Name: 고해상도 자기 공명 영상에서 대뇌 피질 Microinfarcts 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: 배우세요 고해상도 7T MRI를 이용한 대뇌 피질 미세경색 평가 방법을. 사후 MRI로 병리를 검증하고 7T 및 3T 영상 평가 기준을 제시하여 미세혈관 뇌병리 연구에 활용합니다.

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이러한 결과로 이어진 연구는 유럽연합의 제7차 프레임워크 프로그램[FP7/2007-2013] / ERC 보조금 협정[337333]에 따라 유럽연구위원회(European Research Council)로부터 자금을 지원받았습니다. SvV 및 GJB에 대한 연구는 네덜란드 보건 연구 개발 기구(Netherlands Organization for Health Research and Development)인 ZonMw의 VIDI 보조금[91711384]의 지원을 받고 있습니다.

부검 샘플이 프로토콜에 대한 생체 자기 공명 영상의 사용은 지역 규정에 따라이었고, 대학 의료 센터 위트 레흐트 (UMCU)의 지역 기관 심사위원회에 의해 승인했다. 1. 두피 Microinfarcts의 조직 병리학 적 검증 MR-안내 <ol><li> 생체 자기 공명 영상 <ol><li> 뇌 조직을 처리 할 때는 항상 장갑과 적절한 보호 복을 착용 할 것. </li><li> 연구 문제를 바탕으로, 적절한, 바람직하게는 10-mm 두께, 포르말린 고정 뇌 슬래브를 선택합니다. 이 논문의 뇌 석판은 UMCU의 신경 병리학 부서에서 유래되었으며, VU 대학 의료 센터 (VUMC)는, 알려진 알츠하이머 병의 병리를 기반으로. <ol><li> 이전에 절단에, 10 % 포르말린에 담가 적어도 3~4주에 대한 전체 머리를 포르말린은-수정. 두 반구를 포함, 관상 석판에 머리를 잘라. </li><li> 사후 스캔의 경우, 예를 들어 세 개의 뇌 SLA에 대한 선택정면, 측두 - 두정엽, 뇌의 후두부에서 찍은 뇌 당 학사,. 현재 프로토콜은 하나의 스캔 세션에서, 두 반구를 포함하는 세 개의 관상 뇌 슬래브의 사용을 위해 최적화된다. </li></ol></li><li> 양쪽 (지느러미와 꼬리)에서 뇌 석판의 사진을 가지고,주의 깊은 메모를 (또는 밑그림을) 자기 공명 영상과 조직학 이후 공동 현지화를 위해, 용기와 스캐너의 석판의 방향으로. </li><li> 실온에서 10 % 신선한 포르말린 -이 경우 MR 헤드 코일에 들어가고 하나 - 특수 제작 컨테이너 (그림 1)을 입력합니다. MRI 유체로부터 신호가 바람직하지 않은 경우, 적절한 밀도 대신 포르말린 (예컨대 폼 브린 또는 Galden PFPE와 같은)와 퍼플 루오로 폴리 에테르 (PFP​​E) 윤활제를 사용한다. 포르말린을 처리 할 때 흐름 캐비닛을 사용하여 확인합니다. </li><li> 컨테이너의 뇌 석판을 배치 할 때, 기포를 방지해야합니다. shaki 부드럽게하여 기포의 대부분을 제거두 손으로, 조직을 겨, 또는 쉐이커 또는 초음파 목욕을 사용. </li><li> 슬래브는 컨테이너 내에 이동 장소 석판 유지 (도 1)보다 작은 용기를 사용하여, 필요한 액체의 양을 제한 할 수 있는지 확인. </li><li> 증발을 방지하고 오염 가능성 (도 2)로부터 MR (헤드) 코일을 보호하기 위해, 플라스틱 또는 파라 필름으로 용기를 커버. </li><li> 적절한 코일 전신 7T MRI 스캐너를 사용합니다. 이 프로토콜에서 이중 전송 및 32 채널 헤드 코일이 사용됩니다받을 수 있습니다. </li><li> 유체의 잠재적 인 유출을 방지하기 위해, 수건이나 수술 underpad에 싸여 헤드 코일의 컨테이너를 놓습니다. 용기를 이동할 수 있는지 확인하고 석판은 수평 위치 (그림 2) 남아. </li><li> shimming 적절한 도구를 사용하여 고해상도 스캔 올바른 B0 불균일성의 계획에 대해 사용할 수있는 조사 검사를 실행하고, RF 파워를 교정제조사의 프로토콜에 따라 올바른 플립 각도 (몇 슬라브 전체 헤드의 생체 내 주사에 비해 더 적은 전력을 필요로)을 얻었다. </li><li> 설문 조사 스캔의 높은 해상도 인수 계획 뇌 석판이 완전히 시야에 포함되도록 할 수 있습니다. 생체 외 이미징에 최적화되어 표 1에 나타낸 고해상도 인수와 뇌 석판 O / N을 스캔. 여기에 제시된 인수 프로토콜은 0.4 mm의 등방성 해상도, 0.18 mm의 등방성 해상도를 가진 T2 * 강조 영상과 3D FLAIR, T2 및 T1 강조 영상이 포함되어 있습니다. </li><li> 말초 신경 자극에 대한 자동화 된 O / N을 실행 최대 날짜, 또는 경고 등의 검사를 방해 할 수 있습니다 자동 소프트웨어 프로세스를 식별하고 스캐너 절차 이들에 의해 중단되지 않습니다 있는지 확인하십시오. </li><li> 예를 들어 VPN 연결을 사용하여 스캔을 중단 할 수있다 가능 확인 팝업는 스캐너 O / N을 모니터링합니다.</li><li> (현재 프로토콜에서 약 12​​ 시간의 총 스캔 시간 후) 다음 아침을 돌려줍니다. 포르말린에 뇌 석판 보관, 정리. </li><li> 외장 하드 디스크에 이미지를 저장합니다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53125/53125fig1.jpg" /> 그림 7T MRI에서 사후 검사에 대한 포르말린 고정 뇌 석판 1. 준비. 특수 제작 방풍 컨테이너가 10 % 포르말린 또는 유체에서 MRI 신호가 원하지 않는 경우, 퍼플 루오로 폴리 에테르 (PFPE) 윤활제 중 하나 가득합니다. 세 10 mm 두께의 포르말린 고정 관상 뇌 석판은 컨테이너에 배치됩니다. 작은 용기 대신에 슬래브를 유지하는 데 사용된다. 움직임을 막기 위해 처음에 제 2 용기를 테이프. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53125/53125fig2.jpg" /> 그림 2. 배치7T 헤드 코일의 특수 제작 컨테이너. 포르말린의 증발을 방지하기 위해 플라스틱 또는 파라 필름 용기 커버. 7T MR 스캐너의 헤드 코일에 수건이나 수술 underpad 안에 컨테이너를, 놓습니다. 용기를 이동할 수 있는지 확인하고 석판은 수평 위치에 남아. <ol start="2"><li> 조직 병리학 <ol><li> 또는 관심의 다른 병변 - - 가능한 대뇌 피질의 CMIS를 확인 획득 된 영상에. 이러한 병변은 조직 학적 분석을위한 대상입니다. 이러한 (때로는 인해 인하 뇌 슬라브의 표면에 표시) 사후 조직 손상 또는 장기 포르말린 저장 유물 등의 유물, 조심 (예를 들어, neuropil 변화를 나타내는 굵은 자기 공명 영상 hypointensities 8). 참고 : 대뇌 피질의 CMIS의 다른 조직 병리학 적 아형이 다른 MR 특성을 가지고있다. CMI의 하위 유형에 대한 자세한 내용은 독자 생체 (7)을 연구 전 최근이라고합니다. </li><li> AF자기 공명 영상에 가능한 대뇌 피질의 CMIS를 식별 터가, 조직 병리학 적 검증을위한 관심 영역을 샘플링. 조직 병리학와 MRI 이후 매칭을위한 해부학을 포함, 영역을 잘라해야합니다. 다음으로, 표준 조직 병리학을 수행합니다 (그러나 다른 방법이 적용될 수 있음). </li><li> 약 30 X 20 X 5mm 3 가능한 대뇌 피질의 CMI를 포함하는 영역을 잘라. </li><li> 정확한 샘플링을 획득하기 위해, MR 화상의 슬라이스 두께, 및 조직 구조에 의해 병변의 위치를​​ 추정한다. 직접 병변을 표적에 필요한 (파라핀 매립 후) 연속 절편의 양을 제한하기 위해 약간 추정 위치 위 병변 조직을 잘라. </li><li> 샘플링 된 조직이 조직 카세트를 맞는 있는지 확인합니다. 카세트에서 절단면이 아래로 표면을 놓습니다. </li><li> 조직의 처리까지, 10 % 포르말린에있는 모든 조직 카세트를 보관하십시오. </li><li> 파라핀 삽입을위한 조직을 처리. 이것은 보통 등급 알코올 크실렌 조직 (예를 들면, 70 % ~ 100 %에서 95 %) 화장실 및 클리어링의 시리즈를 통해, 조직을 탈수 자동 절차를 포함한다. </li><li> 파라핀 왁스 블록 조직을 포함시킵니다. 절단 대상 표면 매립 후 얼굴 확인. </li><li> 목표 병변이 검색 될 때까지, 마이크로톰로 4-6 μm의 시리얼 부분을 잘라. </li><li> 37 ℃ 수조의 표면 위에 부유 섹션. 유리 슬라이드에 섹션을 탑재합니다. 유리에 조직을 결합하는 온난화 블록에 슬라이드를 놓습니다. 스토어 실온에서 O / N 슬라이드. </li><li> 첫 번째 섹션에 적절한 염색 (예를 들어, H &amp; E 염색)을 수행 더 사용 (예를 들어, 면역 조직 화학)에 대한 인접한 빈 부분을 유지. </li><li> 선택의 매체를 장착 한 방울을 이용하여, H &amp; E 염색 섹션이 커버 슬립. 부드럽게 기포를 방지 슬립을 낮출. </li><li> 해당 잡지에서 광학 현미경을 사용하여 섹션을, 연구nification. 이전에 취득한 자기 공명 영상에 섹션을 비교. </li></ol></li></ol> 2. 생체 7T MRI에 두피 Microinfarcts 평가 <ol><li> 도 6에 기재된 바와 같이 (적어도 3D FLAIR 포함) 생체 MRI 프로토콜을 사용하여 관심의 환자 집단에서 7T MRI를 수행한다. </li><li> CMIS에 대해 다음 7T 평가 기준을 사용하여 다음 단계에서 설명하는대로 생체 7T 자기 공명 영상에서 대뇌 피질의 CMIS 평가 : 대뇌 피질의 CMIS는, (또는 hypointense 센터없이) 검출 (T2)에 hyperintense, T1에 hypointense, FLAIR에 hyperintense 있습니다 뇌 (예를 들어, 시상 및 횡)의 적어도 두 개의보기에, 큰 치수 ≤4 mm -6,7-와 혈관 주위 공간 구별 피질로 제한. </li><li> 동시에 예를 들어, FLAIR, T1 및 T2 이미지, MeVisLab (그림 3)보기, 세 가지 이미지 뷰어와 인터페이스를 사용합니다. 이 플랫폼의여보세요WS 다수의 시청자를 통합하고 가능한 병변의 위치에 마커를 배치합니다. </li><li> 첫 번째 시상보기에서 FLAIR에 한 반구을 평가. hyperintense 병변에 대한 전체 피질을 화면. 모든 hyperintens 병변 ≤4 MM은 가능한 CMI입니다. 각각의 가능한 CMI를 클릭하여 마커를 놓습니다. </li><li> 다른 반구에 대해 반복합니다. </li><li> T1과 T2의 모든 표시 위치를 확인합니다. 이 T2에서 T1 또는 hyperintense에 hypointense없는 경우 위치를 폐기하십시오. </li><li> FLAIR, T1 및 T2에, 가로보기를 평가합니다. 표시되지 않은 경우 위치를 폐기하십시오. 의심스러운 경우에 관상보기를 확인합니다. </li><li> MRI 아티팩트와 해부학 적 변화 (특히 sulcal 가장자리)에주의. </li><li> 마커를 저장합니다. </li></ol><img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53125/53125fig3.jpg" /> 대뇌 피질의 microinfarcts의 평가를위한 그림 3. 예 이미지보기 플랫폼입니다. 인터페이스가 사용되며, INTMeVisLab에 egrated. 이 프로그램은 시상 / 가로 / 관상 방향 사이를 쉽게 전환하고, 배치하고 가능한 병변의 위치에 마커를 저장, 동시에 여러 시청자들을 통합 할 수 있습니다. (다른 마커는 병변의 다른 유형에 대해 선택 될 수있다). 3. 생체 3T MRI에 두피 Microinfarcts 평가 <ol><li> 관심의 환자 인구의 3T 자기 공명 영상을 획득. 기존의 데이터는 한 MR 촬상 프로토콜 적어도 3D T1 및 T2와 FLAIR 포함로서 사용될 수있다. </li><li> CMIS에 대해 다음 3T 평가 기준을 사용하여 다음 단계에서 설명하는대로 생체 내 3T 자기 공명 영상에서 대뇌 피질의 CMIS 평가 : 대뇌 피질의 CMIS는 T1에 뇌의 두 개 이상의 뷰에 대한 검출 (CSF와 isointense) hypointense있다 (예를 들면 시상 및 횡단), 최대 차원 ≤4 mm의 혈관 주위 공간에서 서로 다른 피질, 제한. <ol><li> hypoint의 위치를​​ 탐색FLAIR 및 T2 강조 영상에서 T1에서 발견 ense 대뇌 피질의 병변. 위치가 FLAIR 및 T2에 hyperintense 또는 (회색 문제와) isointense 인 경우 가능성이 대뇌 피질의 CMI 등의 병변을 평가. hypointense 신호 T1의 hypointense 병변을 나타내는, T2에서 볼 인해 출혈성 병변, 용기, 또는 아티펙트 중입니다 동일한 위치에있는 경우 병변 버린다. 의심스러운 경우, T2 * 강조 영상 (9)의 위치를 확인합니다. </li></ol></li><li> 전술 한 바와 같이 동일한 인터페이스를 사용한다. </li><li> 첫 번째 시상보기에서 T1에 한 반구을 평가. 초점 hypointense 병변에 대한 전체 피질을 화면. 모든 hypointense 병변 ≤4 MM은 가능한 CMI입니다. 각각의 가능한 CMI를 클릭하여 마커를 놓습니다. </li><li> 다른 반구에 대해 반복합니다. </li><li> 횡단 (T1)을 평가하고, 동시에 횡단 감각과 T2의 모든 표시 위치를 확인합니다. 시선이 FLAIR 및 T2에 hyperintense 또는 isointense 경우 가능한 CMI와 위치. 위치 나 폐기F는 이슈 또는 해부학 적 변화 될 것으로 보인다. 이 T2에 hypointense 경우 위치를 폐기하십시오. </li><li> 특히, 여러 인접 뇌회 (gyri)에 표시 sulci의 가장자리를 조심한다 뇌의 &#39;가장자리&#39;에서 유물을 울리는, T1 강조 영상에 CMIS 같이 이슈를 조심에서 (측두엽에서 대형 선박에 대한 조심 폴란드). 마지막으로, 그것은 더 큰 피질 경색에 근접 조직에서 가능한 대뇌 피질의 CMIS을 폐기하는 것이 좋습니다. </li><li> 마커를 저장합니다. </li></ol>

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CMIS은 지난 몇 년간 관심이 증가 끌었다. 부검 연구에서 파생 된 증거의 성장 몸은 노화에 따른인지 기능 저하 및 치매 4,5에 중요한 기여로 CMIS을 확인했다. CMIS는 지금 7T 또한 3T MRI에 감지됩니다. 최적화 및 이러한 병변에 대한 평가 프로토콜의 표준화는 전 세계에 걸쳐 코호트 연구에서 강력하고 유효한 CMI 검출의 신속한 구현을 지원합니다. 이것은 앞으로의 임상 연구에서 널리 노화, 뇌 혈관 질환의 맥락에서 CMIS의 임상 관련성 평가, 치매있게 양쪽 단면뿐만 아니라 9,10- 길이. 이 작품의 한 방법 그것이 지금까지 만 사후 평가 될 수 CMIS의 생체 검출을위한 방법을 개발 (연속적 개선)하는 절차로 간주 될 수 있다는 점에서 &#39;meta-방법 &#39;실제로 신경에 의해병리학 자. 새로운 프로토콜 및 MRI 이미지 처리 기술에 의해 생체 CMI 검출 방법을 향상 개발 가장 중요한 단계는 현재 금 표준 ...

환자 연구에서 매우 높은 분야 7 테슬라 (T) MRI의 적용은 빠르게 일을 진행한다. 이 논문은 노화 인간의 뇌에서 뇌 혈관 질환의 맥락에서 7T MRI의 대표적인 응용 프로그램을 소개합니다. 뇌 혈관 질환은 치매 및인지 기능 저하의 주요 원인이다. 치매이 혈관 기여는 흔히 소동맥, 작은 정맥 및 모세 혈관과 뇌의 작은 혈관을 포함한다. 따라서,는 다음과 같이 작은 대뇌 혈관 질환 (SVD) 2로 지칭된다. 즉, 생성 된 조직 손상 - - 작은 대뇌 혈관 종래 MRI, SVD의 결과로 캡처 너무 작아서 가시화 될 수있다. 이 흰색 물질 hyperintensities, 대뇌 microbleeds 및 열공 경색 (3). SVD의 다른 중요한 증상은 대뇌 microinfarcts (CMIS) 4입니다. 부검 연구 VASC에서 CMIS의 높은 유병률을보고울라 치매와 알츠하이머 병 (5). 그러나, 그들의 작은 크기로 인해 그들은 기존의 MRI 4,5에 탐지되지 (50 μm의에서 수 mm까지). 7T MRI는 종래의 MRI의 검출 한계를 넘어 특정 구조 및 병변의 검출을 가능하게 개선 된 신호 대 잡음 비율 및 콘트라스트, 높은 해상도 이미지를 제공한다. 이 기술은 따라서 CMIS을 검출하기 위해 적용 하였다. 이전 크기 &lt;허혈성 속성과 일치 5mm 및 이미지 특성과 병변에 대한 검사 된 생체 7T MRI 검사에서 많은 수 CMIS을 식별합니다. 이러한 병변은 확실 피질에서 식별 될 수있다. 이 초점 긴 병변은 대뇌 피질로 제한, 7T FLAIR (0.8 mm의 등방성 복셀)에 hyperintense 있었다 (0.7 mm의 등방성 복셀) (T2)에, 대뇌 피질의 표면에서 hyperintense을 확장 할 듯 (T1)에 hypointense (1.0 mm의 등방성 복셀). 이들 병변을 사용하여 피질 CMIS는 것이 확인되었다사후 인간의 뇌 조직 6,7에서 조직 병리학 접근 방식을 MR이 유도. 여기서, 생체 MRI 프로토콜 CMIS 피질의 조직 병리학 적 유효성에 대한 이전의 연구에서 사용하는 것을 제시한다. 둘째, 가이드 라인은 생체 7T MRI에서 대뇌 피질의 CMIS의 평가를 위해 제공됩니다. 마지막으로, 7T에 대뇌 피질의 CMIS의 평가는 더 광범위하게 사용할 수 3T MRI로 번역되었으며, 가이드 라인은 3T 자기 공명 영상에서 대뇌 피질의 CMIS을 식별하는 방법을 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>Fomblin / Galden PFPE</td><td>Solvay Solexis, Bollate, Italy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>7T MR 시스템</td><td>Philips Healthcare, Cleveland, OH, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>32채널 수신 헤드 코일</td><td>Nova Medical, Wilmington, MA, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MeVisLab</td><td>MeVis Medical Solutions AG, Bremen, Germany</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

고해상도 자기 공명 영상에서 대뇌 피질 microinfarcts 평가

Assessing Cortical Cerebral Microinfarcts on High Resolution MR Images

뇌성 microinfarcts는 사후 인간의 뇌에서 자주 발견하고,인지 기능 저하 및 치매와 관련이 있습니다. 때문에 그들의 작은 크기로 임상 MRI 검사에 그들을 연구하는 도전이다. 이는 최근 피질 microinfarcts 높은 자계 강도 (7T)을 사용 MRI 스캐너로 도시 될 수 있음을 입증 하였다. 이 경험을 바탕으로,이 병변의 비율도 낮은 해상도 3T 자기 공명 영상에서 볼 수 있습니다. 이러한 연구 결과는 가능한 대뇌 피질의 microinfarcts의 조직 병리학 적 검증과 함께, 사후 인간의 뇌 조직의 생체 이미징 뒷받침했다. 여기서 생체 촬상 프로토콜은 MR과는 조직 학적 평가 뇌 미세 혈관 병리 현상을 관찰 검증하기위한 목적으로 제시된다. 또한, 가이드 라인은 모두 생체 7T와 3T MR 영상에서 대뇌 피질의 microinfarcts의 평가를 위해 제공됩니다. 이 지침은 W 연구자를 제공도구 i 번째 추가로인지 기능 저하와 치매의 임상 적 관련성을 해명하기 위해, 더 큰 환자 샘플의 생체 영상에서 대뇌 피질의 microinfarcts 평가하고, 뇌의 작은 혈관 질환의 새로운 바이오 마커 이러한 병변을 설정합니다.

높은 해상도가 제공된다 7T에서 취득한 생체 시퀀스의 고화질화의 인상 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53125/53125fig4.mp4" target="_blank">(도 4) 여기</a> . 이것은 0.18 mm의 등방성 해상도, * 가중 생체 검사 3D T2입니다. 조직은 조직 학적으로 입증 된 알츠하이머 질환과 심각한 대뇌 아밀로이드 혈관 병증 (CAA)와 84 세의 미친 여성에서 파생되었다. 이미지의 세부 사항은 대뇌 피질의 미세 혈관 병변의 확인을 할 수 있습니다. T2 *뿐만 아니라 공기로서, 철 쉽다. 이 조직은 피질 내 미세 혈관 병변의 높은 부담을 포함하고 있습니다. 이 석판의 sulci의 hypointensities는 대뇌 피질의 미세 혈관 병리 평가를 방해 할 수 기포의 결과입니다. CMIS 피질의 식별을 위해, T2 강조 시퀀스가​​ 필요하다. 그림 5는<...

생체 7T 자기 공명 영상 프로토콜이 제시된다 높은 해상도, 사후 인간의 뇌 조직에서 미세 혈관 병리의 MR 유도 하 조직 병리학 적 검증을 수행 할 수 있습니다. 또한, 가이드 라인은 대뇌 피질의 생체 7T에 microinfarcts뿐만 아니라 3T 자기 공명 영상의 평가를 위해 제공됩니다.

고해상도 자기 공명 영상에서 대뇌 피질 Microinfarcts 평가

Cerebral microinfarcts are frequent findings in the post-mortem human brain, and are related to cognitive decline and dementia. Due to their small sizes ...

전체적인 목표는 MRI 상에서 뇌 미세혈관 병증의 새로운 영상 마커로서 피질 미세 경색(cortical micro infarcts)을 도입하는 것입니다. 우선 생체 내 7 Tesla MRI 스캔을 통해 미세 경색을 확인하였습니다. 이후 이러한 병변의 병리학적 특성을 확인하기 위해 사후 MRI를 수행하였습니다.본 영상에서는 사후 MRI 프로토콜을 시연하며, 7 Tesla MRI 스캔에서의 미세 경색 평가 기준과 3 Tesla 사후 MRI에서 이를 가장 효과적으로 식별하는 방법을 제시합니다. 인간의 뇌 조직은 한편으로는 신경병리학과, 다른 한편으로는 FIFO MRI 사이의 간극을 메울 수 있는 강력한 도구입니다. 이는 특히 다양한 유형의 뇌 병변이 포함된 소혈관 질환 연구에서 매우 가치가 있습니다.사후 스캔을 수행하기 전, 포르말린으로 고정한 10밀리미터 두께의 관상면 뇌 슬라이스를 선택합니다. 본 예시에서는 뇌의 전두측두엽, 두정엽 및 후두엽 영역에서 세 개의 슬라이스를 채취하였습니다. 뇌 슬라이스의 양면을 사진으로 촬영하거나, 용기 및 스캐너 내에서의 슬라이스 방향을 세심하게 기록하십시오.조직학적 분석과 MRI의 공국소화(colocalization)를 위해, Mr.Head 코일에 맞는 용기에 실온의 10% fresh formin을 채웁니다. formin을 취급할 때는 층류 작업대(flow cabinet)를 사용하십시오. 뇌 슬라이스를 용기에 넣을 때 공기 방울이 생기지 않도록 주의하십시오.조직을 손으로 부드럽게 흔들어 대부분의 기포를 제거합니다. 필요한 용액의 양을 줄이고 슬랩이 큰 용기 내에서 움직이지 않도록 큰 용기 안에 더 작은 용기를 넣습니다. 선택 사항으로, 용기를 초음파 세척기에 넣어 추가 기포를 제거합니다.다음으로, 증발을 방지하고 Mr.Head 코일의 잠재적 오염을 막기 위해 용기를 파라필름으로 덮습니다. 32채널 헤드 코일이 장착된 전신 7T MRI 스캐너를 사용하여 뇌 슬랩을 스캔합니다. 용기를 헤드 코일에 배치할 때 액체가 쏟아지는 것을 방지하기 위해 수술용 흡수 패드로 용기를 감쌉니다. 용기가 움직이지 않고 슬랩이 수평 상태를 유지하는지 확인하십시오.서베이 스캔을 수행하고 적절한 시밍 도구를 사용하여 B₀ 균질도를 보정하십시오. 정확한 플립 각도를 얻기 위해 RF 전력을 교정하십시오. 다음으로, 뇌 슬랩이 시야(field of view) 내에 완전히 들어오도록 서베이 스캔을 바탕으로 고해상도 획득 계획을 수립하십시오.등방성 해상도 0.4 mm의 3D FLAIR T2 및 T1 가중 영상과 등방성 해상도 0.18 mm의 T2* 가중 영상을 포함하는 고해상도 획득 프로토콜을 사용하여 뇌 슬래브를 밤새 스캔합니다. VPN 연결을 통해 스캔을 방해할 수 있는 팝업창이나 자동 소프트웨어 프로세스가 발생하는지 밤새 스캐너를 모니터링하십시오. 총 스캔 시간이 약 12시간 경과한 다음 날 아침에 돌아와 MRI에서 뇌 슬래브를 꺼낸 후, 최종적으로 뇌 슬래브를 포르말린에 보관합니다.다음의 7가지 등급 판정 기준에 따라 in vivo 70 T MR 이미지에서 피질 뇌 미세경색을 평가하십시오. 피질 미세경색은 FLAIR에서 고신호강도, T2에서 고신호강도, T1에서 고신호강도를 나타내며, 뇌의 최소 2개 뷰에서 검출 가능하고, 피질에 국한되며, 혈관주위공간과 구별되고, 동시에 크기가 4 mm 이하인 병변을 의미합니다. FLAIR, T1 및 T2 이미지를 확인하여 잠재적 병변 위치에 마커를 표시하십시오. 시상면 뷰의 FLAIR 이미지에서 한쪽 반구를 평가하고 전체 피질에서 국소적 고신호강도 병변을 스크리닝하십시오.4mm 이하의 모든 고신호강도 병변은 미세 경색일 가능성이 있으므로 마커를 표시하고, 반대편 뇌반구에 대해서도 동일하게 반복합니다. 그 다음 T1 및 T2 영상에서 표시된 모든 위치를 확인합니다. T1 또는 T2 영상에서 고신호강도로 나타나지 않는 위치는 제외합니다.마지막으로, flare T1 및 T2의 횡단면 뷰를 평가하십시오. 병변이 보이지 않는 위치는 제외하십시오. 모든 마커를 저장하십시오.다음 세 가지 T 등급 기준에 따라 생체 내 3T MRI 영상에서 피질 미세경색을 평가하십시오. 피질 미세경색은 T1 강조 영상에서 저신호 강도를 보이며, 최대 직경이 4mm 이하로 피질에 국한되고 혈관주위 공간과 구별되어야 합니다. T1 강조 영상에서 발견된 저신호 피질 병변의 위치를 FLAIR 및 T2 강조 영상에서 확인하십시오.병변의 위치가 FLAIR 및 T2 영상에서 고신호강도 또는 등신호강도로 나타나면 이를 확률적 피질 미세경색으로 평가하십시오. 동일한 위치가 T2 영상에서 고신호강도로 나타나면 해당 병변은 제외하십시오. 먼저 시상면 T1 영상에서 한쪽 반구를 평가하십시오.전체 피질을 스크리닝하여 4mm 이하의 모든 저신호 강도 병변에서 국소적 저신호 강도 위치 마커를 확인하십시오. 다른 반구에 대해서도 동일하게 반복하십시오. T1의 횡단면 뷰를 평가하는 동시에, 횡단면 FLAIR 및 T2에서 모든 표시된 위치를 검증하십시오.FLAIR 및 T2 영상에서 고신호강도 또는 등신호강도를 보이는 위치는 미세 경색으로 간주합니다. T2 영상에서 저신호강도를 보이거나 해부학적 변이인 위치는 제외합니다. 마지막으로, 더 큰 피질 경색과 인접한 조직 내에 있는 잠재적 피질 미세 경색은 제외할 것을 권장합니다.마커를 저장하십시오. 이것은 심각한 뇌 아밀로이드 혈관병증 사례의 ex vivo 7 Tesla 0.4 millimeter 등방성 T2 강조 영상의 예시입니다. 여기 다른 사례에서는, FLAIR T2 및 T1 영상에서 미세 경색 가능성이 확인되었습니다.조직 절편을 현미경으로 검사한 결과, 이 미세 경색은 공동 형성이 동반된 만성 신경아교 미세 경색으로 확인되었습니다. 이는 in vivo 7 Tesla MR 영상에서 flare 및 T2 영상에서는 고신호강도로, T1 영상에서는 고신호강도로 나타나는 피질 미세 경색입니다. 3 Tesla MRI의 경우, 피질 미세 경색은 3D T1 가중 영상에서 가장 잘 식별할 수 있습니다. 여기에서 피질 미세 경색은 저신호강도 병변으로 식별됩니다.T1 강조 영상에서 확인됩니다. 해당 부위는 FLAIR 및 T2 강조 영상에서 고신호강도를 보입니다. 적절한 교육을 받은 후, 3 Tesla MRI 스캔에서 미세경색을 판독하는 데 평균적으로 약 30분이 소요됩니다.또한, 제안된 등급 판정 기준은 사용 가능한 데이터 세트에 따라 조정이 필요할 수 있다는 점을 강조하고자 합니다. 이러한 병변의 임상적 중요성에 대한 이해를 빠르게 높이기 위해, 다른 연구자분들께서도 각자의 데이터 세트에서 미세 경색을 평가해 보실 것을 강력히 권장합니다. 이에 따라, 저희는 다른 연구자들에게 미세 경색 등급 판정 방법을 교육하기 위한 모듈을 마련하고 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

쥐에서 허혈성 뇌 손상 외과 유도는 뇌졸중 연구 널리 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 중간 대뇌 동맥의 폐색에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈의 유도를 보여줍니다. histological 얼룩 및 자기 공명 영상에 의해 발생하는 경색의 시각화도 표시됩니다.

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

이 문서 3T 스캐너를 사용하여 인간의 midbrain과 subcortical 구조 1.2 밀리미터 샘플링과 고해상도 기능성 자기 공명 영상을 수행하는 기술을 설명합니다. 인간의 뛰어난 colliculus (SC)의 시각적 자극을 지형지도를 해결하기 위해 이러한 기술의 사용은 예제로 제공됩니다.

인간 Midbrain위한 고해상도 기능성 자기 공명 영상 방법

중대 뇌동맥 폐색 (MCAO)의 다양한 쥐 모델은 널리 실험 뇌 연구에 사용됩니다. 여기서 우리는 인간의 허혈성 뇌졸중의 대다수에 의해 부과 된 손상에 해당하는 크기의 일관성있는 대뇌 피질의 경색을 생산 두개 영구 원심 MCAO의 모델을 보여줍니다.

마우스의 모델링 스트로크 : 말초 중간 대뇌 동맥의 영구 응고

여기에서는 피질하 구조를 해결하고 생리적 노이즈가 없을 때 LGN의 개별 층을 분해할 수 있는지 테스트하기 위해 등록하고 평균화해야 하는 최소 이미지 수를 결정하는 프로토콜을 제시합니다.

인간 Subcortex의 고해상도 구조 자기 공명 영상<I&gt; 생체</I&gt; 및 사후

Resting-state functional-connectivity MRI는 피질 발달의 기형으로 인한 간질을 포함한 광범위한 신경 정신 질환을 가진 환자의 이상을 확인했습니다. EEG와 함께 경두개 자기 자극법은 간질 환자가 비정상적인 연결성을 가진 영역에서 피질 과흥분성을 가지고 있음을 입증할 수 있습니다.

간질 환자의 뇌 흥분을 연결 관련 평가하는 멀티 모달 Imaging- 및 자극 기반 방법

이 프로토콜은 대뇌 thromboemboli을 시각화 결합 된 근적외선 형광 (NIRF) 이미징 및 마이크로 컴퓨터 단층 촬영 (microCT)의 응용 프로그램을 설명합니다. 이 기술은 혈전 부담과 진화의 정량화 할 수 있습니다. microCT 기술은 금 나노 입자를 사용하여 살아있는 동물 내부 혈전 가시화하면서 NIRF 이미징 기술은 형광 절제 뇌 혈전 표지 가시화.

직접 대뇌 Thromboemboli 시각화를위한 결합 된 근적외선 형광 이미징 및 마이크로 계산 된 단층 촬영

정량적 자기 공명 영상 (qMRI) 매개 변수를 이용 하는 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌졸중 발병 시간 추정에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 절차는 급성 뇌졸중 병 변 및 양적 T1 과 T2 (qT1 과 qT2) 이완 시간 선의 타이밍의 묘사에 대 한 MRI 확산을 이용 한다.

영구적인 뇌 허 혈에서 뇌졸중 발병 시간 추정에 대 한 자기 공명 화상 진 찰 프로토콜

여기에 제공된 개방형 이미지 처리 파이프라인은 병변 증상 매핑을 위한 실용적인 자습서입니다. CT/MRI의 수동 경색 세분화부터 표준 공간에 대한 후속 등록에 이르기까지 각 처리 단계에 대해 실용적인 권장 사항 및 예시사례가 있는 그림에 대한 단계별 연습이 제공됩니다.

병변 증상 매핑을 위한 MRI 또는 CT에 대한 뇌 경색 세분화 및 등록

이 절차의 전반적인 목표는 가벼운 외상성 뇌 손상을 가진 쥐에 해마의 양적 미세 구조 정보를 얻는 것입니다. 이것은 파라메트릭 확산지도의 고급 확산 가중 자기 공명 영상 프로토콜 및 관심 영역 기반 분석을 사용하여 수행됩니다.

가벼운 외상성 뇌 손상을 가진 쥐의 해마에 있는 향상된 확산 화상 진찰

고주파 도플러 초음파는 지역 심근 기능을 평가하기위한 새로운 기술입니다. 이 작품은 심근 스트레인, 국소 빈혈 - reperfused (IR) murine 마음에 DP / DT 및 승모판 병리 현상의 반복 측정이 다양한 이미징 플랫폼의 응용을 보여주는 첫번째 증거를 제공합니다.

고주파 고해상도 Echocardiography : 국소 빈혈 - reperfused Murine 중심부에 심근 스트레인, 수축성 및 승모판 병리 현상의 비침습 반복 측정에 대한 최초의 증거

배우세요 고해상도 7T MRI를 이용한 대뇌 피질 미세경색 평가 방법을. 사후 MRI로 병리를 검증하고 7T 및 3T 영상 평가 기준을 제시하여 미세혈관 뇌병리 연구에 활용합니다.

고해상도 자기 공명 영상에서 대뇌 피질 Microinfarcts 평가

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