마우스 대뇌 저산소증 - 허혈 동안 동시 PET / MRI 영상

이 절차의 전반적인 목표는 저산소성 허혈성 손상이 시작되는 동안 posit one emission tomography 및 자기 공명 영상 데이터를 동시에 획득하는 것입니다. 이것은 먼저 마우스에서 총경동맥을 일방적으로 결찰함으로써 이루어집니다. 두 번째 단계는 이미징을 위해 동물을 준비하고 기본 PET 및 MRI 데이터를 획득하는 것입니다.

마지막 단계는 저산소 챌린지 중과 후에 이미징 데이터를 획득하는 것입니다. 궁극적으로, PET와 MRI를 동시에 획득하는 것은 저산소증 중 및 저산소증 후 병변에서 수분 확산 및 독감 데옥시 포도당 흡수의 변화를 입증하는 데 사용됩니다. 이 방법은 뇌졸중 중 생리학 및 생화학의 동적 변화에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 관찰 중인 시스템이 정상 상태가 아니라 변화하는 다른 경우에도 적용할 수 있습니다.

여기에 표시된 도구를 사용하여 외부 주변에 편리하게 배치된 멸균 수술 영역을 준비하십시오. 가열 패드를 켜고 섭씨 37도에 도달하는지 확인합니다. 절차를 시작하기 전에.

1-3%의 불소를 사용하여 마우스를 마취하고 눈에 안과 연고를 바릅니다. 누운 자세로 놓고 발가락 꼬집음으로 진정을 확인합니다. 다음으로, 면봉 1-2개를 사용하여 목 아래쪽과 가슴 위쪽 부위에 디토리 크림을 바릅니다.

약 2분 정도 기다렸다가 해당 부위에 털이 없어지면 젖은 거즈를 사용하여 머리카락과 크림을 제거합니다. 절개 부위를 베타딘으로 안쪽에서 바깥쪽으로 원을 그리며 도포하여 소독합니다. 멸균 수술용 장갑으로 갈아입고 수술용 가위를 사용하여 목 아래 정중선을 따라 1cm를 절개합니다.

수술용 가위로 주변 근막과 바깥쪽 피부를 조심스럽게 분리합니다. 두 개의 MCFE sin 마이크로 홍채 봉합 겸자 사용. 결합 조직을 제거합니다.

기억 지방 패드 사이를 이동하여 근막에서 오른쪽 총경동맥을 분리합니다. 정맥을 손상시키거나 미주신경을 방해하지 않도록 주의한다. 다음으로, 겸자를 사용하여 오른쪽 총경동맥을 외부화합니다.

안정된 자세에서 식염수가 2-3cm의 오른쪽 총경동맥 아래에 2-3cm의 실크 봉합사를 지나 건조되는 것을 방지하기 위해 식염수를 몇 방울 떨어뜨리고 이중 사각형 매듭을 사용하여 결찰합니다. 그런 다음 두 번째 봉합사 길이를 사용하여 결찰을 반복합니다. 올바른 총경동맥의 위치를 조정하고 멸균 스폰지 면봉을 사용하여 구멍에서 과도한 액체를 청소합니다.

그런 다음 6개의 OTT 실크 봉합사로 절개 부위를 봉합하고 킬로그램당 최대 7mg까지 리도카인을 국소적으로 도포합니다. 외과적 통증 관리에 대한 기관별 지침을 따르십시오. 마우스가 이미징할 준비가 될 때까지 회복 중에 수술 후 모니터링을 수행합니다.

먼저 산소 및 질소 공기 공급원을 켜서 산소 및 질소 유량계의 작동을 확인하십시오. 그런 다음 분당 1리터의 유속으로 유량계의 전원을 켭니다. 산소의 흐름을 분당 114.3mg으로 설정하고 질소의 흐름을 분당 1.150g으로 설정합니다.

다음으로, 마취, 호흡 패드 및 히터 시스템이 안전하고 기능적으로 배치되어 있는지 확인하여 동물 침대를 준비합니다. 그런 다음 무선 추적기가 포함된 기준 마커를 시야 내의 동물 침대에 부착합니다. 불소로 마우스를 마취하고 꼬리를 예열하여 카테터 삽입을 준비합니다.

준비가 되면 헤파린 식염수가 미리 채워진 PE 10 카테터를 최대 5cm까지 삽입합니다. 삽입 부위에 시아노아크릴레이트 접착제 한 방울로 IV 라인을 고정합니다. 그런 다음 동물을 준비된 동물 침대로 옮깁니다.

안과 연고를 쥐의 눈에 다시 바르면 건조를 방지하고 치아 막대 주위에 위쪽 앞니를 놓고 이어 바를 제자리에 끼워 동물의 머리를 안정시킵니다. 분당 0.5에서 1리터 사이의 불소 흐름에서 2%의 불소 흐름을 시작합니다. 직장 프로브 온도계를 삽입하고 온도 및 호흡 수치가 작동하는지 확인하십시오.

다음으로, 200마이크로리터의 식염수에 포함된 약 600마이크로큐리의 방사성 추적자 선량을 1밀리리터 주사기에 넣고 주사기 펌프에 넣습니다. 약 3미터의 헤파린 처리된 PE 10 튜브를 주사기에 연결하고 다른 쪽 끝을 꼬리 정맥 카테터 라인에 연결합니다. MRI 코일과 라인 및 케이블, 특히 마취 튜브의 위치가 얽혀 있지 않은지 확인하십시오.

뇌의 중심이 MRI 코일 PET 시스템 및 MRI 자석의 중심과 정렬되어 있는지 확인하십시오. 그런 다음 동물 침대를 자석의 구멍으로 조심스럽게 앞으로 밀어 넣습니다. 임피던스 및 주파수 불일치를 최소화하기 위해 코일의 조정 손잡이를 돌려 MRI 코일의 튜닝 및 매칭을 수행합니다.

다음으로, 희귀한 트립 파일럿 시퀀스를 선택하고 스캔 제어 창에서 시퀀스를 실행하여 스카우트 이미지를 획득합니다. 동물의 위치를 확인하고 뇌가 중심이 될 때까지 필요한 경우 위치를 조정하십시오. 그런 다음 shim을 0 값으로 재설정합니다.

이제 점을 실행합니다. 3.9mm x 6mm x 9mm의 직사각형 부피를 사용하여 뇌 내의 분광 스캔 시퀀스를 해결합니다. calc line width 매크로 명령을 사용하여 흘수선 너비를 확인합니다.

최대값의 절반에서 전체 너비가 허용되는 경우, 결과 슬라이스 플랜이 원하는 대로 정렬될 때 기하학적 편집기를 사용하여 확산 가중 이미징 스캔을 위한 슬라이스 플랜을 배치합니다. 모든 후속 스캔을 위해 스캔 제어 창에서 이 슬라이스 계획을 복사하고 이미지 획득을 시작합니다. 다음으로 PET 획득이 준비되고 시작할 준비가 되면 주입 펌프를 시작합니다.카테터의 식염수를 주입한 후 PET 획득을 시작합니다.

무선 추적기의 진입을 캡처하기 위해. 계수율을 모니터링하고 성공적인 주입을 나타내는 계수가 점진적으로 증가하는지 확인합니다. 10분에서 15분 후에 의료용 공기 흐름을 끄고 즉시 산소 및 질소 유량계의 전원을 켜서 8%의 산소와 92%의 질소를 전달하여 저산소 챌린지를 시작합니다.

이 시점에서, 저산소 챌린지를 시작한 직후 불소의 isof를 0.8%로 줄입니다. 이전 스캔 설정을 사용하여 확산 가중 이미지 획득을 시작합니다. 첫 번째 스캔이 완료된 직후 두 번째 확산 가중 이미지 획득을 시작합니다.

유량계의 전원을 끄고, 의료용 공기 흐름을 복원하고, 불소 농도를 1에서 2%로 되돌려 저산소 문제를 종식시킵니다.저산소증 확산 후 가중 이미징 스캔을 획득한 다음 주입 펌프를 끄고 기하학 편집기를 사용하여 축 및 시상면에서 해부학적 이미지를 획득합니다. 획득 시야가 뇌를 덮는지 확인하십시오. 이 방법을 사용하면 예상대로 뇌졸중이 시작된 후 확산 변화를 빠르게 감지할 수 있습니다.

뇌의 폐색된 쪽에서 보이는 확산 계수 값은 손상이 진행됨에 따라 감소합니다. 표시. 다음은 FDG 흡수를 보여주는 동물의 관상 및 횡단 조각입니다. 애완 동물 이미지는 전경에 있으며 시각화를 위해 배경에 해부학적 MRI 이미지가 주입되어 등록됩니다.

겉보기 확산 계수의 변화와 동시에, 저산소 챌린지를 시작한 후 FDG의 흡수에서 반구형 차이를 관찰할 수 있습니다. 3건 중 2건에서 저산소증 후 대측 흡수에 비해 EPS 후기 흡수가 감소했다. 이것이 사실이 아니었지만 모든 경우에 동물의 다양성으로 인한 것일 수 있으므로 뇌의 다른 생리학적 매개변수나 표적을 관찰하기 위해 다양한 종류의 MRI 및 애완 동물 조영제와 함께 이 일반적인 절차를 사용할 수 있습니다.