Name: 스트레스에 의한 행동 및 생리 적자를 이해 아 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스의 마우스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: 배우세요 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스 마우스 모델을 통해 스트레스 유도 우울증의 행동 및 생리적 변화를 연구하는 방법을 알아보세요. 이 모델은 과식 및 다음증과 같은 증상을 포함한 생체 내 메커니즘을 조사하는 데 활용됩니다.

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저자는 박사 감사합니다. 켄타로 나가오카 (도쿄 농공 대학)과 도움이 토론 와타루 IIO (이바라키 현). 이 연구는 농업과 의료 과학 (IUCAM) (문부 과학성, 일본)과 농산물 및 건강 증진 혜택과 식품의 개발에 관한 연구 프로젝트 (NARO) 사이 이바라키 대학의 협력에 의해 부분적으로 지원되었다 (MAFF, 일본) .

동물 연구에 의해 승인 및 동물 관리 및 사용 이바라키 대학위원회와 교육 문화, 스포츠, 과학 기술부, 기술 (문부 과학성), 일본 (알림 No.71) 모두의 가이드 라인을 충족했다. 프로토콜의 전체 개요는도 1에 도시된다. 1. 장치 <ol><li> 케이지 두 종류의 준비 : 단일 케이지, 그리고 &quot;사회적 패배 (SD)&quot;케이지 (폭 [W]를 깊이 × [D]를 높이 [H] = 143mm 148mm × 293mm ×를 ×) (W × D × 135mm × 320mm) × H는 = 220mm. </li><li> (: 직경 8mm 3 × 5 매트릭스) 그림 2에 나타낸 바와 같이, 15 원형 구멍 아크릴 투명 보드 분할 (두께 5 ㎜)와 두 개의 구획으로 SD 케이지를 나눕니다. </li><li> 가문비 나무 나무, 정제 - 다이어트 식품 알약 및 마시는 물 병에서 만든 나무 면도 칩을 얻습니다. 또한, 종이 수건, 마스크, 라텍스 장갑을 구하십시오. </li&gt; <li> 사회적 상호 작용 시험 (W을 회색 폴리 비닐 클로라이드로 만들어진 오픈 필드 경기장 (W × D × H = 40cm × 40cm × 40 cm), 스틸 (190g)로 이루어지는 중량과 플라스틱 상호 상자를 준비 × D × H = 10cm × 10cm × 13cm 3 개의 와이어 메쉬 창 (W × D = 5cm × 5cm) (그림 3)와 100g). </li><li> 및 동물 시설의 행동 테스트 룸에서 자동 추적 시스템 : CCD 카메라 (; 1.4 1/3 인치 CCD F = 1 2.8-12 mm)를 놓습니다. 적어도 30 분 동안 테스트 룸의 환경에 마우스를 길들 행동 테스트 룸에서 마우스 케이지에 적절한 선반을 배치합니다. </li></ol> 환경 2. 요법 이니 <ol><li> 5 개월 이상 오래 및 동물 사육 회사의 시설에 전달 ICR (ICR) 마우스 : 7 주 남성 SLC있는 남성 C57BL / 6JJmsSlc (B6) 마우스를 사용합니다. </li><li> 독립적으로 N (B6 마우스의 두 그룹을 이동= 설비에 각 군 12); 공격적인 ICR 마우스와 sCSDS 모델을 개발하기위한 또 다른 그룹 (주제 B6 마우스)를 스크리닝 한 그룹 (스크리너 B6 마우스)를 사용합니다. </li><li> 공격적인 행동을 선별하기 위해 시설 ICR 쥐 (N = 12) 소개. </li><li> 개별적으로 12 시간의 명암 사이클에서 일주에 대한 단일 케이지 하우스 마우스 상수 (23 ℃ 정도) 온도와 습도 (40 % 정도)과 (100 룩스 형광등 주위는 08:00에 점등) 환경으로 길들하기 위해. 마우스가 이웃 쥐의 행동에 영향을받지 않도록 케이지 사이에 화이트 컬러 플라스틱 보드를 배치하여 각각의 케이지를 분할. </li><li> 정제 - 다이어트 식품 알약을 확인하고 삼투 물을 사용할 임의로 역. 다른 비 정제 다이어트 알약의 성분이 다를 수 있기 때문에 AIN-93G 차우를 사용합니다. </li><li> 체중, 음식 섭취 (FI), 및 마우스의 취수 (WI)을 매일 측정한다. (B)을 계산초기 날로부터 ODY 체중 증가 (BWG). </li></ol> 공격적 ICR 마우스의 3 상영 <ol><li> (00 : 00 ~ 17 14) 오후에, 위에서 언급 한 바와 같이 일주에 대한 습관화 후, 스크리너 B6 마우스 (나이 8 주 침입자)과 3 분의 재판 주민 침입자 테스트를 사용하여 ICR 마우스 (상주) 화면 주택 방에서 300 룩스의 조명 아래. <ol><li> 특히, ICR 마우스가 침입자를 향해 높은 공격성을 표시하는 찾을 수 많은 다른 B6 마우스 방향으로 연속 5 일 동안 하루에 세 가지 시험 (총 15 시험)에 대한 각각의 ICR 마우스를 테스트합니다. 시험 동안, 공격적인 행동의 공격 대기 시간 및 기간 (공격 물고와 빠른 동작을)를 기록. </li></ol></li><li> 각 시험 후 B6 침입자 생쥐에 손상 상처를 확인하여 하이퍼 적극적인 ICR 마우스를 식별합니다. </li><li> 공격 레이턴시 공격성 ​​점수의 첫번째 인덱스 미만 30 초 인 실험의 비율을 계산한다. </li><li> 기음공격 레이턴시 공격성 ​​점수 초 지수 미만 3 분 인 실험의 비율 alculate. </li><li> 첫 번째 인덱스의 침략 점수를 평가합니다. 첫 번째 인덱스가 동일 할 때 두 번째 인덱스를 사용합니다. </li><li> 공격적인 ICR 마우스와 같은 하이퍼 공격적인 행동없이 높은 공격성 ​​점수를했다 ICR 마우스를 선택합니다. 나이의 약 12​​개월 때까지 실험의 다음 세트에 걸쳐 반복적으로 적극적인 ICR 마우스를 사용; ICR 마우스의 공​​격성을 확인하는 각 실험 전에 그러나, 상술 한 바와 같이 적극적 ICR 마우스에 대해 스크리닝 프로세스를 수행한다. </li><li> 스크리닝 각 세션 후, 스크리너 B6 마우스의 손상 정도를 기록한다. 마우스가 부상당한 경우, 단일 케이지를 분리 마우스와 체중 증가, 음식 섭취 및 물 섭취량을 체크함으로써 진행 상황을 관찰한다. 마우스에서 생리학 및 동작에 영향 심한 상처의 경우, 로컬 I에 따른들을 안락사ACUC 지침. </li></ol> 4. sCSDS <ol><li> 칠일 (일 -6) 환경으로 길들하는 마우스 개별적으로 단일 케이지의 초기 스트레스 노출 (1 일)과 집의 하루 전에 대상 B6 마우스를 소개합니다. </li><li> 사흘 (일 -2)에 1 일 전에, 마우스 (SD 케이지에 자기 B6의 동일한 수를 그들의 영역을 설정할 수 있도록 아크릴 분배기에 의해 분할되는 각 SD 케이지의 구획으로 공격적인 ICR 마우스를 이동 마우스). </li><li> 상기 단일 케이지 상태로, 백색 분할 기판을 사용하여 SD 케이지 나눈다. </li><li> 비 응력 제어 B6 마우스의 경우, SD 케이지 (마우스의 절반)의 쌍을 유지하는 마우스를 제조; 십일에 대한 SD 케이지의 분할로 나누어 각 구획에 두 개의 마우스를 놓습니다. </li><li> 1 일에 매일 BWG, FI, 및 Wi 측정 한 후, afte에서 SD 케이지의 구획 (상주의 홈 케이지)의 하나로 장소 주제 B6 마우스rnoon (14 : 00 ~ 16 : 00) 주택 방에서 300 룩스의 조명 아래 및 주민 침입자 테스트를 완료하는 데 첫 번째 공격 바이트의 물리적 접촉 시간을 측정한다. </li><li> 제 1 일, 제 1 공격 물린 5 분에 물리적으로 접촉 시간을 설정하고 관찰자 Miczek 등에 의해 기술 된 바와 같이 상대의 뒷면 또는 측면에서 우선적 관한 ICR 마우스에 의한 공격 바이트의 수를 카운트 하였다. ~ 20 B6 마우스에 물리적 스트레스의 정도를 결정합니다. </li><li> 물리적 접촉 시간 후, 구조 대상 B6 마우스는, 검사하고 그들의 모피의 상태와 상처를 기록합니다. 그런 다음, 물리적 스트레스에 노출 된 다음 날까지 다음 SD 케이지의 ICR 마우스에 다른 실에 B6 마우스를 놓습니다. </li><li> SD 케이지의 아크릴 칸막이가 투명하고 구멍이 포함되어 있기 때문에, 이웃 COMPART의 ICR 마우스에서 시각, 청각 등 다양한 정서적 스트레스, 후각 자극, 대상 B6 쥐를 노출24 시간 매일의 SD 케이지, 표준. </li><li> 매일 제어 B6 마우스의 BWG, FI 및 WI를 측정 한 후 1 일 SD 케이지의 각 실에 배치합니다. </li><li> 하루에 2 일, BWG, FI, 그리고 위스콘신의 매일 측정 한 후, 물리적 스트레스에 노출 다른 ICR 마우스의 지역에 따라 B6 마우스를 소개합니다. </li><li> 2 일의 첫 번째 공격 바이트에서 4.5 분에서 신체 접촉의 기간을 설정하고 공격 바이트의 수를 계산합니다. </li><li> 다른 구획으로 제어 B6 마우스를 이동하고 매일 쌍의 배치 및 파트너 셔플하기 위해 한 쌍의 조합을 변경할 수 있습니다. </li><li> 하루 10 시간은 첫 번째 공격 바이트에서 0.5 분으로 설정되도록, 하루에 0.5 분으로 신체 접촉의 지속 시간을 감소시킵니다. </li><li> 7 일에, SD 케이지의 구획의 모두 나무 부스러기의 약 절반을 교체합니다. </li><li> 10 일의 마지막 물리적 스트레스에 노출 된 후, 하나의 새장에 따라 B6 마우스를 이동. 제목 B6 마우스와 마찬가지로, 10 일에 단일 케이지로 제어 B6 마우스를 이동합니다. </li><li> ICR 마우스 1 ~ 10 일에 각 시험에서 5 분 때까지 공격 물기를 표시하지 않는 경우, 재판을 종료합니다. 예비 적극적인 ICR 마우스와 ICR 마우스를 교체하고 제목 B6 마우스에 대한 대체 시험을 실시하고 있습니다. </li><li> 마우스가 부상당한 경우, 단일 케이지를 분리 마우스와 체중 증가, 음식 섭취 및 물 섭취량을 체크함으로써 진행 상황을 관찰한다. 진통제에 대한 IACUC 지침을 따르십시오. 마우스에서 생리학 및 동작에 영향 심한 상처의 경우, 로컬 IACUC 지침에 따라 이들을 안락사. </li></ol> 5. 사회 회피 테스트 (사회적 상호 작용 시험) <ol><li> 하루 11 (00 : 00-12 09) 아침에 사회적 회피 행동 검사를 수행합니다. </li><li> 30 분 시험 전에 행동에 (이하 1 룩스의 조명이 어두운 경우) 선반에 제어 및 주제 B6 마우스의 새장을 전송이하 20 룩스의 조명 아래 테스트 룸 그들이 환경에 길들 할 수 있습니다. </li><li> 주문 효과를 줄이기 위해 교대로 제어 및 주제 B6 마우스를 테스트합니다. </li><li> (필드의 중심에서 20 룩스의 빛으로 조명하는) 개방 필드 경기장 각 마우스 대변, 소변을 제거하기위한 행동 검사 전에 70 % 에탄올로 적신 종이 타월을 이용하여 플라스틱 상호 상자, 및 냄새를 청소 . </li><li> 오픈 필드 장치 근처 단일 케이지에서 낯선 ICR 마우스 (침략자로 사용되지 않음) 놓습니다. </li><li> 도 4에 도시 된 바와 같이 상호 작용 빈 박스의 오픈 필드에 B6 마우스를 배치했다. 감시하고 (단계 5.10에 기재되어 있음) 자동 분석 시스템을 이용하여 2.5 분 동안의 동작을 분석한다. </li><li> 1 심 후, 현장에서 B6 마우스를 제거하고 홈 케이지에 넣습니다. </li><li> 이 후, 상호 작용 상자에 익숙하지 않은 남성 ICR 마우스 (사회 목표)를 위치하게 한 후, B6를 소개합니다마우스 오픈 필드에 2.5 분 동안 동작을 모니터링 할 수 있습니다. </li><li> 두 번째 시험 후, 자신의 홈 케이지로 B6 및 ICR 마우스 모두 돌아가 필드 및 상기 언급 된 바와 같이 상호 작용 상자를 청소. </li><li> 사회적 동작을 테스트하기 위해 각 B6 마우스에 대해 이러한 단계를 반복합니다. 각 시험 동안, 기록 위에서 내려다 보는 영화는 CCD 카메라를 사용하여. <ol><li> 행동 검사 후, 고토 등.도 13에 도시 된 바와 같이 각각의 시험 (초) 및 (초) 모서리 영역에서의 상호 작용 영역에서 소요 된 시간을 계산한다. 마우스의 중심에 기초하여, 마우스의 위치를​​ 판단. </li><li> Krishnan 등. (21)에 게시 된 방법에 따라 (목표없이 상호 작용 시간 () 대상과의 상호 작용 시간) × 100 /과 사회적 상호 작용 점수를 계산합니다. </li></ol></li></ol>

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</ol>

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

표준 CSDS 프로토콜 19 (하루 침략자와 신체 접촉의 5 ~ 10 분)을 실시 sCSDS 마우스와 CSDS 마우스 사이의 체중에 결정적인 차이가 있었다. 표준 CSDS 마우스는 응력 21,22,23 기간 동안 체중 감소를 보였다 반면 sCSDS 마우스는, 스트레스 BWG 기간 동안 증가 하였다. 10 일의 기간 동안 응력 공격자와 물리적 접촉의 전체 지속 시간의 측면에서 두 프로토콜 사이의 상당한 차이가있다. 원래 CSDS 패러다임이 침략과 총 하위 마우스 (풀 스케일 CSDS) 사이의 물리적 상호 작용의 50 또는 100 분을 포함하지만, sCSDS 방법은 총 (반 규모 CSDS)이 상호 작용의 27.5 분을 포함. 표준 CSDS 마우스의 물리적 스트레스의 강도가 19 알 수없는했지만, 그것은 공격 바이트의 평균 수는 약 30 하루 sCSDS 마우스에 있었다받은 것이 확인되었다. 에이고토 등. (13), sCSDS 마우스 1 개...

스트레스 사건의 많은 종류의 인간의 삶 전반에 걸쳐 발생한다. 과도한 스트레스는 종종 인간과 동물에 유해한 생리적 인 결과로 이어집니다. 인간에서, 스트레스 이벤트는 우울증 1 등 정신 질환을 침전에 대한 주요 위험 요인이다. 질병 연구의 글로벌 부담은 우울증 장애 2 살았 장애 조정 생명 년 (DALYs)과 년의 관점에서 가장 비활성화 장애의 하나라고 지적했다. 또한, 우울증은 자살 DALYs 3의 가장 큰 비율을 차지한다. 우울증으로 고통받는 사람들은 어려운 삶을 관리하는 발견, 그 결과, 그들의 삶의 질은 종종 악화. 따라서, 환자의 삶의 질을 향상시키기 위해 효과적인 치료제를 개발하기위한 강한 요구가있다. 많은 연구는 주요 우울 장애에 대해 수행되었고, 계시했는지 질병 susceptibilit에 유전 기여Y는 작은 효과 (4)의 복수의 궤적의 효과에 대해 설명한다 30-40 %이다. 우울증 때문에 근본적인 병원성 복잡한 메커니즘, 질환의 병인 상세한 애매 남아있다. 임상 보고서는 감소 각각 6, 체중 증가 보여 같은 우울증과 비정형 우울증 5 우울증의 하위 유형이 있다는 것을 나타냅니다. 25 % -30 %와 우울증 환자의 15~30% 순수 우울증과 비정형 특징을 표현하지만, 각각 그들 대부분은 두 아형 (7)의 혼합 기능을 가지고 있습니다. 따라서, 주요 우울증 증상의 넓은 범위를 갖는다. 바이오 마커를 찾는 인간 우울증의 다양한 유형에 대한 대물 치료제를 개발하기 위해서는, 우울증 8의 여러 동물 모델을 확립하는 것이 중요하다. 우울증 동물 모델은 학습 등 여러 가지 방법을 사용하여 설정 한무력감, 만성 예측할 수없는 가벼운 스트레스, 만성 사회 패배 스트레스 (CSDS) 9-12. 도요타와 동료들은 대사와 우울증과 관련된 행동을 규명하기 위해 쥐 13-17의 CSDS 모델을 설립했다. 우울증 동물 모델 얼굴의 타당성 (18)에 의해 평가되는 점을 감안, 모델이 구축 된 환경이 중요하다. 또, 황금 외. 19 상세히 CSDS 마우스를 생성하기위한 방법을보고 하였다. 그것은 CSDS 생쥐의 사회적 행동 결손 만성 치료에 의해 회수 아니지만 항우울제 급성 치료에 의해, 그들은 뇌 유래 신경 영양의 조절의 관점에서 우울증 환자와 유사한 증상을 공유하는 것이 될 수 있다고 알려져있다 요인 6. 고토 등. (13)는 이전의 방법을 수정하여 아 만성 경증 사회적 패배 응력 (sCSDS) 마우스 모델을 개발황금 등. (19). sCSDS 마우스는 체중 증가의 이득과 체수분 함량 13 다음 polydipsia- 과식증과 같은 증상을 나타낸다. 이 보고서에서, sCSDS 마우스 모델을 확립하기위한 프로토콜이 제공되며, 우리는이 모델의 유용성에 대해 설명합니다.

<table><tbody><tr><td>싱글 케이지</td><td>찰스 리버 연구소 일본</td><td></td><td>폭 [W] &times; 깊이 [D] &times; 높이 [H] = 143 &times; 293 &times; 148mm</td></tr><tr><td>M 케이지</td><td>나츠메 제작</td><td></td>소 <td>W &times; D &타임스; H = 220 &번; 320 &타임스; 135mm</td></tr><tr><td>화이트 플레이크</td><td>찰스 리버 레버러토리 일본</td><td></td><td>가문비나무로 만든 목재 면도 칩</td></tr><tr><td>AIN-93G</td><td>동양 효모</td><td></td><td>정제 다이어트 식품 펠릿</td></tr><tr><td>Kimtowel</td><td>Nippon Paper Crecia Co.</td><td></td><td>종이 타월</td></tr><tr><td>야외 경기장</td><td>O' 하라 & 공동.</td><td></td><td>회색 폴리염화비닐로 만든</td></tr></tbody></table>

스트레스에 의한 행동 및 생리 적자를 이해 아 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스의 마우스 모델

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

스트레스가 많은 생활 사건은 종종 인간의 우울증 발병률을 증가시킵니다. 우울증의 메커니즘을 연구하기 위해서는 우울증의 동물 모델 개발이 필수적이다. 우울증에는 여러 가지 유형이 있기 때문에 이 장애에 대한 더 깊은 이해를 위해 다양한 동물 모델이 필요하다. 이전에는 수정된 만성 사회적 패배 스트레스(CSDS) 패러다임을 사용하여 아만성 및 경증의 사회적 패배 스트레스(sCSDS)에 대한 마우스 모델이 확립되었습니다. 패러다임에서는 공격자에 의한 신체적 부상을 줄이기 위해 공격자와 부하 직원 간의 신체 접촉 기간을 원래의 CSDS 패러다임에 비해 줄였습니다. sCSDS 마우스는 스트레스 기간 동안 체중 증가, 음식 섭취 및 수분 섭취가 증가했으며 스트레스 기간 후에는 사회적 행동이 억제되었습니다. 체중 증가에 따른 스트레스로 인한 과식 및 과음의 얼굴 타당성 측면에서 sCSDS 마우스는 인간의 비정형 우울증과 관련된 몇 가지 특징을 보일 수 있습니다. 따라서 sCSDS의 마우스 모델은 우울증의 기저에 있는 병원성 메커니즘을 연구하는 데 유용할 수 있습니다. 이 프로토콜은 특히 스트레스로 인한 체중 증가와 다갈증 및 과식증 유사 증상의 기저에 있는 메커니즘을 연구하기 위해 sCSDS 마우스 모델을 확립하는 데 도움이 될 것입니다.

10 일의 기간 동안, ICR 마우스로 공격 바이트의 수를 수동으로 연구자에 의해 계산 된 물리적 스트레스의 정도를 모니터링 할 수 있습니다. 그림 5A 수신 공격 바이트의 수에 대한 개별 값을 나타냅니다. 이 초기 단계 (1 일에 약 10-120 바이트)에 상당한 변화가 있었다, 그러나이 변화는 이후 단계 (10 일에 약 5 ~ 20 바이트)에서 감소되었다.도 5b는 공격 바이트의 평균 수신을 나타냅니다 신체 접촉의 지속 시간 (5 분에서 0.5 분으로) 감소 때문에 점차 시간이 지남에 따라 감소 하였다. 피사체 마우스는 체중 변화뿐만 아니라 열흘 sCSDS 생쥐 조사 후 음식과 물의 일상 소비의 변화를 나타내었다. 제어 대상 및 마우스 (p &lt;0.0001 사이 총 체중 증가의 현저한 차이, 짝 양측 스튜 드는 있었다NT의 T는 -test). 주제 마우스의 약 2.0 G <st...

여기서, 아 만성 경증 패배 사회적 스트레스의 마우스 모델을 개발하기위한 방법을 설명하고 hyperphagia- 및 체중 증가 조갈증 다음과 같은 증상을 포함한 우울증 병원성 특징을 조사하기 위해 사용된다.

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

본 절차의 전반적인 목적은 스트레스 유발 증상의 기전을 연구하기 위해 아만성 및 경미한 사회적 패배 스트레스(S-C-S-D-S) 마우스 모델을 구축하는 것입니다. 이는 먼저 개별 수컷 C57BL/6 마우스와 ICR 마우스를 환경에 적응시킨 후, 두 번째 단계로 공격적인 ICR 마우스를 스크리닝하여 선별함으로써 이루어집니다.다음으로, S-C-S-D-S 마우스를 검은색 마우스 6마리와 며칠 동안 반복적으로 개별 노출시킵니다. 최종적으로 측정된 사회적 행동 점수, 체중, 식이 섭취량 및 음수량 모두 S-C-S-D-S 마우스 모델에서 스트레스로 유발된 변화를 나타냅니다. 인간의 다양한 우울증 유형에 대한 바이오마커를 발견하고 객관적인 지표를 개발하기 위해서는 여러 가지 다른 우울증 동물 모델을 확립하는 것이 중요합니다.본 시연에서는 7주령의 수컷 C57BL/6 마우스와 고령의 수컷 ICR 마우스가 사용됩니다. C57BL/6 마우스 12마리씩 두 그룹과 ICR 마우스 12마리 한 그룹을 준비하십시오. 각 그룹을 사육 시설로 독립적으로 이동시킵니다. C57BL/6 그룹 중 하나는 ICR 마우스의 스크리닝 용도이며, 다른 하나는 S-C-S-D-S 모델 구축용입니다.케이지 사이의 상대 습도를 약 40%로 유지하는 표준 조건에서 1주일 동안 마우스를 개별 사육합니다. 마우스가 서로를 매일 볼 수 없도록 불투명한 흰색 가림막을 설치합니다. 각 개체별 사료 및 식수 섭취량과 체중을 측정합니다.순화 주간이 지난 후, 오후 시간대에 ICR 마우스를 거주자로 하여 거주자-침입자 테스트를 수행합니다. 사육실 내 300 럭스의 조명 조건에서 3분 동안 테스트를 진행하며, 공격까지 걸린 잠복기와 물기를 포함한 급격한 움직임의 지속 시간(공격으로 정의됨)을 기록합니다. 각 시행 후, 검은색 C57BL/6 마우스에 열상이 있는지 확인합니다. 이를 ICR 마우스의 과잉 공격성 지표로 사용하여 첫 번째 공격 지수를 산출합니다.공격 잠복기가 30초 미만인 시험 횟수의 비율을 사용하십시오. 과잉 공격성을 보이지 않는 가장 공격적인 ICR 마우스를 선택하십시오. 이 마우스들을 S-C-S-D-S 모델에 사용하십시오.5일 연속으로 하루에 세 번씩 테스트를 반복합니다. 12마리의 ICR 마우스 각각이 12마리의 black six 마우스 각각과 최소 한 번은 만나야 합니다. black six 테스트 마우스를 사육실로 입실시킵니다.이웃한 생쥐들의 시야에서 차단합니다. 이 상태로 7일 동안 적응하게 합니다. 본 연구에서 공격성 ICR 생쥐 한 마리당 두 마리의 검은색 C57BL/6 생쥐가 필요합니다.실험 시작 3일 전, 공격성이 있는 ICR 마우스를 각 SD 케이지의 한쪽 구역으로 이동시킵니다. SD 케이지에는 이동 가능한 아크릴 분리대가 포함되어 있습니다. 이웃 마우스들이 서로 보이지 않도록 모든 SD 케이지를 차단해야 합니다.다음으로, 스트레스를 받지 않은 대조군 C57BL/6 마우스 6마리를 SD 케이지의 서로 반대편 구획에 한 쌍씩 배치하여 연구 기간 내내 유지합니다. 실험 첫날 모든 마우스의 체중을 측정하고 물과 사료 섭취량을 모니터링합니다. 정기적인 측정을 마친 후, 실험 대상인 C57BL/6 마우스를 ICR 마우스가 점유하고 있는 구획에 넣습니다.이 작업은 오후 중반에, 사육실 내에 300마리 미만의 개체가 있는 상태에서 수행하십시오. 첫 번째 공격이 발생하면 5분 동안 공격 횟수를 기록하기 시작하십시오. 침입한 마우스의 후면 또는 측면을 향한 공격 횟수를 집계하십시오.5분 후, black six 마우스를 꺼내 상처 여부를 확인합니다. 그런 다음 다음 테스트일까지 해당 black six 마우스를 동일한 ICR 마우스의 반대편 구획에 둡니다. 이렇게 하면 black six 마우스가 ICR 마우스를 계속 보고, 듣고, 냄새 맡을 수 있어 24시간 내내 누적된 스트레스를 경험하게 됩니다.체중 측정 후 이틀째 되는 날, 각 검은색 6번 생쥐를 서로 다른 ICR 생쥐의 영역에 투입합니다. 첫 공격이 일어난 후, 생쥐들이 4분 30초 동안 상호작용하도록 둡니다. 1일 차와 동일한 측정 항목들을 측정합니다.상호작용 후 black six 마우스의 상처 여부를 확인하십시오. 해당 마우스를 동일한 케이지로 돌려보내되, 공격성을 보인 마우스의 반대편에 배치하십시오. 테스트를 진행하는 매일 동일하게 수행합니다.마지막 세션에서는 생쥐 간의 상호작용 시간을 30초 줄이십시오. 상호작용 시간은 첫 번째 공격 후 단 30초입니다. 어느 날이라도 5분 이내에 ICR 생쥐가 공격을 하지 않으면, 해당 생쥐를 연구에서 제외하고 예비 생쥐로 교체하십시오.11일째 아침, 오늘 동일한 테스트를 받을 여분의 마우스에게 black six 마우스를 소개하고, 테스트 시작 30분 전에 모든 black six 마우스를 대상으로 오픈 필드 테스트를 수행하십시오. 대조군 black six와 실험군 black six의 케이지를 1 lux 미만의 조명 아래 선반에 배치하십시오. 방 조명은 아레나 근처에서 약 20 lux여야 합니다. 익숙하지 않은 공격성 ICR 마우스 한 마리를 준비하십시오.검은색 C57BL/6 마우스를 상호작용 상자가 비어 있는 오픈 필드 박스에 넣고 2.5분 동안 두어 실험을 시작합니다. 행동은 자동화 시스템으로 모니터링해야 합니다. 2.5분 후, 검은색 C57BL/6 마우스를 홈 케이지로 돌려보내고 ICR 마우스를 오픈 필드의 상호작용 상자에 넣습니다.이 마우스는 표적이며 오픈 필드 내 표적 구역의 중심점이 됩니다. 그런 다음, 표적 마우스가 있는 오픈 필드에 검은색 마우스를 다시 도입하여 2분 30분 동안 함께 둡니다. 실험이 완료되면 두 마우스를 모두 홈 케이지로 돌려보내고 오픈 필드 아레나를 청소합니다.이후 각 black six 마우스에게 동일한 경험을 제공하십시오. 이 값들을 바탕으로 black six 마우스가 각 상호작용 구역과 구석 구역에서 보낸 시간을 측정하십시오. 설명된 프로토콜을 사용하여 사회적 상호작용 점수를 계산하십시오.공격 횟수를 10일 동안 측정하였습니다. 초기에는 상당한 변동성이 있었으나, 이는 점차 일관성으로 이어지는 과정이었습니다. 생쥐들이 매일 상호작용하는 시간은 점차 줄어들었습니다.따라서 하향 추세가 나타났습니다. 신체 접촉 시간이 5분에서 30초로 단축됨에 따라, 받은 공격성 물림 횟수의 평균치가 시간이 지남에 따라 점차 감소했습니다. 스트레스를 받은 생쥐는 대조군 생쥐보다 10일 동안 체중이 더 많이 증가한 것으로 보였습니다.음식 섭취량에는 큰 차이가 없었습니다. 하지만 스트레스를 받은 생쥐는 두 배의 양의 물을 섭취했으며, 이는 10일간의 스트레스 요법 후 실시한 사회적 상호작용 테스트에서 상당히 유의미하게 나타났습니다. 예상대로 대조군 생쥐와 스트레스군 생쥐 사이에 유의미한 차이가 있었습니다.대조군 생쥐는 표적 생쥐가 있을 때 탐색 행동을 훨씬 더 많이 보였습니다. 아급성 사회적 질병 스트레스 생쥐 모델을 사용하는 것은 스트레스 유발 체중 증가, 다갈 및 다식 증상의 기저 기전을 더 깊이 이해하는 데 도움이 되므로 유리합니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

예측할 수 없는 만성 경미한 스트레스(UCMS) 프로토콜은 만성 스트레스 및 우울 증상과 관련된 행동 및 생리학적 변화를 연구하기 위한 검증된 방법입니다. UCMS 프로토콜의 부과 8 주간은 두 성별의 설치류에서 행동 변화와 나쁜 건강 결과를 유도합니다.

선동 우울 증상, 행동 변화 및 ​​설치류에 부정적인 건강 성과에 대한 예측할 수없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜

여기 쥐에서 예측할 수 없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜 선물이. 이 프로토콜 장기 우울증 같은 표현 형을 유도 하 고 행동 하 고 neuromolecular 우울증 같은 적자 반전에 상 상속 항우울제의 효능을 평가 하기 위해 수 있습니다.

마우스에 Anhedonia 유도 대 한 예측할 수 없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜

Y-미로 장벽 작업은 보상을 위한 노력을 소비하는 동기를 검사하는 행동 테스트입니다. 여기에서는 만성 코르티코스테론과 사회적 패배 스트레스를 비롯한 여러 가지 잘 검증된 만성 스트레스와 여성에게 효과적인 새로운 만성 비차별적 사회적 패배 스트레스(CNSDS)를 테스트하는 데 대해 논의합니다.

만성 스트레스는 마우스의 Y-미로 장벽 작업에서 노력과 관련된 선택 행동을 변화시합니다.

여기에 제시된 것은 야생형 C56BL/6J 마우스를 활용하여 최소한의 취급과 침습적 절차 없이 스트레스와 불안과 유사한 행동을 유도하는 사회적 고립(SI) 유발 불안 마우스 모델입니다. 이 모델은 사회적 고립의 현대 생활 패턴을 반영하며 불안 및 관련 장애를 연구하는 데 이상적입니다.

사회적 격리 모델 : 스트레스와 불안의 비 침습적 설치류 모델

사회적 위협-안전 테스트는 혐오적 조건 학습 및 사회적 위협-안전 차별 능력의 측정으로서 사회적 회피 발달을 동시에 평가할 수 있으며, 둘 다 만성적으로 사회적으로 패배한 수컷 쥐의 단일 그룹 내에서 스트레스에 취약하고 스트레스 탄력적인 개인을 식별하는 데 사용됩니다.

사회적 위협-안전성 테스트로 심리사회적 스트레스 관련 표현형 밝혀

우리는 청소년 C57BL/6 마우스를 위한 가속 사회적 패배 스트레스 모델을 개발했는데, 이는 남성과 여성 모두에게 작용하고 불연속적인 청소년 기간 동안 노출을 허용합니다. 이 모델에 대한 노출은 사회적 회피를 유발하지만, 패배한 수컷과 암컷 쥐의 하위 집합에서만 가능합니다.

청소년 C57BL/6 수컷 및 암컷 마우스에 대한 사회적 패배 스트레스 모델

이 프로토콜은 초기 사춘기 수컷 마우스에서 10일 동안 만성적인 사회적 패배 스트레스를 수행하여 마우스의 60% 이상에서 성인이 되어서도 오래 지속되는 사회적 회피를 생성하는 방법을 자세히 설명합니다.

초기 청소년기 수컷 마우스의 만성 사회적 패배 스트레스

본 연구는 매일 4가지 사회적 스트레스 요인을 통합함으로써 암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스(MISS) 모델을 설명합니다. 10일 동안 MISS 노출을 반복한 후, 생쥐는 우울증과 불안과 같은 표현형을 개발하여 여성 피험자의 정신 장애를 연구하기 위한 자연스러운 병인학 기반 동물 모델을 제공했습니다.

암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스 모델

이 동영상은 쥐의 주민 침입자 패러다임을 보여줍니다. 이 테스트는 공격 침략, 반 자연 속에서 방어 행동과 폭력을 측정하는 표준화 된 방법입니다. 사회적 스트레스 실험 패러다임의 사용으로 잘 설명되어 있습니다.

주민 침입자 패러다임 : 공격성, 폭력과 사회적 스트레스에 대한 표준화 된 시험

이 문서에서는 모델 산후 우울증과 설치류 수유 불안에 ethologically 관련 패러다임과 같은 만성 주민 침입자 사회적 스트레스의 사용에 대해 설명합니다.

설치류 젖을의 모델 산후 우울증에 만성 사회적 스트레스를 사용하여

배우세요 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스 마우스 모델을 통해 스트레스 유도 우울증의 행동 및 생리적 변화를 연구하는 방법을 알아보세요. 이 모델은 과식 및 다음증과 같은 증상을 포함한 생체 내 메커니즘을 조사하는 데 활용됩니다.

스트레스에 의한 행동 및 생리 적자를 이해 아 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스의 마우스 모델

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