Name: 로컬 및 전신 사이트에서 병원체에 의한 만성 염증을위한 마우스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 52 s
Description: 배우세요 Porphyromonas gingivalis 구강 감염을 통한 마우스 만성 염증 모델. MRI와 micro CT로 국소 및 전신 염증 반응을 측정하여 감염 메커니즘과 숙주-병원체 상호작용을 연구하는 방법입니다.

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이 작품은 P01 A1078894 CAG에 부여 국립 알레르기 전염병 연구소에 의해 지원되었다

<ol><li>Nathan, C., Ding, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonresolving+Inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Nonresolving Inflammation.</a> Cell. 140 (6), 871-882 (2010).</li>
<li>Karin, M., Lawrence, T., Nizet, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+immunity+gone+awry%3A+linking+microbial+infections+to+chronic+inflammation+and%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Innate immunity gone awry: linking microbial infections to chronic inflammation and.</a> 124, 823-835 (2006).</li>
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<li>Hayashi, C., Viereck, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+accelerates+inflammatory+atherosclerosis+in+the+innominate+artery+of+ApoE+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis accelerates inflammatory atherosclerosis in the innominate artery of ApoE deficient mice.</a> Atherosclerosis. 215 (1), 52-59 (2011).</li>
<li>Hayashi, C., Madrigal, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogen-mediated+inflammatory+atherosclerosis+is+mediated+in+part+via+Toll-like+receptor+2-induced+inflammatory+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Innate+Immunity%22%5BJournal%5D)">Pathogen-mediated inflammatory atherosclerosis is mediated in part via Toll-like receptor 2-induced inflammatory responses.</a> Journal of Innate Immunity. 2 (4), 334-343 (2010).</li>
<li>Hayashi, C., Papadopoulos, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+role+for+TLR4+signaling+in+atherosclerosis+progression+as+revealed+by+infection+with+a+common+oral+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology+%28Baltimore%2C+Md.%3A+1950%29%22%5BJournal%5D)">Protective role for TLR4 signaling in atherosclerosis progression as revealed by infection with a common oral pathogen.</a> Journal of Immunology (Baltimore, Md.: 1950). 189 (7), 3681-3688 (2012).</li>
<li>Papadopoulos, G., Weinberg, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-Specific+TLR2+Signaling+Mediates+Pathogen-Induced+TNF-Dependent+Inflammatory+Oral+Bone+Loss%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Macrophage-Specific TLR2 Signaling Mediates Pathogen-Induced TNF-Dependent Inflammatory Oral Bone Loss.</a> The Journal of Immunology. , (2012).</li>
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<li>Miyamoto, T., Yumoto, H., Takahashi, Y., Davey, M., Gibson, F. C. 3rd, Genco, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogen-accelerated+atherosclerosis+occurs+early+after+exposure+and+can+be+prevented+via+immunization%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Pathogen-accelerated atherosclerosis occurs early after exposure and can be prevented via immunization.</a> Infection and Immunity. 74 (2), 1376-1380 (2006).</li>
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<li>Baker, P. J., Dixon, M., Evans, R. T., Roopenian, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+of+Porphyromonas+gingivalis+strains+in+the+induction+of+alveolar+bone+loss+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Microbiology+and+Immunology%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity of Porphyromonas gingivalis strains in the induction of alveolar bone loss in mice.</a> Oral Microbiology and Immunology. 15 (1), 27-32 (2000).</li>
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</ol>

저자는 그들이 더 경쟁 금전적 이해 관계가 없다고 선언합니다.

P. 진지 발리 경구 감염 모델은 로컬 및 전신 사이트의 병원체에 의한 만성 염증의 연구를위한 유용한 도구를 제공합니다. 이 독특한 모델은 만성 염증과 면역 병리에 기여 모두 호스트와 병원체의 특정 메커니즘의 특성을 수 있습니다. 또한, 모델이 면역 및 약리학 적 개입을 포함한 신규 한 치료 전략을 선별하는데 사용될 수있다. 이 프로토콜에서 설명하는 단계는 P.의 개시, 진행 및 결과를 평가하기 위해이 모델 및 세부 방법론의 성공적인 사용을 설명 진지 발리는 만성 염증 유도 된. 염증성 골 손실을 조사하기 위해이 프로토콜을 사용할 때주의해야 할 몇 가지 중요한 측면이 있습니다. 첫째, P. 감염의 결과에 주목해야한다 감염 2) 병원균에 호스트의 1) 유전 적 감수성 : 진지 발리는 세 가지 주요 요인에 의해 결정된다독성 (병원체의 유전), 3) 결과 호스트 병원체 상호 작용 (두 개의 게놈의 상호...

만성 염증은 병적 조직 손상과 인간의 많은 만성 질환의 통합 특성의 주요 드라이버이다. 이 질환은 종양,자가 면역, 만성 염증성 질환 일을 포함한다. 많은 만성 질환의 원인은 불분명하지만, 유전 적 소인, 환경 적 요인의 도입을 모두 포함하는, 복잡하고 다원적 인 것으로 이해된다. 염증의 perpetuators이 어려운 남아 있지만, 면역 활성화 세포 및 분자 프로파일은 병원균이에 대한 호스트 응답에서 관찰 된 것과 패턴이 상당히 겹칩니다. 장착 증거는 미생물 개발에 병원균 및 만성 염증의 진행과 다양한 임상 양상 2,3 감염 연루. 병원균은 유도와 지속적인 감염을 호스트 면역 체계를 전복하고 구축하여 만성 염증을 직접적으로 유지할 수 <sup&gt; 4. 미생물의 지속성이없는 경우, 감염은 자기 항원에 의해 유발 분자 입내 면역 반응, 면역 원성들을 렌더링자가 항원, 또는 이전에 마스킹 숙주 항원을 해제 손상의 변화에​​서 만성 염증을 석출 할 수있다. 거의 그러나 특정 병원균이 특정 만성 질환의 보편적 인 원인으로 확인 된이 없습니다. 오히려, 사용 가능한 데이터의 대다수는 병원체가 유 전적으로 감수성 호스트 3에서 임상 적 질병 결과의 광범위한 만성 염증을 유도하기 위해 별개의 메커니즘을 사용할 것을 제안한다. 따라서, 특정 병원체가 주요 공중 보건에 대한 영향뿐만 아니라, 많은 만성 질환의 치료 및 예방을 가질 수 만성 염증을 유도하는 메커니즘을 상세히 이해할. 만성 염증의 유도 및 유지에 기여하는 호스트와 특정 병원균 메커니즘이지만제대로 병원체에 의한 만성 염증의 모델링의 발전은 이러한 프로세스에 대한 우리의 이해를 증진하기 시작했다, 이해했다. P. 진지 발리 경구 감염 모델은 호스트 및 병원균 로컬 (경구 뼈 손실)에서 만성 염증에 기여하는 특정 메카니즘 및 전신성 사이트 (동맥 경화증) 5,6의 분석을 허용 병원균 - 유도 된 만성 염증의 고유 잘 특성화 된 마우스 모델이다. P. 진지 발리는 인간 치주 질환, 조직 7을 지원하는 치아의 파괴를 특징으로하는 감염 중심의 만성 염증성 질환에 연루 그람 음성, 혐기성 구강 병원균이다. 감염의 초기 부위 병리학 외에 축적 증거 P. 연루 진지 발리가 개발 및 죽상 동맥 경화증 (5)을 포함하여 전신 질환의 진행에 만성 염증을 유도 된, 질병은 만성 inflammatio 특징동맥 혈관 벽의 명. P.와 특정 병원체 무료 쥐의 구강 감염 진지 발리는 치조골 (8)을지지 치아의 파괴를 초래 로컬 염증 반응을 유도한다.을 P. 진지 발리 닫 사십이일 감염 후 8 생쥐 병원균 특이 혈청 항체 역가 (9)의 상부를 개발할 감염된 마우스의 입으로부터 회수 할 수있다. - / - 아포지 단백질 E를 사용하여 아테롬성 동맥 경화증의 구축 마우스 모델 생쥐 (아포 E - / -), P. 경구 감염 진지 발리는 대동맥 동 (10)과 무명 동맥 (11) 내에서 염증성 플라크 침착을 구동 만성 염증을 유도한다. P.의 무명 동맥 내에서 진보적 인 염증 진지 발리는 마우스 생체 내 MRI에 사용 살아있는 동물에서 모니터링 할 수 있습니다 -infected. P.에서 조직 학적으로, 동맥 병변 진지 발리는 쥐 지질 accompa의 증가 축적을 전시 -infected혈관 내피 세포의 활성화, 증가 된 면역 세포의 침윤, 염증 매개 물질 (12)의 상승 된 발현에 의해 nied. 녹아웃 마우스에서이 모델의 사용은 호스트 시그널링 컴포넌트 및 염증성 매개체의 역할뿐만 아니라, 셀을 구동 P. 특정 상호 작용을 밝혀왔다 14 - 진지 발리는 면역 병리 (12) 유도 된. 또한, 정의 된 돌연변이 세균을 이용한 실험은 중요한 P. 확인한 진지 발리 지역 및 전신 사이트 15에 만성 염증에 기여하는 요인을 독성. 이 문서에서는 P.의 평가 방법의 자세한 사항 진지 발리 지역 및 전신 부위에 만성 염증을 유도 된. 우리는 아미라 소프트웨어를 사용 microCT 의해 치조골 손실의 상세한 분석 프로토콜을 제공한다. 또한, 우리는 진보의 평가에 대한 생체 살아있는 동물 MRI에서 일련의 유틸리티를 정의무명 동맥 내 flammation. 우리는 시각화 및 동맥 병변의 염증 플라크의 정량 방법을 포함, 자신의 조직 학적 특성에 대해 설명합니다. 트랜스 제닉 마우스와 정의 된 돌연변이 세균의 사용은 호스트 및 질병의 개시, 진행 및 결과에 관여하는 미생물 인자 모두를 식별하기위한 모델이 특히 적합하다. 또한, 모델은 백신 접종과 약리학 적 개입을 포함한 신규 한 치료 전략을 선별하는데 사용될 수있다.

<table><tbody><tr><td>Amira 분석 소프트웨어</td><td>시각화 과학 그룹</td><td></td><td></td></tr><tr><td>혐기성 챔버 DW Scientific 모델 MG500&nbsp;</td><td>미생물학 국제</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BHI&nbsp;</td><td>벡턴-디킨슨&nbsp;</td><td></td><td></td>211059</tr><tr><td>헤민&nbsp;</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>51280-5G</td><td></td></tr><tr><td>메나디온(비타민 K)</td><td>시그마-알드리치&nbsp; &nbsp;</td><td>M5625-25G</td><td></td></tr><tr><td>효모 추출물</td><td>Becton-Dickinson&nbsp;</td><td>212750</td><td></td></tr><tr><td>카르복시메틸셀룰로오스(중간 점도)&nbsp;</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>C-4888</td><td></td></tr><tr><td>Sulfamethoxazole 및 trimethoprim 경구 현탁액 5ml 당 200 mg/40 mg</td><td>Hi-Tech Pharmacal</td><td>NDC 50383-823-16</td><td></td></tr><tr><td>&mu; 코네티컷 40&nbsp;</td><td>Scanco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HistoChoice 조직 고정 시</td><td>그마-알드리치&nbsp;</td><td>H2904</td><td></td></tr><tr><td>수단 IV</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>S4261-25G</td><td></td></tr><tr><td>수직 보어 11.7T Avance 분광계&nbsp;</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paravision</td><td>Paravision</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rat 안티 마우스 F4/80</td><td>Serotec</td><td>MCA497R</td><td></td></tr><tr><td>Rat 안티 마우스 TLR2</td><td>eBioscience</td><td>13-9021-80</td><td></td></tr><tr><td>Leica S4 해부 스코프</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microm HM 550 cryostat</td><td>Microm</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

로컬 및 전신 사이트에서 병원체에 의한 만성 염증을위한 마우스 모델

A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

만성 염증은 병적 조직 손상과 종양,자가 면역, 및 만성 염증성 질환을 포함하여 인간에서 많은 만성 질환의 통합 특성의 주요 드라이버이다. 증거 신흥 임상 증상의 다양한 개발과 만성 질환의 진행에 병원체 - 유도 만성 염증을 연루. 때문에 만성 질환의 복잡하고 다원적 원인에 인과 관계의 증거 및 기계적인 링크의 설립을위한 실험을 설계하는 사람이 거의 불가능하다. 동물 모델을 사용하는 장점은 특정 질병의 과정에 영향을 미칠 수있는 유전 적 및 환경 적 요인이 제어 될 수 있다는 것이다. 따라서, 관련 감염 동물 모델을 설계하는 것은 만성 염증에 기여하는 호스트와 병원체 특정 메커니즘을 식별하는 중요한 단계를 나타낸다. 여기에서 우리는 병원균에 의한 만성 infla의 마우스 모델을 설명구강 병원균 Porphyromonas 진지 발리 밀접하게 인간 치주 질환과 연관된 세균 감염 다음 로컬 및 전신 사이트에서 mmation. 특정 병원체 무료 쥐의 구강 감염은 치조골, 치주 질환의 특징을 지원하는 치아의 파괴의 결과로 지방의 염증 반응을 유도한다. P.로 설립 된 마우스 죽상 동맥 경화증의 모델, 감염 진지 발리는 혈관 내피 세포의 활성화, 증가 된 면역 세포의 침윤 및 병변 내에서 염증 매개 물질의 높은 발현과 함께 대동맥 동과 무명 동맥 내 염증 플라크 침착을 가속화합니다. 우리 지역 및 전신 사이트에서 염증의 평가를위한 세부 방법론. 트랜스 제닉 마우스와 정의 된 돌연변이 세균의 사용은 호스트 및 질병의 개시, 진행 및 결과에 관여하는 미생물 인자 모두를 식별하기위한 모델이 특히 적합하다. AdditionallY는, 모델은 백신 접종과 약리학 적 개입을 포함한 신규 한 치료 전략을 선별하는데 사용될 수있다.

적절한 마우스 모델 및 구강 감염 요법, P.를 사용하여 진지 발리는 만성 염증과 면역 병리 지역 (구강)에서 전신 사이트 (동맥) (그림 1)를 유도한다. 에서 마우스, P. 경구 감염 진지 발리는 치조골 (8)을지지 치아의 파괴를 구동 로컬 염증 반응을 유도한다.을 P. 진지 발리 쥐가 주로 IgG의 아이소 타입 9의 아르이 생물에 대한 혈청 항체 반응을 개발 -infected. 도 4에 도시 된 결과는 C57BL / 6 이일 P.gingivalis 간격으로 3 회 감염된 microCT 의해 치조골 손실의 평가가 6 주후에 희생되는 실험의 대표이다. 아미라 소프트웨어를 사용하여 부피 분석은 P.를 보여 진지 발리 -infected 생쥐 (감염되지 ...

동물 모델은 만성 염증의 발달에 기여하는 호스트와 병원체의 특정 메커니즘을 규정하는 매우 중요한 도구로 입증되었다. 여기서 우리는 로컬 및 전신성 염증 부위에서의 진행을 평가하기 위해 인간 병원체 Porphyromonas 진지 발리 및 세부 방법론 경구 감염 마우스 모델을 설명한다.

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

다음 프로토콜의 전반적인 목표는 생리학적으로 관련 있는 동물 모델을 사용하여 미생물 감염이 체내 만성 염증에 미치는 영향을 조사하는 것입니다. 이는 porphyromonas gingivalis를 마우스에 경구 감염시켜 국소 및 전신성 만성 염증을 유도함으로써 수행됩니다. 이후 MRI를 통해 살아있는 동물의 전신 염증 진행 정도를 측정할 수 있으며, 국소 염증성 골 손실은 micro CT로 평가하고, 희생 후 안면 지질 염색을 통해 죽상동맥경화성 플라크를 시각화할 수 있습니다.최종적으로, P gingivalis에 감염된 마우스와 감염되지 않은 대조군 사이의 치조골 부피 차이와 죽상경화성 플라크의 축적 정도는 각각 micro CT 분석과 지방 염색을 통해 측정할 수 있습니다. 본 동물 모델의 주요 장점은 만성 염증에 관여하는 숙주 및 병원성 메커니즘을, 특히 감염 부위에서 떨어진 곳에서 조사할 수 있다는 점입니다. 따라서 형질전환 마우스와 정의된 세균 돌연변이체를 사용하여 국소 감염 부위뿐만 아니라 전신 부위까지 살펴볼 수 있습니다.이 모델은 질병에 기여하는 숙주 및 미생물 요인과 같이 병인론의 핵심 측면을 식별하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 방법은 염증성 골손실 및 죽상동맥경화증에 관여하는 특정 숙주 및 병원체 메커니즘에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 류마티스 관절염, 당뇨병, 암을 포함한 다른 마우스 질환 모델에도 적용할 수 있습니다. 이곳은 보스턴 대학교의 고해상도 MRI 코어 시설이며, 포스트닥 연구원인 Ning이 마우스 영상 촬영의 제반 사항을 시연할 예정입니다. 먼저 냉동된 Porphyromonas gingivalis 3 81 균주를 혐기성 혈액 한천 배지에 스트리킹하고, 37 °C의 혐기성 챔버에서 배양하십시오.3~5일 후, 플레이트에서 배양된 미생물을 사용하여 5 mL의 뇌심장침출액(brain heart infusion broth, BHI) 액체 배지에 접종합니다. 하룻밤 동안 배양한 후, 배양액을 45 mL의 BHI로 옮기고 18~24시간 동안 추가로 혐기성 배양합니다. 대수 증식기 중간 단계에서 7,000 g, 실온 조건으로 10분간 원심분리하여 박테리아를 회수하고, 펠릿을 50 mL의 PBS로 3회 세척한 후 세롤로지컬 피펫을 사용하여 5 mL의 PBS에 펠릿을 완전히 재현탁합니다. 배양액의 1:10 희석액이 660 nm에서 광학 밀도(optical density) 1.0이 되도록 펠릿을 PBS에 재현탁합니다.그런 다음 2% 중량 대 부피 농도의 용액이 되도록 중간 점도의 카르복시메틸셀룰로오스를 충분히 칭량하고, 뭉침을 방지하기 위해 볼텍싱하면서 박테리아 현탁액에 카르복시메틸셀룰로오스를 천천히 첨가합니다. C2에서 염증의 진행 정도를 측정하기 위해, 먼저 생쥐의 머리가 앙와위(supine position)가 되도록 동물 홀더에 고정한 후 30 mm 수직 프로브와 11.7 T MRI 스캐너의 수직 보어 내에 배치합니다.워블링(wobbling) 및 시밍(shimming) 과정 후에, 세 가지 직교 방향으로 스카우트 영상을 획득하기 위해 rare 시퀀스를 사용하여 축상면, 관상면 및 시상면 영상을 생성합니다. 그 후, 저해상도 자기공명 혈관 조영술을 통해 획득한 영상이 표적 영역 내에 있는지 확인하고, 다음 파라미터를 사용하여 비게이팅(ungated) 3D 그래디언트 에코 시퀀스로 무명동맥의 고해상도 자기공명 혈관 조영술을 수행합니다. 슬랩 두께 1.5 centimeters, 플립 각도 45 degrees, 반복 시간 20 milliseconds, 에코 시간 2.2 milliseconds, 시야(FOV) 1.5 by 1.5 by 1.5 centimeters, 매트릭스 128 by 128 by 128, 그리고 평균 횟수 4회로 설정하여 총 스캔 시간은 약 22분입니다.그런 다음 ROI 분석을 위해 쇄골하동맥 분기점 0.3~0.5mm 아래의 해당 동맥 축상 영상을 선택합니다. 조직이 항상 PBS에 잠겨 있도록 유지하며 대동맥을 고정합니다. 먼저 대동맥 구(bulb)가 왼쪽에 오도록 대동맥을 해부학적 위치에 놓습니다. 그런 다음 대동맥궁의 세 번째 분지 아래의 대동맥 상단, 내림대동맥의 중간 지점, 내림대동맥의 하단 근처, 그리고 대퇴동맥 분지 위쪽의 총 5개 위치에 임시 고정 핀을 순차적으로 배치합니다.다음으로, 초미세 스프링 가위를 사용하여 대퇴동맥의 왼쪽 분지부터 시작하여 상행 대동맥의 가장 낮은 분지 아래까지 대동맥의 왼쪽 면을 절개합니다. 그런 다음 각 분지를 절단하고 핀으로 고정하여 내면을 노출시킨 후, 계속해서 조직을 핀으로 고정합니다. 이렇게 하면 내면 전체가 위에서 명확하게 보이며, 핀으로 인한 시각적 방해 없이 노출됩니다.지질을 염색하고 병변을 정량화하려면, 먼저 핀으로 고정한 대동맥을 갓 조제한 Sudan four 또는 oil red O 용액으로 덮습니다. 50분 후, 조직을 70% isopropanol로 1~5분 동안 세척한 다음, 조직에서 나오는 물이 더 이상 붉지 않을 때까지 2중 증류수로 대동맥을 조심스럽게 헹굽니다. 다음으로 대동맥을 PBS로 덮고, 이미지 보정을 돕기 위해 조직 옆에 자를 배치합니다.그 다음 해부 현미경에 부착된 고해상도 카메라로 조직의 이미지를 캡처하고, 해당 이미지를 TIFF 파일로 저장합니다. 마지막으로, 이미지 분석 소프트웨어를 사용하여 각 내막 표면을 수동으로 추적하여 그 면적을 결정합니다. 이어서 자동 색상 임계값 설정을 통해 병변 면적을 계산하기 위해, 각 이미지에 임계값을 설정하여 병변과 정상 부위를 구분하는 색상 강도를 정의합니다.p gingivalis에 감염된 생쥐를 이용한 이번 대표 실험에서 동맥경화성 병변으로 덮인 내막 표면의 백분율을 계산할 수 있습니다. 부피 분석 결과, 감염된 생쥐는 감염되지 않은 대조군에 비해 유의미한 골 손실을 보이는 것으로 나타났습니다. 재구성된 상악 반측면의 시각적 검사를 통해, 대조군 및 동맥경화 소인군과 비교하여 감염된 생쥐의 구치근 노출 표면적이 증가했음을 확인할 수 있습니다.POE 결핍 마우스. P. gingivalis는 만성 염증을 유도하여 치조골 손실과 대동맥동 및 관상동맥 내 염증성 플라그 침착을 일으키며, 이는 마지막 감염 후 24시간 이내에 나타나기 시작합니다. 이러한 변화는 이 대표 이미지들과 같이 감염 후 다양한 시점에서 연속적인 생체 내 MRI 촬영을 통해 살아있는 마우스에서 모니터링할 수 있습니다. 또한, Sudan IV로 염색한 대동맥의 단면 측정 결과, P. gingivalis 감염이 내막 표면의 지질 침착과 병변 부위를 유의미하게 증가시킴이 입증되었습니다.또한, 대동맥 기저부 병변의 면역조직화학 분석 결과, IV가 감염된 마우스에서 대식세포 침윤이 증가하고 선천성 면역 수용체인 toll-like receptor 2의 발현이 높아진 것으로 나타났습니다. 이 실험 절차를 수행할 때, 염증을 평가하는 실험 기간의 시점이 질병의 진행 과정과 적절히 일치하도록 고려하는 것이 중요합니다. MR 영상 촬영 후에는 전신 죽상경화증 부하 또는 병변의 세포 구성 성분과 같은 추가적인 질문에 답하기 위해 en face staining 또는 면역조직화학 분석과 같은 다른 방법들을 수행할 수 있습니다.이 영상을 시청한 후, 여러분은 만성 염증에 관여하는 숙주 및 병원성 요인을 모두 조사할 수 있는 in vivo 마우스 모델에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 병원체를 다루는 작업은 매우 위험할 수 있으며, 이 절차를 수행하는 동안에는 항상 PPE의 적절한 사용과 같은 예방 조치를 취해야 함을 잊지 마십시오.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

영구와 만성 세균 감염 마우스 모델...

만성의 살모넬라균 감염된 마우스 모델

Citrobacter rodentium 감염이 장의 세균 감염을 공부뿐만 아니라 마우스의 면역 반응 및 대장염를 개최 할 수있는 중요한 모델을 제공합니다. 이 프로토콜은 장벽 무결성, 병원체 부하와 손쥐 전염성 대장염에 대한 병원체 및 호스트 공헌의 철저한 특성을 허용하는 조직 학적 손상의 측정을 설명합니다.

<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; 마우스 모델 : 감염성 대장염에 대한 공부 병원체 및 호스트 기부

여기에 설명 된 방법은 비 침습적 bioluminescence 이미징 (BLI)을 통해 생쥐의 폐에서 IL-8 프로모터 의존 염증 활성화의 시각화 수 있습니다. 동일한 동물을 루시퍼 레이즈 리포터 구조물의 전달 시점으로부터 최대 2 개월 동안 BLI에 여러 번 투여 할 수있다.

IL-8 transiently Transgenized 마우스 모델<em&gt; In Vivo</em&gt; 염증 반응의 장기 모니터링

여기 장 장벽 위반 후 박테리아에서 파생 된 화합물의 입구를 모방 하는 프로토콜 제공 됩니다. Lipopolysaccharide sublethal 저용량 24 h 후 주입에 대 한 모니터링 했다 생쥐에 체계적으로 주입 했다. 프로 염증 성 cytokines의 표정은 비장, 간, 그리고 콜론에서 여러 시간 지점에서 결정 되었다.

장 방 벽 위반 후 미생물 파생 제품의 입구를 모방 하는 쥐로 Lipopolysaccharide의 주사

Murine 원심 인공 인간의 전환 colitis, 지저분한 스트림에서 제외 콜론 세그먼트에서 주로 림프 colitis 위한 murine 모델을 제공 합니다.

Murine 원심 인공, C57BL/6 마우스에 전환 Colitis의 새로운 모델

피부 부상에 타고 난 면역 반응의 실시간 탐지 및 쥐의 포도 상 구 균 감염에 대 한 접근 방식을 설명 합니다. 비교 LysM EGFP 여 쥐 (형광 neutrophils 보유) LysM EGFP와 잡종 immunodeficient 마우스 스트레인, 우리가 미리 감염에 대 한 우리의 이해 및 감염을 방지 하는 방법의 개발.

마우스 모델을 평가 타고 난 면역 반응 포도 상 구 균 감염

풋패드 접종 모델은 생체 내에서 바이러스 유발 신경 염증 반응을 특성화하는 데 중요한 도구입니다. 특히, 말초 신경계에서 시작된 바이러스 운동 및 관련 면역 병리학 적 과정에 대한 명확한 평가를 제공한다.

바이러스 유발 신경 염증 반응을 연구하는 마우스 풋패드 접종 모델

이 논문은 바이러스 감염 동안 폐렴구균이 무증상 집락 상태에서 질병을 유발하는 병원체로 전환하기 위한 새로운 마우스 모델을 설명합니다. 이 모델은 질병 진행의 여러 단계 동안 다양한 숙주에서 다미생물 및 숙주-병원체 상호작용을 연구하는 데 쉽게 적용할 수 있습니다.

바이러스 동시 감염 시 콜로니자에서 병원체로 Streptococcus pneumoniae 의 전환을 위한 마우스 모델은 연령 악화 질병을 요약합니다.

본 연구에서는 SKG 마우스에서 CD4+ T 세포를 이식하여 류마티스 관절염(RA) 마우스 모델을 확립하는 프로토콜을 보고하며, 이를 통해 RA에 대한 면역학적 기전, 병리학적 진행 및 새로운 치료법 개발을 조사하기 위한 빠르고 신뢰할 수 있는 실험 도구를 제공합니다.

An Adoptive Transfer Model of Rheumatoid Arthritis in Mice

여기서는 쥐의 초기 구간(간질성 주사)과 꼬리부고(혈관 내 주사)에서 염증 자극을 유도하는 두 가지 뚜렷한 외과적 주사 모델을 설명한다. 이 방법들은 부고고의 다양한 부위에서 특정 부위 반응을 연구할 수 있게 합니다.

병원체 관련 분자 패턴에 의해 유발된 부고고환염의 마우스 모델

배우세요 Porphyromonas gingivalis 구강 감염을 통한 마우스 만성 염증 모델. MRI와 micro CT로 국소 및 전신 염증 반응을 측정하여 감염 메커니즘과 숙주-병원체 상호작용을 연구하는 방법입니다.

로컬 및 전신 사이트에서 병원체에 의한 만성 염증을위한 마우스 모델

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