DOI: 10.3791/52239-v
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마우스 피하 모델에서 칸디다 알비칸스 생물막 발달의 실험적 절차를 제시합니다. 진균 생물막은 군집 형성 단위의 수를 결정하고 생성되는 빛의 양이 생존 가능한 세포의 수와 일치하는 비침습적 생물 발광 이미징에 의해 정량화되었습니다.
다음 실험의 전반적인 목표는 칸디다 알비칸스 세포에 의한 생체 내 생물막 형성의 비침습적 모니터링을 위한 루시페라제 발현 균주의 사용을 검증하는 것입니다. 이는 칸디다 알비칸스(candida albicans)의 균주를 발현하는 루시페라아제(luciferase)로 집락화된 카테터 조각을 마우스의 등에 이식함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계에서 효모는 세포외 기질에 내장된 두꺼운 세포층으로 성장하여 카테터 내부에 성숙한 생물막을 생성합니다.
다음으로, 루시페라제 효소에 의해 전환될 기질을 추가합니다. 이 반응은 측정 가능한 빛을 생성합니다.생물 발광 이미징 또는 BLI는 살아있는 숙주 내에서 생물막의 형성을 기록하고 정량화하는 데 사용됩니다. 중앙 Venmo 시스템과 같은 다른 기존 기술에 비해 이 기술의 주요 장점은 한 동물 내에서 최대 6개의 생물막을 테스트할 수 있으므로 통계 분석에 필요한 동물 수를 크게 줄일 수 있다는 것입니다.
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