신기원 무선 송신기 시스템을 사용하여 인간의 질병의 작은 설치류 모델에서 장기 연속 뇌파 모니터링

이 절차의 전반적인 목표는 쥐 및 생쥐와 같은 설치류에 고품질 EEG를 기록하기 위해 epic 송신기를 효과적으로 이식하는 것입니다. 이것은 먼저 두개골 표면을 노출시키고 건조시킴으로써 이루어집니다. 두 번째 단계는 송신기, 전극 및 필요한 뼈 나사를 삽입하기 위해 두개골에 구멍을 뚫는 것입니다.

다음으로, 본 스크류를 삽입하고 송신기 전극을 정렬합니다. 마지막 단계는 전극을 삽입하고 아크릴 접착제로 송신기를 두개골에 고정하는 것입니다. 궁극적으로, 데이터 수집 비디오 및 검토 소프트웨어는 EEG 활동 24 7을 모니터링하여 발작 및 간헐적 스파이크와 같은 모든 EEG 이벤트를 캡처하는 데 사용됩니다.

이식 단계를 배우기 어렵기 때문에 이 방법의 시각적 시연이 중요합니다. 설치류의 두개골의 크기는 복잡하지만 훈련이 가능한 수술 절차를 낳습니다. 이 프레젠테이션의 주요 목표는 이 이식 절차를 단순화하고 쉽게 재현할 수 있도록 하는 것입니다.

이 방법에 대한 아이디어는 간질의 동물 모델에서 장기간 전기 기록을 만드는 데 어려움을 겪었을 때 처음 떠올랐습니다. 경련성 발작 중에는 유선 녹음으로 인해 전기 인공물이 발생하기 쉬우며 전극 두개골 계면에 불의한 응력이 가해지기 쉽습니다. 유선 녹음 시스템은 동물이 밧줄을 씹거나 임플란트를 긁기 때문에 실패할 수 있습니다.

이 무선 시스템은 이러한 모든 문제를 해결하는 동시에 최대 6개월 동안 연속 중단 없는 EEG 기록을 제공합니다. 수술을 준비할 때는 송신기를 완전히 멸균하고 70% 에탄올에 담근 다음 멸균 식염수에 헹구고 멸균 식염수에 담가야 합니다. 필요할 때까지 그대로 두십시오.

마지막 준비는 수술 부위의 모든 것이 멸균되었는지 확인하는 것입니다. 주변 지역과 장비에 70% 에탄올을 뿌리고 닦으십시오. 동물을 마취한 후, 동물이 마취되는 동안 수술을 시작하기 전에 발가락 꼬집음에 대한 반응이 없는지 확인하십시오.

15분마다 이 작업을 수행합니다. 마취된 동물은 먼저 입위 안경테의 위치에 고정되어야 합니다. 이어바를 사용하되 어린 강아지의 피부는 매우 부드럽기 때문에 너무 조이지 마십시오.

고정 후 노즈콘을 적용하여 3%iso 불소를 전달합니다. 동물을 따뜻하게 유지하려면 그 아래에 가열 패드를 섭씨 37도로 유지하십시오. 성인 동물의 경우 또한 눈을 윤활하십시오.

이제 절개 부위를 먼저 소독하고 70% 에탄올로 두피를 닦아낸 다음 베타딘으로 피부를 원을 그리며 문지릅니다. 그런 다음 동물을 드레이프하십시오. 정중선을 따라 귀 약간 뒤의 두피를 매우 조심스럽게 절개하는 것으로 시작하십시오.

절개 부위를 약 2cm 정도 연장합니다. 어린 새끼는 매우 부드러운 두개골입니다. 또한 이 절개 부위를 한 번만 절개하면 더 빨리 치유됩니다.

따라서 두개골이 노출됩니다. 그런 다음 동맥류 클립을 사용하여 두개골을 잡고 송신기가 부착될 부위를 노출시키고 건조시킵니다. 어린 새끼의 경우 두개골 뼈가 융합되지 않는다는 것을 명심하십시오.

그런 다음 송신기가 부착될 두개골을 말리십시오.강력한 접착 결합을 위해 전기 소작 펜을 사용하여 두개골의 출혈을 멈춥니다. 이제 해부학적 랜드마크와 뇌 지도를 사용하여 두개골 위치를 식별하여 기록할 버 구멍을 배치합니다. 그런 다음 Dremel 및 bur 유형 비트를 사용하여 녹음 위치에 직경이 300미크론 이하인 두 개의 구멍을 만듭니다.

다음으로, 소뇌 위와 람다 뒤에 버 구멍을 놓습니다. 기준 전극의 경우 트랜스미터의 전선이 버 구멍에 정렬되어 있는지 확인하십시오. 그렇지 않은 경우 트랜스미터의 적합성을 확인하고 끝이 가는 집게를 사용하여 전극을 부드럽게 구부려 구멍과 정렬되도록 합니다.

이제 수술 용 가위를 사용하여 원하는 길이로 자릅니다. EEG 기록을 위해 경막 위까지 확장되거나 정의된 뇌 구조까지 침투해야 합니다. 이제 전극을 코팅하지 않고 송신기에 충분한 시아노아크릴레이트를 도포하여 완전히 덮습니다.

전극에 접착제를 묻히지 마십시오. 송신기가 표면 녹음을 수행하려는 경우 송신기를 구멍으로 내리고 약간의 압력을 가하여 약 1분 동안 제자리에 고정하십시오. 녹음을 뇌 심부 구조에서 가져올 경우 송신기를 캐뉼라 홀더에 장착하고 입체 팔에 놓습니다.

접착제 오염 없이 트랜스미터 전극을 버 구멍에 배치하는 것이 중요합니다. 오염으로 인해 신호가 저하됩니다. 다음으로, 송신기의 부착을 견고하게 하기 위해 더 많은 시아노아크릴레이트 젤을 추가합니다.

송신기의 벽을 덮는 원으로 접착제를 바르십시오. 안테나를 덮지 않도록 하십시오. 그런 다음 주사기에서 송신기 바닥 주위에 100마이크로리터의 화학 촉진제를 적용합니다.

주변 조직에 닿지 않도록 하십시오. 촉진제를 제거하려면 반 밀리리터의 멸균 식염수로 해당 부위를 철저히 씻으십시오. 이제 송신기 주위의 피부를 덮지 않고 봉합합니다.

송신기의 상단은 외부화되어야 합니다. 좋은 신호 전송을 위해 Vicryl 또는 실크 봉합사를 사용하십시오. 섬세한 강아지와 함께 작업할 때 피부는 송신기와 주변 접착제 주위로 상당히 단단해야 합니다.

이제 동물을 프레임에서 따뜻한 담요로 옮깁니다.회복을 위해 수술 후 관리 세부 정보는 텍스트 프로토콜에 제공됩니다. 이식된 동물 한 마리를 기록실로 옮깁니다. 한 번에 한 마리의 이식 동물만 모니터링할 수 있지만 이식되지 않은 다른 동물도 함께 모니터링할 수 있습니다.

레코더를 설정하려면 전원 공급 장치를 수신기 베이스에 연결하십시오. 그런 다음 BNC를 통해 베이스를 데이터 수집 시스템에 연결합니다. 이제 신호 수신기 베이스에 케이지를 놓습니다.

신호등이 켜져야 합니다. 이제 데이터를 기록할 수 있습니다. 먼저 수신기 베이스를 광고 변환기에 연결하고 변환기를 컴퓨터에 연결합니다.

소프트웨어 설정을 사용하여 s를 설정합니다.amp녹음의 속도를 초당 500으로 설정합니다. 송신기는 0.1에서 100 헤르츠 사이의 EEG 신호를 전송하며, 양쪽 끝에서 VE 롤오프당 8데시벨을 설정하며, 나이퀴스트보다 높은 적절한 샘플링 속도를 설정하는 것이 중요합니다. 초당 500 샘플을 권장합니다.동물을 기록하는 동안 스트레스와 탈수 징후를 관찰하십시오.

강아지는 2시간 이상 챔버에 있으면 안 됩니다. 송신기는 손상을 최소화하는 폼 팩터로 설계되었으며 배터리 용량에 따라 6개월 동안 지속적으로 배터리 수명 기록을 수행할 수 있습니다. P 12 이상의 쥐는 P 6의 어린 쥐와 마찬가지로 송신기를 매우 잘 견뎌냈습니다.

두개골에 부착된 시아노아크릴레이트는 발달을 방해하지 않아 동물이 성체로 발달하는 동안 지속적인 데이터 수집이 가능했습니다. 이 기술을 숙달하면 제대로 수행하면 단 몇 분 만에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 따라 전극에 접착제 오염이 없도록 하는 것이 중요하다는 것을 기억하십시오. 간질의 시간, 경과 및 중증도와 같은 추가 질문에 답하기 위해 정량적 발작 감지 분석과 같은 다른 방법을 수행할 수 있습니다.

이 기술은 간질 연구자들이 신생아 발작과 주산기 뇌졸중의 설치류 모델을 연구할 수 있는 길을 열어줄 것입니다.