Name: 종 MRI에 이어 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 개발하기 위해 초음파 영상 유도 심장 내 주입 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-06T13:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: 배우세요 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 초음파 영상 유도 심장 내 주입으로 구축하는 방법을. MDA-MB231/Br-GFP 세포를 사용하여 9.4 T MRI로 종양 진행을 비침습적으로 모니터링합니다.

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우리는 박사 부부에게 감사의 말씀을 전합니다. 우리 MDA-MB231Br 세포를 제공하는 다이앤 팔미 에리와 NCI의 패트리샤 스티. 우리는 기술 및 평등 한 지원을 위해 박사 랄프 메이슨 씨 제이슨 Reneau과 양 라몬 로페스 감사합니다. 이 작품은 DOD IDEA 어워드 W81XWH - 08 - 1-0583와 W81XWH-12-1-0317에 의해 부분적으로 지원되었다. MRI 실험은 고급 이미징 연구 센터, NIH BTRP # 1 P41-RR02584 시설에서 수행하고, 초음파 유도 심장 내 주사 1S10RR02564801에서 VisualSonics 베보 (770)를 수행 하였다.

모든 동물의 절차는 텍사스 대학 남서 의료 센터의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다. 1. MDA-MB231/Br-GFP 세포의 준비 <ol><li> 10 % FBS, 1 % 글루타민 및 1 % 페니실린 / 스트렙토 마이신을 함유하는 DMEM 배지 (친절의 Drs. 팔미 및 스티, NCI에 의해 제공) MDA-MB231/Br-GFP 셀을 검색하여 배양. </li><li> 세포와 매체의 색상의 상태를 관찰하고, 2-3 일마다 중간 교체합니다. </li><li> 를 Trypsinize 및 단계에 설명 된대로 80 %의 합류가 1.3.1-1.3.5에 도달하면 세포를 수집 <ol><li> 완전히 오래된 매체를 제거하고 부드럽게 세포를 씻어 5 ㎖의 PBS (1X)를 추가합니다. 접시에서 PBS를 제거합니다. </li><li> 접시에 1.5 ㎖의 트립신을 추가, 모든 세포는 트립신에 의해 보호됩니다 확인하기 위해 부드럽게 요리를 기울이십시오. 다시 세포 배양기에 접시를 넣고 1 분 동안 37 ° C에서 보관. </li><li> 인큐베이터 밖으로 접시를 타고 관찰세포를 확인하기 위해 광학 현미경으로 세포를 접시에서 분리. </li><li> 트립신의 효력을 정지 3 ㎖ 매체를 추가합니다. 원심 관에서 세포 혼합액을 모은다. 5 분 동안 2,000 rpm에서 혼합물을 원심 분리기. </li><li> 신중하게 매체를 제거하고 균일 할 때까지 5 ㎖ 혈청 배지에서 세포를 재현 탁. </li></ol></li><li> 세포의 적절한 수를 계산하고 100 μL 부피의 1.75 × 105 세포의 최종 농도로 무 혈청 DMEM 배지에이를 재현 탁. <ol><li> 50 ㎕의 세포 혼합물을 50 ㎕의 트리 판 블루를 추가합니다. 혼합 한 후, 10 ㎕의 혼합물을 조심스럽게 세포 계수 슬라이드에 추가 할 수 있습니다. 정확한 세포 수의 추정을 보장하기 위해 여러 개의 샘플을 사용합니다. </li><li> 셀 카운팅 슬라이드, 한번에 하나의 단부와 셀 카운터 자동 카운트 시작의 막대기. 모든 계산 결과의 평균을 가지고 총 세포 수를 계산합니다. </li><li> 다시 세포를 원심 분리기와 그들을 재현 탁볼륨 μL 1.75 × 105 cells/100의 최종 농도 초래할 무 혈청 배지의 적절한 볼륨. </li></ol></li><li> 이전에 심장 내 주입에 얼음 장소 세포. </li></ol> 2. 초음파 이미징 안내 심장 내 주입 <ol><li> 이전 6-8주 사이 여성 누드 마우스 (BALB / C 뉴 / 뉴)를 사용합니다. </li><li> 영상 시스템에 로그인합니다. 트랜스 듀서 (704) (40 메가 헤르츠)를 초기화합니다. </li><li> 새로운 연구를 시작하고 정보를 입력합니다. </li><li> 마취 (유도 챔버에서 3 % isoflurane/100 %의 O 2)와 코 콘을 통해 모든 절차를 수행하는 동안 100 % O 2 (1 DM 3 / 분)에 이소 플루 란 (2 %)와 동물을 유지한다. 금단 반사가 발가락 핀치 관찰되지 않은 경우 마취가 확인됩니다. </li><li> 37 ° C로 영상 테이블의 온도를 설정 앙와위에서 가열 된 영상 테이블에 마취 된 마우스를 테이프. </li><li> 메신저에 앞서 37 ° C에서 초음파 젤을 유지노화. 마우스의 가슴에 젤을 적용합니다. </li><li> 홀더에 트랜스 듀서를 장착합니다. 원하는 영상의 깊이에 도달 할 때까지 트랜스 듀서를 낮 춥니 다. 좌심실이 랜드 마크로서 상행 대동맥 (그림 1A)로 확인 될 때까지 단계를 이동합니다. 좌심실의 밝은 전망이 가시화되는 단계를 잠급니다. </li><li> 22 G 바늘로 1 ML의 주사기로 세포 혼합물의 100 μl를 그립니다. 놓고 마운트 주사기 주사기를 고정합니다. </li><li> 마우스의 가슴을 향해 앞으로 주사기를 이동하고 바늘 끝이 (마우스를 입력하기 전에)보기의 이미지 필드가 될 때까지 조심스럽게 좌우로 그것을 옆으로 이동합니다. </li><li> 좌심실을 목표로 바늘의 높이와 각도를 조절합니다. </li><li> 초음파 영상의지도하에 좌심실로 즉시 피부와 근육 층을 통해 인터 공간에 주사기 바늘을 침투. 왼쪽 ventri에 바늘을 성공적으로 삽입 표시CLE는 주사기에 신선한 동맥혈 (진한 빨강 정맥혈 달리 핑크 색상)의 환류입니다 </li><li> 세포 혼합물을 천천히 (그림 1B)를 주입한다. </li><li> 완료되면, 바늘을 철회 트랜스 듀서를 들어, 적신 거즈와 초음파 젤을 청소하고 테이프를 제거합니다. </li><li> 예열 패드 깨끗한 케이지를 준비합니다. </li><li> 패드에 동물을 배치하고 전체 복구까지 동물을 관찰합니다. </li><li> 동물의 행동 이틀 동안 매 24 시간을 모니터링합니다. </li><li> 일반 조건 및 실험 생쥐의 합병증의 신경 학적 징후는 정기적으로 모니터링된다. </li></ol> 3. 두개 내 종양 개발의 MRI 모니터링 <ol><li> 뇌 전이의 두개 내 개발을 모니터링하는 9.4 테슬라 자석을 사용합니다. </li><li> 이주 종양 이식 후 MRI를 시작하고 최대 세 주 동안 일주일에 한 번 반복합니다. </li><li> 3 % 이소 플루 란과 동물을 진정 유전자에서 그들을 유지RAL 마취 (1.5 % 이소 플루 란). </li><li> 모니터링하고 실험 내내 동물 체온과 호흡 수를 일정하게 유지한다. </li><li> 고해상도 멀티 나선형 (1 mm의 14 슬라이스 두께, 간격) T 1 -과 T 2 강조 관상 후두에 전두엽의 영역을 포함하는 이미지, 다음과 같은 매개 변수를 취득 : T 1 강조 영상을 : 에코 여러 조각 (SEMS)를 스핀, TR / TE = 400 msec/20 밀리 초, 매트릭스 : X 256 256, 평면 해상도 FOV 20 × 20 mm의 : 78 X 78 μm의 2. T 2 강조 영상 : 256 X 256, FOV 20 × 20 mm의 평면 해상도 : 78 X 78 μm의 빠른 스핀 여러 조각 (FSEMS) 시퀀스, TR / TE = 2500 msec/48 밀리 초, 8 에코 열차, 매트릭스를 에코 28.9. 종양 병변은 T 2 강조 영상에서 정상 뇌 조직보다 밝게 나타납니다. </li><li> 종양의 크기는 수동으로 enhan을 요약하여 T 2 강조 영상에서 결정된다우리 에이트 작성한 MATLAB 프로그램을 이용하여 각 이미지의 질량 부를의 cing. 직경이 슬라이스 두께 (1mm)보다 작은 종양의 대부분을 감안할 때, 종양의 크기는 오히려 부피보다 평면 영역으로 표시된다. </li></ol> 4. H &amp; E 염색은 전이 확인 <ol><li> 종양 베어링 뇌를 해부, 바로 다음 MR 스캔 후 쥐를 희생의 OCT 매체에 포함와 C -80 ° 동결 </li><li> 제 10 ㎛ 두께의 관상 뇌의 일련의 저온 유지 장치와 표본. </li><li> 뇌 부분에 H &amp; E 염색을 수행합니다. </li></ol>

<ol><li>Schouten, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+brain+metastases+in+a+cohort+of+patients+with+carcinoma+of+the+breast%2C+colon%2C+kidney%2C+and+lung+and+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma.</a> Cancer. 94, 2698-2705 (2002).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

본 연구에서는이 연구 개발 뇌 전이의 모든 동물과없는 동물의 죽음이 관찰되었다 있도록 초음파 영상 유도 좌심실 분사의 정확성을 보장 것을 증명하고있다. 영상 유도 주사의 아름다움은 피부 그리고 마지막으로 좌심실에 바늘 침투의 경로를 모니터링하고 따라 엄격한 해부학 적 랜드 마크를 필요로하는 수동 절차 구별되는 이미지에 따라 조절 될 수 있다는 것입니다. 뇌 전이의 두개 내 개발의 현재 이해는 크게 동물 모델 4,10에 대한 조직 학적 연구를 기반으로합니다. 그러나, 조직 학적 연구는 일반적으로 종양 이식 후 다양한 시점에서 사망 생쥐의 다수를 필요로한다. 더 중요한 것은, 개별 병변의 시간적 개발에 대한 정보는 조직 학적 연구에서 부족하다. 생체 내 이미징은 큰 전자 약속fficiency 각 동물이 자신의 제어 및 여러 시간 지점 역할을하기 때문에 순차적으로 7,11 검...

뇌 전이는 성인에서 가장 흔한 두개 내 악성 종양이다. 예후도 적극적인 치료 4-6 개월의 평균 생존에 매우 좋지 않습니다. 유방암 뇌 전이 1-3의 높은 사망률을 가진 세 가지 주요 암 중 하나입니다. 여러 뇌 열대 유방암 라인은 심장 내 또는 intracarotid 주입 4 후 뇌 전이를 개발 할 수있다. 좌심실로 종양 세포의 직접적인 주입은 폐 모세 혈관 베드를 우회함으로써 내장 전이를 최소화하면서 두뇌 전이 형성의 발생을 증가시킬 수있다. MDA-MB231Br 라인은 설치류 모델 5,6에서 뇌 전이를 개발하기 위해 가장 널리 사용되는 인간 유방암 라인 중 하나이다. 다른 많은 연구 4,7와 마찬가지로, 우리는 우리의 이전 연구에서 심장 내 주입의 수동 절차를 수행했습니다. 그러나, 50 %의 성공 속도는 매뉴얼을 얻었다이전의 실험이 실패한 경우 주사와 마우스의 일부가 반복으로서 절차에서 사망했다. 여기서, 우리는 무 흉선 마우스의 좌심실로 뇌 추구 유방암 세포의 주입을 확보 촬상 유도 절차의 사용을 도입하고있다. 종 고해상도 MRI는 뇌 전이의 두개 내 개발을 따라 적용됩니다.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>하이클론</td><td>SH30022.01</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>트립신</td><td>미디어텍</td><td>25-051-C1</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>자동 세포 계수기</td><td>BioRad</td><td>TC10</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>박스터 인터내셔널 Inc.</td><td>1001936060</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>VisualSonics Vevo 770 고해상도 이미징 시스템&nbsp;</td><td>비주얼 소닉 Inc.</td><td></td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>9.4 T 수평 보어 자석과 Varian INOVA Unity 시스템&nbsp;</td><td>애질런트</td><td></td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>O.C.T 컴파운드</td><td>사쿠라 파인텍 USA</td><td>4583</td><td>&nbsp;</td></tr></tbody></table>

종 mri에 이어 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 개발하기 위해 초음파 영상 유도 심장 내 주입

Ultrasound Imaging-guided Intracardiac Injection to Develop a Mouse Model of Breast Cancer Brain Metastases Followed by Longitudinal MRI

유방암 뇌 전이가 단계 IV에서 유방암 환자의 30 %에서 발생하는 높은 사망률과 연관된다. 중앙 생존 기간은 단지 6 개월입니다. 그것은 임상 시나리오에서 전이성 세포의 혈역학 적 확산을 모방하기 위해 적절한 동물 모델을 가지고하는 것이 중요합니다. 여기서, 우리는 흉선 누드 마우스의 좌심실로 뇌 열 유방암 세포의 정확한 주입을 안내하는 작은 동물 초음파 영상의 사용을 도입하고있다. 세로 MRI는 두개 개시 및 뇌 전이의 성장을 평가하는 데 사용됩니다. 초음파 유도 심장 내 주입은 정확한 주입 및 이에 높은 성공률뿐만 아니라 보장뿐만 아니라 우리의 이전의 수동 절차에 비해 크게 사망률 감소했다. 생체 고해상도 MRI는 한 작게, hyperintense 다발성 병변의 시각화 수 310 μm의 T에 직경 삼주 후 분사에 이미지를 2 - 가중. FOLLOW 업 MRI는 두개 내 종양의 성장과 뇌 전체에 걸쳐 배포 전이의 증가 수를 보여준다.

MRI (평면 해상도에 78 μm의)의 높은 공간 해상도로, hyperintense 병변 (그림 2) 직경 310 ㎛의 한 작은 식별 할 수 있습니다. 이 연구에서 전이가 매우 작은 괴사와 부종의 개발 때문에 T 2 강조 영상에서 hyperintense 병변이 진정으로 종양의 질량을 나타내는 최소이다. 종관 MRI 연구는 종양 성장의 비 침습적 생체 평가에 허용한다. 도 3에 도시 된 바와 같이, 고해상도 MRI 3 주 심내 분사 (도 3a) 후에 여러 작은 병변을 검출 할 수 있었다. 주 4 일, 이전 스캔 모두에서 볼 수 있었다 병변은 큰되었다, 더 많은 새로운 병변은 T 2 강조 영상 (그림 3B)에 나타났다. H &amp; E 염색 <stron...

유방암 뇌 전이의 마우스 모델은 MDA-MB231/Br-GFP 세포의 초음파 영상 유도 심장 내 주입으로 설정됩니다. 다 초점 두개 내 전이의 개발은 고해상도 9.4 T MRI를 사용하여 세로 방향으로 모니터링하고있다.

종 MRI에 이어 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 개발하기 위해 초음파 영상 유도 심장 내 주입

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 ...

이 실험 절차의 전반적인 목표는 초음파 유도를 통해 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 구축하고, 이를 MRI로 모니터링하는 것입니다. 이는 뇌 친화성 유방암 세포를 수집하여 좌심실에 주입함으로써 수행됩니다. 이후 초음파 유도의 도움을 받아 두개내 종양의 발달 과정을 모니터링합니다.MRI를 사용하고 H&amp;E 염색을 통해 전이를 확인합니다. 결과적으로 영상 유도 하의 정확한 주입은 유방암 뇌전이의 형성 및 발달 모니터링의 성공률을 유의미하게 높일 수 있습니다. 종단적 MRI를 통해 유방암의 형성 및 발달을 비침습적으로 모니터링할 수 있습니다.모든 동물 실험 절차는 텍사스 대학교 사우스웨스턴 의료 센터의 기관동물실험윤리위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다. 본 프로토콜을 위해 10% FBS, 1% glutamine, 1% penicillin-streptomycin이 함유된 DMEM 배지에서 배양한 M-D-A-M-B 2 31 B-R-G-F-P 세포를 준비하십시오. 항상 세포 상태를 모니터링하고 2~3일마다 배지를 교체하십시오. 80% confluence에 도달하면, trypsin을 처리하여 세포를 수집하십시오.먼저, 진공 피펫을 사용하여 기존 배지를 완전히 제거합니다. 그런 다음 PBS 5 mL를 첨가하여 모든 세포가 PBS로 덮일 때까지 세포를 부드럽게 세척합니다. 이후 세척액을 제거합니다.다음으로, 디쉬에 trypsin 1.5 milliliters를 첨가합니다. 디쉬를 가볍게 기울여 모든 세포가 trypsin으로 덮이도록 합니다. 디쉬를 37 degrees Celsius의 세포 배양기에 다시 넣습니다.1분 동안 기다린 후, 현미경으로 세포를 관찰합니다. 세포가 둥글게 떠 있다면 분리된 것입니다. 배지 3 mL를 첨가하여 소화를 중단시키고, 세포 혼합액을 피펫으로 옮겨 원심분리 튜브에 넣습니다.혼합물을 1,160 G에서 5분 동안 원심 분리합니다. 그 다음 진공 피펫을 사용하여 배지를 조심스럽게 제거합니다. 이어서 피펫을 이용해 5 mL의 무혈청 배지로 세포를 부드럽게 재부유시키며, 세포 펠릿이 더 이상 보이지 않고 세포 혼합물 50 µL가 균질하게 보일 때까지 수행합니다.완전히 혼합된 후 트라이판 블루 50 µL를 추가합니다. 여러 개의 세포 계수 슬라이드에 10 µL씩 분주합니다. 그 후 세포 계수기 값을 통해 세포 수를 측정합니다.모든 세포 수 측정값의 평균을 계산하여 사용하십시오. 이제 더 정확한 세포 현탁액을 만듭니다. 세포를 다시 원심 분리하고 무혈청 배지 100 µL당 175,000 cells가 되도록 재현탁하십시오.그런 다음 심장 내 주사를 위해 세포를 얼음 위에 보관합니다. 본 프로토콜에서는 6~8주 된 암컷 BC nude mice를 사용하십시오. 영상 시스템에 로그인하고 트랜스듀서를 초기화합니다.40 megahertz에서 7 0 4로 설정하십시오. 새로운 연구를 시작하고 정보 입력란을 적절히 작성하십시오. 다음으로, 마우스에 마취제를 노즈콘을 통해 투여하여 마취시키십시오.유도 주입 과정 동안, 이미징 테이블의 온도를 37 °C로 설정하고 마우스를 앙와위 자세로 테이블에 테이프로 고정합니다. 이미징 전 초음파 겔을 37 °C로 유지한 후 마우스의 흉부에 도포합니다. 이제 트랜스듀서를 홀더에 장착하고 원하는 이미징 깊이까지 내립니다.다음으로, 상행 대동맥을 기준점으로 삼아 좌심실이 식별될 때까지 스테이지를 이동시킨 후, 시야가 가장 선명한 위치에서 스테이지를 고정합니다. 이제 22 gauge 바늘이 장착된 1 mL 주사기로 냉각된 세포 혼합액 100 µL를 흡입합니다. 충전된 주사기를 주사기 마운트에 고정합니다.그 다음 주사기를 가슴 쪽으로 이동시킵니다. 마우스에 삽입하기 전, 바늘 끝이 영상 시야 내에 들어올 때까지 조심스럽게 좌우로 움직입니다. 좌심실을 겨냥하여 바늘의 높이와 각도를 조절하고, 위치가 잡히면 신속하게 피부와 근육층을 통과하여 바늘을 좌심실 내로 삽입합니다.초음파 영상의 안내에 따라, 좌심실에 성공적으로 삽입되었음을 나타내는 징후는 주사기로 신선한 분홍색 동맥혈이 역류하는 것입니다. 그 후 세포 혼합물을 천천히 주입하고, 바늘을 뽑은 다음, 트랜스듀서를 들어 올리고 젖은 거즈로 초음파 젤을 닦아냅니다. 이어서 테이프로 고정한 동물을 풀어주고, 예열된 패드가 있는 깨끗한 케이지로 옮깁니다.마우스가 완전히 회복될 때까지 관찰하고, 이후 며칠 동안 매일 상태를 확인하십시오. 78 square micron의 평면 해상도를 사용하여, 직경 310 microns의 MRI 고신호 강도 병변을 식별할 수 있습니다. 본 연구의 전이 병변은 크기가 매우 작았으며 괴사와 부종이 최소였으므로, T2 강조 영상의 고신호 강도 병변은 실제 종양을 나타냈습니다.대규모 종단적 MRI 연구를 통해 종양 성장을 생체 내에서 비침습적으로 평가할 수 있습니다. 고해상도 MRI를 통해 심장 내 주사 3주 후에 여러 개의 작은 병변을 검출할 수 있었으며, 4주 차에 이전 스캔에서 관찰되었던 병변들은 모두 크기가 커졌습니다. T2 강조 영상에서는 더 많은 새로운 병변이 나타났습니다.H and E 염색 결과 확산성 전이 병변이 나타나거나, H and E 염색 결과 군집형 전이 병변이 나타났습니다. 종양 주변에서 확장된 혈관이 자주 관찰되었으며, 이는 비발아성 혈관신생(non sprouting angiogenesis)이 일어나고 있음을 나타냅니다. 이 영상을 시청한 후에는 마우스 심장의 좌심실에 초음파 영상 유도 하 바늘 주입을 수행하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

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연구

JoVE Journal

Medicine

의학

hypoxia inducible 인자 - 1α 활동 Bioluminescence 이미징은 유방암 뇌 전이의 마우스 모델에서 종양 intracranial hypoxia 개발을 모니터에 적용됩니다.

유방암 뇌 전이의 종양 Hypoxia 역학 생체내의 Bioluminescence 이미징에서는 마우스 모델에서

뼈 전이의 pathogenesis에서 angiogenesis가 중요한 공정이므로 이미징 및 치료를위한 목표를 나타냅니다. 여기서는 특정 사이트 유방암 골 전이의 쥐 모델을 제시하고 비 invasively 이미지 angiogenesis에 전략을...

자기 공명 영상, 체적 계산의 Tomography 및 초음파를 이용한 유방암의 뼈 전이의 누드 쥐 모델에서 Angiogenesis의 멀티 모달 이미징

심장 초음파 유도 경피적 심근 주입 뮤린 마음에 유전자 전달 제 또는 세포의 전달을위한 효율적인 신뢰성 있고 타겟팅 양상을 나타낸다. 이 프로토콜에 설명 된 단계에 따라, 운전자는 신속하게이 다재 다능 한, 최소 침습 기술에서 경쟁력이 될 수 있습니다.

마우스의 초음파 유도 경 흉부 심근 내 주입

암 종양 주변 조직뿐만 아니라 로컬 프 및 항 염증 매개 의해 영향 복잡한 질환이다. 따라서, 오히려 피하 모델보다 이방성 주입 모델은 방식으로 더 잘 모방 인간의 병리 암의 진행을 연구하기 위해 유용 할 수 있습니다.

마우스의 유방 지방 패드에 유방암 세포의 소성 주입은 종양의 성장을 연구한다.

치료 옵션을 완화 남아있는 동안 그 빈도는 증가로 뇌 전이는 긴급 충족되지 않은 의료 요구되고있다. 암 세포의 intracarotid 동맥 주입을 통해 뇌 전이의 실험 동물 모델을 만들기 소설 개입 요법의 질병 생물학 및 평가의 기계론의 연구를 용이하게한다.

Intracarotid 암 세포 주입 뇌 전이의 마우스 모델을 제작하기

여기, 우리는 간단 하 고, 침략, 그리고 쉽게 처리 방법, 더 적은에서 유 방 지방 패드에 유방암 세포를 이식 하는 프로토콜을 제시 하 고이 마우스 orthotopic 유 방 암 모델 적절 한 유 방 지방 패드 환경으로 사용할 수 있습니다의 다양 한 측면을 조사 하 암입니다.

Orthotopic 쥐 유 방 지방 패드 유방암 세포의 주입

이 작업은 녹색 형광 단백질 및 생물 발광 신호의 검출뿐만 아니라 정량적 분자 검출 기술의 통합에 의해 종양 하중을 정확하게 평가하기 위한 고급 프로토콜을 미리 설정합니다.

정형외 유방암 모델을 사용하여 삼중 음성 유방암 을 연구

두개 내 뇌 전이 모델링은 정확하고 시기 좋은 방법으로 치료에 종양 크기와 반응을 모니터링할 수 없다는 것에 의해 복잡합니다. 제시된 방법론은 자기 공명 화상 진찰 분석과 두개 내 종양 주입을 결합할 때, 정확하고 일관된 주사, 향상된 동물 감시 및 정확한 종양 부피 측정을 육성합니다.

두개 내 주입 및 자기 공명 이미징을 통해 뇌 전이를 모델링

우리는 내인성 HER2 증폭 염증성 유방암 세포주의 꼬리 정맥 주사를 통해 생성된 유방암 뇌 전이의 이종이식 마우스 모델을 설명합니다.

염증성 유방암 세포의 꼬리 정맥 주입을 통한 뇌 전이 모델링

뇌 전이는 암 환자의 심각한 이환율과 사망률의 원인입니다. 대부분의 뇌 전이 마우스 모델은 사망률 및 치료 개입 결과의 혼란 분석을 혼란시키는 전신 전이에 의해 복잡합니다. 여기에 제시된 것은 최소한의 전신 종양으로 일관된 두개 내 종양을 생성하는 암세포의 내 경동맥 주사를위한 프로토콜입니다.

암세포의 내경동맥 주입에 의한 뇌전이 모델링

배우세요 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 초음파 영상 유도 심장 내 주입으로 구축하는 방법을. MDA-MB231/Br-GFP 세포를 사용하여 9.4 T MRI로 종양 진행을 비침습적으로 모니터링합니다.

종 MRI에 이어 유방암 뇌 전이 마우스 모델을 개발하기 위해 초음파 영상 유도 심장 내 주입

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