Isolation of Murine Peritoneal Macrophages to Carry Out Gene Expression Analysis Upon Toll-like Receptors Stimulation

Antonio Layoun; Macha Samba; Manuela M. Santos

doi:10.3791/52749

쥐 복막 대 식세포의 분리는 수신자 같은 수용체 자극하면 유전자 발현 분석을 수행하기

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Immunology and Infection

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Isolation of Murine Peritoneal Macrophages to Carry Out Gene Expression Analysis Upon Toll-like Receptors Stimulation

쥐 복막 대 식세포의 분리는 수신자 같은 수용체 자극하면 유전자 발현 분석을 수행하기

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08:21 min

April 29, 2015

DOI: 10.3791/52749-v

Antonio Layoun¹, Macha Samba¹, Manuela M. Santos^1,2

¹Centre de recherche du Centre hospitalier de l'Université de Montréal,Institut du cancer de Montréal, ²Département de Médecine,Université de Montréal

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기서는 쥐 복막 대식세포를 분리하는 간단한 프로토콜을 설명합니다. 이 절차 다음에는 RNA 추출을 수행하여 Toll-like receptor 자극에 대한 유전자 발현 분석을 수행합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 murn 복막 대식세포를 분리하고 톨 유사 수용체의 자극에 대한 유전자 발현 분석을 수행하는 것입니다. 이것은 첫 번째 주입으로 수행됩니다. 3.8%의 Thi glyco 배지를 마우스의 복막강에 주입하여 복막으로의 단핵구 이동을 증가시켜 3일 후 대식세포 수율을 증가시키고, 마우스를 안락사시키고 차가운 ECCO 인산염 완충 식염수를 복강에 주입하여 세포를 수확합니다.

복막강을 부드럽게 마사지한 후 복막액을 조심스럽게 흡인합니다. 다음으로, 얻어진 세포를 배양하고 유도된 복막 대식세포를 유세포 분석으로 특성화합니다. 마지막 단계는 다른 톨 유사 수용체 또는 TLR 리간드로 이러한 대식세포를 자극하고 샘플에서 RNA를 분리하는 것입니다.

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