2015년 6월 20일
Schlemm의 운하 공간으로 섬유주 (TM) 마이그레이션 ophthalmodynamometer에 의해 급성 압력 상승에 의해 유도 및 스펙트럼 영역 빛 간섭 단층 촬영으로 관찰 할 수있다. 이 방법의 목적은 현장에서 조직 생활에 심각한 압력 상승에 살고 유출 관의 형태 계측 학적 반응을 정량화하는 것입니다.
이 절차의 전반적인 목표는 생리학적 조건에서 섬유주 그물망을 검사하여 현장에서 살아있는 사람의 눈에서 급성 안압 상승에 대한 살아있는 유출로의 형태학적 반응을 정량화하는 것입니다. 이는 먼저 기준선에서 안구 내부의 압력을 측정하고 광간섭 단층촬영(optical coherence tomography)을 통해 수액 유출 경로의 위치인 윤부를 이미징하여 수행됩니다. 두 번째 단계는 안압 동력계로 외측 공막에 5g 및 10g의 압력을 가하여 IOP가 상승하는 동안 압력 측정 및 윤부 스캔을 반복하는 것입니다.
다음은 트로픽 에이드 한 방울로 평활근을 이완시킨 후. 압력 측정 및 림버스 스캔은 없이 반복됩니다. 그리고 IOP 상승 중에는 이미지 데이터를 내보내고 처리하며, 유출 경로 구조 형태학을 측정하고 평활근 이완 유무에 관계없이 IOP 상승에 따른 형태학적 변화를 비교하면 섬유주 그물망의 기계적 특성에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다.
원자력 현미경 검사와 같은 다른 기술에 비해 이 기술의 주요 장점은 살아있는 눈의 섬유주 그물망을 측정하고 안압 섭동에 대한 기계적 반응을 조사한다는 것입니다. 그 반응에는 그것을 지탱하는 주변 평활근의 영향이 포함됩니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 고정, 표적 및 고정이 없거나 이 방법에서 시선 위치가 주로 구두 명령에 의해 조정되기 때문에 처음에는 어려움을 겪을 것입니다.
또한 복부 동력계를 적용하면 눈의 위치가 약간 바뀝니다. 따라서 이미지 획득 전에 스캔을 재정렬해야 합니다. 압력 상승으로 시작합니다.
먼저 Goldman 애플리케이션 Chronometry를 사용하여 기준선 압력을 측정하고 0.5%의 프로판을 눈에 떨어뜨린 다음 3분 동안 기다립니다. 테스트 그룹을 두 개의 코호트로 나눕니다. 코호트 1은 30g의 압력을 받고 코호트 2는 5g의 압력을 받습니다.
안과 동력계로 측두공막에 부드럽게 압력을 가합니다. 그런 다음 5분 동안 기다렸다가 두 번째 코호트에 10g의 압력을 가하고 상승된 압력 측정인 다른 측정을 수행합니다. 이제 피사체의 안구, 스캐너에 있는 피사체에 대한 광간섭 단층촬영 스캔을 수행하고 인구 통계 데이터를 입력합니다.
다음으로, 구두 명령을 사용하여 환자의 시선을 코 방향으로 향하게 하여 스캔을 측두변부 중심에 놓습니다. 측두변림이 중앙에 놓이면 기준선 스캔을 수행합니다. 이제 0.5%프로판을 눈에 한 방울 떨어뜨립니다.
3분 정도 기다렸다가 알모 동력계 코호트를 사용하여 압력을 가하는 동안 다시 스캔하면 한 명은 30g의 압력을, 두 번째 코호트는 5g의 압력을 받습니다. 두 번째 코호트의 경우, 첫 번째 압력 적용 후 5분 동안 기다렸다가 세 번째 눈 스캔을 수행하는 동안 10g의 압력을 가합니다. 이전과 마찬가지로 좋은 스캔만 허용됩니다.
데이터를 내보내고 이미지 J로 가져온 후 이미지를 TIFF 이미지 스택으로 변환하고 다음 설정과 함께 향상된 로컬 대비 프로세스를 사용합니다. 매개 변수 블록 크기 31, Instagram 빈 256, 마스크 5개에서 최대 기울기를 none으로 설정하고 fast 옵션을 활성화된 것으로 설정합니다. 이미지 스택의 각 프레임에서 이 작업을 수행하고 변경 사항을 저장합니다.
그런 다음 종횡비의 크기를 2048 X 10 24로 조정하고 이미지를 세로로 뒤집습니다. 배율 거리를 2048로 설정합니다. 알려진 거리를 4, 000으로 설정하고 픽셀 종횡비를 1로 설정합니다.
그런 다음 선박 횡단에 대한 스캔을 분석할 수 있습니다. 마우스 휠을 천천히 돌려 스캔을 육안으로 검사하여 독특한 혈관 횡단을 식별합니다. 스캔 내에서 참조 지점으로 사용하려면 분석 스프레드시트에 이미지 번호와 참조 프레임 번호를 기록하십시오.
스캔 볼륨의 프레임을 스크롤하는 것은 두 가지 용도로 사용됩니다. 첫째, 우리는 수성 용기에서 독특한 랜드마크를 찾고 있습니다. 이는 서로 다른 시간에 수행된 스캔 볼륨을 정렬하는 데 사용됩니다.
둘째, 볼륨을 스크롤하면서 우리는 수성 용기의 형태를 마음 속에 통합하고 그 형태를 사용하여 수성 용기를 Schlemm의 운하와 구별합니다. 자유형 선택 도구를 사용하여 Schlemm 운하에 초점을 맞춥니다.먼저 단면적을 측정합니다. 마우스로 경계를 돌면서 운하를 수동으로 분할합니다.
현재 이미지 프레임에 대해 CTRL D를 누르고 있으면 세그먼트 선의 위치를 문서화할 수 있습니다. 그런 다음 CTRL M을 누르고 있으면 Schlemm 운하의 면적이 자동으로 측정됩니다. 확대하면 슐렘 운하의 뚜렷한 경계가 없다는 것을 알 수 있습니다.
이러한 이유로 전체 너비 절반 최대 접근 방식은 분할의 경계를 결정하기 위한 지침으로 선험적으로 사용됩니다. 이제 Schlemm 운하 단면적 및 측정 프레임 번호를 분석 스프레드시트에 복사합니다. 그런 다음 윤곽선이 있는 영역을 선택 취소하고 오른쪽 화살표를 누릅니다.
키를 세 번 눌러 세 개의 이미지 프레임을 앞으로 이동합니다. Schlemm 운하 단면적이 10프레임으로 측정될 때까지 이 과정을 반복합니다. 이제 왼쪽 화살표 키를 눌러 첫 번째 측정 프레임으로 돌아가서 Schlemm 운하의 길이를 측정하기 시작합니다.
도구 모음에서 직선 세그먼트 도구를 선택합니다. 현재 프레임에서 Schlemm 운하의 가장 앞쪽에서 뒤쪽 대부분의 위치로 직선을 그립니다. 컨트롤 D를 누르고 있으면 세그먼트 선의 위치를 문서화할 수 있습니다.
그런 다음 컨트롤 M을 길게 눌러 슐렘 운하의 길이를 측정합니다. 그런 다음 Schlemm 근관 길이와 프레임 번호를 분석 스프레드시트에 복사하고 길이를 선택 취소한 다음 부피가 측정된 세 번째 이미지마다 근관 길이를 측정합니다. 마지막으로, 세 가지 샘플에서 섬유주 그물망 두께를 측정합니다.
첫 번째 측정 프레임으로 돌아가서 운하의 가장 앞쪽 위치에서 섬유주 그물망 및 내부 챔버의 경계까지 직선을 그립니다. 선이 경계에 수직인지 확인합니다. 이제 control을 누른 상태에서 D를 누른 다음 M을 눌러 선을 측정합니다.
항상 이러한 측정값을 가져온 프레임과 함께 데이터베이스에 복사합니다. 둘째, 운하의 중심에서 그물망과 전방의 경계까지 선을 그립니다. 선은 경계에 수직이어야 합니다.
그런 다음 Ctrl 키를 누른 상태에서 현재 프레임에 대해서만 D를 누릅니다. 셋째, 운하의 가장 뒤쪽 위치에서 전방과의 그물망 경계까지 선을 그립니다. 또한 이 선이 테두리에 수직인지 확인하십시오.
그런 다음 control을 누른 상태에서 D를 누른 다음 M.Repeat을 눌러 이전에 분석한 다른 9개 프레임 각각에서 이러한 세 가지 두께를 측정합니다. 그런 다음 설명된 프로토콜을 사용하여 데이터 분석을 진행하고, 유출에 대한 안압의 크고 작은 변화의 영향, Schlemm 운하, 단면적과 같은 견인되고 형태학적 매개변수를 얻었습니다. 높은 수준의 압력 증가는 근관의 관찰 가능한 붕괴를 일으키는 반면 안압의 작은 증가는 수용되었습니다.일단 숙달되면 이 기술은 적절하게 수행되면 10-15분 이내에 수행할 수 있습니다.
전체 스크립트를 보고 수천 개의 과학 동영상에 액세스하세요
본 연구에서는 살아있는 사람의 눈에서 급성 안압(IOP) 상승에 따른 섬유주(TM)의 형태측정학적 반응을 조사합니다. 광간섭 단층촬영을 이용하여 생리적 조건 하에서 슐렘관 공간으로의 섬유주 이동량을 정량화합니다.
이 기술은 살아있는 사람의 눈에서 안압 상승에 따른 섬유주(trabecular meshwork)의 기계적 반응을 직접 측정할 수 있게 하여, 녹내장 표적 검증을 위한 생리학적 관련 데이터를 제공합니다. 고유한 조직 간 상호작용이 유지되는 조건에서 형태 측정학적 변화를 정량화함으로써, 방수 유출 경로 가설의 기전적 리스크 감소(de-risking)를 지원합니다. 이 접근법은 전임상 모델과 인간의 병태생리학 사이의 가교 역할을 하여, 안압 하강 치료제의 표적 선정에 대한 예측 신뢰도를 높여줍니다.
이 방법은 유출로에 대한 인간 유래 생체역학적 데이터를 제공함으로써, 표적 가설부터 전임상 검증에 이르는 발견 연속체 내에서 적절한 역할을 수행합니다.