2014년 6월 29일
우리는 작은 금속 클립을 사용하여 상행 대동맥의 수축에 의해 위 스타 쥐의 압력 과부하 및 좌심실 비대를 만들기위한 단계별 절차를 설명합니다. 이 모델은 광범위하게 심장 비대 동안 리모델링 변경을 공부하고 이러한 변화의 회귀를위한 전략을 파악하고 평가하기 위해 사용된다.
안녕하세요, 저는 인도 생명공학 센터의 심혈관 질환 생물학과 Raj Gandhi의 Aji Kumar Gs입니다. 저는 프로세스 카르타의 지도하에 일하고 있으며 이 비디오에서는 쥐에서 I OTE 구조를 상승시키기 위한 단계별 절차를 시연할 것입니다. 우리 실험실에서는 이 연간 모델을 활용하여 심장 비대 및 진행성 심부전의 병태생리학과 기본 분자 메커니즘을 연구합니다.
우리는 또한 이 모델을 사용하여 좌심부전과 관련된 폐고혈압을 연구합니다. 그러니 시작합시다 그리고 동물을 미학적으로 만들고 누운 자세를 유지하십시오. 두 개의 기관 고리 사이를 중간으로 절개하고 기관 캐뉼라를 삽입하여 기관 내 삽관을 수행하며, 이 캐뉼라는 설치류 인공호흡기에 차례로 연결됩니다.
그런 다음 두 번째와 세 번째 갈비뼈 사이의 왼쪽 가슴 부위를 약 2cm 길이로 절개하여 근육층을 분리합니다. 이오타의 오름차순 부분의 이오타 수축을 시각화하려면 어플리케이터가 있는 작은 크기의 티타늄 클립을 사용하여 갈비뼈를 반대 방향으로 수행한 다음 근육층과 피부를 중단된 패턴으로 봉합해야 합니다. 기관내관을 제거한 후 기관 근육, 층 및 피부를 닫고 동물이 회복할 수 있도록 합니다.
이 절차는 기관 동물 윤리 위원회의 승인을 받은 후 이루어졌습니다. 수술 전에 수술 부위를 70% 알코올로 소독하고 발열 패드를 무균 상태로 유지하십시오. 설치류 인공호흡기와 마취 장치를 수술 준비를 하십시오.
고압증기멸균으로 수술 기구를 살균합니다. 상행 I 이압 수축을 위한 주요 수술 도구는 멸균 장갑, 엄지 손가락 집게, 가위, 수술용 칼날, 작은 크기의 티타늄 클립 및 출혈 시 거즈가 있는 어플리케이터 동맥 겸자, 바늘 홀더, 프롤린 봉합사 재료, 꼰 실크 봉합사 및 바늘입니다. 쥐를 24시간 동안 항생제 우산 아래에 두고, 3% ISO 불소와 100% 산소가 혼합된 유도 챔버에서 쥐를 미학적으로 만든다.
쥐의 목선과 왼쪽 가슴 부위의 털을 제거하고 동물을 맨 위에 두십시오. 발열 패드. 성공적인 마취 확인을 위해 1.5% ISO 불소 체크 페달 반사로 마취를 유지합니다.
포비돈 요오드 용액으로 수술 부위를 소독한 다음 70%알코올로 소독합니다. 절차를 세 번 반복합니다. 수술 부위만 노출되도록 동물 위에 멸균 드레이프를 놓습니다.
기관과 평행하게 피부를 절개하고 아래 조직을 분리합니다. 기관을 노출시키기 위해. 기관 아래에 명주실을 묶고 부드럽게 위로 들어 올립니다.
두 개의 연골 고리 사이를 중간 절개하여 기관 캐뉼라를 삽입합니다. 기관 캐뉼라를 설치류 인공호흡기에 연결합니다. 인공호흡기는 분당 50회의 호흡수로 설정되어야 합니다.
일회 호흡량 1.7 ml, 영감 시간 0.6 초. 두 번째 갈비뼈와 세 번째 갈비뼈 사이의 왼쪽 가슴 부위를 절개합니다. 늑간 근육은 층별로 분리되어야 합니다.
갈비뼈 사이를 절개하는 동안 폐가 손상되지 않도록 주의해야 합니다. 갈비뼈를 집어넣은 후 지방 조직을 부드럽게 조작하여 이오타의 상승 부분을 조심스럽게 찾습니다. 화살표는 iota의 오름차순 부분을 나타냅니다.
어플리케이터의 도움으로 오름차순 iota 주위에 작은 크기의 티타늄 클립을 놓아 iota를 원래 직경의 50-60%로 수축시킵니다. I otic Constriction에 이어 심장의 위치를 조정하고 프롤린 봉합사로 갈비뼈를 근사화합니다.동시에 폐를 다시 팽창시키기 위해 약 2-4초 동안 인공호흡기를 일시 중지합니다. 프롤린으로 근육을 겹겹이 배치한 다음 중단된 봉합사 패턴으로 실크 봉합사로 피부를 게시합니다.
인공호흡기에서 설정한 호흡수를 점차적으로 낮추고 동물의 자발 호흡을 관찰합니다. 자발적이고 규칙적인 호흡이 회복되면 기관 캐뉼라를 제거합니다. 이제 마취는 콧방울을 통해 유지됩니다.
프롤린 봉합사로 기관 링 사이의 구멍을 닫습니다. 근육층과 피부를 각각 프롤린과 실크 봉합사로 봉합합니다. 포비돈 요오드 용액을 수술 후 진통제 주사로 수술 부위에 도포합니다.
Tremadol 복강내 식염수는 복강내 투여할 수 있습니다. 탈수의 징후가 점차 낮아지면 동물이 회복 된 후 마취를 오프 위치로 전환하고 케이지로 옮겨 7 일 동안 식수와 혼합된 아목시실린을 경구 투여합니다. 상승 iota의 수축에 의해 생성된 압력 과부하의 강도는 2차원 심장 초음파로 I otic 수축 부위를 가로지르는 압력 구배를 관찰하여 결정할 수 있습니다.
그림의 왼쪽 패널은 63mm의 수은의 압력 구배를 갖는 대동맥 수축 쥐의 도플러 반향을 보여줍니다. 그리고 오른쪽 패널은 iota 전체에 걸쳐 큰 압력 구배가 없는 가짜 제어 쥐를 나타냅니다. 상단 패널은 수술 후 8주 후인 쥐에서 좌심실의 M 모드 심초음파를 보여주고, 하단 패널은 가짜 조절을 나타내며, 심실 중격 두께와 좌심실 후벽 두께는 유의하게 증가한 반면 좌심실 내경은 I 이측 수축을 겪은 쥐에서 현저히 감소했습니다.
가짜 수술 대조군과 비교했을 때, 수술 8주일 후 상승 I 이강 수축을 받은 쥐에서 가짜 수술 대조군에 비해 상당한 심장 비대가 관찰되었습니다. 안녕하세요, 저는 Raj입니다. 여기에서는 쥐에서 오름차순 iota의 수축 절차를 설명합니다.
이 모델의 주요 장점은 심장 비대와 심부전의 점진적인 진행입니다. 이 산모의 만성 고혈압에 있는 임상 상황과 유사하게, 산모 관리는 iota의 수축을 위해 타이타닉 클립의 적용에 취해져야 합니다. 가장 중요한 것은 타이타닉 클립의 적용이 왼쪽 20 플러스 스트레스에 대한 중요한 iota 수축을 생성하기에 충분해야하지만 급성 전자 기능 부전 및 폐 부종을 유발할 정도로 심각하지 않아야하며 갈비뼈 사이를 절개하는 동안 폐에 어떤 손상도 피하기 위해주의를 기울여야한다는 것입니다.
인공호흡기는 폐를 다시 팽창시키기 위해 갈비뼈를 반대쪽으로 대고 3-4초 동안 배치해야 합니다. 이 비디오를 시청해 주셔서 감사드리며 실험에 행운을 빕니다.
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본 논문은 상행 대동맥 결찰을 통해 Wistar 쥐에서 압력 과부하 및 좌심실 비대를 유도하는 단계별 절차를 설명합니다. 이 모델은 심비대를 연구하고 잠재적인 퇴행 전략을 평가하는 데 널리 활용됩니다.
쥐의 상행 대동맥 수축 모델은 압력 과부하로 유도된 심비대증에 대한 강력한 전임상 모델을 제공하며, 심혈관 약물 발견 과정에서 기전적 리스크 제거 및 타겟 검증을 가능하게 합니다. 이 모델은 만성 고혈압에서 관찰되는 심비대증 및 심부전의 점진적인 발병 과정을 재현함으로써 중개 연구에 대한 예측 신뢰도를 높여줍니다. 또한, 재현성이 뛰어나고 정량적인 결과 도출이 가능하여 포트폴리오 선별 및 초기 단계의 치료 가설 검증에 매우 유용합니다.
이 모델은 발견에서 전임상 단계에 이르는 연속 과정에 통합되어, 심혈관 약물 후보 물질의 초기 기전 연구와 중개 검증 사이를 연결합니다.