Isolation and Culture of Dissociated Sensory Neurons From Chick Embryos

Sarah Powell; Amrit Vinod; Michele L. Lemons

doi:10.3791/51991

JoVE Journal
Neuroscience

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Isolation and Culture of Dissociated Sensory Neurons From Chick Embryos

병아리 배아에서 분리 및 해리 감각 뉴런의 문화

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11:16 min

September 24, 2014

DOI: 10.3791/51991-v

Sarah Powell¹, Amrit Vinod¹, Michele L. Lemons¹

¹Department of Natural Sciences,Assumption College

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

세포 배양 모델은 환경 조건 위에 상세한 제어를 제공하고, 따라서 신경 세포 생물학의 다양한 양상을 명료하게 강력한 플랫폼을 제공한다. 우리는 병아리 배아에서 감각 신경을 분리 해리, 문화 할 수있는 신속하고 저렴하고 신뢰할 수있는 방법을 설명합니다. 하층 준비 및 면역 세포의 세부 사항도 제공됩니다.

이 절차의 전반적인 목표는 닭 배아에서 해리된 1차 감각 뉴런의 풍부한 집단을 배양하는 것입니다. 이것은 배아 날부터 손상되지 않은 등쪽 뿌리 신경절, 7-10개의 닭 배아를 원뿔형 튜브에 모은 다음 해리된 세포 현탁액으로 분해함으로써 이루어집니다. 해리된 두 번째 단계로, DRG 세포는 배양을 위해 배양 접시에 도금됩니다.

그 후, 배양 접시를 부드럽게 헹구어 뉴런을 우선적으로 제거합니다. 마지막 단계는 고농도 또는 저농도의 라미닌으로 미리 코딩된 산성 세척 및 베이크드 커버 슬립과 같이 잘 정의된 하위층에 해리된 감각 뉴런을 도금하는 것입니다. 하나의 면역 세포 화학은 해리된 배양 병아리 감각 뉴런의 세포체, 신경돌기 및 성장 원뿔에서 NCA 및 활성화된 베타 원 인테그린의 존재를 보여주는 데 사용됩니다.

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