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DOI: 10.3791/52240-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study focuses on measuring mRNA decay rates in the yeast Saccharomyces cerevisiae. By analyzing mRNA half-lives, researchers can understand the balance between mRNA synthesis and degradation.
특정의 mRNA의 정상 수준은 mRNA의 합성과 부패의 속도에 의해 결정된다. 전체 게놈 mRNA의 분해율 또는 특정의 mRNA 붕괴 속도는 mRNA의 반감기를 측정함으로써 측정 할 수있다. 이 프로토콜은 사카로 미세스 세 레비 시아에서 mRNA의 붕괴 속도의 측정에 초점을 맞추고있다.
다음 실험의 전반적인 목표는 효모 Saccharomyces visi에서 mRNA 붕괴 속도를 측정하는 것입니다. 이것은 먼저 효모 세포를 성장시켜 허용 온도에서 위상을 로그함으로써 달성됩니다. 다음으로, 세포는 총 mRNA 합성이 억제되는 더 높은 온도로 이동합니다.
그런 다음 효모 샘플은 각 샘플에 대해 미리 결정된 시점에서 수확됩니다. 총 RNA는 겔 전기영동에 의해 분리되어 추출되어 멤브레인으로 옮겨집니다. 마지막으로, 북부 혼성화(northern hybridization)는 시간의 함수로서 mRNA 수준의 변화를 확인하기 위해 수행됩니다.
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