지주막 하 출혈의 급성과 늦은 후유증의 연구에 대한 토끼 피 션트 모델 : 기술적 측면

이 절차의 전반적인 목표는 토끼에서 검사관의 독립적인 두개내압 또는 ICP 제어 혈액 션트, 급성 지주막하 출혈 또는 SAH 모델을 확립하는 것입니다. 이것은 먼저 쇄골하 동맥을 캐뉼러링함으로써 이루어집니다. 두 번째 단계에서는 디지털 감산 혈관 조영술을 수행한 다음 신경 모니터링 프로브와 척추 접근 바늘을 마지막 단계에서 배치합니다.

척추 접근 바늘과 쇄골하 동맥은 션트에 연결되어 검사자, 독립적인 ICP 제어 급성 SAH를 유도하고, 궁극적으로 ICP 대뇌 혈류 또는 급성 SAH에 대한 동물의 CBF 및 심폐 반응을 모니터링할 수 있습니다. 이 방법은 조기 뇌 손상 및 지연된 뇌혈관 표본이 분만 결과 및 사망률에 어떻게 기여하는지와 같은 신경 혈관 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 동맥류성 수혈 후: 진정제를 투여한 토끼를 앞다리와 뒷다리를 모두 수술면에 고정한 상태에서 앙와위 자세로 눕히는 것으로 시작합니다.

이와 같이 3채널 심전도를 설치하십시오. 토끼의 복부 쪽에 삼각형 형태로 3개의 피하 전극을 놓습니다. 다음으로, 쇄골의 중간 3 분의 1 주위의 오른쪽 그림 근육에 포비돈 요오드 또는 이와 유사한 것으로 피부를 소독하고 동물을 멸균 시트로 덮습니다.

국소 마취제를 가슴 근육에 침투시킨 후 외측 파라무스 피부 절개를 해 가슴 근육을 노출시킵니다. 쇄골하 동맥이 시각화될 수 있을 때까지 둔기 절개를 통해 근육 섬유를 상하로 분할합니다. 그런 다음 현미경으로 두 개의 직선 마이크로 겸자를 사용하여 쇄골하 동맥을 절개한 다음 원위부로 접합하고 4개의 O 폴리필라멘트 봉합사와 구부러진 마이크로 겸자를 사용하여 노출된 근위 끝 주위에 합자를 배치합니다.

다음으로, 구부러진 마이크로 시저를 사용하여 쇄골하 동맥의 벽을 절개하고 동맥 역행을 캐뉼레이션합니다. 그런 다음 근위 결찰 쪽으로 이중 매듭 결찰로 카테터를 고정하고, 추가로 동맥 근위부의 동맥 꼬임 또는 구부러짐을 방지하고 미끄러짐이나 다량의 출혈을 방지하기 위해 원위 결찰 쪽으로 이중 매듭 결자로 카테터를 고정합니다. 그런 다음 동맥혈 가스 분석 상태에 대한 혈액 샘플을 수집하고 표준 심혈관 및 호흡기 매개변수를 지속적으로 모니터링합니다.

하악골 각도에 외부 크기 측정 장치를 배치하여 혈관 조영술을 보정하고 기준선 및 후속 혈관 직경의 사후 측정을 정확하게 비교할 수 있습니다. 그런 다음 캐뉼러 동맥을 통해 비이온 IOP IOL의 역행성 동맥 내 볼루스 주입을 수행하고 즉시 캐뉼라를 식염수로 세척하여 사다리의 폐색을 방지합니다. 기준선 디지털 감산 혈관 조영술 후 토끼를 엎드린 자세로 재배치하고 동맥 내 카테터를 조작하거나 재배치하지 않도록 주의하십시오.

동맥 혈압 모니터링을 연결하고 심전도, 동맥 혈압, 말초 산소 포화도, 호기 이산화탄소 및 심부 온도를 포함한 표준 심혈관 및 호흡 매개변수를 지속적으로 모니터링하기 시작합니다. 아날로그 출력 인터페이스를 통해 데이터를 아날로그 디지털 컨버터 데이터 로거로 전송하고 저장합니다. 머리를 30도 각도로 홀더에 넣고 포비돈 요오드로 머리와 목의 피부를 각각 1분씩 3회 소독합니다.

새로운 수술 부위를 멸균 시트로 덮은 후 정중선 피부를 절개합니다. 작은 수술용 견인기를 삽입하여 두개골 바깥쪽 랜드마크에 따라 3개의 둥근 절골술을 만들고 신경 모니터링 프로브를 보정합니다. 두개간 압력과 실질 레이저 도플러 혈류 신경 모니터링 팁을 배치하고 뼈 왁스로 버 구멍을 밀봉하여 두개골 유체를 단단히 유지하고 I-C-P-C-P-P 및 MAP의 안정적인 상태를 유지하기 위해 닫힌 두개골 상태를 허용합니다.

다음으로, 22 게이지 40mm 소아 척추 접근 바늘을 수조 마그나에 경피적으로 삽입합니다. 그런 다음 틈이 발견될 때까지 뼈 외부 후두 돌기를 따라 바늘을 아래로 밉니다. 몇 분 동안 토끼의 머리를 20-30도 각도로 기울인 상태에서 뇌척수액이 자발적으로 떨어지는 것을 관찰하여 바늘의 올바른 위치를 확인합니다.

이제 혈액으로 채워진 압력 모니터링 튜브를 사용하여 수조 마그나의 척추 접근 바늘을 이전에 카테터화된 쇄골하 동맥에 부착된 3방향 정지 콕에 연결합니다. 그런 다음 쇄골하 동맥과 CI 흉골 마그나 사이의 션트 연결을 열어 지주막하 출혈을 유도합니다. 션트를 연 후 두개내 압력이 이완기 혈압에 가까운 값으로 증가하기 시작합니다.

이때 두개간 고원이 10초 이상 유지되거나 압력이 자발적으로 감소하는 경우 두개간 압력이 최고점에 도달한 후 션트를 닫고 압력이 기준선에 가까운 정상 상태로 돌아올 때까지 척추 접근 바늘을 제자리에 유지합니다. 마지막으로 뇌 혈류 미세 바늘과 두개내 압력 프로브를 제거합니다. 뼈 왁스로 버 구멍을 막은 다음 네오마이신 설페이트를 사용하여 엄격한 상처 세척을 수행하고 피부를 봉합합니다.

먼저 버 구멍 위에 피부를 봉합합니다. 그런 다음 토끼를 누운 자세로 재배치하고 쇄골하 동맥 카테터를 제거한 후 가슴 근육과 피부를 봉합합니다. 이 보고서에 기술된 SAH의 광견병에 걸린 혈액 션트 모델은 손상 후 24시간 이내에 해마, 기저피질, 대뇌혈관구조에서 조기 뇌 손상을 일으켜 특징적인 혈액 분포를 유도합니다.

또한, 이 모델은 3일째에 중등도에서 중증의 지연성 뇌혈관 경련을 유발합니다. SAH 유도 후, 동물이 완전 마취 상태에서 급성 SAH 시 호흡 정지 또는 중증 서맥으로 인해 절차의 사망률은 약 20%입니다. 기술적 관점에서 볼 때, 이 혈액 션트 모델은 검사자의 독립적이고 제어 가능한 SAH 유도를 모두 허용합니다.

이 절차를 시도하는 동안 이 쇄골하 동맥을 단단히 고정하고, 멋진 차를 타고 동물의 위치를 변경하고, Cy Sternum 침술 동안 매우 부드럽고 인내심을 가져야 한다는 것을 기억하는 것이 중요합니다.