형광 파우더를 사용하여 소매 환경에서의 미생물 오염을 추적 - 소매 델리 카트슨 환경 예

이 절차의 전반적인 목표는 소매 델리 환경에서 식중독성 병원균인 listeria monocytogenes의 잠재적인 교차 오염 메커니즘을 입증하는 것입니다. 이는 먼저 소매 환경을 시뮬레이션하기 위한 모의 델리 주방을 설계함으로써 수행됩니다.

두 번째 단계에서는 델리 육류에 형광 화합물을 접종한 후, 지원자들에게 코팅된 육류를 썰어 포장하고 냉장고에 보관하도록 요청합니다. 마지막 단계에서는 블랙라이트 아래에서 형광 화합물을 관찰하여 잠재적인 교차 오염을 추적합니다. 최종적으로 분광법을 사용하여 형광 화합물을 정량화함으로써 소매 델리 환경에서 교차 오염이 어떻게 발생하는지 보여줄 수 있습니다.

미생물을 이용하는 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은 분광 광도법을 통해 형광 화합물을 빠르게 정량화할 수 있다는 점입니다. 이 방법은 유통 단계에 대한 통찰을 제공할 수 있을 뿐만 아니라 소규모 농장, 식품 가공 공장 및 기타 식품 서비스 운영 시설과 같은 다른 시스템에도 적용되어 식품 안전을 확보할 수 있습니다. 절차 중에 사용할 깨끗한 장갑과 70% ethanol을 카운터 위에 놓는 것으로 시작하십시오.

그다음 깨끗한 칼과 도마를 사용하여 델리 미트를 약 100 millimeter 두께의 샘플 3개로 자릅니다. 그다음 약간 습기가 있는 깨끗한 스펀지를 사용하여 샘플 하나에 갓 준비한 형광 분말을 고르게 도포합니다. 이어서 모든 샘플을 플라스틱 랩으로 감싸고, 테이프를 사용하여 형광 분말을 도포한 샘플에는 a라고 표시하고 나머지 두 샘플에는 b와 c라고 표시합니다.

그다음 샘플을 4 °C에 두고, 슬라이서 주변에 13 W 전구의 블랙 컴팩트 형광등을 설치합니다. 스와빙 템플릿으로 사용할 5 x 5 cm 크기의 알루미늄 호일을 자르고, 동시에 1315 mL 튜브에 95% ethanol 6 mL를 채웁니다. 그런 다음 모의 델리의 모든 구역을 동시에 관찰할 수 있도록 전략적인 위치에 비디오 카메라 3대를 설치합니다.

형광 분말에 의한 델리 육가공품의 오염을 추적하기 위해, 실험 과정 중 참가자들을 비디오로 촬영하도록 카메라를 켜고 블랙 라이트(자외선등) 아래에서 모의 델리 매장의 사전 사진을 찍습니다. 그 다음, 각 참가자가 다음 과정을 수행하도록 합니다. 먼저, 냉장고에서 A라고 표시된 육가공품 샘플을 꺼냅니다.

다음으로, 고기의 포장지를 풀고 랩은 따로 보관한 뒤, 샘플을 슬라이서의 캐리지 트레이 위에 놓습니다. 미트 그립으로 샘플을 고정한 다음, 슬라이서의 전원을 켜고 슬라이서 인덱스 노브를 2로 조절합니다. 이어서 고기를 다섯 조각 썰어 델리 페이퍼 위에 올린 후, 전원을 끄고 미트 그립을 풉니다.

고기 슬라이스를 A라고 표시된 플라스틱 백에 넣으십시오. 그런 다음, 모의 주방 사진을 촬영한 후 시연한 것과 같이 샘플 B와 C를 슬라이스하고, 고기 샘플을 다시 포장하여 냉장고에 보관하십시오. 형광 분말 오염도를 정량화하려면, 이미지에 표시된 각 영역에 멸균 알루미늄 호일 템플릿을 배치하십시오. 그런 다음 95%Ethanol에 적신 멸균 칼슘 알긴산 면봉으로 각 영역을 스왑하고, 각 면봉을 95%Ethanol이 들어 있는 튜브에 하나씩 넣으십시오.

각 튜브를 충분히 볼텍싱한 다음, 내용물을 개별 유리 큐벳으로 옮깁니다. 각 스왑 샘플의 흡광도를 370 nanometers에서 측정하고, 공식을 사용하여 각 구역에서 스왑된 형광 분말의 양을 계산합니다. 마지막으로, 비디오를 시청하여 모의 데스크의 다양한 표면이 접촉된 횟수를 정량화합니다.

본 대표 실험에서는 델리 슬라이스 준비 과정 중 육류 슬라이서의 다양한 표면에 손이 닿는 평균 횟수를 분석하기 위해 자원봉사자들의 모습을 비디오로 촬영하였습니다. 이후 서로 다른로 여러 명의 시청자가 영상을 분석하였으며, 손 접촉 횟수의 평균값을 산출하였습니다. 데이터 분석 결과, 예상대로 육류 고정 장치, 육류 포장지, 델리 육류 및 델리 용지의 손 접촉 빈도가 가장 높게 나타났으며, 참가자당 평균 8회에서 14회의 접촉이 발생하였습니다.

냉장고, 그립 테이블, 육류 그립, 슬라이서 칼날 및 캐리지 트레이의 다양한 구성 요소와 같은 표면을 스왑(swab)한 후, 슬라이서의 여러 구성 요소와 모의 주방에 묻어 있는 형광 분말의 양을 정량화했습니다. 예상한 대로 방금 입증된 바와 같이, 결과에서는 냉장고, 그립, 육류 그립 및 백 플레이트에서 가장 높은 오염 수준이 나타났습니다.

본 절차를 수행할 때는 영상이 동기화될 수 있도록 비디오 카메라를 동시에 켜는 것이 중요합니다. 이 방법은 교차 오염이 어떻게 발생하는지와 같은 식품 안전 분야의 핵심 질문에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있으며, 연구 결과를 바탕으로 효과적인 교육 실습 방법을 개발할 수 있습니다.