Name: 형광 파우더를 사용하여 소매 환경에서의 미생물 오염을 추적 - 소매 델리 카트슨 환경 예 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-05T17:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: 학습하세요 형광 파우더를 이용한 소매 델리 환경에서 Listeria monocytogenes 교차 오염 추적 방법을. 흑광 관찰과 분광광도법으로 오염 경로를 정량 분석하여 식품 안전 관리에 활용합니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

저자는이 연구에 도움 식품 안전 실험실 학생들과 자원 봉사자 모두에게 감사의 말씀을 전합니다. 이 연구는 USDA 국가 통합 된 식품 안전 이니셔티브 (NIFSI) 부여 (보너스 번호 10507316)에 의해 투자되었다.

1. 표준 곡선 <ol><li> 37.5 mg의 형광 분말을 달아 6 ML 200 증거 에탄올에 용해. 200 증거 에탄올이 솔루션의 2 배 연속 희석을합니다. </li><li> 소용돌이 모두 10 초 샘플 및 370 nm에서의 흡광도를 측정한다. </li><li> 1 ㎖ 200 증거 에탄올 당 형광 분말의 양을 계산합니다. </li><li> 형광 분말의 농도에 기초하여 흡광도를 보여주기 위해 (x-축에서 370 ㎚에서의 Y 축과 흡광도 ㎎ / ml의 농도에서) 표준 곡선을 준비한다. </li></ol> 2. 형광 파우더와 델리 고기 (볼로냐) 접종 <ol><li> 깨끗한 칼을 사용하여 보드를 절단 약 100 mm 두께의 샘플로 델리 고기를 잘라. A, B 및 C라는 3 개의 시료를 준비 </li><li> 코트 샘플에 약간의 물기를 깨끗한 스폰지를 사용하여 형광 파우더로 균일하게. 균등 고기 샘플의 분말을 확산. 형광 분말 샘플 B와 C를 접종하지 마십시오. </리&gt; <li> 플라스틱 랩으로 샘플을 감싸고 &#39;A&#39;와 테이프로 B와 C 등 두 개의 샘플을 나머지로 형광 분말 코팅 샘플을 레이블. </li><li> 델리 경우 또는 실험이 실시 될 모의 부엌에서 4 ° C에서 개최 냉장고에 샘플을 놓습니다. </li></ol> 3. 모의 델리 주방 준비 <ol><li> 부엌에서 깨끗한 장갑과 70 % 에탄올 스프레이를 제공합니다. </li><li> 슬라이서 주변 13 W 전구 블랙 컴팩트 형광등을 장착합니다. </li><li> 보라고의 템플릿 역할을하는 알루미늄 호일의 5cm X 5cm 컷 아웃을 준비합니다. </li><li> 6 ㎖의 95 % 에탄올을 포함하는 15 ML 튜브를 준비합니다. </li></ol> 4. 비디오 설정 동시에 모의 델리의 모든 영역을 관찰하는 전략적 위치에있는 산 3 개의 비디오 카메라. (프로토콜 5에 설명 된대로) 슬라이서 절차를 시뮬레이션하기 전에 카메라의 전원을 켜고으로 (동시에 결과를 분석) 프로토콜 7 설명했다. 5. 교차 오염을 추적하기 위해 델리 저미는 절차 시뮬레이션 샘플 크기를 개선하고 변화를 반영, 각 기관의 임상 시험 심사위원회 프로토콜의 승인 후 모집 참가자들이 본 연구를 수행하기 위해. 참가자 또는 경험 소매 델리 환경에서 작업하지 않을 수 있습니다 대학생이 될 수 있습니다. 그들은 델리를 입력하면 각 참가자는 장갑을 착용하고 있는지 확인합니다. 가지고 검은 형광등 아래 사진은 다음에 &quot;전에&quot;연구가 완료되면 그림 &quot;후&quot;. 다음과 같이 각 참가자에게 명확한 서면 및 구두 지시 사항을 제공합니다 : <ol><li> 냉장고로 이동합니다. </li><li> &quot;A&quot;라는 레이블이 붙은 고기를 제거합니다. </li><li> 고기의 포장을 플라스틱 랩을 저장합니다. </li><li> 슬라이서의 운송 트레이에 고기를 넣습니다. </li><li> 고기 그립 고기를 고정합니다. </li><li> 전원 스위치를 켜십시오. </li><li> SLI를 조정CER 인덱스 노브 &quot;2&quot;. </li><li> 조각과는 델리 종이에 고기의 5 개 조각을 분배. </li><li> OFF 전원 스위치를 켜고 고기 압력을 해제. </li><li> &quot;A&quot;라는 레이블이 붙은 비닐 봉투에 고기 조각을 놓습니다. </li><li> 고기 &quot;A&quot;를 재 포장하고 냉장고로 돌아갑니다. </li><li> REPEAT은 &quot;B&quot;와 &quot;C&quot;라는 고기와 2-11 단계를 반복합니다. </li></ol> 6. 의 양을 형광 분말 델리 부엌에서 모의​​ 슬라이싱 (5.4 절)의 완료 후 형광 분말을 계량. 이것은 다음과 같이 경우 : <ol><li> 멸균 5cm X 5cm 알루미늄 호일 템플릿을 사용하여 그림 1에 표시된 영역에 놓습니다. </li><li> 지역을 채취, 95 % 에탄올에 담가 살균 알긴산 칼슘 면봉을 사용하여 멸균 폴리 프로필렌 튜브에 6 ㎖의 95 % 에탄올에 배치합니다. </li><li> 소용돌이 관 철저 및 370 nm에서의 흡광도를 읽을 수있는 유리 베트로 전송. </li><li> standar을 참조하십시오다음 식 사용 형광체 분말의 양 (y)를 결정하기 위해 D 곡선 : x는 흡습성이며 Y = MX + B, m은 표준 곡선의 기울기, b는 절편이다. </li><li> 데이터의 정규화를 들어, 다음 수식을 사용하여 샘​​플링 된 면적당 형광체 분말의 비율을 계산한다 : </li></ol><img src="/files/ftp_upload/51402/51402eq1.jpg" alt="포뮬러 1" /> 7. 비디오 분석 비디오 테이프 참가자들이 작업을 완료 5.1-5.12로. 동기화 및 각도가 동시에 볼 수 있도록 DVD 디스크에 비디오 레코딩을 저장한다. 손으로 건 드리면 수 델리 환경 (4 다른 연구자가 독립적으로 설정 완전한 데이터를 분석)의 다양한 표면에 (자원 봉사자 모의 델리에있는 영역을 터치하는 횟수)를 기록하는 비디오를 시청.

<ol><li>Sheen, S., Hwang, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+the+cross-contamination+of+Escherichia+coli+O157%3A+H7+on+the+surface+of+ready-to-eat+meat+product+while+slicing%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing.</a> Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).</li>
<li>Crandall, P., Neal, J. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimizing+the+risk+of+Listeria+monocytogenes+in+retail+delis+by+developing+employee+focused%2C+cost+effective+training%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).</li>
<li>Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+and+chemical+control+of+Salmonella+in+ready-to-eat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).</li>
<li>Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precut+prepackaged+lettuce%3A+a+risk+for+listeriosis%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis?</a> Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).</li>
<li>Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonellosis+outbreaks+in+the+United+States+due+to+fresh+produce%3A+sources+and+potential+intervention+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Salmonellosis outbreaks in the United States due to fresh produce: sources and potential intervention measures.</a> Foodborne Pathog. Dis. 6, 635-648 (2008).</li>
<li>Zhu, M., Du, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Listeria+monocytogenes+contamination+in+ready%E2%80%90to%E2%80%90eat+meat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Compr.+Rev.+Food+Sci.+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Control of Listeria monocytogenes contamination in ready‐to‐eat meat products.</a> Compr. Rev. Food Sci. Food Safety. 4, 34-42 (2005).</li>
<li>Lianou, A., Sofos, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+incidence+and+transmission+of+Listeria+monocytogenes+in+ready-to-eat+products+in+retail+and+food+service+environments%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments.</a> J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+risk+assessment+of+relative+risk+to+public+health+from+foodborne+Listeria+monocytogenes+among+selected+categories+of+ready-to-eat+foods%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods.</a> , http://www.fda.gov/downloads(2003 Forthcoming.</li>
<li>Endrikat, S., Gallagher, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+risk+assessment+for+Listeria+monocytogenes+in+prepackaged+versus+retail-sliced+deli+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat.</a> J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).</li>
<li>Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+public+health+impact+of+Listeria+monocytogenes+product-to-product+and+environment-to-product+contamination+of+deli+meats+at+retail%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail.</a> J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).</li>
<li>Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Handwashing+Technique+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5900067%22%5BJournal%5D)">Handwashing Technique Analysis.</a> Patent number 5900067. , (1999).</li>
<li>Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observation+and+relative+quantification+of+cross-contamination+within+a+mock+retail+delicatessen+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment.</a> Food Control. 31, 116-124 (2013).</li>
<li>Xiao, M., Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5821546%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5821546. , (1998).</li>
<li>Waldroup, A., Kirby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5621215%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5621215. , (1997).</li>
<li>Ashby, K. D., Wen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+of+dietary+porphyrins+as+a+basis+for+real-time+detection+of+fecal+contamination+on+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat.</a> J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).</li>
<li>Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+protein+marked+Escherichia+coli+biotype+I+strains+as+surrogates+for+enteric+pathogens+in+validation+of+beef+carcass+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions.</a> J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).</li>
<li>Byrd, J., Hargis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+marker+for+the+detection+of+crop+and+upper+gastrointestinal+leakage+in+poultry+processing+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Poult.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants.</a> Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).</li>
<li>Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+Listeria+monocytogenes+during+mechanical+slicing+of+turkey+breast+bologna%2C+and+salami.%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami.</a> J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).</li>
</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

이 연구의 전반적인 목표는 세균의 교차 오염이 식중독의 위험을 관리하고 줄일 수있는 전략을 개발하기 위해 소매 델리 환경에서 발생할 수있는 방법을 설명했다. 소매 델리 환경 L.에 대한 특히 높은 위험을 가지고 오염 모노 사이토 겐. USDA-FSIS는 소매점에서 슬라이스 델리 고기 델리 고기 슬라이스 및 연방 검사 공장 9시 포장 리스테리아와 일곱 배 높은 연관성을 가지고 있다고 보도했다. 형광 기반의 방법은 도체 (13, 14)의 표면에 분변 오염을 검출하기 특허에서보고되었다. 독립적 인 연구는 가금류 가공 공장 15 ~ 17에있는 고기와 교차 오염 소스에 분변 오염의 존재를 확인하기 위해 형광 화합물을 사용했습니다. 다른 연구자들은 여기에보고 된 것과 유사한 연구를 수행 하였다. 그들은 터키의 브리에 형광 화합물을 코팅성 처브 높은 오염 (18)의 영역을 결정하...

특히 소매 부분의 음식 준비 환경에서 인성 병원균의 교차 오염으로 인해 고기뿐만 아니라 야채 1-5 다양한 소스에서 식중독의 위험이 증가의 주요 관심사입니다. 대부분의 경우, 세균성 병원체에 오염 된 식품 (6)를 통해 소매 유통 환경을 입력합니다. 이전의 소비 7에 더 개입이나 치료 (즉, 조리 또는 가열)이 보통이 없기 때문에 소매 수준에서 준비를 먹을 준비가 된 음식은 특별한 관심의이다. 또한, 오염 RTE 식품에 존재하는 병원체는 소매 환경에서 다른 식품 또는 식품 접촉 표면에 전사 할 수있다. 교차 오염은 소매 음식 환경의 거의 모든 유형에서 발생할 수 있지만, 샌드위치 가게는 특히 때문에 병원균 리스테리아 monocytog와 RTE 델리 고기의 협회의 특정 관심의ENES 2. 미국 식품의 약국 (FDA) 및 농업 식품 안전 및 검사 서비스 (USDA-FSIS)의 미국학과에서 실시한 위험 평가 분석을 바탕으로, 오염 된 델리 고기는 리스테리아 증의 경우 90 %에 대한 가능성이 책임이 있습니다 - 희귀 L.에 의한 아직 심각한 인간의 질병 리스테리아 모노 사이토 겐 - 미국 8. 일반적으로, 소매 및 식품 서비스 시설에 슬라이스 델리 고기는 L.의 위험성 증가와 관련이있다 모노 사이토는 제조 (9)에 의해 USDA 검사 공장에서 presliced ​​가공 육류에 비해. 이 때문에 식품 취급자, 들어오는 원료 성분, 또는 후 처리 7 오염 될 수있다 가공 식품에 의한 병원균의 도입의 증가 가능성이 될 수 있습니다. 전반적으로, 리스테리아는 미국에서 매년 식중독으로 인한 예상 사망자의 약 28 %를 차지 때문에에의L.의 주름 위험 소매 수준에서 슬라이스 델리 고기에 오염 모노 사이토 겐, 델리 슬라이서 자체는 소매 환경 2,10의 인성 병원균의 표면 전송을위한 중요한 요소로 확인되었습니다. 쉰 1에 나타난 바와 같이, 슬라이스 전에 소비의 마지막 처리 단계이며, 따라서, 델리 슬라이서 이해와 교차 오염을 방지 한 모두를위한 중요 관리 점 고려되어야한다. 본 연구의 전반적인 목표는 글로 세균 같은 형광 분말을 사용 델리 소매 환경에서 오염을 추적하는 방법을 개발하는 것이었다. 이는 세균 교차 오염 및 위생 관행 11,12을 시뮬레이션하는 데 사용 된 형광 화합물이다. 이 연구는 슬라이서, 주변 환경, 기타 가공 육류에 오염 된 고기에서 병원균의 이동을 추적 할 수 있도록 설계되었습니다. 그것은 CONT의 경로를 이해하는 것이 중요합니다효과적인 개입 및 소매 직원과 관리자를위한 교육 자료를 모두 개발하는 아 민화. 유사한 접근 방식은 다른 처리 환경 (예를 들어, 가금류, 쇠고기), 농장, 병원에서 병원균의 이동을 시뮬레이션하기 위해 사용될 수있다.

<table><tbody><tr><td>Glo Germ Powder</td><td>Glo Germ Co</td><td></td><td>공급업체에서 구매</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>Sigma</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>영구 마커</td><td>Sharpie</td><td></td><td>문구점에서 구매</td></tr><tr><td>장갑</td><td>VWR</td><td>82026-424</td><td></td></tr><tr><td>Deli Meat</td><td>NA</td><td></td><td>NA Bologna Chub 일반 식료품점에서</td></tr><tr><td>도마</td><td>NA</td><td>NA</td><td>A 레구카르 부엌 도마</td></tr><tr><td>나이프</td><td>NA</td><td>NA</td><td>A 레귤러 나이프&nbsp;</td></tr><tr><td>5 cm x 5 cm 멸균 템플릿</td><td>NA</td><td>NA</td><td>알루미늄 호일 템플릿은 5 cm x 5 cm 템플릿으로 자르고 살균&nbsp;</td></tr><tr><td>15ml 폴리프로필렌 원심 분리기 튜브</td><td>VWR</td><td>89039-664</td><td></td></tr><tr><td>면봉</td><td>Puritan</td><td>25-806</td><td></td></tr><tr><td>유리 큐벳</td><td>VWR</td><td>470019-186</td><td></td></tr><tr><td>Vortex</td><td>VWR</td><td>58816-121</td><td></td></tr><tr><td>플립 카메라</td><td>플립 울트라 HD</td><td>NA</td><td>온라인 구매</td></tr><tr><td>델리 슬라이서</td><td>Bizerba</td><td>SE-12</td><td></td></tr><tr><td>델리 냉장고</td><td>True Company</td><td>TDBD-722</td><td></td></tr><tr><td>스케일</td><td></td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>분광 광도계</td><td>Milton Roy Company</td><td>NA</td><td>Spectronic 20D</td></tr></tbody></table>

형광 파우더를 사용하여 소매 환경에서의 미생물 오염을 추적 - 소매 델리 카트슨 환경 예

Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

소매 환경에서의 인성 병원균의 교차 오염이 식중독에 대한 위험이 증가에 기여하는 중요한 공중 보건 문제입니다. 이러한 델리 고기, 치즈, 경우에 신선한 농산물로 먹을 준비가 된 (RTE) 가공 식품 등 리스테리아 등 병원균의 오염으로 인한 식품 매개 질병 발생에 관여하고있다. L.에 대하여 모노 사이토는, 델리 슬라이서는 종종 교차 오염의 주요 원천입니다. 이 연구의 목적은 세균 오염을 시뮬레이션과 소매 환경이 오염을 추적하기 위해 형광 화합물을 사용하는 것이 었습니다. 모의 델리 부엌은 소매 환경을 시뮬레이션하기 위해 설계되었습니다. 델리 고기가 형광 화합물로 접종과 자원 봉사자는 식품 소매 직원의 예상과 유사한 일련의 작업을 완료하기 위해 모집했다. 자원 봉사자는 패키지를 슬라이스와 델리 냉장고에 고기를 저장하는 지시했다. 잠재적 인교차 오염은 특정 지역을 보라고하고 분광 광도계 채취 영역의 광학 밀도를 측정하여 모의 소매 환경에서 추적했다. 결과는 슬라이서의 냉장고 (즉, 델리 경우) 그립과 다양한 영역이 교차 ​​오염에 대한 높은 위험이 있다고 지적했다. 본 연구의 결과는 소매 직원 집중된 교육 자료를 개발하기 위하여 사용될 수있다. 또한, 유사한 방법 또한 식량 생산 환경 (예를 들어, 작은 농장), 병원, 요양원, 유람선 및 호텔에서 미생물 오염을 추적하는 데 사용할 수 있습니다.

그림 1은 자원 봉사자가 할당 된 작업을 완료 한 후 채취 된 슬라이서의 영역을 나타냅니다. 자원 봉사자는이 다양한 표면에 손을 접촉의 평균 주파수를 분석하기 위해 비디오 촬영을했다. 손 접촉의 빈도는 네 개의 서로 다른 관찰자에 의해 분석 및 평균 하였다. 이러한 결과는 그림 2에서 설명된다. 데이터는 고기 그립, 델리 고기 래퍼, 델리 고기, 그리고 델리 종이가 손 접촉 (8-14 연락처의 평균)의 최고 속도를했다 있음을 보여줍니다. 이 후, 분석은 자원 봉사자가 작업을 완료 한 후 정량적 슬라이서와 델리 주방의 다양한 구성 요소에 형광 분말의 양을 공부 하였다. 이러한 냉장고 손잡이, 테이블, 고기 그립, 슬라이서 블레이드, 캐리지 트레이의 다양한 구성 요소로 표면을 교환했다. 도 3에 도시 된 바와 같이, 결과는 보여 주었다 오염의 최고 수준냉장고 그립 (약 25 %)에서 발견되...

이 연구의 전반적인 목표는 소매 델리 설정에서 인성 병원균 리스테리아의 잠재적 교차 오염의 메커니즘을 설명했다. 이 방법론은 병원균 오염을 추적하기 위해 다른 다양한 환​​경에 적용 할 수있다.

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

이 절차의 전반적인 목표는 소매 델리 환경에서 식중독성 병원균인 listeria monocytogenes의 잠재적인 교차 오염 메커니즘을 입증하는 것입니다. 이는 먼저 소매 환경을 시뮬레이션하기 위한 모의 델리 주방을 설계함으로써 수행됩니다.두 번째 단계에서는 델리 육류에 형광 화합물을 접종한 후, 지원자들에게 코팅된 육류를 썰어 포장하고 냉장고에 보관하도록 요청합니다. 마지막 단계에서는 블랙라이트 아래에서 형광 화합물을 관찰하여 잠재적인 교차 오염을 추적합니다. 최종적으로 분광법을 사용하여 형광 화합물을 정량화함으로써 소매 델리 환경에서 교차 오염이 어떻게 발생하는지 보여줄 수 있습니다.미생물을 이용하는 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은 분광 광도법을 통해 형광 화합물을 빠르게 정량화할 수 있다는 점입니다. 이 방법은 유통 단계에 대한 통찰을 제공할 수 있을 뿐만 아니라 소규모 농장, 식품 가공 공장 및 기타 식품 서비스 운영 시설과 같은 다른 시스템에도 적용되어 식품 안전을 확보할 수 있습니다. 절차 중에 사용할 깨끗한 장갑과 70% ethanol을 카운터 위에 놓는 것으로 시작하십시오.그다음 깨끗한 칼과 도마를 사용하여 델리 미트를 약 100 millimeter 두께의 샘플 3개로 자릅니다. 그다음 약간 습기가 있는 깨끗한 스펀지를 사용하여 샘플 하나에 갓 준비한 형광 분말을 고르게 도포합니다. 이어서 모든 샘플을 플라스틱 랩으로 감싸고, 테이프를 사용하여 형광 분말을 도포한 샘플에는 a라고 표시하고 나머지 두 샘플에는 b와 c라고 표시합니다.그다음 샘플을 4 °C에 두고, 슬라이서 주변에 13 W 전구의 블랙 컴팩트 형광등을 설치합니다. 스와빙 템플릿으로 사용할 5 x 5 cm 크기의 알루미늄 호일을 자르고, 동시에 1315 mL 튜브에 95% ethanol 6 mL를 채웁니다. 그런 다음 모의 델리의 모든 구역을 동시에 관찰할 수 있도록 전략적인 위치에 비디오 카메라 3대를 설치합니다.형광 분말에 의한 델리 육가공품의 오염을 추적하기 위해, 실험 과정 중 참가자들을 비디오로 촬영하도록 카메라를 켜고 블랙 라이트(자외선등) 아래에서 모의 델리 매장의 사전 사진을 찍습니다. 그 다음, 각 참가자가 다음 과정을 수행하도록 합니다. 먼저, 냉장고에서 A라고 표시된 육가공품 샘플을 꺼냅니다.다음으로, 고기의 포장지를 풀고 랩은 따로 보관한 뒤, 샘플을 슬라이서의 캐리지 트레이 위에 놓습니다. 미트 그립으로 샘플을 고정한 다음, 슬라이서의 전원을 켜고 슬라이서 인덱스 노브를 2로 조절합니다. 이어서 고기를 다섯 조각 썰어 델리 페이퍼 위에 올린 후, 전원을 끄고 미트 그립을 풉니다.고기 슬라이스를 A라고 표시된 플라스틱 백에 넣으십시오. 그런 다음, 모의 주방 사진을 촬영한 후 시연한 것과 같이 샘플 B와 C를 슬라이스하고, 고기 샘플을 다시 포장하여 냉장고에 보관하십시오. 형광 분말 오염도를 정량화하려면, 이미지에 표시된 각 영역에 멸균 알루미늄 호일 템플릿을 배치하십시오. 그런 다음 95%Ethanol에 적신 멸균 칼슘 알긴산 면봉으로 각 영역을 스왑하고, 각 면봉을 95%Ethanol이 들어 있는 튜브에 하나씩 넣으십시오.각 튜브를 충분히 볼텍싱한 다음, 내용물을 개별 유리 큐벳으로 옮깁니다. 각 스왑 샘플의 흡광도를 370 nanometers에서 측정하고, 공식을 사용하여 각 구역에서 스왑된 형광 분말의 양을 계산합니다. 마지막으로, 비디오를 시청하여 모의 데스크의 다양한 표면이 접촉된 횟수를 정량화합니다.본 대표 실험에서는 델리 슬라이스 준비 과정 중 육류 슬라이서의 다양한 표면에 손이 닿는 평균 횟수를 분석하기 위해 자원봉사자들의 모습을 비디오로 촬영하였습니다. 이후 서로 다른로 여러 명의 시청자가 영상을 분석하였으며, 손 접촉 횟수의 평균값을 산출하였습니다. 데이터 분석 결과, 예상대로 육류 고정 장치, 육류 포장지, 델리 육류 및 델리 용지의 손 접촉 빈도가 가장 높게 나타났으며, 참가자당 평균 8회에서 14회의 접촉이 발생하였습니다.냉장고, 그립 테이블, 육류 그립, 슬라이서 칼날 및 캐리지 트레이의 다양한 구성 요소와 같은 표면을 스왑(swab)한 후, 슬라이서의 여러 구성 요소와 모의 주방에 묻어 있는 형광 분말의 양을 정량화했습니다. 예상한 대로 방금 입증된 바와 같이, 결과에서는 냉장고, 그립, 육류 그립 및 백 플레이트에서 가장 높은 오염 수준이 나타났습니다.본 절차를 수행할 때는 영상이 동기화될 수 있도록 비디오 카메라를 동시에 켜는 것이 중요합니다. 이 방법은 교차 오염이 어떻게 발생하는지와 같은 식품 안전 분야의 핵심 질문에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있으며, 연구 결과를 바탕으로 효과적인 교육 실습 방법을 개발할 수 있습니다.

tracking-microbial-contamination-retail-environments-using

Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

이 프로토콜은 전체 세포의 급속한 탐지 다음 토마토와 다른 신선한 농산물의 표면 샘플링을위한 간단한 접착제 테이프 기반의 접근 방식을...

접착제 테이프 기반의 샘플링 및 형광의 조합 현장에서</em의 신속한 감지를 위해> 하이브 리다이 제이션 살모넬라균 신선한 농산물에 대한

Google은 최근은 간단 세균 검출을위한 형광 분석 "을 믹스 앤 읽기"를 설정하는 데 적용할 수있는 형광 DNAzyme 프로브를 생성하기위한 새로운 접근 방식을보고했습니다. 이러한 특별한 유전자 프로브는이를 형광 신호 생성에 세균 검출을 번역 특정 세균에 의해 생산되는 원유 세포외 혼합물 (CEM)의 앞에서 발색단 - 수정의 DNA-RNA 키메라 기판의 절단을 catalyze. 이 보고서에서 우리는 "RFD-EC1"표시된 특정 DNAzyme 프로브는 모델 박테리아의 탐지를 위해 고용되는 핵심 실험 절차를...

형광 DNAzymes을 사용하여 박테리아의 탐지

이 비디오는 박테리아 세포에서 형광 항생제 프로브의 축적을 측정하는 분석을 보여줍니다. 유출 펌프 억제제에 노출되면 박테리아 세포의 막관통 양성자 구배가 방해를 받아 형광단 접합 항생제가 추가됩니다. 파괴된 양성자 구배로 인한 유출 펌프의 억제는 박테리아 내부에 항생제의 축적을 유발합니다. 박테리아 세포를 용해시키고 형광 강도를 측정하여 항생제 축적을 확인합니다.

박테리아 세포에서 형광 항생제 프로브의 축적을 측정하기 위한 분석

많은 양의 농업용수에서 식품 매개 병원체의 통합 농도, 농축 및 종말점 비색 검출과 관련된 프로토콜이 여기에 제시되어 있습니다.  물은 선택적 또는 비선택성 매체로 농축된 MMS(Modified Moore Swabs)를 통해 여과되며, 검출은 박테리아 표시 비색 기판이 내장된 종이 기반 분석 장치(μPAD)를 사용하여 수행됩니다.

색도계 탐지의 종이 기반의<em&gt; 대장균</em&gt;<em&gt; 살모넬라</em&gt; SPP., 그리고<em&gt; 리스테리아</em&gt; 농업 다량의 물에서

PCR 기반 프로토콜은 개별 야생포파리의 신체 표면과 소화관에서 Cronobacter spp., Salmonella enterica 및 Listeria monocytogenes를 검출하기 위해 조정되었습니다. 이 프로토콜의 목표는 식품 매개 발병 조사 중 환경 샘플링 프로그램의 일환으로 수집된 개별 곤충에서 박테리아 병원체를 검출하고 분리하는 것입니다.

개인 오물 파리에서 인성 세균 병원균의 검출

진화 시나리오되지만 (공간적 분리)의 역할은 공간 분포의 조정을 허용하는 제어 실험실에서 미생물 단순한 시스템을 사용하여 조사 할 수있다. 설립자 셀 밀도를 수정하여, 다양한 구색 수준은 바실러스 서브 틸리 스 (Bacillus subtilis)의 식민지 바이오 필름에 형광 표지 된 박테리아 균주를 사용하여 시각화 할 수 있습니다.

표면 식민지 미생물 집단에 공간 분리를 모니터링

이 프로토콜의 전반적인 목표는 비용 효율적인, 노트북에 대 한 기능 nanosensors을 합성 하 고의 급속 한 탐지는 자석 및 형광 방출 modalities의 결합을 통해 병원 성 박테리아에 특히 표적으로.

E. 콜라이 O157:H7의 Foodborne 병원 체 검사를 사용 하 여 자기 형광 Nanosensor: 신속한 감지

여기에 제시된 것은 높은 정밀도와 분류학적 분해능으로 수생 약탈 진핵생물의 방목 속도를 정량화하는 단일 세포, epifluorescence 현미경 기반 기술에 대한 프로토콜입니다.

수생 생태계에서 유기 탄소 흐름의 새로운 경로를 밝히기 위해 추적자로 형광으로 분류 된 박테리아

이 프로토콜의 목적은 혐기성 챔버를 사용하지 않고 국부적으로 구매한 식품, 특히 엡실론 독소생성 균주 B 및 D에서 다른 클로스트리디움 퍼프린스 독시노타입을 검출하는 것입니다.

소매 식품 시료에서 클로스트리디움 퍼프린지 독시변의 농축 및 검출

형광 태그 항생제는 항균 저항의 다중 양상을 공부하기 위하여 이용될 수 있는 강력한 공구입니다. 이 문서는 형광 태그 항생제의 제조 및 박테리아에서 항생제 저항을 공부 하는 그들의 응용 프로그램을 설명 합니다. 프로브는 분광광도법, 유세포 분석 및 현미경 검사법에 의한 세균 저항(예: 유출)의 메커니즘을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

형광 항생제 프로브를 사용한 세균 저항성 시각화

이 프로토콜은 클린룸 환경에서 미생물 바이오버든을 최소화하기 위한 모범 사례를 요약하고 환경 모니터링, 공정 모니터링 및 제품 멸균 테스트와 같은 전략을 포함합니다. 이는 현재 우수 조직 관행 표준 및 현재 우수 제조 관행 표준을 충족하는 데 필요한 제조 및 테스트 시설과 관련이 있습니다.

클린룸 환경 및 세포 치료를 위한 미생물 제어 및 모니터링 전략

학습하세요 형광 파우더를 이용한 소매 델리 환경에서 Listeria monocytogenes 교차 오염 추적 방법을. 흑광 관찰과 분광광도법으로 오염 경로를 정량 분석하여 식품 안전 관리에 활용합니다.

형광 파우더를 사용하여 소매 환경에서의 미생물 오염을 추적 - 소매 델리 카트슨 환경 예

더 많은 동영상 탐색