2013년 10월 16일
지난 몇 년 동안, 새로운 세대의 내시경은 쥐 대장염과 대장 종양을 평가하기위한 중요한 진단 연구 보조로 등장했습니다. 우리는 생쥐의 염증과 대장 종양의 내시경 적 평가뿐만 아니라 대장염과 대장 종양의 내시경 심각도를 문서화하는 진수 식별자를 사용하는 새로운 채점 시스템에 여기에 대한 자세한 프로토콜을 제시한다.
안녕하세요.저는 도쿄에 있는 닌텐도 대학의 pH를 방문하는 토모히로 카니(Tomohiro Kani)이고, 웨스턴 리저브 대학교 의과대학의 소화기 건강 연구 센터(Digestive Health Research Center)의 소장인 파비오 엘리(Fabio Elli)입니다. 이 비디오에서는 마우스에서 대장내시경을 수행하는 방법론을 설명합니다. 정상적인 내시경 해부학적 구조에 익숙해지는 것의 중요성을 강조합니다.
외상 및 이미지 아티팩트를 최소화하기 위해 내시경 검사 중 문제를 효과적으로 해결하는 방법을 설명합니다. 마지막으로, 대장염 및 대장염 관련 암의 뮤 아이 모델에서 장 염증 평가를 위한 채점 시스템을 설명하십시오. 경청해 주셔서 감사합니다.
먼저 내시경을 비디오 시스템 센터와 광원에 부착할 때 내시경 시스템을 설정합니다. 내시경을 살균하고 공기 주입을 위해 주사기를 부착합니다. 그런 다음 시스템을 켜고 동물과 함께 화이트 밸런스를 조정합니다.
적절하게 마취 및 구속되면 내시경 검사를 시작합니다. 필요에 따라 생검 샘플을 얻을 수 있습니다. 범위를 지정한 후 마지막에 복구를 위해 조명으로 마우스를 따뜻하게 합니다.
대장 염증 및 대장 관련 대장암 평가를 위한 채점 시스템이 설명됩니다. 내시경 시스템 설정. 내시경 시스템에는 비디오 시스템 센터, 크세논 광원 및 비디오 레코더가 포함됩니다.
우리는 쥐의 대장 내시경을 위해 인간 요관경을 사용합니다. 당사의 스코프 URFV는 CCD 센서를 사용하는 유연한 비디오 스코프입니다. 삽입 튜브의 외경은 3.3mm이고 말단 끝의 직경은 2.8mm입니다.
시작하려면 스코프를 비디오 시스템 센터와 광원에 연결합니다. 다음으로, 내시경과 렌즈 표면을 70% 에탄올로 살균합니다. 그런 다음 3mm 주사기를 작업 채널에 부착합니다.
이것은 흡입 또는 흡인으로 루미날 내 공기의 양을 조절하는 데 사용됩니다. 메인 스위치를 켜고 화이트 밸런스를 설정합니다. 또한 NBI 모드 2에서 설정하여 마우스를 마취하는 것을 잊지 마십시오.
먼저, 흡입 마취를 시연하겠습니다 불소를 사용하여 4-5%의 불소를 유도에 사용합니다. 마우스가 움직임을 멈춘 후 농도를 유지 용량인 1-2%로 줄입니다.꼬리와 하지를 테이핑하여 테이블 위에 마우스를 제지합니다. 테일 테이핑은 범위를 지정하는 동안 마우스를 고정하는 데 특히 중요합니다.
또한, tri bromo의 복강 내 주사. 에탄올은 마취에 사용할 수 있습니다. 3. 내시경 검사항문 주위 병변은 내시경 평가의 일부가 아니지만 중요한 소견이므로 삽입 전에 관찰해야 하며 외상성 출혈과 혼동하지 않아야 합니다.
내시경을 수술용 윤활제로 코팅하기 전에 CCD 센서를 코팅하지 마십시오. 항문을 통해 내시경을 삽입합니다. 이 초기 삽입은 맹인 삽입이 결장 결장 점막을 손상시킬 수 있으므로 가능한 한 부드럽게 이루어져야 합니다.
조명을 켜고 녹음을 시작합니다. 에어 시린지를 천천히 조심스럽게 밀어 시야를 확보합니다. 공기를 너무 많이 주입하면 입안이 죽을 수 있습니다.
자연 출혈의 존재 여부는 내시경을 직장 또는 결장 각도에 삽입할 때 판단해야 합니다. 핸들링은 뷰를 수직으로 조정하고 토크 제어는 수평 조정을 위한 것입니다. 이 두 컨트롤 간의 조정은 매우 중요합니다.
투명도를 관찰합니다. 정상적인 결장에서 벽은 정상적인 혈관으로 투명하고 두께가 없습니다. 투명성은 혈관 또는 벽외 장기의 벽면 가시성으로 정의됩니다.
삽입과 당기기를 반복하는 동작은 정상 결장에서의 평가에 도움이 됩니다. 검사 중에 작은 혈관과 큰 혈관이 모두 보입니다. 필요에 따라 사진이나 생검 샘플을 촬영할 수 있습니다.
접촉 출혈이 있는지 확인하십시오. 내시경을 빼낼 때 의도적으로 점막을 긁어낼 필요는 없습니다. 협대역 이미징 모드는 점막에 있는 혈관의 미세한 구조를 강조합니다.
직장은 근육으로 둘러싸여 있지만 결장은 주변 조직에 의해 고정되어 있지 않습니다. 이러한 해부학적 차이 때문에 직장에서는 벽외 내장이 보이지 않습니다. 대변 알갱이는 때때로 항문 가까이에 존재합니다.
공기 흡입으로 제거할 수 있지만 때로는 지속되어 내시경 시야를 방해할 수 있습니다. 이 경우 대변을 씻어내기 위해 최대 1mil의 PBS 관장을 사용합니다. 대변은 보통 몇 분 후에 배설된다.
렌즈에 번짐으로 인해 발생하는 흐릿한 시야도 일반적인 문제이며, 특히 대장염이나 출혈의 경우 더욱 그렇습니다. 이 상황에서 우리는 공기를 주입하여 렌즈를 청소하려고 했습니다. 이 절차는 스코프를 빼지 않고 렌즈를 청소하는 데 성공할 수 있습니다.
연동 운동은 장의 정상적인 생리적 활동 중 하나입니다. 연동 운동 중에는 공기 주입이 내강을 확장하는 데 성공하지 못하기 때문에 연동파가 지나갈 때까지 기다려야 합니다. 넷째, 생검 생검 검체는 유연한 생검 컵 겸자를 사용하여 얻습니다.
컵은 손잡이로 열고 닫습니다. 집게를 작업 채널에 삽입합니다. 장을 뚫지 않도록 주의하세요.
컵을 적당한 크기로 열고 팁을 관심 영역에 놓습니다. 컵을 부드럽게 닫고 단단히 당깁니다. 적절한 용액으로 세척하여 시편을 제거합니다.
다섯 번째는 회복입니다. 검사 후 회복될 때까지 마우스를 따뜻하게 하십시오. 우리는 결장 염증에 대한 6 개의 점수를 데우기 위해 전기 조명을 사용합니다.
당사의 채점 시스템은 4개의 매개변수, 즉 항문 주위 병변 1개, 결장 벽의 투명도 2개, 장 출혈 3개, 국소 병변 4개로 구성됩니다. 각 매개변수는 0에서 3까지 점수를 매길 수 있습니다. 최대 총점은 12입니다.
또한 특정 내시경 결과를 강조하는 데 사용할 수 있는 십진수 단위 척도가 포함되어 있습니다. 각 매개변수에 대한 자세한 설명은 함께 제공되는 원고에서 확인할 수 있습니다. 다음은 첫 번째 요약인 항문 주위 병변입니다.
이 소견은 직장에 내시경을 도입하기 전에 관찰해야 합니다. 이렇게 하면 외상성 출혈로 인한 혼동을 피할 수 있습니다. 점수가 0이면 정상입니다.
점수 2는 피가 섞인 방전에 대한 것입니다. 3번은 육아 조직 또는 직장 탈출증에 대한 것입니다. Two. 투명도. 이것은 결장 벽과 주변 내장의 혈관을 시각화하는 능력을 나타냅니다.
점수가 0이면 혈관이 명확하게 보인다는 것을 나타냅니다. 1점을 기록하세요. 작은 혈관은 부분적으로 보이지 않지만 큰 혈관은 보입니다.
2점을 기록하세요. 작은 혈관은 일반적으로 보이지 않으며 큰 혈관도 투명하지 않습니다. 점수 3은 점수 2와 동일하고 결장의 모양이 두꺼워집니다. 3.
출혈, 자연 출혈은 접촉 출혈과 구별해야 합니다. 그에 따라 판단하십시오. 점수 1은 접촉 출혈이 완만한 표준 범위 지정 절차인 점수 3에 의해 유발됨을 나타냅니다.
결장에 들어갈 때 자발적인 출혈이 나타납니다. 넷째, 국소 병변. 이러한 결과는 종종 염증을 동반하는 국소 조건을 반영합니다.
1점을 기록하세요. 플라크(Plaque)는 겉보기에 정상적인 점막으로 덮인 평평한 높이입니다. 2점을 기록하세요.
레드 엔드 영역 침식은 3점을 얻습니다. 피브린과 같은 물질로 덮인 궤양 침식. NBI는 이것을 인식하는 데 도움이 됩니다.
10진수 디스크립터. 세 개의 매개변수를 추가하고 소수점 점수.0.1을 부여했습니다. 협착의 경우 장 파열 또는 천공 점수 0.2, 종양 병변 발표 사례 1에 대한 점수 0.5.
클로스트리듐 디피실 감염이 있는 마우스. 그것은 정상적인 투명도를 가지고 있지만 초기 침식을 가지고 있습니다. 작은 침식이 보이지만 배경 점막은 정상입니다.
자세히 관찰하면 이 병변을 둘러싼 약간의 부종이 드러납니다. 또한. 다른 부분에서는 염증의 존재를 나타내는 소견이 없습니다. 사례 2.
고지방 식단에서 DSS로 인한 대장염이 있는 마우스. 이 경우 불투명, 자발적인 출혈 및 협착이 나타납니다. 처음에는 출혈이 보입니다.
그것은 자발적입니다. 여기에 협착이 있습니다. 공기 주입에 의해 확장되지 않으며 내시경이 통과할 수 없습니다.
배경 점막은 붉어지고 두꺼워집니다. 또한 접촉 구타가 여기저기서 발생합니다. 이는 결장 사례의 취약성을 나타냅니다. 3.
만성 DSS 대장염, 불투명도, 벽 두께 및 종양과 같은 돌출부가 있는 마우스가 보입니다. 일반적으로 흰색 칼라 벽 두께가 보이고 벽이 투명하지 않습니다. 이것은 비장 굴곡근 주위의 궤양입니다.
사례 4. 아족시메탄 및 DSS로 유발된 대장염 관련 암이 있는 마우스. 여러 종양과 궤양이 있습니다.
큰 편평한 유형의 돌출된 병변이 오른쪽 벽에 있고 조금 더 가까운 부위에서 또 다른 낮은 편평한 유형의 병변이 보입니다. 표면의 구조는 정상 점막과 분명히 다릅니다. NBI는 이러한 병변의 발견 및 진단에 유용합니다.
직장에 섬유질 물질로 덮인 지리적으로 큰 궤양이 있습니다. 시청해 주셔서 감사합니다.
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본 논문은 장내 염증 및 대장암 평가에 중점을 둔 마우스 대장내시경 검사 수행을 위한 상세 프로토콜을 제시합니다. 저자들은 소수점 식별자를 사용하여 결장염과 종양의 중증도를 기록하는 새로운 점수 체계를 소개합니다.
마우스 모델에서 검증된 내시경 점수 산정 방식은 대장염 및 대장암 종양 중증도에 대한 재현 가능하고 정량적인 평가를 가능하게 하며, 이는 위장관 질환 연구에서 표적 검증 및 기전적 리스크 감소를 직접적으로 뒷받침합니다. 단일 워크플로우 내에 염증 및 종양 평가를 통합함으로써 초기 발견 단계부터 전임상 연구에 이르기까지 예측 신뢰도와 중개 연구의 연속성을 높일 수 있습니다. 표준화된 점수 산정 시스템은 바이오 제약 R&D 분야에서 연구 간 비교 가능성과 포트폴리오 수준의 의사 결정을 용이하게 합니다.
이 검증된 내시경 점수 시스템은 발견에서 전임상 단계에 이르는 연속 과정 내에 위치하며, 위장관 질환 연구에서 가설 검증, 리드 물질 평가 및 중개 모델 최적화를 가능하게 합니다.