Name: 통각 행동의 변화를 측정하는 조작 적 구강 안면 통증 평가 장치 (OPAD)의 사용 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 20 s
Description: 학습하세요 조작적 구강안면통증평가장치(OPAD)를 이용해 설치류의 통각 행동을 측정하는 방법을. 온도 조절 자극과 보상-갈등 패러다임을 활용하여 임상적으로 관련성 높은 통증 데이터를 획득할 수 있습니다.

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약물 남용에 대한 국립 연구소, NIH 교부금 5R44DA026220-03

여기 OPAD의 사용 (Stoelting 주 우드 데일, 일리노이)은 캡사이신을 사용하여 예를 들어 실험에 대한 일반적인 용어에 설명되어 있습니다. 운영자는 많은 옵션과 고통 모델 비록 가진 수많은 실험을 프로그래밍 할 수있는 자유를 가지고 있습니다. 예를 들어, 진통제의 투여가 만성 수축 부상 생산과 염증과 같은 통각 조치 6,3,4,5,7 및 기타 통증 모델을 줄일 수는 통각 행동에게 3,9 증가했다. 이 모델은 다음과 같은 프로토콜에 쉽게 적응할 수 있습니다. 모든 실험, maleSprague-Dawley 계 흰쥐 (250~300g, 찰스 리버, 롤리, NC)를 사용 하였다. 이들은 22 쌍에 보관 하였다 ° C 온도 및 일반 12 시간 조명 / 어두운 사이클 (ON 오전 6시부터 오후 6시까지 등)와와 금식 경우를 제외하고 음식과 물을 무료로 이용하실 수 있었다 31 % 습도 조절 객실을 보유하고 있습니다. 행동 세션은 가벼운 단계에서 수행되었다. 이러한 시설 AAALAC 인증되었고 모든 절차가 승인 된 B플로리다 IACUC의 Y 대학. 1.Training 및 초기 세션 <ol><li> 음식을 빨리 설치류 각 OPAD 세션 전날 밤에 (예 : 15 + / -이 실험을 위해 1 시간). </li><li> 설치류는 최초의 비 혐오 온도 (예 : 33-37 ° C)에서 일관된 동작이 관찰 될 때까지 훈련해야합니다. 일반적으로 약 6 세션 (3 회 두 주 동안 주)는 각각 세션 당 600 ~ 1,000 약 또는 2,000 시간을 핥고 마우스 또는 쥐를 훈련하기에 충분합니다. </li></ol> 2. 예비 시험 준비 및 캡사이신 치료 <ol><li> 털이 설치류가 최고입니다 이것이 가능하지 않은 경우, 모든 조작 적 절차, 설치류 1-2 일 정확한 여부를 테스트하기 전에 제거 (구강 만하지 vibrissae 패드 머리 /이 설치류의 탐색에 영향을 가지고 같은 수염) 자신의 얼굴, 머리카락을 가지고 있어야합니다 행동의 기록. </li><li> 구강 머리 온도 절연체 역할을하며 더위와 추위 덜 통각 있습니다. 머리를 제거하려면, 쥐를 마취눈 연고를 추가, 물로 세척 한 후 2-4 분 기다립니다, 헤어 제거 크림을 적용 어선 뺨 머리를 면도. 전체 방법론 Neubert 등. 3을 참조하십시오. </li><li> 시험 날에 동물을 마취 (예 : 1-2.5 % isoflurane을 흡입)과 마르지 않도록하고 눈에 점점에서 모든 국소 약물 치료를 유지하기 위해 두 눈에 opthalamic 수의사 연고를 배치합니다. </li><li> 멸균 면봉으로 노출 된 뺨에 양측 캡사이신 크림 (0.1 %)을 적용합니다. 5 분을 기다립니다. 따뜻한 물 (약 40 ° C에서)에 적신 거즈 패드로 크림을 닦아냅니다. 알코올 면봉으로 뺨을 닦아 30 분 타이머를 설정합니다. </li><li> 케이지에 반환하기 전에 마취에서 회복하는 설치류 충분한 시간을 허용합니다. 이 케이지 침구 구토물이기도를 막는 것을 방지하기 위해 흉골 자세에서 머리를 올릴 수있을 때까지 기다립니다. </li></ol> 3. 프로토콜 및 실험 OPAD 시스템 프로그래밍 <ol><li> 주요 혁신 OF 행동 테스트에 OPAD 시스템이 구강 안면 소프트웨어, 사용자가 프로그램 할 수 있으며 새로운 실험을 만들 ANY-미로 (Stoelting 주 우드 데일, IL) 기반의 시스템입니다. </li><li> 간단한 실험을 프로그래밍하는 방법의 일반적인 예는 아래와하지만, 캡사이신 이외의 온도 램핑 프로토콜과 통증 모델에 대한 많은 옵션을 사용할 수 있습니다. </li><li> 실험은 어느 시점에서 설계 및 저장할 수 있습니다. OPADs 및 오픈 소프트웨어를 켭니다. 주변 소음 제어하는​​ 화이트 노이즈를 켭니다. &quot;파일&quot;에서 새로운 실험을 선택합니다. 부제목 아래의 &quot;프로토콜&quot;이름 프로토콜을 멀게 할 것인지 여부를 선택합니다. </li><li> &quot;OPAD 케이지&quot;선택 &quot;새 OPAD 케이지&quot;아래에서 &quot;연결된 모든 OPAD 케이지를 추가합니다.&quot; &quot;출력&quot;선택 &quot;온도 컨트롤러&quot;아래에서 &quot;열 요소&quot;. 온도 (예를 들어, 중립적 인 33-37 ° C)부터 조정합니다. </li><li> 필요한 경우, 아래에 올렸 온도 조정 &quot;OPAD 온도주기를.&quot; 중립에서 온도를 변경하려면여기까지 차갑게 조정에 뜨거운. </li><li> &quot;1&quot;은 &quot;로 온도를 설정 (° C)&quot;= 45 &quot;램프 시간&quot;= 30 초, 그리고 = 3 분 &quot;에 대한 값으로 남아 있습니다.&quot; &quot;2&quot;, 33, 30 초, 3 분. &quot;3&quot;, 7, 60 초, 3 분. &quot;4&quot;, 33, 60 초, 3 분. &quot;시간 후에 다음 기간&quot;에 대한 확인란을 선택하고 3 분을 선택합니다. </li><li> 아래의 &quot;필드&quot;는 주제에 대한 추가 노트를 추가 할 수 있습니다. 예를 들어, &quot;새 필드&quot;를 선택하여 동물 ID에 대한 영역을 만들고 그 이름을 변경 &quot;동물 ID.&quot; 그런 다음, &quot;동물&quot;을 선택 &quot;텍스트&quot;및 &quot;동물 ID로이 필드를 사용하십시오.&quot; </li><li> &quot;무대&quot;에서, OPAD가 자동으로 &quot;첫 번째 단계.&quot;을 설정합니다 시험 기간의 기간을 설정하고 필요한 경우 단계 이름을 지정합니다. 이 램핑 세션, 18 분으로 설정. </li><li> 단계에 참고 : 대부분의 실험, 행동 세션이 20 분 이상 지속하지 않아야합니다. 그 후, 설치류가 물리게된다. 며칠 동안 실험을 위해 추가 단계는 데이터 분석을 간단하게하기 위해 매일 추가 할 수 있습니다. </li&gt; <li> 아래의 &quot;계산&quot; &quot;새 계산&quot;을 선택하고 &quot;L / F&quot;비율을 얼굴 / 핥기에 대한 이름을 지정하십시오. 표시된 섹션에 대답 조정 &quot;아래의 영역에서 계산을 입력&quot;, &quot;릭 : 활성화 / 문의 수 : 정품 인증 수를.&quot; </li><li> 간단한 데이터 분석을위한 기간을 만들려면 &quot;분석&quot;을 선택하고 &quot;새 기간&quot;. 쓰기 0을위한 : 이름 한 &quot;33 ° C를&quot;을위한 박스 선택 &quot;에서 시작&quot;를 &quot;이 기간은 모든 단계에서 동일하다&quot;, &quot;종료 시간 :&quot;3 분을 넣어. </li><li> 각 기간에 대해 위의 단계를 반복합니다. 이름 : &quot;램프 33-45 ° C.&quot; 3 분 :에서 시작됩니다. 3.5 분 :에서 끝납니다. &quot;45 ° C&quot;, 3.5 분, 6.5 분. &quot;램프 45-33 ° C&quot;, 6.5 분, 7 분. &quot;33 ° C&quot;, 7 분, 10 분. &quot;램프 33-7 ° C&quot;, 10 분, 11 분. 7 &quot;° C&quot;, 11 분, 14 분. &quot;램프 7-33 ° C&quot;, 14 분, 15 분. &quot;33 ° C&quot;, 15 분, 18 분. </li><li> 저장 및 프로토콜 이름을 지정합니다. 참고 : 저장된 프로토콜은 새로운 실험에 다시 사용할 수 있습니다. </li></ol> 4. 분석을 실행 <ol><li> 룸 테 준비OPAD 병 mperature 보상 혼합물과 장소. 물을 2:1 비율 : 자당이나 사카린 용액을 사용할 수도 있지만, 가당 연유는 잘 작동합니다. </li><li> 장소 액체 캐치 트레이, 플렉시 유리 케이지, 금속 바닥 OPAD 컴퓨터에 거슬리는. 케이지에 배선을 연결합니다. </li><li> 에 장소 보상 병 서서는 주둥이 설치류에 의해 도달 할 수 있도록 조정합니다. 처음 병이 나은 다음 얼굴 연락처를 생산 철회 케이지 더 뒤로 배치 할 수 있습니다. </li><li> OPAD 소프트웨어에 실험을로드합니다. 테스트 할 동물의 수를 추가합니다. 소호 &quot;실험&quot;에서 &quot;제목&quot;을 추가 한 다음 치료 그룹 (캡사이신 및 제어)를 추가합니다. 각 그룹에있는 동물의 수를 추가합니다. </li><li> 부제목 &quot;테스트&quot;아래의 &quot;동물 치료 및 데이터&quot;를 선택합니다. 치료의 문자 (A, B, C 등), 동물의 ID를 추가합니다. 상자들은 이제 화면에 지정된 동물 ID가 있어야합니다. </li><li> OPAD 상자에서 버튼을 누릅니다. 이됩니다적당한 온도에 thermodes을 조정합니다. 표시등이 주황색으로 갈 때, 설치류 내부를 놓고 버튼을 다시 누르십시오. 캡사이신 크림을 닦아 후이 실험 쥐 30 분 시작됩니다. </li><li> 녹색 표시등이 켜집니다. 쥐의 구강,하지 vibrissa, 핥아 수있는 지역에 thermodes과 접촉을해야하므로 병이 상자는 거리를 조정합니다. 적절한 조정이 연락처에 대한 설명 오렌지 박스 위에 사슬을위한 견고한 빨간색 상자가 발생합니다. </li><li> 보상 병의 적절한 배치 분석을 위해 매우 중요합니다. 병이 너무 가까우면 쥐도 접촉하지 않고 핥아 것 또는 여러 릭은 하나의 (대신 단단한 상자 감싸고 대한 윤곽이 빨간색 상자로 표시)로 표시되도록 보상 병에 그것의 코를 만져. </li><li> OPAD은 톤 실험을 알려드립니다 통해 테스트 세션이되면. 그 케이지에 쥐를 반환합니다. 다른 설치류 테스트 할 경우 나중에 상자가 indica의 것테의 동물 ID. 실험이 완료 될 때까지 필요에 따라 반복 4.5-4.7 단계를 반복합니다. </li></ol> 5. 분석, 그래프 및 OPAD 소프트웨어를 사용한 데이터의 통계 분석 <ol><li> 부제목 아래의 &quot;결과&quot;는 텍스트, 그래프, 또는 통계 분석보고를 확인할지 여부를 선택합니다. </li><li> &quot;그래프 보고서 설정&quot;상자에서 검사 할 변수를 선택합니다. 예를 들어, &quot;계산 결과&quot;에서 &quot;L / F&quot;확인란을 선택합니다. </li><li> &quot;기간&quot;으로 &quot;X 축 쇼&quot;를 지정하고 &quot;에 대해 서로 다른 시리즈보기&quot; &quot;치료.&quot; &quot;보고서보기&quot;를 선택합니다. 저장, 인쇄, 복사, 또는 보고서를 이메일로 전송이 시간에 수행 할 수 있습니다. 필요한 경우 특정 데이터 포인트를 그룹화 단계 아래에있는 상자에서 제외 될 수 있습니다. </li><li> 소호에서 &quot;데이터&quot;는 필요한 경우 스프레드 시트 형태의 실험에서 원시 데이터의 조정 목록입니다. 참고 : 모든 데이터가 이제 저장되고 조작하고 나중에 분석 할 수 있습니다. </li></ol> 6. 정리 <ol><li> 컴퓨터를 종료하고 케이지 배선을 제거합니다. 세척하고, 화격자 상자, 병, 액체 트레이를 소독. 이러한 구성 요소는 손이나 식기 세척기로 세척 될 수있다. </li></ol>

<ol><li>Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+pain%3A+progress+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of pain: progress and challenges.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).</li>
<li>Vierck, C. J., Hansson, P. T., Yezierski, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+pre-clinical+pain+assessment%3A+are+we+measuring+the+same+thing%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Clinical and pre-clinical pain assessment: are we measuring the same thing.</a> Pain. , 135-137 (2008).</li>
<li>Neubert, J. K., Widmer, C. G., Malphurs, W., Rossi, H. L., Vierck, C. J., Caudle, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+novel+thermal+operant+behavioral+assay+for+characterization+of+orofacial+pain+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Use of a novel thermal operant behavioral assay for characterization of orofacial pain sensitivity.</a> Pain. 116, 386-395 (2005).</li>
<li>Nolan, T. A., Hester, J., Bokrand-Donatelli, Y., Caudle, R. M., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptation+of+a+novel+operant+orofacial+testing+system+to+characterize+both+mechanical+and+thermal+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Adaptation of a novel operant orofacial testing system to characterize both mechanical and thermal pain.</a> Behav. Brain Res. 217, 477-480 (2011).</li>
<li>Rossi, H. L., Vierck, C. J., Caudle, R. M., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cold+sensitivity+and+thermal+preference+using+an+operant+orofacial+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pain%22%5BJournal%5D)">Characterization of cold sensitivity and thermal preference using an operant orofacial assay.</a> Mol. Pain. 2, 37(2006).</li>
<li>Anderson, E. M., Valle-Pinero, A. Y., Suckow, S. K., Nolan, T. A., Neubert, J. K., Caudle, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphine+and+MK-801+administration+leads+to+alternative+N-methyl-d-aspartate+receptor+1+splicing+and+associated+changes+in+reward+seeking+behavior+and+nociception+on+an+operant+orofacial+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Morphine and MK-801 administration leads to alternative N-methyl-d-aspartate receptor 1 splicing and associated changes in reward seeking behavior and nociception on an operant orofacial assay.</a> Neuroscience. 214, 14-27 (2012).</li>
<li>Anderson, E. M., Neubert, J. K., Caudle, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+changes+in+reward-seeking+following+morphine+withdrawal+are+associated+with+altered+N-methyl-d-aspartate+receptor+1+splice+variants+in+the+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Long-term changes in reward-seeking following morphine withdrawal are associated with altered N-methyl-d-aspartate receptor 1 splice variants in the amygdala.</a> Neuroscience. 223, 45-55 (2012).</li>
<li>Neubert, J. K., Rossi, H. L., Malphurs, W., Vierck, C. J., Caudle, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+between+capsaicin-induced+allodynia+and+hyperalgesia+using+a+thermal+operant+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Differentiation between capsaicin-induced allodynia and hyperalgesia using a thermal operant assay.</a> Behav. Brain Res. 170, 308-315 (2006).</li>
<li>Rossi, H. L., Jenkins, A. C., Kaufman, J., Bhattacharyya, I., Caudle, R. M., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+bilateral+trigeminal+constriction+injury+using+an+operant+facial+pain+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay.</a> Neuroscience. 224, 294-306 (2012).</li>
<li>Neubert, J. K., King, C., Malphurs, W., Wong, F., Weaver, J. P., Jenkins, A. C., Rossi, H. L., Caudle, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mouse+orofacial+pain+and+the+effects+of+lesioning+TRPV1-expressing+neurons+on+operant+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pain%22%5BJournal%5D)">Characterization of mouse orofacial pain and the effects of lesioning TRPV1-expressing neurons on operant behavior.</a> Mol. Pain. 4, 43(2008).</li>
<li>Rossi, H. L., Vierck, C. J., Caudle, R. M., Yezierski, R. P., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dose-dependent+effects+of+icilin+on+thermal+preference+in+the+hindpaw+and+face+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pain%22%5BJournal%5D)">Dose-dependent effects of icilin on thermal preference in the hindpaw and face of rats.</a> J. Pain. 10, 646-653 (2009).</li>
<li>Rossi, H. L., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+environmental+enrichment+on+thermal+sensitivity+in+an+operant+orofacial+pain+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of environmental enrichment on thermal sensitivity in an operant orofacial pain assay.</a> Behav. Brain Res. 187, 478-482 (2008).</li>
<li>Nolan, T. A., Price, D. D., Caudle, R. M., Murphy, N. P., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Placebo-induced+analgesia+in+an+operant+pain+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Placebo-induced analgesia in an operant pain model in rats.</a> Pain. , (2012).</li>
<li>Dubner, R., Beitel, R. E., Brown, F. J. A behavioral animal model for the study of pain mechanisms in primates. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDubner%2C+R+%22Pain%3A+New+Perspectives+in+Therapy+and+Research%22">Pain: New Perspectives in Therapy and Research</a>. Weisenberg, M., Tursky, B. , Plenum Press. 155-170 (1976).</li>
<li>Vierck, C. J., Hamilton, D. M., Thornby, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pain+reactivity+of+monkeys+after+lesions+to+the+dorsal+and+lateral+columns+of+the+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Pain reactivity of monkeys after lesions to the dorsal and lateral columns of the spinal cord.</a> Exp. Brain Res. 13, 140-158 (1971).</li>
<li>Caterina, M. J., Schumacher, M. A., Tominaga, M., Rosen, T. A., Levine, J. D., Julius, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+capsaicin+receptor%3A+a+heat-activated+ion+channel+in+the+pain+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The capsaicin receptor: a heat-activated ion channel in the pain pathway.</a> Nature. 389, 816-824 (1997).</li>
<li>Neubert, J. K., Rossi, H. L., Pogar, J., Jenkins, A. C., Caudle, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mu-+and+kappa-2+opioid+receptor+agonists+on+pain+and+rearing+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Funct%22%5BJournal%5D)">Effects of mu- and kappa-2 opioid receptor agonists on pain and rearing behaviors.</a> Behav. Brain Funct. 3, 49(2007).</li>
<li>Rossi, H. L., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hot+and+cold+stimulus+combinations+on+the+thermal+preference+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of hot and cold stimulus combinations on the thermal preference of rats.</a> Behav. Brain Res. 203, 240-246 (2009).</li>
<li>von Frey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Untersuchungen+%C3%BCber+die+Sinnesfunctionen+der+menschlichen+Haut%5BTitle%5D)+AND+%22Abh.+Sachs.+Ges.+Wiss%22%5BJournal%5D)">Untersuchungen über die Sinnesfunctionen der menschlichen Haut.</a> Abh. Sachs. Ges. Wiss. 23, 175-266 Forthcoming.</li>
<li>D'Amour, F. E., Smith, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+determining+loss+of+pain+sensation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp.+Ther%22%5BJournal%5D)">A method for determining loss of pain sensation.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 75, 74-79 (1941).</li>
<li>Kerins, C. A., Carlson, D. S., Hinton, R. J., Hutchins, B., Grogan, D. M., Marr, K., Kramer, P. R., Spears, R. D., Bellinger, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specificity+of+meal+pattern+analysis+as+an+animal+model+of+determining+temporomandibular+joint+inflammation%2Fpain%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Oral+Maxillofac.+Surg%22%5BJournal%5D)">Specificity of meal pattern analysis as an animal model of determining temporomandibular joint inflammation/pain.</a> Int. J. Oral Maxillofac. Surg. 34, 425-431 (2005).</li>
<li>Kramer, P. R., He, J., Puri, J., Bellinger, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+model+for+measuring+nociception+after+tooth+pulp+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Dent.+Res%22%5BJournal%5D)">A non-invasive model for measuring nociception after tooth pulp exposure.</a> J. Dent. Res. 91, 883-887 (2012).</li>
<li>Thut, P. D., Hermanstyne, T. O., Flake, N. M., Gold, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+operant+conditioning+model+to+assess+changes+in+feeding+behavior+associated+with+temporomandibular+joint+inflammation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Orofac.+Pain%22%5BJournal%5D)">An operant conditioning model to assess changes in feeding behavior associated with temporomandibular joint inflammation in the rat.</a> J. Orofac. Pain. 21, 7-18 (2007).</li>
<li>Vierck, C. J., Acosta-Rua, A. J., Johnson, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+chronic+constriction+of+the+sciatic+nerve%3A+a+model+of+long-term+cold+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pain%22%5BJournal%5D)">Bilateral chronic constriction of the sciatic nerve: a model of long-term cold hyperalgesia.</a> J. Pain. 6, 507-517 (2005).</li>
<li>Trujillo, K. A., Akil, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+morphine+tolerance+and+dependence+by+the+NMDA+receptor+antagonist+MK-801%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Inhibition of morphine tolerance and dependence by the NMDA receptor antagonist MK-801.</a> Science. 251, 85-87 (1991).</li>
<li>King, C. D., Devine, D. P., Vierck, C. J., Mauderli, A., Yezierski, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opioid+modulation+of+reflex+versus+operant+responses+following+stress+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Opioid modulation of reflex versus operant responses following stress in the rat.</a> Neuroscience. 147, 174-182 (2007).</li>
<li>Morgan, D., Carter, C. S., DuPree, J. P., Yezierski, R. P., Vierck, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+prescription+opioids+using+operant-based+pain+measures+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Clin.+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of prescription opioids using operant-based pain measures in rats.</a> Exp. Clin. Psychopharmacol. 16, 367-375 (2008).</li>
<li>Vincler, M., Maixner, W., Vierck, C. J., Light, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+systemic+morphine+on+escape+latency+and+a+hindlimb+reflex+response+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pain%22%5BJournal%5D)">Effects of systemic morphine on escape latency and a hindlimb reflex response in the rat.</a> J. Pain. 2, 83-90 (2001).</li>
<li>Mauderli, A. P., Acosta-Rua, A., Vierck, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+operant+assay+of+thermal+pain+in+conscious%2C+unrestrained+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">An operant assay of thermal pain in conscious, unrestrained rats.</a> J. Neurosci. Methods. 97, 19-29 (2000).</li>
<li>Vierck, C. J., Kline, R., Wiley, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+operant+escape+and+innate+reflex+responses+to+nociceptive+skin+temperatures+produced+by+heat+and+cold+stimulation+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Comparison of operant escape and innate reflex responses to nociceptive skin temperatures produced by heat and cold stimulation of rats.</a> Behav. Neurosci. 118, 627-635 (2004).</li>
<li>Nolan, T. A., Caudle, R. M., Neubert, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+caloric+and+non-caloric+sweet+reward+solutions+on+thermal+facial+operant+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of caloric and non-caloric sweet reward solutions on thermal facial operant conditioning.</a> Behav. Brain Res. 216, 723-725 (2011).</li>
<li>Taha, S. A., Katsuura, Y., Noorvash, D., Seroussi, A., Fields, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Convergent%2C+not+serial%2C+striatal+and+pallidal+circuits+regulate+opioid-induced+food+intake%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Convergent, not serial, striatal and pallidal circuits regulate opioid-induced food intake.</a> Neuroscience. 161, 718-733 (2009).</li>
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OPAD 시스템은 설치류의 통증 인식의 변화를 감지 할 수있는 사용하기 쉬운, 높은 처리량 분석이다. 이 시스템의 높은 처리량 자연은 수많은 동물 한 사람이 하루에 테스트 할 수 있다는 것을 의미합니다. 그것은 하나의 컴퓨터에서 동시에 실행할 수 16 상자까지 허용하는이 OPAD 소프트웨어 시스템 때문입니다. 이 세션 시간 단계마다 짧은 시간으로 설정되어있는 경우 초기 설정 시간 후에 약 48 조작 적 실행합니다 (실행 당 18 분에서) 시간도 더 수행 할 수 있다는 것을 의미합니다. 이 동물의 수백 하루에 고통을 테스트 할 수 있습니다. 시험이 금액은 대부분 기존의 통증 분석과 실용적되지 않습니다. 우리의 이전 작품과 일치 설치류 행동은 고통스러운 조건에서 변경됩니다. 비 유해 기간 동안 설치류는 일반적으로 그들이 thermodes와의 접촉을 유지하는 마시는 오랜 관찰을해야합니다. 혐오 45시 ° C 또는 10 ° C 조건설치류들은 오랜 기간 동안 접촉을 유지할 수없는만큼 짧은 관찰을해야합니다. 따라서 핥기 / 얼굴 비율 (세션 내 얼굴 접점의 개수로 나눈 핥는 수) 통증으로 변경합니다. 캡사이신은 45에서 처리 대 치료 설치류 낮은 L / F 비율 ° C의 온도에 의해 입증으로 고통을 가열하는 감도를 증가했다. 진통제가 아닌 고통스러운 조건 3과 비슷한 수준이 얼굴 / 핥기 비율을 반환 할 수 있습니다. 쉽게 피부 (캡사이신 크림의 신청 등)에서 생산되는 통증 조건이 분석에 통증을 감지하는 가장 간단한 방법이지만, 삼차 신경통처럼 임상 적으로 관련성이 깊은 신경 조직 통증의 동물 모델은 조작 적 구강 안면 분석 9 동작을 변경할 수 있습니다 . 종합적으로 이러한 데이터는 OPAD 열에서 변경 및 조작 적뿐만 아니라 감기 통증, 통증 임계 값 및 캡사이신과 같은 유해한 화학 약품에 민감한 증거를 지원하는통증과 진통제 6,3,8,17,10,5,12,18,11,9의 수많은 다른 조건을 감지하는 구강 안면 통증 분석의 능력. 측정 고통의 OPAD의 시스템은 반사 기반의 방법보다 통증을 감지 더 많은 임상 적으로 관련성이 의미 및 인도 방법입니다. 폰 프라이 필라멘트 19 꼬리 영화 분석 20와 발 철수와 같은 통각 이러한 전통적인 방법은 한 세기 이상 사용하지만, 그들은 단지 실험 - 쏜 자극에 대한 반응을 측정하고 있습니다. 동물 약간의 컨트롤을 가지고 있으며, &quot;통각&quot;은 주로 척수로 지역화되어 있습니다. 인간의 경우, 주관적 통증의 경험은 사람들이 단순히 고통을 자신의 주관적인 수준을보고하도록 요청 될 때 중요합니다. 조작 적 기반 절차의 자기보고 그들의 고통을 동물에 대한 능력은 기본 통증 연구 1 돌파구 될 것입니다. OPAD로, 동물은 AP 동안 반응 여부의 선택이 주어집니다ainful 자극이나하지. 너무 고통스러운 경우, 동물은 단순히 보상을 도달하는 그들의 시도를 줄이고, 따라서 고통에 대한 그들의 노출을 제한합니다. 동물들은 그들의 움직임을 제한해야하고 그들이 노출하는 고통스러운 자극의 크기를 제어 할 수없는 많은 반사 기반 방법에 비해이 훨씬 더 인간적이고 덜 스트레스 분석이다. 고통에서 탈출 할 필요가 모든 동물에 고유의 드라이브이고 다른 통각 분석을 좋아위한 OPAD 대신 보상이 동작을 포함합니다. 조작 적 작업에 떨어져 고통의 반사 기반의 측정에서 운동 분야에서 더 많이되고 있습니다. 다른 그룹은 검사 식사 시간 21,22,23 및 열 열 통증 탈출 패러다임 24 (다른 통증 대책의 검토를 위해 우리는 우리의 첫번째 기준을 제시 같은 비 반사 기반의 조치를 사용했습니다 1). OPAD는 통합 측정, 얼굴 / 릭 비율, WH에 이러한 요소를 결합 할 수 있습니다무형 문화 유산은 음식 섭취와 고통스러운 자극에서 탈출 할 필요성을 검사합니다. 또 다른 이점은이 분석 감도 7,9을 잃지 않고 오랜 기간 (1-2 개월)에 통증을 측정 할 것입니다. 반사 기반의 테스트를 통해 그 장점으로 인해,이 스트레스를 덜하고 더 자비 롭 분석은 잘 설치류 통각 행동에 장기적인 변화를 측정하도록 구성되어 있습니다. 조작 적 통증은 아편 복용 효과와 통증 임계 값의 측면에서 반사 기반 방법에 비해 종종 다른 결과를 측정합니다. 아편의 과다 복용은 일반적으로 반사 기반의 측정을 위해 사용하는 동안 25 몇 가지 연구는 낮은 복용량은 조작 적 분석 26,27,28에 대한 응답에 필요한 것을 나타냅니다. 높은 약물 복용은 조작 적 측정을 방해 할 수 있지만, 이들은 OPAD 6 감지합니다. 다른 연구는 또한 고통스러운 자극으로부터 탈출을위한 임계 값을 조작 적 versu에 대해 서로 다른 것을 보여 주었다자신의 척추 반사의 속도 대 고통의 동물의 지각 사이 큰 차이를 시사의 반사 기반의 측정 29,2,30. OPAD의 장점은 짐승 작업을 수행 할 것인지 여부를 선택할 수 있다는 것입니다,이 짐승 탈출하거나 회피 동작을 표현할 수 있습니다. 이 복잡한 동작은 짐승 14,29,15,30을 느끼는 통각의 양을 제어하는 대뇌 피질의 결정을 필요로한다. 탈출 및 회피 행동이 반사 기반의 측정을 방해 할 수 있지만 이러한 통증 행동 OPAD의 중요한 구성 요소입니다. 통증 임계 값 및 조작 적 분석에 필요한 아편의 낮은 복용량의 차이는 기존의 반사 기반의 측정보다 통증과 진통제에 대한 높은 감도를 제안한다. OPAD 전통적인 분석, 여러 가지 실험 조건 및 약물보다 더 직접적으로 고통을 측정 할 수 있지만,이 분석에 부정적인 영향을 미칠 수에 대해 제어 할 수 있어야합니다. 변경appetitive 동기 부여의이 분석에 동작을 변경할 수 있습니다. 이 보상 자체가 31 차이 또는 보상 6 동기 부여에 반영 될 수 있습니다. 치료는 많은 약물 동기 부여를 방해 할 수있는 보상 동물의 동기가 일정하도록주의해야합니다. 예를 들어, 모르핀과 다른 아편의 과다 복용은 조작 적 구강 안면 분석 6 응답 변경합니다 단, 지방 물질 32에 대한 과식증을 일으킬 수 있습니다. 본 조작 적 기반 보상 분쟁의 패러다임 불안의 필드와 중독 등의 사용에 대한 폭 넓은 의미를 가지고하는 것이 좋습니다 않지만 (즉, 주어진 고통스러운 자극의 존재 보람 변경) 그것은 고통 중에 appetitive 변경에 대한 제어하는 것이 중요합니다 테스트 세션. 동기 부여의 이러한 변경이 임상 적으로 관련성이 낮은 복용량에 나타나지 않지만 진통 효과는 3 그대로 유지됩니다. 연속하는 한 가지 방법이것이 가능 혼란에 대한 ROL는 중립 (33-37 ° C) 온도에서 동작을 증가하지 않는 주어진 약의 복용량을 보장하는 것입니다. 중립 온도에서 비 약물 그룹에 비해 약물을 테스트 통증 구성 요소를 추가하기 전에 첫 번째 단계되어야합니다. 또한, 몇 가지 기본 세션이 이러한 문제를 감지 할 수 있으며, 하나의 행동 세션 내의 대해 제어 할 수 있습니다 OPAD를 사용하여 테스트 세션 내에서 할 수 있다는 것을 주어진. 금식 일정이 분석에 의욕을 변경할 수로이 일관성을 유지하는 것이 중요합니다. 우리는 일반적으로 금식을하지만, 다른 일정이 가능합니다. 예를 들어, 우리는 6 시간의 매일 짧은 빠른 전 (미발표 결과) 실험을했다. 이 대신에 매일 매일 테스트 할 수 있습니다. 또한, unfasted 쥐도 분석 9에서 잘 대응하고 있습니다. 사용되는 모든 금식 기술은 동기 부여 요인을 제어하는​​ 테스트 내내 일관성을 유지하기 위해 주로 중요합니다. <p class=결론적으로 &quot;jove_content&quot;&gt;, OPAD 전통적인 통증 분석보다는 인간의 조건에 대한 더 많은 유사한 수준에 통증을 측정 조작 적 분석을 사용하기 쉽습니다. 이 시스템의 주요 기능은 소프트웨어 제어 시스템을 사용하여 실험 매개 변수와 프로토콜, 데이터 수집 및 분석 / 결과 측정의 통합이다. 이것은 높은 처리량 방식으로 다양한 결과 측정을 수집하고 분석하는 사용자가 제어하는​​ 옵션과 매개 변수의 풍부한을 제공합니다. 이 소프트웨어를 구동하거나 높은 처리량도 있습니다 일반적으로 사용되는 통증 테스트 시스템 (예를 들어 꼬리 영화, 폰 프라이 필라멘트) 대조. 소프트웨어 기반의 시스템은 행동 연구 설계 및 데이터를 수집 및 분석하고이 분석의 사용 증가는 기본 통증 연구는 앞으로 더 많은 임상 적으로 번역 될 수 있도록하는 방법.하는 방법에 대한 상당한 발전을 제공합니다 이 시스템은 ADVA에 상당한 영향을 미칠 것으로 예상된다이러한 조작 적 행동 연구는 전반적인 통증 행동에 고차 구조의 영향을 이해하는 데 필요한 링크를 제공 할 수 있기 때문에 통증에 관한 앞으로의 연구를 ncing.

만성, 통제 통증은 진통제 치료는 종종 머리맡에 벤치에서 번역되지 주요 공중 보건 문제와 소설 남아있다. 성공의 부족은 반드시하거나 완전히, 특히 신뢰성, 높은 처리량, 시판의 부족 인간의 고통 조건 1,2 모델 및 않는 고통의 반사를 기반으로 측정 비효율적 인 행동 분석의 사용에 부분적으로 인해 쥐와 생쥐 모두 생체 통증 평가 분석한다. 우리는 우리의 조작 적 기반 통각 분석의 버전을 사용하기 쉽고, 여기에 높은 처리량을 제시한다. 이 새로운 시스템은 열, 추위, 그리고 3,4,5 기계 등 다양한 통증 양상을 감지하는 민감한 것으로 입증되었습니다 우리가 이전에 조작 적 구강 안면 통증 분석을 기반으로합니다. 이러한 조치에서 다양한 분야가 진통제 6,3,4,5,7, 염증 등 통증 상태, 통각 과민, 이질통 및 포함, 연구되어왔다 <s캡사이신, resiniferatoxin, 멘톨, 그리고 icillin 8,10,5,11와 TRP 채널을 통해&gt; 3,8 위로, 삼차 신경통 9, 말초 통각 변조. 고통 (12)와 위약 효과 13의 불안에 의한 변조와 같은 심리적 효과는 또한 고통의 전체 경험을 측정하기위한 적절하고 단순히 통각 수 있습니다 제안 구강 안면 조작 적 검사로 증명되었다. 구강 안면 통증 평가 장치 (OPAD)는 짐승이 세션 14,15 동안 기분이 강화 보상을 받거나, 따라서 고통의 양을 조절 혐오 자극을 탈출 사이에 선택할 수있는 보상 / 충돌 분석을 사용합니다. 설치류는 먼저 액체 보상을 포함하는 음식 병에 대한 액세스 권한을 얻기 위해 온도 조절 thermodes에 자신의 얼굴을 눌러 훈련된다. 훈련 후, 자극 온도는 가열 또는 냉각 재에 차이가 있습니다상응하는 동물을 인식 통각이나 진통제의 수준을 표시 할 수 있습니다. OPAD는 기준 시험 및 단일 테스트 세션에서 따뜻한 온도에서 통증의 평가를 허용 급격한 온도 변화 할 수 있습니다. 여기에서 우리는 차가운 열에 의한 통증의 변화를 감지 할 수 OPAD의 능력을 강조하는 간단한 프로토콜 및 TRPV1 길항제 캡사이신 16을 제시한다. 그것이 아닌 조직 손상이기 때문에이 분석에 여러 가지 장점을 가지고 있으며, 설치류 모델 8 얼굴 이질통과 통각 과민을 유발하기 이전에 증명 되었기 때문에 캅사이신은 열 민감 제로서 아래에 사용됩니다. 우리는, 분석 OPAD 소프트웨어를 신속하게 얻을 수있는 방법 그래프를 보여줍니다, 그리고 설치류 행동 데이터에 대한 통계 분석을 수행합니다.

<table><tbody><tr><td>가당 연유</td><td>Borden</td><td>5272910108</td><td></td></tr><tr><td>Capzasin-HP 0.1%</td><td>Chattem, Inc.</td><td>0032648-02</td><td></td></tr><tr><td>이소프로필 알코올</td><td>CVS</td><td>5042826245</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>Piramal Healthcare</td><td>66794-013-25</td><td></td></tr><tr><td>안과용 동물 연고</td><td>Dechra</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>제모 로션</td><td>Church and Dwight Co., Inc</td><td>NRLBB-22339-04</td><td></td></tr><tr><td>OPAD 시스템</td><td><a href="https://www.stoeltingco.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Stoelting</a></td><td>67500</td><td></td></tr><tr><td>추가 OPAD 케이지</td><td><a href="https://www.stoeltingco.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Stoelting</a></td><td>67501</td><td></td></tr><tr><td>눈금 실린더</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-34512-11</td><td></td></tr><tr><td>종이 타월</td><td>ANY</td><td>ANY</td><td></td></tr><tr><td>면봉</td><td>Fisher</td><td>23-400-101</td><td></td></tr><tr><td>Fluotec 4 기화기</td><td>Ohmeda</td><td>39711</td><td></td></tr><tr><td>바리캉</td><td>Oster</td><td>78005-010</td><td></td></tr></tbody></table>

통각 행동의 변화를 측정하는 조작 적 구강 안면 통증 평가 장치 (opad)의 사용

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

우리는 깨어있는 의식 설치류에있는 고통의 검출을위한 조작 적 시스템을 제시한다. 구강 안면 통증 평가 장치 (OPAD)은​​ 통각의 반사 기반의 측정에 의존하지 않음으로써 더 많은 임상 적 방법으로 통증 행동을 평가한다. 음식 털이 (또는 면도) 설치류는 11 ° C와 60 ° C. 사이의 온도로 프로그래밍 할 수있는 두 펠티어 기반 thermodes가 플렉시 유리 챔버에 배치됩니다, 금식 설치류는 보상 병에 액세스하려면 다음과 접촉하는 훈련입니다. 세션 동안, 행동 고통 결과의 번호가 자동으로 기록되고 저장됩니다. 이러한 조치는 보상 병 정품 인증 번호 (릭)와 얼굴 접촉 자극 (얼굴 연락처), 그러나 / 핥기 얼굴 비율 (세션 / 접촉의 총 수 당 릭의 총 개수)도 만들 수 있습니다 같은 사용자 정의 조치를 이용하실 수 있습니다. 자극의 온도는 단일 온도 세션 내의 여러 온도로 설정할 수 있습니다. OPAD인 높은 처리량, 그것은 대신 척수 반사 기반의 통각 분석에 의존 대뇌 피질의 입력을 포함으로 미래에 통증 연구의 더 나은 번역으로 이어질 것입니다 조작 적 분석을 사용하기 쉬운.

전형 결과는 그림 1A-D의 OPAD에 한 쥐의 행동에 대해 설명합니다. 릭의 수는 중립 33에서 세션의 모든 세그먼트에 대한 높은 ° C의 온도지만, 혐오 사람에 대한 낮은 (45 ° C와 11 ° C) 그림 1A에 도시 된 바와 같이. 그림 1B가 있듯이, 접촉의 긴 시합은 33에서 수행됩니다 ° C는 비 통각 자극 온도에 일반적입니다. 지속 시간이 감소하고 온도가 고통스러운 기간 동안 연락처의 수가 증가. 그림 1C는 OPAD이 모든 테스트 세션에 사용할 프로그래밍 된 램핑 프로토콜의 다이어그램입니다. 그림 1D는 그램 시간에 섭취 보상의 총량을 표시합니다 . 마찬가지로 릭의 수, 동물은 고통스러운 것들에 중립 온도를 선호합니다. 핥기 /베이스 세션에 대한 얼굴 비율 (L / F)은 OPAD에 의해 계산되었다에 설명되어1E 그림. 이 비율은 ° C 세션 (얼굴 접촉 당 20-46 핥는) 45 ° C (얼굴 접촉 당 3 감싸고), 7의 고통 세션에서보다 세 비 고통스러운 33시 훨씬 높다 ° C (1 얼굴 접촉 당 핥아 ). 편도 ANOVA 반복 측정하여 L / F 비율에 대한 온도의 효과 (F (4,52) = 6.2182, p &lt;0.001) 유의 하였다. 33 ° C 대 7 ° C (p &lt;0.05), 45 ° C 대 33 ° C (2) (p &lt;0.01), 33 ° C (2) 대 7 ° C (비교할 때 Bonferroni의 시험 유의 하였다 p &lt;0.01). N 모든 온도에 = 16. 그림 1 층에 캡사이신 처리 설치류 (N = 8) 중립 33의 ° C 온도에서 순진 쥐 (N = 8)에서 유의 한 차이가 없었다. 캡사이신 처리 설치류는 45 상당히 낮은 L / F 비율을 가지고 있었다 ° C (t-test를, t (13) = 2.9350, p = 0.012).에게 캡사이신 그룹은 ° C 7시 높은 L / F 비율을 가지고, 그러나 이것은 중요하지 않았습니다. <p class="jove_content" fo:keep-together.withiN 페이지 = &quot;항상&quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50336/50336fig1.jpg" alt="그림 1" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50336/50336fig1highres.jpg"/> 그림 1. 세션 동안 thermode의 OPAD과 통각을 측정합니다. OPAD에 한 쥐의 행동은 B, 핥는 A) 수를 그래프입니다) 연락처 C) 온도 및 그램 D) 보상 섭취. E)는 핥기 / 얼굴 비율은 세 가지 않은 고통스러운 33 ° C 세션에서 높고 ° C와 11 ° C (반복 측정 일원 분산 분석, F (4,52) = 6.2182, p &lt;0.001, 45의 고통 세션에서 상당히 낮은 Bonferroni의 테스트를 33 ° C 대 7 ° C (p &lt;0.05, #), 45 ° C 대 33 ° C (2) (p &lt;0.01, **), 33 ° C (2) 대 7 ° C (p &lt;0.01, # #). F) 캡사이신 처리 설치류는 45 ° C (t-test를, t (13) = 2.9350, p = 0.012, *)에서 만에서 상당히 낮은 L / F 비율을했다중립 온도 없음. N 층에 대한 순진에 대한 캡사이신과 N = 8 1E와 N = 8 = 16. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50336/50336fig1large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> .

우리는 깨어있는 의식 설치류의 통증 행동의 평가를위한 사용자 친화적 인, 높은 처리량 조작 적 시스템을 제시한다. 구강 안면 통증 평가 장치 (OPAD)는 이렇게 테스트를 더 인간적 방법을 제공하는 보상 / 충돌 패러다임을 통해 통증을 평가할 수 있습니다. 이 프로토콜은 설치류에서 더 많은 임상 적 및 번역 데이터를 얻을 것입니다.

통각 행동의 변화를 측정하는 조작 적 구강 안면 통증 평가 장치 (OPAD)의 사용

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

본 절차의 전반적인 목표는 조작성 또는 안면 통증 평가 장치를 사용하여 설치류의 항통각 행동을 측정하는 것입니다. 이는 먼저 설치류를 oad에서 안정적인 기저선이 확보될 때까지 몇 차례 세션 동안 훈련시킴으로써 달성됩니다. 절차의 다음 단계는 실험 전날 설치류의 뒷다리 털을 제거하고 금식시키는 것입니다.다음으로, 안면 진피를 자극하는 개방형 온도 가변 바를 사용하여 정상 온도 및 통증 유발 온도에서의 기저치 측정을 수행합니다. 이는 설치류가 보상을 얻고자 할 때 이루어집니다. 마지막 단계는 동일한 조건에서 통증 유발 자극 또는 진통 자극을 가하고 핥는 접촉 빈도를 측정하는 것입니다.예를 들어, 캡사이신은 통증 조건에서 핥는 빈도를 감소시킵니다. 결과적으로, 전체 접촉 횟수 중 핥는 빈도 분석을 통해 변화된 통증 행동을 확인할 수 있습니다. P withdrawal, von fry 또는 tail flick 분석과 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은, 통각 수용의 반사 기반 측정법 대신 구강안면 통증 평가 장치(orofacial pain assessment device, OPED)가 조작적 보상 갈등 분석법을 사용한다는 점입니다. OPED 훈련 세션 전날 밤에.본 시연을 위해 설치류에게는 먹이를 제공해서는 안 됩니다. 단식 시간은 15시간으로 하며, 1시간 정도의 오차는 허용됩니다. 설치류는 먼저 혐오감이 없는 온도에서 일관된 행동을 보이도록 훈련되어야 합니다.이 과정은 주 3회씩, 약 6회 세션에 걸쳐 진행됩니다. 생쥐는 세션당 600회에서 1,000회까지 핥을 수 있는 반면, 쥐는 세션당 최대 2,000회까지 핥을 수 있습니다.본 시연에서는 Orofacial 소프트웨어를 사용하여 간단한 실험을 프로그래밍하는 방법을 보여줍니다. 이 소프트웨어는 다양한 온도 상승 프로토콜과 통증 모델을 제공합니다. 또한, 설계 내용은 완료 정도와 상관없이 어떤 상태에서든 저장할 수 있습니다.op pads의 전원을 켜고 소프트웨어를 실행한 후, 주변 소음을 제어하기 위해 화이트 노이즈를 켭니다. 다음으로, 파일(file) 메뉴에서 새 실험(new experiment)을 선택합니다. 그런 다음 프로토콜(protocol) 하위 항목에서 프로토콜 이름을 지정하고, 블라인드 처리 여부를 선택합니다.OPED 케이지 메뉴에서 새로운 OPED 케이지를 선택한 다음 연결된 모든 OPED 케이지를 추가하십시오. 출력 항목에서 온도 컨트롤러를 선택하십시오. 그다음 열전 소자에서 필요한 경우 시작 온도를 중성 온도로 조정하고, OPED 온도 사이클 탭에서 램핑 온도를 조정하여 온도를 중성에서 고온 및 저온으로 변경하십시오.여기서 설정을 조정하십시오. 1단계의 경우, 온도를 45 °C로 설정하십시오. 램프 시간을 30초로 설정하고 해당 온도를 3분 동안 유지하도록 설정하십시오.두 번째 단계에서는 설정을 33 °C, 30초, 3분으로 맞추십시오. 세 번째 단계에서는 온도를 7 °C 램프, 60초, 유지 시간 3분으로 설정하십시오.2단계와 마찬가지로 4단계를 생성하되, 62초의 램프(ramp)를 설정하십시오. 그런 다음 '다음 시간 경과 후(after the following period of time)' 확인란을 선택하고 해당 값을 3분으로 설정하십시오. 이제 필드 탭에서 피실험자에 대해 필요한 추가 참고 사항을 입력하십시오.예를 들어, 새 필드를 선택하고 이름을 animal id로 변경하여 동물 ID 영역을 만듭니다. 그런 다음 animals 탭을 선택하고 text를 선택한 후, stage 탭의 animal ID look으로 이 필드를 사용하십시오. OPPA는 자동으로 첫 번째 단계를 설정하므로, 단계의 이름을 지정하고 테스트 기간의 지속 시간을 설정하십시오.행동 세션은 10분에서 20분 이상 지속되지 않아야 합니다. 그 시간이 지나면 쥐들이 포만감을 느끼기 때문입니다. 또한, 며칠 동안 실험을 진행하는 경우에는 데이터 분석을 더 간편하게 하기 위해 추가 단계를 추가할 수 있습니다.다음으로, 계산(calculations) 항목 아래에서 새로운 계산(new calculation)을 선택하고, L 대 face 비율을 나타내기 위해 이름을 L over F로 지정합니다. 표시된 섹션의 아래 영역에 계산식을 입력하십시오. 해당 식을 L.Number of activations over contact로 수정합니다.데이터 분석을 단순화하기 위해 시간 기간을 생성하려면, 분석 및 새 시간 기간을 선택하십시오. 이름을 33 degrees C로 지정하고, 모든 단계에서 이 기간이 동일하다는 확인란을 선택하십시오. 시작 위치(starts at) 필드에는 0을 입력하십시오.NZ 필드에는 3분을 입력하십시오. 이제 각 시간대에 대해 이 라벨링 과정을 반복하십시오. 마지막으로 프로토콜을 저장하고 이름을 지정하십시오.털은 절연체 역할을 하므로, 모든 조작적 절차에는 무모성 설치류를 사용하는 것이 가장 적합하며, 이제 새로운 실험에 사용할 수 있습니다. 그렇지 않은 경우, 동물 실험 1~2일 전에 수염을 제외한 구강 안면모만 제거하십시오. 이를 위해 먼저 설치류를 마취시킵니다.다음으로, 클리퍼를 사용하여 뺨의 털을 깎습니다. 털을 깎은 후, 안연고를 바르고 이어서 제모 크림을 도포한 뒤 몇 분 동안 기다립니다. 그 다음, 제모 크림과 털을 물로 씻어냅니다.테스트 당일, 예를 들어 3% isof fluorine 흡입 마취제를 사용하여 동물을 마취합니다. 다음으로, 양쪽 눈에 안연고를 도포합니다. 이후, 국소 약물 치료제가 눈에 들어가지 않도록 주의하십시오.이제 멸균 면봉을 사용하여 노출된 양쪽 뺨에 0.1% capsaicin 크림을 도포하고 5분 동안 기다립니다. 그동안 거즈 패드를 40 °C의 따뜻한 물에 적셔 둡니다. 5분 후, 젖은 패드로 크림을 닦아낸 다음 알코올 솜으로 닦아냅니다.이제 설치류를 케이지로 돌려보내고 30분 동안 타이머를 설정하십시오. 먼저 연유 1분량과 물 2분량을 혼합하여 실온의 보상 혼합물을 준비합니다. 이 혼합물을 개방된 병에 채웁니다.둘째로, oped 기기에 액체 수거 트레이, 플렉시글라스 케이지 및 금속 바닥 격자를 설치합니다. 조립이 완료되면 케이지를 oped 시스템의 나머지 부분과 연결하는 배선을 부착합니다. 설치대 위에 보상 병을 배치하여 설치된 스파우트가 설치된 설치물이 접근할 수 있도록 합니다.처음에는 병을 약간 깊게 위치시켜, 더 나은 접촉이 필요할 경우 다시 꺼낼 수 있도록 합니다. 이제 소프트웨어에서 실험을 로드하십시오. 소제목 아래에 테스트 대상 동물을 입력하십시오.실험 제목을 입력한 다음, 캡사이신 및 대조군과 같은 처리군을 추가하십시오. 그런 다음 각 그룹의 동물 수를 입력하십시오. 테스트 하위 항목에서 동물 처리 및 데이터를 선택하십시오.처치 표시 문자와 동물 ID를 추가하십시오. 이제 각 박스의 화면에 지정된 동물 ID가 표시되어야 합니다. 이제 박스의 버튼을 눌러 써모스(thermos)를 적정 온도로 조절하십시오.초록색 불이 켜지면 설치류를 내부에 넣습니다. 본 실험에서는 캡사이신 크림을 닦아낸 30분 후에 쥐를 투입합니다. 이제 버튼을 다시 누르면 주황색 불이 켜집니다.거리를 조정하십시오. 쥐가 핥을 수 있도록 병을 상자에 배치합니다. 쥐의 구강 부위가 써모스(thermos)에 닿아야 하며, 진동 부위에 닿아서는 안 됩니다.적절하게 조정되면 접촉을 나타내는 테두리 있는 주황색 상자 위에 핥기를 나타내는 짙은 빨간색 상자가 나타납니다. 테두리만 있는 빨간색 상자는 문제가 있음을 나타냅니다. 테스트 세션이 종료되면 oped가 신호음으로 실험자에게 알립니다.이제 설치류를 케이지로 돌려보냅니다. 다른 설치류를 테스트해야 하는 경우, 박스에 해당 동물의 ID가 표시되며 동일한 절차를 반복합니다. op 패드에서는 여러 마리의 쥐를 동시에 실험할 수 있습니다.한 가지 프로토콜에서 최대 16개의 박스를 동시에 가동할 수 있습니다. 따라서 시간당 40~80마리의 쥐를 테스트할 수 있습니다. 실험이 완료되면 장비의 전원을 끄고 케이지 배선을 수동 또는 기계 세척으로 제거하며, 대형 박스 병과 액체 트레이를 세척 및 소독하십시오.oped 소프트웨어에서 데이터 분석 도구를 사용할 수 있습니다. 'Results'라는 소제목 아래에서 텍스트 그래프 또는 통계 분석 보고서 중 무엇을 볼지 선택하십시오.그래프 보고서 설정 상자에서 조사할 변수를 선택하십시오. 예를 들어, 계산 결과 항목에서 L over F 상자를 체크하십시오. 그런 다음, X축 표시(on the X Axi show) 필드를 시간 기간으로 지정하고, 서로 다른 시리즈 표시(show different series four) 필드를 처리군으로 지정하십시오.그런 다음 보고서 보기(view the report)를 선택하십시오. 이때 보고서를 저장, 인쇄, 복사 또는 이메일로 전송할 수 있습니다. 필요한 경우 그룹화 단계 아래의 상자에서 특정 데이터 포인트를 제외할 수 있습니다.필요한 경우, 데이터 소제목 아래에서 스프레드시트 형태의 원시 데이터를 확인할 수 있습니다. OPED는 테스트 세션을 위한 램핑 프로토콜(ramping protocol)로 프로그래밍되었습니다.단일 설치류 테스트 세션을 분석한 결과, 중립 온도에서는 세션의 모든 구간에서 핥기 횟수가 높게 나타났으나, 혐오 온도에서는 낮게 나타났습니다. 예상대로 중립 온도에서는 접촉 시간이 긴 행동 양상을 보였습니다. 온도가 통증을 유발하는 기간 동안에는 접촉 지속 시간은 감소하고 접촉 횟수는 증가했습니다.섭취한 총 보상량은 핥은 횟수와 비슷합니다. 동물들은 고통스러운 온도보다 중립 온도에서 먹이 섭취를 선호합니다. 기저선 세션의 핥기 대비 얼굴 접촉 비율은 캡을 씌우지 않은 모든 동물에 대해 OPPA에 의해 계산되었으며, 이 비율은 고통스러운 세션보다 세 번의 비고통 세션 동안 훨씬 더 높게 나타났습니다.일원 배치 분산 분석(One-way ANOVA)과 Bonferroni 검정을 통해 유의성을 확인하였습니다. 다음 날, 해당 그룹을 캡사이신 처리군 쥐와 대조군(naive) 쥐로 나누었습니다.중성 온도에서 각 그룹당 8마리씩 배치하였습니다. 그룹 간에 유의미한 행동 차이는 나타나지 않았습니다. Capase 투여군 및 처리된 설치류는 45 °C에서 LTA F 비율이 유의하게 낮았으며, 7 °C에서는 유의미하지 않게 더 높은 LTA F 비율을 보였습니다.이 기술을 숙달하면 여러 개의 ePad 박스를 사용하여 하루에 수백 마리의 동물을 대상으로 실험을 수행할 수 있습니다. 이를 적절히 실행하면 통각 수용 또는 진통 상태에 대한 고효율 통증 테스트가 가능합니다.

use-operant-orofacial-pain-assessment-device-opad-to-measure-changes

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

유해 확산 억제 제어, 현세의 변론과 상처에 hyperalgesia 테스트는 임신과 출산에 관련되는 환자에서 시연하고 있습니다. 이 테스트는 고통 처리의 억제 및 흥분성의 메커니즘을 평가하고 여기에 임신과 지속적인 통증에 대한 개인의 위험을 밝혀 도움이되는 peripartum 기간 동안 서로 다른 시간 시점에서 내생적인 진통제를 평가하기 위해 활용됩니다.

포스트 수술 고통의 예측에 대한 실험적 패러다임 (PPOP)

이 비디오는 안와하신경을 결찰하여 쥐 모델에서 구강안면 신경병성 통증을 유도하는 방법을 보여줍니다. 그 결과 신경 손상과 염증이 발생하여 비정상적인 통증 신호를 유발하고 만성 통증 상태를 모방할 수 있으며, 이는 구강 안면 통증 분석을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

안와하신경결찰을 통한 쥐 모델에서 구강안면 신경병성 통증 유도

식사 기간에 있는 길게하는 것은 구면 고통을 가진 인간의 보호 행동과 유사한 설치류에 있는 구안면 nociceptive 행동을 나타냅니다. 먹는 것은 훈련이나 동물 조작이 필요하지 않으며, 피질 참여가 필요하며, 다른 실험적으로 유발된 행동과 경쟁하지 않는 행동이며, 이 분석이 대체 반사 또는 작동 측정과 구별됩니다.

설치류의 오로페이셜 모시피티브 응답의 척도로서의 식사 시간

이 원고는 삼차신경병성 통증을 연구하기 위한 설치류 모델을 설명합니다. 설명된 방법에는 쥐의 안와하부신경의 만성 수축 손상을 수행하기 위한 외과적 절차와 지속적인 통증 및 이질통을 나타내는 자발적 및 유발 행동의 변화를 측정하기 위한 수술 후 행동 검사가 포함됩니다.

삼차 신경 병증 성 통증을 연구하기 위해 쥐의 눈꺼풀의 신경 (이온 CCI)의 만성 수축 부상

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통풍이 중 환자 실 환자에서 객관적인 Nociceptive 평가: Pupillometry와 Nociceptive 굴곡 반사를 사용 하 여 타당성 조사

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통각 행동의 변화를 측정하는 조작 적 구강 안면 통증 평가 장치 (OPAD)의 사용

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