Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

Ji-Yoen Kim; Stacy D. Grunke; Yona Levites; Todd E. Golde; Joanna L. Jankowsky

doi:10.3791/51863

영구와 광범위한 신경 세포의 형질 도입에 대한 신생아 마우스 뇌의 뇌실 바이러스 감염

JoVE Journal
Neuroscience

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Neuroscience

Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

영구와 광범위한 신경 세포의 형질 도입에 대한 신생아 마우스 뇌의 뇌실 바이러스 감염

Full Text

63,235 Views

10:15 min

September 15, 2014

DOI: 10.3791/51863-v

Ji-Yoen Kim*¹, Stacy D. Grunke*¹, Yona Levites², Todd E. Golde², Joanna L. Jankowsky^1,3

¹Department of Neuroscience,Baylor College of Medicine, ²Department of Neuroscience, Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease,University of Florida, ³Department of Neurology and Department of Neurosurgery,Baylor College of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기서 우리는 신생아 마우스 뇌에 아데노 관련 바이러스를 뇌실 내 주입하여 광범위한 신경 세포 전달을 위한 기술을 보여줍니다. 이 방법은 바이러스로 전달된 transgenes의 평생 발현을 달성하는 빠르고 쉬운 방법을 제공합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 뇌 전체의 뉴런을 바이러스로 전달하는 것입니다. 이것은 갓 태어난 새끼를 냉동 마취한 다음 신생아를 주입을 위해 냉각 단계로 이동시켜 수행됩니다. 다음으로, 람다 봉합사와 양쪽 눈 사이의 외심실 또는 람다와 BGMA 사이의 중간에 있는 시상 봉합사에서 외측을 표적으로 하는 주사 부위를 식별합니다.

마지막 단계는 바늘을 올바른 깊이로 삽입하고 최대 2마이크로리터의 바이러스 용액을 각 반구의 측심실에 천천히 주입하는 것입니다. 궁극적으로, 관심 유전자에 대한 형광 태그 또는 면역 형광을 사용하여 뇌실 내 주사로 인한 전이유전자 발현 패턴을 보여줍니다. 일반적으로 이 기술을 처음 접하는 개인은 외측심실을 정확하게 조준하는 데 어려움을 겪을 것입니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos