1.14: 샘플의 보존 : 냉장고,냉동고, 극저온 냉동고의 이용

실험실 샘플, 표본 및 시약의 보존은 전 세계 연구 실험실의 요구 사항입니다. 시간이 지나도 시료의 무결성과 생존력을 보존하는 효율적인 방법은 저온에서 유지하는 것입니다.

벤치에서 샘플로 작업하거나 실험이 끝날 때 샘플을 보관하는 경우 다양한 냉각 방법을 사용할 수 있습니다. 이 동영상은 실험실에서 일반적으로 볼 수 있는 냉각제 및 기기의 유형을 보여주고 어떤 유형의 시료가 어떤 온도에서 보관되는지 이해하는 데 도움이 됩니다.

냉각제의 선택은 수행되는 실험 절차의 특성에 따라 다릅니다.

재래식 얼음은 단기적으로 샘플을 보존하기 위한 논리적인 선택입니다. 당신은 아마 얼음이 녹는 점이 0인 얼어붙은 물이라는 것을 알고 있을 것입니다. 이 위상 다이어그램에서 볼 수 있듯이 정상 대기압에서 C. 당신은 그것이 때때로 "젖은 얼음"이라고 불린다는 것을 모를 수도 있습니다., 실온에서 따뜻해지면 액체가 되기 때문입니다.

? 젖은 얼음? 샘플과 시약을 작업하거나 운반하는 동안 차갑게 유지하는 데 이상적입니다.

?젖은 얼음? 고체 H2O, 드라이 아이스입니까? 드라이 아이스는 대기압에서 액체로 녹지 않고 승화라는 과정을 통해 직접 이산화탄소 가스로 변형되는 고체 형태의 이산화탄소입니다. 승화는 물질의 위상이 고체에서 기체로 직접 이동하는 것을 말하며 위상 다이어그램의 삼중 점 아래에서 발생합니다.

일반적으로 0°C보다 훨씬 낮은 온도에서 보관되는 얼어붙은 박테리아 또는 포유류 세포 또는 조직과 같은 생물학적 표본으로 작업할 때 드라이아이스를 사용하십시오.

드라이아이스는 상태 변경 시 잔류물을 남기지 않기 때문에 유리하여 드라이아이스 위에 액체를 부어 냉동조를 구성하는 데 이상적입니다.

액체 질소는 응축 된 질소 가스입니다. 일반적으로 다음과 같이 작성됩니까? LN2?. 대기압에서 액체 질소는 -196에서 끓거나 액체에서 기체로 전환됩니다. C, 위상 다이어그램으로 볼 수 있습니다.

대부분의 실험실 냉동고가 얻을 수 있는 온도보다 낮은 온도에서 생물학적 표본을 보관해야 하는 경우 액체 질소가 사용됩니다.

액체 질소는 시스템 내의 압력 상승을 방지하기 위해 릴리프 밸브가 장착된 느슨한 뚜껑 또는 대형 탱크 듀어가 있는 듀어 또는 진공 플라스크에 저장할 수 있습니다.

무독성이지만 드라이아이스와 액체 질소는 위험한 물질이므로 실험실의 숙련된 구성원에게 교육을 받기 전까지는 취급해서는 안 됩니다.

액체 질소와 드라이아이스의 온도가 매우 낮기 때문에 피부와 접촉하면 심각한 조직 손상이 발생할 수 있습니다. 항상 극저온 장갑과 실험복을 포함한 적절한 보호 장비를 착용하십시오. 도구를 사용하여 샘플을 조작하여 피부와의 접촉을 피하십시오.

또한 밀폐 용기는 드라이 아이스 또는 액체 질소를 저장하는 데 사용해서는 안 됩니다., 이러한 냉각제는 상태를 가스로 바꾸기 때문입니다. 밀폐된 조건에서는 압력이 증가하여 폭발로 이어질 수 있습니다.

이제 시료를 차갑게 유지하는 기기에 대해 알아보겠습니다. 실험실용 냉장고와 냉동고는 가정에서 볼 수 있는 것보다 온도를 더 엄격하게 조절하여 장치 전체의 온도를 균일하게 유지합니다.

일반적으로 온도 모니터링 시스템과 심각한 온도 변화 후에 울리는 경보가 장착되어 있습니다.

독성 화학 물질이나 박테리아로 오염될 수 있으므로 실험실 냉장고나 냉동고에 음식이나 음료를 보관하지 마십시오. 점심을 보관할 다른 장소를 찾아야합니다.

냉장고는 4시에 유지됩니까? C는 일반적으로 샘플의 임시 보관에 사용되며, 특히 동결이 샘플 무결성에 영향을 줄 수 있습니다.

많은 시약과 용액은 4? C는 사용 전에 데워진 조직 배양 배지 및 부어진 세포 배양 플레이트를 포함하여 유통 기한을 연장합니다.

냉장실은 액체 크로마토그래피 장치와 같이 저온에서 작동해야 하는 대형 장비를 보관하는 데 이상적입니다.

실험실 등급 냉동고의 온도 범위는 -20도입니까? C에서 -196 ? C: 극저온 냉동고용.

핵산 및 시약, 예를 들어 제한 효소의 저장, -20 ? C가 적절한 선택입니다. 냉동실에서 꺼낸 후에는 샘플과 시약을 얼음 위에 보관해야 합니다.

-80? C 및 극저온 냉동고는 액체 질소에서 동결 보존 후 장기간 동안 냉동 조직 및 세포를 보관하는 데 적합합니다. 드라이 아이스는 일반적으로 -80에서 채취 한 샘플을 운반하는 데 사용됩니다. C 냉동고.

냉동 보존(Cryopreservation)은 조직 또는 살아있는 세포의 장기 보관을 지칭하는 용어입니다. 영하의 온도에서는 샘플을 분해하는 반응을 포함한 모든 생물학적 활동이 효과적으로 중단됩니다.

살아 있는 세포와 조직을 얼릴 때 얼음 결정이 형성되어 세포 탈수 및 손상으로 이어질 수 있을 뿐만 아니라 용질 분자가 유해한 농도로 축적될 수 있습니다.

스냅 또는 급속 냉동은 생물학적 샘플을 액체 질소 또는 드라이 아이스와 에탄올의 혼합물에 빠르게 담가 큰 얼음 결정이 형성되어 세포를 손상시킬 수 없도록하는 과정입니다. 동결 보호제는 얼음 형성을 줄이기 위한 첨가제로도 사용할 수 있습니다.

급속 냉동의 대안으로, 기계를 사용하여 여기에서 볼 수 있는 양 배아를 동결 보존하는 데 필요한 냉동 과정을 천천히 제어할 수 있습니다.

최근에는 얼음 결정으로 인한 손상 없이 세포와 조직을 동결 보존하는 방법으로 유리화(vitrification)가 도입되고 있습니다. 이 과정은 특정 동결 보호제가 있는 상태에서 급속 냉각을 통해 샘플의 액체를 비결정질의 유리 같은 고체로 변환합니다.

당신은 방금 실험실 표본 및 시약 냉각에 대한 JoVE의 소개를 보았습니다.

이 비디오에서는 다양한 유형의 냉각제 및 장비와 각 냉각 방법을 사용하는 경우의 예를 검토했습니다. 또한 생물학적 표본을 동결 보존하는 몇 가지 방법을 소개했습니다. 시청해 주셔서 감사합니다.