩니다. 농축 된 솔루션은 직렬 희석과 같은 다양한 방법을 통해 희석됩니다. 이 비디오는 또한 솔루션의 정확한 준비를위한 기초를 마련한다. 예를 들어 비디오는 적절한 체적 컨테이너를 사용하여 볼륨을 정확하게 측정하는 방법과 반월상 연골이 있을 때 볼륨을 읽는 방법을 검토합니다. 그런 다음 볼륨 측정을 위한 일부 응용 프로그램이 표시됩니다. 겔 전기 흡수는 농축 재고 솔루션의 병렬 희석뿐만 아니라 퍼센트 중량 볼륨 솔루션의 준비를 필요로하는 일반적으로 사용되는 실험실 절차입니다. 단백질 수량에 표준 곡선을...

솔루션을 성공적으로 만들 수 있는 능력은 거의 모든 생물학적 및 화학 실험에서 수행되는 기본 실험실 기술입니다. 용액은 용매로 알려진 벌크 액체에 용해된 솔루트의 균질한 혼합물이다. 해결책은 그들의 단호한 농도에 의해 기술될 수 있습니다, 용액의 단위 당 존재하는 얼마나 많은 solute의 측정. 이 비디오에서는 생물학적 응용 분야에 대한 수성 또는 수성 솔루션을 만드는 방법에 대한 단계별 절차가 제시됩니다. 비디오는 지정된 솔루션 볼륨에 필요한 solute양을 계산하고 측정하는 방법에 대해 설명합니다. 정제수에서 솔루트를 용해시키고 용액의 pH를 조정하는 방법이 도시되어 있다. 원하는 부피에 도달하기에 충분한 수량(QS)을 적절히 첨가하여 용액을 살균하는 방법을 논의하기 전에 반월상 연골에 대하여 입증된다. 용액 을 만드는 응용 프로그램은 인산염 완충식염(PBS)과 같은 여러 일반적으로 사용되는 생물학적 용액의 논의와 생물학적 연구에서의 사용에 대한...

마이크로 파이프는 액체 용액의 마이크로 볼륨을 전송하는 데 사용되는 일반적인 실험실 기기입니다. 마이크로파이프는 0.5~5000μl 사이의 정확한 체적 이동을 위해 다양한 크기로 제공되며 각 계측기는 세 가지 크기의 일회용 팁 중 하나를 필요로 합니다. 마이크로피펫토르는 파이펫 샤프트에서 공기를 대체하여 액체를 생성된 진공으로 끌어들이도록 합니다. 그들의 사용은 다양한 세포 기반 분석법에 대한 세포 현탁액을 전송하고, 다른 분석 기술에 대한 샘플을 적재하고, 조직을 단일 세포 현탁액으로 기계적으로 방해하는 것을 포함합니다. 마이크로 파이프토르는 약간의 지시와 연습으로 사용하기 쉬운 매우 유용한 실험실 도구입니다. 이 비디오에서 JoVE는 처음 사용자에게 실험실에서 마이크로 파이프를 사용하는 모든 팁, 트릭 및 사용 및 아웃을 보여줍니다.

세로로지 피펫은 실험실에서 1ml 미만에서 최대 50ml까지 밀리리터 양의 액체를 전송하는 데 자주 사용됩니다. 파이펫은 멸균, 플라스틱 및 일회용 또는 살균 가능한 유리 및 재사용 가능할 수 있습니다. 두 종류의 파이펫은 액체의 포부와 경륜의 시대를 위해 파이펫 보조를 사용합니다. 다양한 실험용 필기용에 동일한 파이펫 보조장치와 함께 다양한 크기의 파이펫을 사용할 수 있습니다. 예를 들어, 세로지학적 파이펫은 화학 용액 또는 세포 현탁액을 혼합하거나, 리셉터클 간에 액체를 옮기거나, 다른 밀도의 신중하게 계층화 시약을 하는 데 유용합니다. 액체가 흡인되고 분배되는 수준에 주의를 기울이면, 혈청 피펫은 실험실에서 정확한 밀리리터 양의 솔루션을 전송하는 데 유용한 도구가 될 수 있습니다. 이 비디오는 혈청 학적 파이펫에서 볼륨을 읽을 수있는 방법, 파이펫 원조가 작동하는 방법 및 세로지학적 파이펫을 사용하기위한 다양한 응용 프로그램에 대해 설명합니다.

1854년 로버트 분슨(Robert Bunsen)이 선정하고 공동 설계한 분젠 버너는 뜨겁고 그을음이 없는 비조명불꽃을 생산하는 일반적인 실험실 장비입니다. Bunsen 버너는 연소 전에 중앙 배럴에 가스와 산소를 혼합하여 불꽃을 일으킬 수 있도록 합니다. 분젠 버너를 조작하면 화염의 크기와 온도를 모두 제어할 수 있습니다. 다른 용도 중, 분젠 버너 불꽃의 열은 화염 위의 공간을 가열하고 그 아래 쿨러 공기에서 공기 중의 미립자를 들어 올리는 대류 전류를 만드는 데 사용할 수 있습니다, 이 작업 영역멸을 유지. 화염으로 작업하려면 추가주의가 필요합니다. 항상 분젠 버너를 점화하기 전에 느슨한 머리, 의류 또는 액세서리를 확보하고 항상 소화기 및 / 또는 화재 담요와 같은 적절한 안전 장비를 손에 가지고 있어야합니다. Bunsen 버너를 사용하는 방법과 손에 어떤 안전 장비를 사용하는 방법을 이해하는 데 시간이 걸리면 안전과 자신감을 가지고이 유용한 실험실 도구를 작동 할 수...

후드는 다양한 유형의 실험실 실험을 위한 보호 인클로저 역할을 하는 일반적인 종류의 기기입니다. 그들은 환경으로부터 실험 샘플을 보호하고 유해하거나 전염성있는 샘플로부터 연구원을 보호하는 역할을합니다. "후드"는 라미나르 플로우 벤치, 연기 후드뿐만 아니라 조직 배양 후드 또는 생물 안전 캐비닛을 포함 할 수있는 용어입니다. 모든 후드는 라미나르 흐름의 원리에 따라 작동하며 창 새시와 보호 유리 장벽, 비 다공성 작업 표면, 공기 섭취 및 배기 가스를 포함하여 동일한 기본 구성 요소를 가지고 있습니다. 사용된 후드의 유형은 실험에 따라 선택되어야 합니다. 예를 들어, 연기 후드는 일반적으로 실험 환경이 아닌 사용자를 보호합니다. 대조적으로, 라미나르 플로우 벤치는 실험을 보호하지만 사용자는 보호하지 않으므로 위협이되지 않을 때 실험 샘플을 멸균상태로 유지할 수 있습니다. 사용자와 실험 모두 보호되어야 하는 경우 조직 배양 후드 또는 생물 안전 캐비닛을 사용할 수 있습니다.

분석 균형은 과학 실험실에서 장비의 일반적인 조각이다. 이 고도로 정밀한 계측기는 그램의 만십,000분의 1까지 측정할 수 있습니다. 트리플 빔 밸런스는 세 라이더 빔에 카운터웨이트를 사용하여 팬의 시료의 균형을 맞추는 스케일 유형입니다. 반면, 현대 분석 저울은 복잡한 전자 센서 시스템을 사용하여 물질을 정확하게 매스합니다. 분석 균형은 매우 민감하기 때문에 공기 전류가 측정을 방해하지 않도록 하는 초안 쉴드가 있는 경우가 많습니다. 계량 할 때 계량 보트 또는 계량 용지가 계량되는 물질을 잡고 계량 팬을 보호하는 데 사용됩니다. 물질을 계량하기 전에 분석 저울은 계량 보트를 빼거나 용지의 무게를 재량하기 위해 타르트됩니다. 타링은 0을 읽기 위해 스케일을 다시 설정하는 것을 말하며 물질을 정확하게 계량할 수 있습니다. 화학 물질 계량 외에도 분석 균형은 동물이나 곤충, 초원심 분리 실험에서 원심분리관에 사용됩니다.

분광계는 과학 연구에서 일상적으로 사용되는 기기입니다. 분광측법은 분광광계를 이용하여 시료를 통해 빛의 빔을 전달하여 화학 물질이 빛을 얼마나 흡수하는지를 정량적 측정한다. 이 비디오에서는 분광측계의 구성 요소 외에도 분광측기의 기본 개념을 흡기, 흡광도 및 맥주 램버트 법칙을 검토합니다. 이러한 개념은 자외선 및 가시 범위에서 빛을 흡수 할 수있는 용액에서 solute의 농도를 결정하는 방법에 대한 기초를 제공합니다. 또한, 원하는 파장에서 시료의 흡광도를 비우고 측정하는 방법에 대한 지침을 포함하여 분광계를 작동하는 방법에 대한 절차가 시연된다. 비디오는 또한 Aalyte 농도의 측정을 위한 표준 곡선을 만드는 방법을 다룹니다. 생물학적 연구에서 분광계의 여러 응용 분야는 세포 밀도 측정 및 화학 반응 비율의 측정과 같은 논의됩니다. 마지막으로, 마이크로볼륨 분광계는 단백질과 핵산의 품질과 양을 측정하는 데 장점이 뿐만 아니라 도입된다.

조직학은 일반적으로 가벼운 현미경의 사용에 의해 원조되는 세포와 조직의 연구입니다. 조직학적 시료의 제조는 계획된 염색 기술 또는 기타 다운스트림 응용 프로그램을 포함하는 예상 후처리뿐만 아니라 크기 및 경도와 같은 샘플의 고유 특성에 따라 크게 달라질 수 있습니다. 이 비디오에 설명된 바와 같이, 시편 제제는 전형적으로 사망 시 세포에 의해 방출되는 자연발생효소에 의한 시료의 분해를 방지하기 위한 고정 절차로 시작한다. 일단 수정되면 샘플을 충분히 지원할 수 있는 임베딩 매체에 샘플을 배치합니다. 가장 일반적으로 이것은 파라핀 왁스이지만 글리세린 기반 동결 매체 및 한고와 같은 다른 물질도 단면화 중에 시료를 둘러싸고 있습니다. 단면은 사용자가 몇 미크론에서 두께에 몇 밀리미터에 이르기까지 얇은 조각으로 샘플을 면도 할 수 있도록 마이크로 톤 또는 다른 절단 장치에서 일어난다. 절단되면, 섹션은 유리 슬라이드에 장착하고 현미경에 이미지되기 전에 샘플의 특정 기능을...

형광 현미경 검사는 광 현미경 검사법의 돋보기 와 형광의 시각화를 결합하는 매우 강력한 분석 도구입니다. 형광은 형광소로 알려진 형광 분자에 의해 광파장의 작은 범위의 흡수및 방출을 포함하는 현상입니다. 형광 현미경검사는 강력한 광원, 특수 필터 및 형광을 시료에 표시하는 수단을 추가하여 기본 광 현미경과 함께 수행됩니다. 이 비디오는 형광 의 메커니즘, 스토크의 교대 및 광 표백메커니즘을 포함하여 형광 현미경 검사법의 기본 원리를 설명합니다. 또한 형광태그 항체 및 단백질, 핵산 형광염료의 사용, 시편에 자연형광 단백질의 첨가를 포함하는 시료를 형광으로 표시하는 수많은 방법의 예를 제공한다. 크세논 또는 수은 광원, 광 필터, 이색 거울 및 시료를 비추기 위한 셔터의 사용을 포함한 형광 현미경의 주요 성분이 모두 설명되어 있다. 마지막으로, 형광 현미경 검사법을 위한 많은 응용의 몇몇의 예는 도시됩니다.

가벼운 현미경은 많은 다른 필드에 있는 연구원이 견본을 천 배 의 그들의 원래 크기만큼 확대하기 위하여 이용된 계기입니다. 가장 간단한 형태로, 샘플을 확대하는 투명 렌즈와 빛을 비추는 광원으로 구성됩니다. 그러나 대부분의 가벼운 현미경은 훨씬 더 복잡하고 현미경 자체의 몸 내및 목표 및 안구와 같은 구성 요소에서 모두 엄격하게 제어 된 치수를 가진 수많은 미세 조정 렌즈가 있습니다. 이 비디오에서는, 빛 현미경의 주요 구성 요소가 기술되고 그들의 사용 및 기능은 상세히 설명됩니다. 배율, 초점 및 해상도의 기본 원칙도 도입됩니다. 기본 광 현미경 작업은 시료에 빛을 가져오고 광원이 최상의 품질의 이미지를 생성하기 위해 올바른 강도, 방향성 및 형상을 보장하는 것으로 시작됩니다. 다음으로, 샘플은 제대로 확대되어야하며 관심 영역을 보기 위해 초점을 맞추어야합니다. 얼룩진 세포나 스테인드 되지 않은 세포 및 조직의 보기, 표본의 작은 세부 사항을 해결하고, 심지어...

극심한 감기를 이용한 실험실 샘플, 표본 및 시약의 보존은 생물 의학 연구 실험실에서 일상적으로 수행됩니다. 이 비디오는 실험실 샘플을 차갑게 유지하는 몇 가지 방법에 대해 설명하고 각 실험 요구 사항에 사용할 올바른 냉각 방법을 설명합니다. 예를 들어, 얼음과 드라이 아이스와 같은 냉각제는 일반적으로 실험 중에 샘플을 차갑게 유지할 때 사용됩니다. 이 비디오에서는 가장 일반적으로 사용되는 냉각제의 물리적 특성뿐만 아니라 작업시 안전 주의 사항을 설명합니다. 실험 사이에 샘플을 차갑게 유지하는 데 있어 실험실 급 냉장고와 냉동고를 포함한 냉각 장비를 사용하여 장기간 시료를 보존할 수 있습니다. 또한 이 비디오에서 논의되는 것은 일반적으로 이용 가능한 실험실 냉각 장비에 저장할 수 있는 샘플 및 시약의 유형입니다. 마지막으로, 극저온 보존의 개념은 조직, 세포 및 생체 분자가 영하의 온도로 냉각되어 모든 시료 분해 생물학적 활성을 효과적으로 중지하는 과정으로 도입됩니다. 얼음...

많은 실험적 해석이 실온(RT; ~20-25°C)에서 수행되지만, 실험이나 실험의 일부가 온도 조절을 요구하는 것은 드문 일이 아닙니다. 이 비디오는 과학자가 "따뜻하게 유지"할 수있는 다른 이유와 온도에 대해 설명합니다. 예를 들어, 언젠가 세포는 체온(~37°C)에 가까운 환경에서 배양되어야 하며, 단백질 구조(>56°C) 또는 시약 및 용액을 가열해야 합니다(~100°C). 또한 온도계를 처리하고 교반 액체의 온도를 측정하는 적절한 방법입니다. 실험실의 온도를 조절하는 방법은 항상 명확하지 않기 때문에 이 비디오는 각 상황에서 어떤 종류의 장비를 선택할 수 있는지에 대해서도 설명합니다.