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활동 기반 식욕 부진 설치류 모델을 사용하면 거식증의 신경 생물학적 기초 연구에
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JoVE Journal Behavior
Using the Activity-based Anorexia Rodent Model to Study the Neurobiological Basis of Anorexia Nervosa

활동 기반 식욕 부진 설치류 모델을 사용하면 거식증의 신경 생물학적 기초 연구에

Full Text
15,145 Views
07:46 min
October 22, 2015

DOI: 10.3791/52927-v

Tara Gunkali Chowdhury1, Yi-Wen Chen1, Chiye Aoki1

1Center for Neural Science,New York University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에서는 암컷 청소년기 마우스에서 활동 기반 거식증(ABA)을 유도하는 프로토콜을 제시합니다. ABA는 달리는 바퀴에 접근할 수 있는 설치류에게 음식 제한을 가함으로써 유발되는 과잉 행동 상태입니다. 이 현상은 신경성 식욕 부진증의 근본적인 신경생물학을 연구하기 위한 모델로 사용되고 있습니다.

이 절차의 전반적인 목표는 청소년기 암컷 마우스에서 활동 기반 거식증을 유도하는 것입니다. 이것은 먼저 쥐를 달리는 바퀴에 소개하고 최소 3일 동안 쥐의 달리기 바퀴 활동을 지속적으로 모니터링함으로써 달성됩니다. 다음으로, M은 음식 접근이 제한된 일정에 놓이고 자발적인 바퀴 달리기의 변화가 기록됩니다.

궁극적으로, 이 활동에 기반한 거식증 모델은 신경생물학적 변화가 음식에 대한 접근이 제한되었을 때 동물의 행동 변화와 관련이 있음을 보여줄 수 있습니다. 이 활동 기반 거식증 모델이 신경성 식욕 부진증에 대한 회복력과 취약성의 기저에 있는 신경 화학 및 신경 해부학의 개별적인 개인차를 식별할 수 있기 때문에 신경성 식욕 부진증의 치료를 개선하는 데 도움이 되기를 바랍니다. 이 방법은 신경성 식욕 부진증에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 불안과 동반 질환이 있는 다른 질병에도 적용할 수 있습니다.

일반적으로 개별 누티, 이 방법은 AIA를 기반으로 한 활동에 대한 각 동물의 취약성이 매우 다양하기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 따라서 동물의 체중 감량, 식사 및 활동을 면밀히 모니터링하거나 동물이 설정을 시작할 수 있습니다. 컴퓨터와 USB 허브를 동물실에 두세요. 흐르는 물과 보행자가 다니는 곳에서 멀리 떨어져 있지만 달리는 바퀴의 송신기 범위 내에 두십시오.

또한 허브의 스위치를 사용하여 컴퓨터 및 USB 허브의 백업 전원 공급 장치를 사용하십시오. 모니터링할 모든 실행 휠의 채널 번호에 해당하도록 채널 번호를 설정합니다. 이제 실행 중인 휠 관리자 소프트웨어를 시작하고 소프트웨어가 각 송신기를 인식하는지 확인합니다.

각 휠이 프로그램 창에 나열됩니다. 제목 휠 센서 아래. 소프트웨어는 각 휠에 자동으로 ID 번호를 부여합니다.

휠에 이 번호를 기록해 두면 도움이 될 수 있습니다. 휠이 인식되지 않으면 휠의 배터리를 교체하십시오. 다음으로, 각 생쥐 피험자를 위한 새장을 준비하고, 침구, 둥지, 물에 자유롭게 접근할 수 있는 둥지, 달리는 바퀴가 있습니다.

러닝 휠은 케이지 벽, 음식 바구니 또는 케이지 상단을 건드리지 않고 자유롭게 움직여야 합니다. 또한 소프트웨어가 휠 개수를 업데이트하고 있는지 확인합니다. 적응하기 위해 동물들은 각 쥐를 바퀴가 달린 우리에 개별적으로 수용하고 우리에서 약 100g의 건조 사료와 50g의 습식 사료를 이용할 수 있습니다.

소프트웨어에서. start acquisition(수집 시작)을 선택하여 데이터 수집 및 저장을 시작합니다. 파일 메뉴에서 중지될 때까지 데이터가 저장될 디렉토리를 선택합니다.

소프트웨어는 광 주기의 어두운 단계가 시작되기 직전에 매일 지속적으로 기록합니다. 동물의 무게를 잰다, 젖은 음식의 무게를 잰다, 건조 음식의 무게를 잰다. 건조 식품 용기에 50g 미만이 들어 있는 경우 다시 채우고 습식 식품 용기를 교체하십시오.

음식이 마르거나 침구로 더러워진 경우 동시에 휠 수를 수동으로 기록하십시오. 음식 제한 첫날의 디지털 데이터를 백업하려면 하루의 광 주기 부분 중간에 케이지에서 모든 습식 및 건식 음식을 제거하십시오. 나중에 어두운 시간이 시작될 때 동물의 무게와 바퀴 수를 기록하십시오.

그런 다음 호퍼에 약 50g의 건조 식품을 넣고 보트에 5g의 습식 식품을 제공합니다. 다음으로, 각 동물에 대한 침구와 둥지가있는 새로운 케이지를 준비하십시오. 음식을 옮기는 데 두 시간이 지난 후, 물레와 더러운 침구 몇 줌을 준비된 케이지로 옮깁니다.

쥐를 음식 없이 새 우리로 옮깁니다. 식품 접근 기간이 끝나면 UNE 식품의 무게와 휠 수를 기록하십시오. 실험 기간 동안 이 과정을 매일 반복합니다.

어느 시점에서든 동물이 초기 체중의 75% 이하로 떨어지면 실험에서 제외합니다. 동물이 실험에서 제외되어야 함을 나타내는 과도한 굶주림의 다른 징후로는 구부정한 자세와 케이지 주위를 움직일 수 없는 것이 포함됩니다. 동물은 만졌을 때 차가울 수 있으며 음식에 접근하는 2시간 동안 먹지 못할 수 있습니다.

3일 동안 음식을 제한한 후 실험을 종료합니다. 조직을 적출하기 위해 동물을 안락사시키거나 동물이 회복할 수 있도록 하십시오. 소프트웨어에서 추가 동작 테스트를 수행하려면 파일 메뉴에서 end acquisition 옵션을 클릭하십시오.

이제 데이터가 선택한 디렉토리의 WLS 파일에 저장됩니다.실험 시작 시 케이지에서 달리는 바퀴를 제거한 다음 배터리를 제거합니다. 회복 중인 동물은 성욕, 음식에 대한 접근이 허용되어야 합니다. 이제 데이터를 스프레드시트로 내보냅니다.

파일 메뉴에서 내보내기 옵션을 선택하고 소스 데이터 파일 옵션에서 원하는 WLS 파일을 선택합니다. 그런 다음 시작 및 종료 날짜와 시간을 선택하고 마지막으로 내보낼 각 휠 센서를 선택합니다. 그런 다음 휠 센서 목록에서 b의 효과를 연구하기 위해 필요에 따라 데이터를 분석할 수 있습니다.

인간 신경성 식욕 부진증과 유사한 개체군에서, 암컷 청소년기 마우스는 P 36에서 바퀴에 적응했다. 사춘기가 시작된 직후, P 40부터 식량 부족이 시작되었고 체중이 급격히 감소한 대조군은 바퀴가 달리거나 음식에 제한이 없었다. 굶주린 동물들은 식량 제한이 시작된 후 과도하게 달렸다.

바퀴 활동에 대한 자세한 분석은 일주기 패턴을 보여주었습니다. 흥미롭게도, 식량을 구하는 동안에도 굶주린 동물들은 물레를 사용하기로 선택했습니다. 음식 제한이 시작된 후, 일부 동물은 먹이를 주기 직전에 활동이 증가했는데, 이는 음식 예측 활동이라고 할 수 있습니다. 활동 기반 시나리오를 겪기 위해 코호트를 설정하는 데 마스터하는 것은 적절하게 수행되면 몇 시간 안에 달성할 수 있습니다.

이 절차를 시도하는 동안 하루에 한 번 이상 휠 수를 수동으로 기록해야 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다. 예기치 않은 전력선의 중단 또는 배터리 고갈은 이 절차에 따라 컴퓨터 생성 휠 카운팅을 방해할 수 있습니다. 면역 세포 화학, 전기 생리학 및 행동 검사와 같은 다른 방법을 수행하여 활동 기반 거식증 유도가 뇌 해부학, 생물물리학적 특성 및 행동에 미치는 영향과 같은 추가 질문에 답할 수 있습니다.

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행동 문제 (104) 신경성 식욕 부진 운동 음식 제한 사춘기 스트레스 불안

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