Name: 높은 소금 다이어트와 루이스 쥐에서 만성 신장 질환을 유발하는 산화 질소 합성 효소 억제와 함께 5/6th의 절제 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: 학습하세요 Lewis 쥐에서 만성 신장 질환을 유도하는 방법을 알아보세요. 산화 질소 합성 효소 억제제와 고염분 식이를 활용한 5/6 신장 절제술을 통해 신부전 메커니즘을 연구하고 새로운 치료법을 개발할 수 있습니다.

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우리는 그녀의 우수한 기술 지원을 크리스타 서재 Ouden 감사합니다. 이 기술은 재정적 네덜란드의 신장 재단 보조금 C06.2174에 의해 지원되었다. MCV는 과학 연구에 대한 네덜란드기구 (NWO) 비디 - 부여 016.096.359에 의해 지원됩니다.

모든 실험은 위트레흐트 실험 동물위원회의 동물 실험 윤리 가이드 라인에 따라 실행됩니다. 프로토콜은 저자의 기관의 동물 관리 및 사용위원회의지도 및 승인하에 수행됩니다. CKD ~ 8 주 세의 나이에 남성 근친 루이스 쥐 (찰스 리버, Sulzfeld, 독일)에서 유도된다. 쥐 빛, 온도 및 습도 제어 환경의 표준 조건 하에서 보관되어 있습니다. 1. 수술 준비 <ol><li> 수술기구를 소독 : <ul><li> 1 학생 조직은 1-2 치아 12cm를 포셉 </li><li> 1 학생의 표준 패턴 집게 </li><li> 2 Semken 포셉 </li><li> 1 마요 가위 </li><li> 1 명 홍채 가위 </li><li> 가위로 1 올슨-Hegar 바늘 홀더 </li><li> 담요 </li></ul></li><li> 재고 목록을 확인 : <ul><li> 온난화 패드와 램프 테이블 운영 </li><li> O <suB&gt; 2, isoflurane을 </li><li> 조직 </li><li> 면도기 </li><li> 저울 </li><li> 무균 조작 세트 </li><li> 멸균 거즈 5X5 및 10 × 10 </li><li> 70 % 알코올 </li><li> 0.9 % 염화나트륨 용액 </li><li> 1 ML의 주사기 </li><li> 바늘 (25G) </li><li> 젤 폼 패드 : spongostan </li><li> Vicryl 4.0 및 5.0 </li><li> 부 프레 노르 핀 0.03 ㎎ / ㎏ (1:10 생리 소금에 희석) </li><li> 수술 후 쥐 깨끗한 케이지 </li></ul></li></ol> 2. 오른쪽 Uninephrectomy <ol><li> 70 % 알코올로 테이블을 소독. </li><li> 장소는 유도 상자에 쥐 4 % isoflurane을하고 O 2 1 리터의 흐름으로 마취를 유도. 주 : 사용 된 쥐의 변형에 따라 사전 및 수술 진통제를 처방, 지역 수의사와상의이 필요. </li><li> 원뿔 테이블과 장소 코 쥐를 전송합니다. 쥐와 코 콘은 쥐의 체온을 유지하기 위해 가열 패드에 배치됩니다. 쥐 I들 O 2 isoflurane을하고 1리터 2 %의 혼합물로 환기. </li><li> 쥐의 측면을 면도하고 알코올로 소독. 세척 및 소독 손을 멸균 수술 장갑을 착용하십시오. 머리 모자와 마스크를 착용하십시오. 만들기 1 - 1.5 cm의 절개 병렬 해부 집게와 무딘 가위를 사용하여 갈비뼈합니다. 등 근육의 무딘 절개하여 신장을 노출합니다. </li><li> 신장의 하부 극 볼 수 있습니다,주의 신 주위 지방 조직을 그립에있는 작은 무딘 집게를 사용합니다. 부드럽게 집게로 신 주위 지방을 당겨 신장을 구체화. 이 절차를 수행하는 동안 부신을 방해하지 않도록주의하십시오. 부신 쉽게 지방 조직에서 중간 사이트에 집게를 배치하여 제거하고 부드럽게 부신과 그림 2로 신장 사이의 위쪽으로 이동할 수 있습니다. </li><li> 가제 지방과 결합 조직을 둘러싼 명확한 부드럽게 신장을 놓습니다. 신장 동맥과 정맥을 확인하고 합자 (5.0 배치vicryl) 혈관 주위에 하나의 매듭하지만, 매듭을 묶을하지 않습니다. </li><li> 신장과 매듭 사이의 공간을 만들기 위해, 약 0.5 cm가 대동맥쪽으로 혈관을 따라 조심스럽게 느슨한 매듭을 이동합니다. 이 절단 후에 떨어져 미끄러지는 합자을 방지하기 위해 수행됩니다. </li><li> 두 배 매듭으로 매듭을 묶어. 혈류가 중단되는 경우, 신장의 색은 바로 갈색으로 변경됩니다. 합자의 끝을 절단하지 마십시오. </li><li> 신장에 가까운 신장 혈관을 차단하고 신장을 제거합니다. 부드럽게 신장 혈관의 출혈을 확인하는 합자의 긴 끝냅니다. 끈은 선박에 그 자리에 체재한다. 합자의 긴 끝을 잘라. 참고 남은 신장 혈관 즉시 복강에 철회 할 것이다. </li><li> 얼룩 절제 신장 건조하고 무게. </li><li> Vicryl 5.0에 봉합을 실행하는 골격 근육 절개를 닫습니다. 뒷다리에 0.10 ML (0.03 ㎎ / ㎏) 부 프레 노르 핀 메신저를 주입. 를 닫습니다피내 봉합 Vicryl 4.0 피부. 이 상처를 열지 쥐를 방지 할 수 있습니다. 참고 : 루이스 쥐에서 호흡 저하로 인해, 우리는 단지 isoflurane을을 전환하기 전에 수술 후 진통을 제공합니다. </li><li> 음식과 물에 쉽게 접근 할 수있는 깨끗한 독방 케이지의 쥐를 집입니다. 온난화 패드 O / N에 케이지 절반을 놓고 조심스럽게 쥐 다음날 확인합니다. 상처가 닫혀 있고 쥐가 수술 후 6 ~ 12 시간 사이에 일반적입니다, 활성화 될 때, 쥐가 그룹 하우징에 다시 배치 할 수 있습니다. </li></ol> 3. 왼쪽 소계 절제 <ol><li> 7 일 후에 같은 준비가로 2.1에서 2.5에 설명 된 오른쪽 측면으로 왼쪽에 만들어집니다. 수술 전, 오른쪽 신장의 무게의 약 2/3rds에 해당 제거해야 신장 조직의 양이 계산됩니다. 수술 전 젤 거품의 작은 조각 (Spongostan, 존슨 앤 존슨, 뉴저지) 준비합니다. </lI&gt; <li> 왼쪽 신장의 상단 기둥 주위에 날카로운 가위를 배치 한 뇌졸중 (가위 위치를 그림 3 참조) 상부 기둥을 잘라 내다. 젤 거품의 조각으로 즉시 뚜껑을 덮고 멸균 거즈와 가벼운 압력을 발휘. </li><li> 3.3에서와 같이 신장의 하부 극 반복합니다. </li><li> 피부에 혈액 응고 방지하기 위해 신장을 올립니다. 출혈이 멈출 때까지 멸균 거즈로 젤 거품 패드 모두에서 가벼운 압력을 유지합니다. 출혈이 지속되면 다른 폼 패드를 추가합니다. </li><li> 복부 안쪽에 부착 젤 거품 패드로 남은 신장을 놓습니다. 근육과 피부를 닫고 2.9-2.12를 따릅니다. </li></ol> 4. 가짜 수술 <ol><li> 가짜 작동 컨트롤은 신장을 노출하기 위해 동일한 절차를 겪는다. 대신 신장 extirpating 또는 일주일 후 채를 절단, 신장 모두 부신 분비를 방해하지 돌보는, 일주일 간격으로 캡슐화가 있습니다. 상처 봉합 수술 후 관리는 ID이다2.11와 2.12에 entical. </li></ol>

<ol><li>AS, G. o, Chertow, G. M., Fan, D., McCulloch, C. E., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+kidney+disease+and+the+risks+of+death%2C+cardiovascular+events%2C+and+hospitalization%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Chronic kidney disease and the risks of death, cardiovascular events, and hospitalization.</a> N. Engl. J. Med. 351 (13), 1296-1305 (2004).</li>
<li>Fleck, C., Appenroth, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suitability+of+5%2F6+nephrectomy+%285%2F6NX%29+for+the+induction+of+interstitial+renal+fibrosis+in+rats--influence+of+sex%2C+strain%2C+and+surgical+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Toxicol.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Suitability of 5/6 nephrectomy (5/6NX) for the induction of interstitial renal fibrosis in rats--influence of sex, strain, and surgical procedure.</a> Exp. Toxicol. Pathol. 57 (3), 195-205 (2006).</li>
<li>Griffin, K. A., Picken, M. M., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+structural+correlates+of+glomerulosclerosis+after+renal+mass+reduction+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Functional and structural correlates of glomerulosclerosis after renal mass reduction in the rat.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 11 (3), 497-506 (2000).</li>
<li>Kang, D. H., Kanellis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+microvascular+endothelium+in+progressive+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Role of the microvascular endothelium in progressive renal disease.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 13 (3), 806-816 (2002).</li>
<li>Baylis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+synthase+derangements+and+hypertension+in+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Nephrol.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide synthase derangements and hypertension in kidney disease.</a> Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 21 (1), 1-6 (2012).</li>
<li>Bongartz, L. G., Braam, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+nitric+oxide+reduction+induces+permanent+cardiac+systolic+dysfunction+and+worsens+kidney+damage+in+rats+with+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Transient nitric oxide reduction induces permanent cardiac systolic dysfunction and worsens kidney damage in rats with chronic kidney disease.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 298 (3), 815-823 (2010).</li>
<li>Fujihara, C. K., De N, G., Zatz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+nitric+oxide+synthase+inhibition+aggravates+glomerular+injury+in+rats+with+subtotal+nephrectomy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Chronic nitric oxide synthase inhibition aggravates glomerular injury in rats with subtotal nephrectomy.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 5 (7), 1498-1507 (1995).</li>
<li>Fujihara, C. K., Sena, C. R., Malheiros, D. M., Mattar, A. L., Zatz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+nitric+oxide+inhibition+induces+progressive+nephropathy+after+regression+of+initial+renal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Short-term nitric oxide inhibition induces progressive nephropathy after regression of initial renal injury.</a> Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290 (3), F632-F640 (2006).</li>
<li>Dikow, R., Kihm, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+infarct+size+in+uremic+rats%3A+reduced+ischemia+tolerance%3F%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Increased infarct size in uremic rats: reduced ischemia tolerance?</a> J. Am. Soc. Nephrol. 15 (6), 1530-1536 (2004).</li>
<li>Elrashidy, R. A., Asker, M. E., Mohamed, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pioglitazone+attenuates+cardiac+fibrosis+and+hypertrophy+in+a+rat+model+of+diabetic+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cardiovasc.+Pharmacol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Pioglitazone attenuates cardiac fibrosis and hypertrophy in a rat model of diabetic nephropathy.</a> J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. 17 (3), 324-333 (2012).</li>
<li>Haylor, J., Schroeder, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+gadolinium+following+use+of+MR+contrast+agents+in+a+rat+model+of+nephrogenic+systemic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Skin gadolinium following use of MR contrast agents in a rat model of nephrogenic systemic fibrosis.</a> Radiology. 263 (1), 107-116 (2012).</li>
<li>Moriguchi, Y., Yogo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+hypertrophy+is+associated+with+inflammation+in+sodium+loaded+subtotal+nephrectomized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Res%22%5BJournal%5D)">Left ventricular hypertrophy is associated with inflammation in sodium loaded subtotal nephrectomized rats.</a> Biomed. Res. 32 (2), 83-90 (2011).</li>
<li>van Koppen, A., Joles, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healthy+bone+marrow+cells+reduce+progression+of+kidney+failure+better+than+CKD+bone+marrow+cells+in+rats+with+established+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Healthy bone marrow cells reduce progression of kidney failure better than CKD bone marrow cells in rats with established chronic kidney disease.</a> Cell Transplant. , (2012).</li>
<li>Baylis, C., Corman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aging+kidney%3A+insights+from+experimental+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">The aging kidney: insights from experimental studies.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 9 (4), 699-709 (1998).</li>
<li>Szabo, A. J., Muller, V., Chen, G. F., Samsell, L. J., Erdely, A., Baylis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nephron+number+determines+susceptibility+to+renal+mass+reduction-induced+CKD+in+Lewis+and+Fisher+344+rats%3A+implications+for+development+of+experimentally+induced+chronic+allograft+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol.+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Nephron number determines susceptibility to renal mass reduction-induced CKD in Lewis and Fisher 344 rats: implications for development of experimentally induced chronic allograft nephropathy.</a> Nephrol. Dial Transplant. 23 (8), 2492-2495 (2008).</li>
<li>Darling, I. M., Morris, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+%22true%22+creatinine+clearance+in+rats+reveals+extensive+renal+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm.+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of "true" creatinine clearance in rats reveals extensive renal secretion.</a> Pharm. Res. 8 (10), 1318-1322 (1991).</li>
<li>Levey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+renal+function+in+chronic+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Measurement of renal function in chronic renal disease.</a> Kidney Int. 38 (1), 167-184 (1990).</li>
<li>Myers, G. L., Miller, W. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+improving+serum+creatinine+measurement%3A+a+report+from+the+Laboratory+Working+Group+of+the+National+Kidney+Disease+Education+Program%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Chem%22%5BJournal%5D)">Recommendations for improving serum creatinine measurement: a report from the Laboratory Working Group of the National Kidney Disease Education Program.</a> Clin. Chem. 52 (1), 5-18 (2006).</li>
<li>Hostetter, T. H., Meyer, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+clearance+methods+for+measurement+of+glomerular+filtration+and+tubular+reabsorption%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">The development of clearance methods for measurement of glomerular filtration and tubular reabsorption.</a> Am. J. Physiol. Renal Physiol. 287 (5), F868-F870 (2004).</li>
<li>Koeners, M. P., Racasan, S., Koomans, H. A., Joles, J. A., Braam, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide%2C+superoxide+and+renal+blood+flow+autoregulation+in+SHR+after+perinatal+L-arginine+and+antioxidants%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Physiol.+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide, superoxide and renal blood flow autoregulation in SHR after perinatal L-arginine and antioxidants.</a> Acta. Physiol. (Oxf). 190 (4), 329-338 (2007).</li>
<li>van den Brandt, J., Wang, D., Kwon, S. H., Heinkelein, M., Reichardt, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentivirally+generated+eGFP-transgenic+rats+allow+efficient+cell+tracking+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">Lentivirally generated eGFP-transgenic rats allow efficient cell tracking in vivo.</a> Genesis. 39 (2), 94-99 (2004).</li>
<li>Kreutz, R., Kovacevic, L., Schulz, A., Rothermund, L., Ketteler, M., Paul, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+high+NaCl+diet+on+spontaneous+hypertension+in+a+genetic+rat+model+with+reduced+nephron+number%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Effect of high NaCl diet on spontaneous hypertension in a genetic rat model with reduced nephron number.</a> J. Hypertens. 18 (6), 777-782 (2000).</li>
<li>Liu, Z. C., Chow, K. M., Chang, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+two+protocols+of+uremic+rat+model%3A+partial+nephrectomy+and%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Evaluation of two protocols of uremic rat model: partial nephrectomy and.</a> 25 (6), 935-943 (2003).</li>
<li>Griffin, K. A., Picken, M., Bidani, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+of+renal+mass+reduction+is+a+critical+modulator+of+subsequent+hypertension+and+glomerular+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Method of renal mass reduction is a critical modulator of subsequent hypertension and glomerular injury.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 4 (12), 2023-2031 (1994).</li>
<li>Meyer, F., Ioshii, S. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+partial+nephrectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Cir.+Bras%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic partial nephrectomy in rats.</a> Acta. Cir. Bras. 22 (2), 152-156 (2007).</li>
</ol>

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높은 소금 다이어트 및 임시 NOS 억제와 결합 루이스 쥐에서 신장 질량의 5/6th의 외과 제거는 인간의 CKD 유사한 CKD의 모델에 이르게 및 CKD의 치료 개입의 인과 관계 메커니즘과 효능을 연구 할 수 있습니다. 5/6th의 절제 모델은 CKD에 대한 잘 알려진 광범위하게 설명하는 모델입니다. 그러나 단순히 신장 질량의 5/6th을 제거하면 모든 쥐의 변종 즉시 신부전으로 이어질하지 않습니다. 우리는 GFP + 루이스 쥐 21의 가용성으로 CKD에있는 세포 기반 치료의 효과를 연구하기 위해 루이스 쥐를 사용하여받는 사람의 관리 기증자 세포의 세포 추적 (nonGFP +) 쥐 수 있습니다. 루이스 쥐 속도가 느린 다른 변종 22, 15에 비해 신장 손상 및 CKD의 개발의 개발에 상대적으로 저항한다. 이 인간 CKD의 여러 측면과 유사 이래 그러므로 우리는 NO 고갈과 높은 소금 다이어트 신장 질량의 5/6th...

그 진보적 성격, 계속되는 말기 신장 질환과 관련된 심혈 관계 이환율과 사망률로 인해 CKD는 성장 공중 보건 문제 1. CKD의 진행을 둔화 따라서 중요한 건강 우선 순위입니다. CKD는 항상성의 복잡한 derangements 특징 때문에, 통합 동물 모델은 CKD의 개발 및 진행을 연구 할 필요가있다. 신장은 서로 상호 작용하는 다른 세포 유형의 다양한으로 구성되어 있습니다. 이러한 복잡성은 체외에서 모방 할 수 없습니다. CKD에 새로운 치료 개입을 연구하기 위해, 우리는 인간의 CKD 2,3의 여러 측면을 닮은 5/6th 절제 절제 모델, 진보적 인 신장 질환의 잘 알려진 실험 모델을 사용합니다. 신장 질량 총 감소는 진보적 인 사구체와 tubulo-간질 부상, 남은 네프론의 손실과 조직 및 사구체 고혈압의 개발을 발생합니다. 이 progr을과 연관되어essive intrarenal 모세관 손실 4, 염증과 사구체. 위험 요인은 결국 내피 세포 기능 5에 미치는 영향을 CKD. 우리는 CKD의 개발에 상대적으로 저항하는 쥐의 변형 (루이스)를 사용하기 때문에 우리는 산화 질소 (NO) 고갈 6, 7, 8, 높은 소금 다이어트 9에서 신장 질량의 5/6th의 제거를 결합했다. 도착 적응 한 후, 동물 이틀 후 L-NNA의 지속과 오른쪽면 uninephrectomy (UNX) 다음에 사주의 기간 동안 물 (20 ㎎ / L)을 첨가 NO 합성 효소 억제제 (L-NNA), 수신하지 . 일주일 후, 신장 질량의 2/3rds의 소계 절제 (SNX) 즉, 제거는 왼쪽에 수행됩니다. SNX 후, 동물을 4 주 동안 마시는 물에 20 ㎎ / L LNNA에 이어 다시 이틀 복구 할 수 있습니다. 지상 차우 (시간 선 그림 1 참조) 보충 높은 소금 다이어트 (6 %)을, 실험을하는 동안 계속됩니다. 티그는 오른쪽에 UNX을 수행 할 수있는 이성과 왼쪽에 SNX은 신장 혈관이 쉽게 신장이 신체 외부에 노출되었을 때 너무 많은 혈관을 스트레칭하지 않고 신장에 액세스 할 수 있습니다 왼쪽에 더 이상 것입니다 . 문학, 모델은 일주일 후 10,11,12 오른쪽 신장 UNX 다음, 왼쪽 신장의 극을 먼저 제거되는 설명되어 있습니다. 우리의 손이 모델은 신장 장애의 더 빠른 발전을 보였다, 또한 신장 기능의 손실에 훨씬 더 큰 변화. 신부전의 진행은 혈중 요소, 수축기 혈압과 단백뇨를 측정하여 시간이 지남에 따라한다. SNX 후 6 주까지, 신부전, 개발 사구체 여과 속도의 현저한 감소 (69 %)하고 효과적인 신장 플라즈마 흐름 (62 %) 13 고혈압 (수축기 혈압&gt; 150 mmHg로), 단백뇨 (특징&gt; 50 mg/24 HR) 및 가벼운 요독증 (&gt; 10 MM). 조직 학적 특징은 tubul 포함오 - 간질 손상, 염증, 관 위축 및 섬유화와 나머지 인구 (&lt;10 %)에서 건강 사구체의 대규모 감소로 이어지는 초점 사구체 경화증으로 반영됩니다. 후속 최대 12 주 후까지 SNX는 치료 개입의 평가를위한 기회의 창을 제공 CKD의 추가 진행을 보여줍니다.

<table><tbody><tr><td>&nbsp;</td><td>&nbsp;</td><td>&nbsp;</td><td><강한>시약</강한></td></tr><tr><td>L-NNA</td><td>시그마-알드리치</td><td>N5501</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Spongostan dental : 젤 폼 패드 1x1x1 cm</td><td>Johnson & 존슨</td><td>Ms0005</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36</td><td>Ethicon</td><td>V303H</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36</td><td>Ethicon</td><td>V392H</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>부프레노르핀 (0.3 mg/ml)</td><td>현지 약사를 통해 Reckitt Benckiser 제약사에서 주문한</td> 알 <td>수 없음</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>&nbsp;</td><td>&nbsp;</td><td><강한>장비</강한></td></tr><tr><td>학생 조직 집게 - 1x2 치아 12cm</td><td>미세 과학 도구(FST)</td><td>91121-12</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>학생 표준 패턴 펜치</td><td>FST</td><td>91100-12</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>메이요 가위</td><td>FST</td><td>14010-15</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>2X 셈켄 펜치</td><td>FST</td><td>11008-13</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>학생 홍채 가위</td><td>FST</td><td>91460-11</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Olsen-Hegar 바늘 홀더</td><td>FST</td><td>12002-14</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4"> </td></tr></tbody></table>

높은 소금 다이어트와 루이스 쥐에서 만성 신장 질환을 유발하는 산화 질소 합성 효소 억제와 함께 5/6th의 절제

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

만성 신장 질환 (CKD)는 세계적인 문제입니다. CKD의 진행을 느리게하는 주요 건강 우선 순위입니다. CKD는 항상성의 복잡한 derangements 특징 때문에, 통합 동물 모델은 CKD의 개발 및 진행을 연구 할 필요가있다. CKD의 CKD 및 새로운 치료 개입의 개발을 연구하기 위해, 우리는 인간의 CKD의 여러 측면을 닮은 5/6th 절제 절제 모델, 진보적 인 신장 질환의 잘 알려진 실험 모델을 사용합니다. 신장 질량 총 감소는 진보적 인 사구체와 tubulo-간질 부상, 남은 네프론의 손실과 조직 및 사구체 고혈압의 개발을 발생합니다. 또한 진보적 인 intrarenal 모세 혈관 감소, 염증과 사구체 경화증과 연관되어 있습니다. 위험 요인은 결국 내피 세포 기능에 미치는 영향을 CKD. 이 모방하기 위해, 우리는 산화 질소 (NO) 고갈과 높은 소금 다이어트와 신장 질량의 5/6th의 제거를 결합합니다. 도착 적응 한 동물은 다시오른쪽면 uninephrectomy 다음에 사주의 기간 동안 물 (20 ㎎ / L)을 첨가 NO 합성 효소 억제제 (NG-니트로-L-아르기닌) (L-NNA)를 가압하지 않습니다. 일주일 후, 소계 절제 (SNX)이 왼쪽에서 수행됩니다. SNX 후, 동물을 4 주 더 동안 물 (20 ㎎ / L)에 LNNA 다음 이틀 동안 복구 할 수 있습니다. 지상 차우 (시간 선 그림 1 참조) 보충 높은 소금 다이어트 (6 %)을, 실험을하는 동안 계속됩니다. 신부전의 진행은 혈중 요소, 수축기 혈압과 단백뇨를 측정하여 시간이 지남에 따라한다. SNX 후 6 주까지, 신부전을 개발하고있다. 신장 기능이 &#39;황금 표준&#39;이눌린 및 파라 - 아미노 히 푸르 산 (PAH) 정리 기술을 사용하여 측정됩니다. CKD의이 모델은 사구체 여과율 (GFR)의 감소와 효과적인 신장 플라즈마 흐름 (ERPF), 고혈압 (수축기 혈압&gt; 150 mmHg로), 단백뇨 (&gt; 50 mg/24 시간이 특징입니다)와 가벼운 요독증 (&gt; 10 MM). 조직 학적 특징은 염증, 관 위축 및 섬유화와 나머지 인구 (&lt;10 %)에서 건강 사구체의 대규모 감소로 이어지는 초점 사구체에 반영 tubulo-간질 손상이 있습니다. 후속 SNX는 CKD의 추가 진행을 보여줍니다 12주 후까지.

부분합을 절제 한 후, 총 신장 질량의 약 1/6th이 남아 있습니다. 그림 4는 이전의 두 실험에서 평균과 ​​표준 편차의 오른쪽 신장 제거 된 부품의 무게를 보여줍니다. 하나는 UNX 후 주에, 왼쪽 신장의 비대가 발생하는 것을 염두에 두어야한다 나타내는 것을 5/6th 제거 미만 오른쪽 신장 항상 결과의 무게에 근거하여 산출 제거해야합니다 무게. 이 수술 중 좌측 신장의 무게를 결정하는 것이 가능하지 않기 때문에 그러나, 이것은 원래 신장 질량의 약 5/6th을 제거하는 가장 정확한 방법입니다. 시간이 지남에 따라 CKD를 가진 쥐 고혈압, 요독증, 빈혈, 단백뇨 및 GFR과 ERPF에 상당한 감소를 개발할 수 있습니다. 6 주 이후 설립 CKD는 구조 개입을 테스트 할 시간이 시점 적합한을 개발했습니다. 시간이 지남에 고혈압과 단백뇨의 강한 진행을 관찰하면서 헤마토크리트신장 기능 (GFR과 ERPF) 가벼운 저하 (그림 5)...

수술 신장 질량의 5/6th를 제거하여 루이스 쥐에서 만성 신장 질환 (CKD)을 설정하는 두 단계 방법을 설명합니다. 수술의 조합, NOS-억제와 높은 소금 다이어트 인과 관계 메커니즘과 새로운 치료 개입의 개발 연구를 허용, 인간의 CKD를 닮은 모델에 연결됩니다.

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

이 절차의 전반적인 목적은 루이스 쥐(Lewis rat)에서 만성 신장 질환을 유도하는 것입니다. 이는 먼저 산화질소 차단제인 NG Nitro, L arginine 또는 LNNA를 4주 동안 투여함으로써 수행됩니다. 그 다음, 오른쪽 신장 전체를 제거합니다.그 후 일주일 뒤에 왼쪽 신장의 3분의 2를 제거합니다. 마지막으로, LNNA 투여와 고염식 식단을 유지하면서 쥐의 신부전 진행 과정을 시간에 따라 관찰합니다. 최종적으로 소변을 수집하여 단백질과 헤마토크릿을 측정하고, 혈액, 혈장 또는 소변 내의 UIA 및 수축기 혈압을 측정함으로써 만성 신장 질환이 유도되었음을 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.신장 기능은 궁극적으로 이눌린 및 파라-아미노히푸르산(PAH) 청소율에 의해 결정됩니다. 이 방법은 만성 신장질환(CKD)의 병리에 대한 이해를 높이는 등 신장학 분야의 핵심적인 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으며, 치료적 중재의 효과를 연구하는 데 사용될 수 있습니다. 첫 신장 절제술 시행 4주 전부터 쥐의 음용수에 20 mg/L의 산화질소 합성효소 억제제인 LNNA를 투여하기 시작하십시오.이 타임라인에 따라 진행하십시오. 절차를 시작하기 전, 70% alcohol을 사용하여 테이블을 소독하십시오. 수술 준비를 위해 다음 기구들을 멸균하는 것부터 시작하십시오: 담요 1장, 1~2개의 치형(teeth)이 있는 12 centimeter student tissue forceps 1개, standard pattern student forceps 1개, simkin forceps 2개, mayo scissors 1개, student iris scissors 1개, 그리고 가위가 포함된 Olson heger needle holder 1개.그런 다음 다음의 준비물을 갖춥니다. 가온 패드와 램프, 산소 및 이소플루레인(isoflurine)이 구비된 수술대, 쉐이버, 멸균 수술 기구, 5x5 및 10x10 멸균 거즈, 70% 알코올, 0.9% 염화나트륨 용액, 1 mL 주사기, 25 gauge 바늘, 겔폼(gel foam) 패드, 4.0 및 5.0 Vicryl 봉합사, 0.03 mg/kg의 buprenorphine, 그리고 수술 후 쥐를 수용할 깨끗한 케이지를 준비합니다.유도 챔버에서 4% isoflurane으로 마취를 유도하고 전처치 진통제를 투여합니다. 필요한 경우, 쥐를 테이블 위 가열 패드 위에 왼쪽으로 눕혀 옮기고,

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Research

연구

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Medicine

의학

사구체여과율(GFR) 측정은 전반적인 신장 기능을 평가하기 위한 황금 표준입니다. 그러나 이 매개변수를 측정하는 기존 절차는 번거롭고 많은 시간을 투자해야 합니다. 여기에서는 사구체여과(GFR)를 경피적으로 결정하기 위한 더 빠르고 최소 침습적인 방법에 대해 설명합니다.

의식 설치류에서 신장 기능의 경피 평가

이 원고 마우스 5/6일 부분 신 (PNx) 극 결 찰과 수행에 상세한 2 단계 수술 절차를 제공 합니다. 수술 후 4 주 운영 하는 가짜 쥐에 비해 PNx 마우스 개발 장애 신장 기능, 빈 혈, 심장 비 대, 심장 섬유 증, 및 심장 수축 기 및 diastolic 기능 감소.

마우스 5/6일 신 모델 실험 신부전 심근을 유도

이 원고는 쥐 대뇌 저항 동맥 혈관 기능을 평가 하기 위한 비디오 현미경 검사 법 프로토콜을 체 외에 설명 합니다. 원고는 또한 레이저 도플러 Flowmetry를 사용 하 여 붙일 레이블된 lectin과 조직 관류와 microvessel 밀도 평가 하기 위한 기법을 설명 합니다.

쥐의 고립 된 저항 동맥의 비디오 현미경을 이용 하 여 혈관 제어 메커니즘의 평가

이 원고와 프로토콜의 목적은 쥐에서 직교 신장 이식의 외과 수술을 상세히 설명 하 고 입증 하는 것입니다. 이 방법은 기증자 신장의 정확한 관류를 달성 하 고 정 맥 및 요 추 팔목 문 합 기술을 사용 하 여 재 관류 시간을 단축 하기 위해 단순화 된다.

직교 쥐 신장 이식: 새롭고 단순화 된 외과 접근

변형된 2 신장 1 클립(2K1C) Goldblatt 마우스 모델은 폴리우레탄 튜브를 사용하여 신장 동맥 협착을 개시하여 레닌 발현 및 신장 손상의 증가를 유도하여 개발되었다. 여기에서는 재현 가능하고 일관된 2K1C 마우스 모델을 생성하기 위해 커프를 준비하고 신장 동맥 상에 배치하는 자세한 절차를 설명합니다.

신장 동맥 협착증에서 레닌 조절의 수정 된 두 신장 하나의 클립 마우스 모델

쥐 동위원소 신장 이식 모델은 신장 동종이식편 거부의 메카니즘을 조사하는 데 기여한다. 현재의 모델은 신장 이식의 종단 간 해부학과 요관 방광 문합술의 종단 간 "터널"방법을 사용하여 혈액 공급 및 정맥 역류에 간섭하지 않고 수혜자의 생존을 증가시킵니다.

신장 동종이식편 거부반응을 위한 쥐 동위원소 신장 이식 모델

이 프로토콜은 쥐 총장골 동정맥루 생성의 수술 단계를 자세히 설명합니다. 우리는 혈액 투석 접근 관련 사지 병태생리학을 연구하기 위해 이 모델을 개발했습니다.

혈액 투석 접근 관련 손 기능 장애의 쥐 모델

본 원고는 랫트 모델에서 정중선 개복술을 통한 날카로운 양극절제술에 의한 5/6 신절제술을 위한 표준화된 프로토콜을 소개하며, 체계적인 정밀도가 높고 기술적 오류 위험이 낮은 신실질 절제술을 통해 신부전 상태를 유도하는 것을 목표로 합니다.

5/6 쥐에서 정중선 개복술을 통한 날카로운 양족 절제술을 사용한 신장 절제술

본 글은 단측 신장 IRI를 이용한 허혈성 CKD 모델을 제시하고, 샘플 채취 하루 전에는 반대쪽 신장 절제술을 시행합니다; 이 프로토콜은 혈청 기반 기능 평가, 높은 생존율, 그리고 28일과 42일간의 CKD 병리 재현 가능성을 가능하게 하여, 기전 및 중재적 연구를 위한 다재다능한 플랫폼을 제공합니다.

신장 허혈/재관류 손상에 의해 유도된 급성 신장 질환에서 만성 신장 질환으로의 전환 마우스 모델

질소 산화물 (NO)의 내생적인 생산은 생물 학적 기능의 다양한 조절. 그것은 어떠한 기반 시그널링의 장애 또는 dysregulation이 많은 사람이 질병에 연루되어 있는지 점점 더 분명 해지고 있습니다. 메소드는 더 이상 metabolites 인간 질병에 대한 소설 진단 또는 전조 생체 자료를 제공할 수 없습니다 관련된 계량합니다.

질소 산화물 Bioactivity을 시금을위한 분석 기법

학습하세요 Lewis 쥐에서 만성 신장 질환을 유도하는 방법을 알아보세요. 산화 질소 합성 효소 억제제와 고염분 식이를 활용한 5/6 신장 절제술을 통해 신부전 메커니즘을 연구하고 새로운 치료법을 개발할 수 있습니다.

높은 소금 다이어트와 루이스 쥐에서 만성 신장 질환을 유발하는 산화 질소 합성 효소 억제와 함께 5/6th의 절제

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