Name: 소매 절제술의 기술 및 쥐에서 Roux-EN-Y 위장 바이 패스를 수정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-20T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 5 s
Description: 학습하세요 쥐 모델에서 소매 절제술 및 Roux-en-Y 위장 바이패스 기술을 이용한 비만 대사 수술의 분자 메커니즘과 대사 효과를 연구하는 방법을.

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동물 보호 프로토콜에 도움을 주신 Gilles Mithieux와 Aude Barataud(INSERM U1213, 프랑스 리옹), Marie Liabeuf와 Stephanie Lemarchand-Minde(프랑스 낭트 L'Institut du Thorax, 동물 시설)에게 감사드립니다. 이 작업은 La région des Pays de la Loire, Fondation d' Avenir 및 Casden Bank의 보조금으로 지원되었습니다. 촬영 과정에서 환대와 도움을 주신 l'institut Cochin의 Catherine Postic, Fadila Benhamed, Michelle Caüzac에게 감사드립니다.

동물과 주택 : 8 주령 C57BL / 6 수컷 마우스를 얻습니다. 지방에서 35 % 킬로 칼로리, 25.8 %의 카세인, 1.30 % 미네랄 AIN, 1.30 %의 비타민, 1.70 %의 인산이 칼슘, 0.7 : 10 주 이전에, 물에 대한 C57BL / 6 마우스 무료로 이용할 수 높은 지방 다이어트 (DIO 다이어트를 제공 %의 탄산 칼슘 2.10 %, 시트르산 칼륨, 0.026 % 콜린 타르트 레이트, 8.9 % 수 크로스, 0.384 % 시스틴 6.5 % 셀룰로오스, 31.7 %의 돼지 기름, 3.3 %의 대두유, 및 16.29 %의 말토 덱스트린) 8 (SG) 또는 14 (RYGB) 주 비만 수술 전에. 체중 증가를 촉진하기 위해, RYGB 수술 (가짜 및 RYGB) : 물 20 % 과당 전용 마우스를 제공 (W / V) 높은 지방 다이어트에 추가한다. 윤리 정책 : 아래에 설명 된 모든 프로토콜 단계는 동물 실험에 대한 윤리위원회의 지침을 따르의 승인 번호 01953.01에서 드 라 루 아르를 지불. 1. 일반 수술 전 준비 <ol><li> 수술 전 6 시간 동안 마우스를 빨리. 젤 디등 식품 3 일 수술 전 수술과 독점적으로 일일 전에 주어졌다. (0.4 L / 분 옥시젠) 5 % 이소 플루 란 (0.4 L / 분) O 2 챔버로 마취를 유도한다. 마취 효과가 있는지 확인하기 위해 발가락 - 핀치 테스트를 수행합니다. 피하 주사를 통해 진통제 (0.1 ㎎ / ㎏ 부 프레 노르 핀), 항생제 (10 ㎎ / ㎏ marbofloxacine), 친 반응 속도 (1 ㎎ / ㎏ 메토 클로 프라 미드)를 관리 할 수 있습니다. </li><li> (실험실 트래픽 및 환기 팬 먼) 수술 절차에 대해 특정 작업 영역을 할당합니다. 전용 하드 표면 소독제와 외과 영역을 청소합니다. 수술하는 동안 마우스 homeothermy을 유지하기 위해 작업 공간 영역에 가열 패드를 놓습니다. 가열 패드에 깨끗하고 흡수 underpad을 적용합니다. </li><li> 전기 면도기를 사용하여 골반 흉골에서 복부를 면도. 멸균 플라스틱 포장 (도 1A 및 2A)에서 마우스의 복부를 싸서 가열 페이지의 부정사 위치에 마우스를 올려광고. </li><li> 마취 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 적용합니다. 코 콘에 마우스를 놓고 2 % 이소 플루 란 (0.4 L / 분)와 O 2 (/ 분 0.4 L)으로 마취를 유지한다. </li><li> 수술을 시작하기 전에, 무균 시험 가운, 일회용 수술 용 모자, 안면 마스크, 멸균 장갑을 넣어. 수술의 모든 단계에 필요한 멸균 수술기구 세트를 포함하는 멸균 패키지를 엽니 다. 멸균 플라스틱 포장의 창을 잘라 2 연속 포비돈 - 요오드 솔루션으로 피부를 소독. </li></ol> 2. 소매 절제술 : 수술 <ol><li> 중간 개복술 (그림 1B) <ol><li> 쌍안 현미경과 메스로 복강을 (복부 근육을 손상하지 않는) 열 복부의 중간 흉골에서 중간 선 절개를 수행합니다. 37 ° C의 식염수로 적신 멸균 압축으로 피부를 보호합니다. </li></ol></li><li> 위의 노출 (그림 1C) <ol><li> 살짝 적신 - 면봉을 사용하여 위장을 동원. 적신 면봉 또는 마이크로 가위를 사용하여 측면 가까운 결합 조직의 첨부 파일에서 배를 무료로 제공됩니다. </li><li> 조심스럽게 완전히 위장을 구체화하고 지혈 콜라겐은 위장 뒤에 압축 놓습니다. (그림 1D와 E를) 출혈 미래를 방지하기 위해 8.0 비 흡수성 봉합사로 위장 큰 곡률을 따라 유문 및 식도 혈관을 봉합. 참고 : 지혈 사용, 조직 손상을 유발만을 절제 할 것을 목표로 조직에서 사용할 수 있는지 확인 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 위의 심장 지역의 절제술 (안저) <ol><li> 유문 영역 (신체)과 위 (안저)의 심장 지역 (그림 1 층) 사이의 해부학 라인 존재에 gastrotomy을 수행합니다. </li><li> 각 방향으로 2 적신 면봉으로 잔여 음식을 제거위의 측면. 마이크로 가위를 사용하여, 안저 위장 (도 1G)의 코퍼스 사이의 경계를 따라 위장을 잘랐다. </li><li> 지혈 콜라겐이 주요 출혈의 경우에는 2 분 동안 압축 누릅니다. 절개 (그림 1H)의 끝으로 위장 oesophagal 접합에서 8.0 비 흡수성 봉합사와 위장 개방을 닫습니다. </li></ol></li><li> 위의 유문 지역의 절제술 (말뭉치) <ol><li> 위 (그림 1I)의 약 80 %를 제거 할 수 있도록 큰 곡률을 따라 위 절제술을 완료합니다. 3mm로 SG의 폭을 표준화. 지혈 콜라겐이 주요 출혈의 경우에는 2 분 동안 압축 누릅니다. </li><li> 8.0 비 흡수성 봉합사 (그림 1J)와 위의 유문 지역의 개방을 닫습니다. 조심스럽게 봉합이 새지 있는지 확인하기 위해 위의 각 측면을 향해 2 적신 면봉을 굴립니다. </li><li>누설의 경우 8.0 비 흡수성 봉합사로 완료합니다. 지혈 콜라겐를 압축을 제거하고 복강에 배를 반환합니다. 봉합사에 대해 압축 지혈 콜라겐을 둡니다. </li></ol></li><li> 복부 폐쇄 <ol><li> 5.0 비 흡수성 봉합사 (도 1K)을 복벽의 근육층을 닫는다. 1 %로 이소 플루 란 농도를 줄임으로써 마취를 줄입니다. 5.0 비 흡수성 봉합사 (도 1L)를 사용하여 피부를 닫는다. </li></ol></li></ol> 3. Roux-EN-Y 위장 바이 패스 : 수술 <ol><li> 중간 개복술 <ol><li> 쌍안 현미경과 메스로 복강을 (복부 근육을 손상하지 않는) 열 복부의 중간 흉골에서 중간 선 절개를 수행합니다. 37 ° C의 식염수 (그림 2B)로 적신 멸균 압축으로 피부를 보호합니다. </li></ol> &lt;/ 리&gt; <li> Biliopancreatic 사지 및 영양 사지 <ol><li> 소장 (그림 2C)을 구체화. 측정 8 유문에서 cm 5.0 비 흡수성 봉합사 (그림 2D)과 소장의이 합자를 수행합니다. </li><li> 두 합자 (그림 2E) 사이의 소장을 잘라. 복부의 왼쪽 상단 사분면에 두 끝의 근위 사지를 놓습니다. 주의 : 이것은 영양 사지 (도 2F)로 사용한다. </li><li> 영양 사지에게 근위 사지 (그림 2 층) 아래 6cm가 직면하고있는 양단의 말단 사지를 놓습니다. 참고 :이 담즙 사지로 사용됩니다. </li></ol></li><li> Jejuno-jejunostomy <ol><li> 마이크로 가위를 사용하여 근위 사지와 장 루프를 모두 잘라 같은 길이의 두 antimesenteric 절개 (그림 2G 및 2H)를 수행합니다. </li><li> 이 8.0 좌우 문합을 수행비 흡수성 봉합사. 복부 측 문합 (그림 2J) 다음 등쪽 측 문합 첫 번째 (그림 2I)을 수행합니다. </li><li> 조심스럽게 봉합이 새지 있는지 확인하기 위해 문합 양쪽으로 2 적신 면봉을 굴립니다. 누설의 경우 8.0 비 흡수성 봉합사로 완료합니다. </li></ol></li><li> 위장 jejunostomy <ol><li> 살짝 적신 면봉을 사용하여 위장을 동원. 적신 면봉 또는 마이크로 가위를 사용하여 측면 가까운 결합 조직의 첨부 파일에서 배를 무료로 제공됩니다. </li><li> 부드럽게, 재 흡수 지혈 콜라겐은 위장 뒤에 압축 배치, 완벽하게 위장을 외부화. 곡선 형 마이크로 핀셋 (도 2K 및 2L)을 사용하여 복막 통과 5.0 비 흡수성 봉합사를 사용하여 유문부의 결찰을 수행한다. </li><li> 복부 위의 측면, 유문에서 1.5 cm, 및 말초 사지를 모두 잘라같은 길이 (그림 2M)의 두 개의 절개를 작성, 마이크로 가위를 사용하여. </li><li> 이 8.0 비 흡수성 봉합사로 좌우 문합을 수행합니다. 지느러미 측 문합 (그림 2N)로 시작하고 복부 측 문합 (그림 2O)를 수행합니다. 조심스럽게 봉합이 새지 있는지 확인하기 위해 문합 양쪽으로 2 적신 - 면봉을 굴립니다. 누설의 경우 8.0 비 흡수성 봉합사로 완료합니다. </li></ol></li><li> 복부 폐쇄 <ol><li> 5.0 비 흡수성 봉합사 (도 2P)을 이용하여 복벽의 근육층을 닫는다. 1 %로 이소 플루 란 농도를 줄임으로써 마취를 줄입니다. 피하 주사를 통해 따뜻한 식염수 25 ㎖ / kg .Administer 5.0 비 흡수성 봉합사 (도 2Q)를 사용하여 피부를 닫는다. </li></ol></li></ol> 4. 일반 수술 후 케어 <ol><li> 이소 플루 란을 중지마우스가 잠에서 깨어 때까지 0.8 L / 분의 O 2 흐름을 계속합니다. 이 케이지 주위에 이동하고 서서 떨어지지 않고 걸을 수있는 위해 동물 시작으로 표시 모터 제어를 회복 할 때까지 무인 마우스를 두지 마십시오. </li><li> 5 일간 30 ° C 온도 조건에서 인큐베이터에 마우스 (케이지 당 하나의 마우스)를 놓습니다. </li><li> 프로토콜이 끝날 때까지 RYGB 마우스와 비타민 (800 밀리그램 / 180 mL의 물) supplementations, 철 (피하 주사 0.5 ㎎ / ㎏ / 일)를 유지한다. </li><li> 수술 후 5 일간 (10 % 라드, 10 % 액체 설탕, 57 %의 물 고지방 겔 다이어트) 무료 겔 다이어트 식품에 대한 액세스를 돌려줍니다. 삼일 수술 후 고체 음식을 다시 소개. </li><li> 피하는, 멜 록시 캄 (수술 후 하루 3 0 일에서 하루에 두 번 0.1 ㎎ / ㎏) (1 ㎎ / ㎏, 하루 0에서 수술 후 3 일까지), 메토 클로 프라 미드 (1 ㎎ / ㎏, 하루 0에 부 프레 노르 핀을 주입 수술 후 5 일), 및 marbofloxacine (10 ㎎ / ㎏, 하루 0에서 하루에 3 afte<html> R 수술). </li></ol> 5. 수술 후 대사 매개 변수 평가 <ol><li> 음식물 섭취 측정 <ol><li> 마우스는 수술 후 1 주간 복구 할 수 있습니다. 집 쥐 케이지 당 하나. 케이지에 넣고 고체 다이어트의 양을 측정한다. 무게 남은 음식을 24 시간 이상. 한 필요에 따라이 단계를 반복합니다. </li></ol></li><li> 경구 당부 하 시험 <ol><li> 구강 루스 전에 6 시간 동안 마우스를 빨리. 꼬리 끝에서 혈액 방울을 수확 시간 0 혈당 값을 결정하는 혈당 측정기에 삽입 된 글루코스 스트립을 적용한다. </li><li> 20 % D-포도당 용액 (2g / kg)의 경구 용 알약을 관리 할 수 ​​있습니다. 15, 30, 60 및 120 분 후 위관을 혈당 수준을 측정한다. </li></ol></li><li> 헤모글로빈 수준 분석 <ol><li> 혈액학 시스템을 사용하여, 헤모글로빈 수준을 샘플링 신선한 혈액 20 μL를 측정한다. </li></ol></li></ol>&quot;&gt; 6. 안락사 <ol><li> 복강 자일 라진 / 케타민 용액 (80분의 10 ㎎ / ㎏)을 주입하여 쥐를 마취. 자궁 경부 전위를 수행합니다. 심장이 박동되지 않고 안구 깜박 반사가 손실되는 것을 보장함으로써 완전한 안락사를 확인합니다. </li></ol>

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</ol>

저자는 이해 상충이 없음을 선언합니다.

비만의 증가 전염병을 극복하기 위해, 제 비만 수술 절차는 미국에서 1960 년에 등장했다. 이후 절차의 수는 여전히 매년 전 세계적으로 수행 증가하고 오늘날, 이러한 기술은 병적 비만 (6)의 관리를위한 최적의 치료 옵션을 나타낸다. 개발 절차 중 SG와 RYGB은 임상 4에 사용되는 두 개의 가장 인기있는 방법입니다. 동물 모델, 특히 설치류, 비만 수술 후에 관찰 일반 건강 증진 뒤에기구를 해독하는데 사용되어왔다. 비만 수술의 유익한 대사 효과를 유지하는 분자 메커니즘을 해독하기 위해, 우리는 비만 수술의 두 마우스 모델 개발 : 종종 제한적인 기법으로 정의 된 SG를하고, 제한 및 흡수 장애 수술로 설명하는 RYGB. 이 마우스 비만의 실현절차는 미세 경험을 필요로한다. 이 모델 동물 수술과 인간의 내장 외과 전문 기술자를 사용하여 개발되었다. 경험에서, 수술 훈련을 RYGB 후 이상...

비만과 당뇨병의 세계적 대유행이 정도의 파괴이다. 전 세계적으로 억이 넘는 성인 (인구의 30 %) 비만 (BMI&gt; 25kg / m 2) 또는 비만 (BMI&gt; 30kg / m 2) 중 하나입니다 (1). 이 증가 이환율과 사망률을 선도, 2 형 당뇨병, 고혈압 및 이상 지질 혈증 등의 대사 합병증과 함께 올 수 있습니다. 비만은 전체 사망률과 암 2의 유병률을 증가시킨다. 인한 효과적인 침습적 치료법의 부족, 비만 수술은 장기간 지속 중량 손실 (3, 4)을 초래할 수있는 유일한 옵션을 나타낸다. 다른 수술 방법의 수는 개발되었지만, 슬리브 절제술 (SG) 및 루 엉 Y 위장 (RYGB)은 가장 일반적으로 임상에서 사용되는 두 가지 절차가있다. 속도 허가 절차 동안에, 위의 초기 부피의 80 % 인제거; 따라서,이 기술은 포만감을 향상 제한적 수술이다. RYGB은 제한-흡수 장애 기법 중 하나입니다. RYGB 중에 작은 위 주머니 (총 용적 위의 1 ~ 2 %)이 생성되고, 장내 소화 및 영양소의 흡수를 지연시키는 Y 형으로 재 배열된다. 이 두 기술은 RYGB에서 본 높은 효율, 자주 관련된 동반 질환에 상당한 체중 감소 및 일반 개선 (예를 들면, 고혈압, 제 2 형 당뇨병 및 이상 지질 혈증) 3로 이어집니다. 그러나, 비만 수술의다면 발현 유익한 효과 뒤에 분자 메커니즘은 종종 완전히 규명되지 않습니다. 인해 가능한 수많은 유전자 변형 된 균주를 마우스 모델은 이러한 분자 메커니즘을 탐구하는 가장 편리한 동물 모델이다. 그러나, 비만 절차는 작은 동물 모델의 requir에 직접 적용하기 어렵다높은 수술 손재주를 전자. SG 용이 매우 좋은 생존율 설치류에서 수행 될 수 있지만, RYGB 인해 심각한 장폐색 5 마우스 치명적이다. 다른 변형 RYGB 기술들이이 문제를, 특히 5 oesojejunostomy 대응하기 위해 제안되었다. 위장 절제없이 gastrojejunostomy : 여기, 우리는 다른 대안을 제시한다. 이 변형은 RYGB 재생 인간에서 관찰되는 유익한 효과의 대부분 (즉, 상당한 체중 감소 및 글루코스 항상성 및 지질 개선). 이 원고는 요약 및 마우스에서 SG와 RYGB의 기술 및 실험 세부 사항을 논의하고 동영상의 도움으로 이러한 절차를 용이하게하는 것을 목표로하고있다. 특정한 하이라이트 비타민, 철 결핍의 감소를 허용 수술 전 및 수술후 의료 프로토콜의 최적화에 대하여 설명한다.

<table><tbody><tr><td><스트롱>드럭</스트롱></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>고지방 다이어트</td>, <td>디오</td>다이어트, <td>세이프</td><td></td></tr>, <tr><td>이소플루란</td>, <td>포레인</td>, <td>박스터,</td><td></td></tr><tr><td>부프레노르핀,</td><td>부프리케어</td><td>, 애니멀케어</td><td></td>,</tr><tr><td>마보플록사신</td>, <td>마르보실,</td><td>베토퀴놀</td><td></td></tr>, <tr><td>암모늄, 구연산철, 비타민, PP-B12</td>, <td>페르콥상</td><td>베토퀴놀</td><td></td></tr><tr><td>비타민 A-D3-E-K-B</td><td>, 비타 롱거</td>, <td>비르박</td><td></td></tr>, <tr><td>NaCl 0.9%</td><td>NaCl, 0,9%</td><td></td><td></td></tr><tr><td>포비돈 용액</td><td>, 베타딘 스크럽</td>, <td>베타딘</td><td></td></tr><tr><td>포비돈 용액</td>, <td>베타</td>딘 용액, <td>베타딘</td><td></td></tr><tr><td>카밥톨 980 NF</td>, <td>오크리겔</td>, <td>TVM</td><td></td></tr><tr><td>Name </td><td>참조</td><td>Company</td><td>Comments</strong</td></tr><tr><td>>Sutures</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prolene&reg;</td><td>8.0, 6,5mm</td><td>Ethicon</td><td></td></tr><tr><td>Prolene&reg;</td><td>5.0, 13mm</td><td>Ethicon</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>References</td><td>Company</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Surgical equipments</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scissors</td><td></td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더</td><td>Olsen-Hegar</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 가위</td><td>Vannas</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 펜치&nbsp;</td><td>Graefe</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 집게 곡선</td><td>Graefe</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>곡선 마이크로 바늘 홀더</td><td>Castroviejo</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>지혈 콜라겐 압축</td><td>Pangen</td><td>Urgo</td><td></td></tr><tr><td>흡수 언더패드</td><td></td><td>VWR</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>References</td><td>회사</td><td>코멘트</td></tr><tr><td>특정 장비</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>혈액 시스템&nbsp;</td><td>Hemavet 950FS</td><td>Hemavet</td><td></td></tr><tr><td>포도당 스트립 및 포도당계</td><td>원터치 Verio</td><td>Life 스캔</td><td></td></tr><tr><td>스테레오 현미경</td><td>MZ6</td><td>Leica&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

소매 절제술의 기술 및 쥐에서 roux-en-y 위장 바이 패스를 수정

Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice

비만은 (2003 년부터 2008 년까지) 유럽 (4) 여성을위한 %, 36.5에 남성 28 %와 6.2의 보급과 함께, 주요 공중 보건 문제입니다. 병적 비만 자주 수명 및 품질을 감소 예컨대 제 2 형 당뇨병, 고혈압, 고지혈증 등의 대사성 합병증과 관련된다. 효과적인 침습적 치료의 부재에서 비만 수술은 병적 비만 환자 (신체 질량 지수 (BMI)&gt; 40kg / m 2)를위한 유용한 치료 옵션 장기 선도이다 대사성 합병증의 체중 감소 및 개선 지속 . 그러나 비만 수술의 유익한 효과를 유지하는 기본 세포 및 분자 메커니즘은 아직 완전히 이해되지 않습니다. 때문에 사용할 수있는 다수의 유전자 변형 종자에 마우스 모델은 비만 수술의다면 발현 유익한 효과 뒤에 분자 메커니즘을 탐구하는 가장 편리한 동물 모델입니다. 여기, 우리는 최적화 된 healthc 상세한소매 절제술과 수정 된 Roux-EN-Y 위장 바이 패스 : 두 가지 가장 널리 사용되는 비만 수술에 대한 쥐의 방법과 수술 프로토콜입니다. 비만 수술의 치료 효과를 기본 분자 메커니즘을 해독하는 새로운 치료제의 표적을 식별하는 약속을 제공합니다.

일반 조건 되어있는 SG 절차에 대한 평균 수술 시간은 49.3 ± 1.5 분이었다. 우리는 위의 약 80 % %를 나타냅니다 위의 62.8 ± 5.0 mg의 제거. 어떤 마우스는 수술 중 또는 다음의 7 일 동안 죽지 않았다. 하나의 마우스 (7.1 %)이 때문에 위석에 의한 위 폐색의 11 번째 수술 후 일에 사망했다. RYGB 절차에 대한 평균 수술 시간은 89.1 ± 2.8 분이었다. 사망률은 RYGB (; p = 0.038 66.6 % : RYGB 대 25 % 가짜) 후 유의하게 높았다. 수술 후 사망의 주요 원인이었다 문합 누출 (N = 8), 문합 협착 (N = 5), 마취...

비만 수술은 체중을 줄이고 병적 비만과 자주 관련된 치명적인 대사 합병증(당뇨병, 비만, 이상지질혈증)을 줄이는 가장 효율적인 방법입니다. 비만 수술의 마우스 모델은 당뇨병, 고혈압 및 이상지질혈증에 대한 이러한 수술의 유익한 효과 뒤에 있는 분자 메커니즘을 해독하기 위한 고유한 자산입니다.

소매 절제술의 기술 및 쥐에서 Roux-EN-Y 위장 바이 패스를 수정

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is ...

이러한 외과적 개입의 전반적인 목표는 마우스 모델에서 위소매절제술과 Roux-en-Y 우회술의 대사 효과를 측정하는 것입니다. 이 방법은 비만 및 신진대사 분야에서 비만 수술 후 관찰된 신진대사 이득에 관여하는 분자 메커니즘의 경로에 대한 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이러한 기술의 주요 장점은 마우스 모델에서 인간 환자에서 관찰된 바와 같이 비만 수술의 임상적 결과를 자극한다는 것입니다.위소매절제술은 발가락 꼬집기로 적절한 마취 수준을 확인한 후 마우스의 눈에 연고를 바르고 전기 면도기로 흉골부터 골반까지 복부를 면도합니다. 복부를 비닐 랩으로 덮고 동물을 가열 패드에 누운 자세로 놓습니다. 비닐 랩의 창을 자르고 포비돈 요오드 용액으로 피부를 소독하십시오.그런 다음 동물을 양안 현미경 아래에 놓고 메스를 사용하여 흉골에서 복부 중앙까지 정중선 피부를 절개합니다. 다음으로, 섭씨 37도의 식염수를 적신 멸균 찜질로 피부를 보호하고 면봉을 사용하여 위를 부드럽게 움직이고 장기를 측면의 폐쇄 결합 조직 부착물에서 해방시켜 완전한 외부화를 가능하게 합니다. 반사된 기관 뒤에 지혈 콜라겐 압박을 놓습니다.그런 다음 8.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 위의 더 큰 곡률을 따라 유문과 식도 혈관을 접합한 다음 위의 유문 영역과 심장 영역 사이의 해부학적 라인에 위절술을 합니다. 물에 적신 면봉 두 개를 사용하여 위 양쪽에 남아 있는 음식물을 제거합니다. 그런 다음 마이크로 가위를 사용하여 안저와 신체 사이의 경계를 따라 위를 자르고 위-식도 접합부에서 절개 끝까지 8.0 비흡수성 봉합사로 위 입구를 닫습니다.더 큰 곡률을 따라 위 절제를 완료하여 위의 약 80%를 제거하고 적절하게 지혈 콜라겐 찜질을 적용합니다. 또 다른 8.0 비흡수성 봉합사로 위의 유문 부위 입구를 막고 물에 적신 면봉 두 개를 위 양쪽으로 부드럽게 굴려 봉합사가 누출되지 않는지 확인합니다. 복강에서 지혈 콜라겐 압박을 제거하고 위를 원래 위치로 되돌려 봉합사에 대해 하나의 지혈 콜라겐 압박을 남깁니다.그런 다음 5.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 복벽과 피부의 근육층을 닫습니다. Roux-en-Y 위 우회술의 경우 흉골에서 복부 중앙까지 정중선 피부를 절개하여 섭씨 37도의 식염수를 적신 멸균 찜질로 피부를 보호합니다. 장을 외부화하고 유문에서 8cm를 측정합니다.5.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 8cm 표시의 양쪽에 있는 장에 두 개의 합자를 놓고 봉합사 사이의 조직을 자릅니다. 그런 다음 조직의 근위부를 복부의 왼쪽 상단 사분면에 배치하고 원위부를 근위부에서 6cm 아래 소화구를 향하게 합니다. 마이크로 가위를 사용하여 근위부와 장 루프를 모두 자르고 같은 길이의 장내 절개를 두 개 만듭니다.다음으로, 두 개의 8.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 좌우 문합을 만들고 등쪽 문합을 먼저 배치한 다음 복부 쪽 문합을 배치합니다. 문합 양쪽으로 적신 면봉 두 개를 부드럽게 굴려 봉합사가 누출되지 않는지 확인하고 방금 보여준 것처럼 위를 조심스럽게 외부화합니다. 재흡수 가능한 지혈 콜라겐 찜질을 장기 뒤에 놓고 구부러진 마이크로 집게를 사용하여 오멘텀을 통해 5.0 비흡수성 봉합사를 통과시켜 유문을 결찰합니다.유문과 말단에서 1.5cm 떨어진 복부 쪽을 잘라 같은 길이의 절개 부위를 두 개 만든 다음 두 개의 8.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 등쪽에서 복부까지 좌우 문합을 합니다. 봉합사가 새지 않는지 확인하십시오. 그런 다음 5.0 비흡수성 봉합사로 복벽과 피부의 근육층을 봉합하고 피하 주사를 통해 따뜻한 식염수 1kg당 25ml를 투여합니다.마우스가 마취에서 완전히 회복되면 동물을 섭씨 30도의 인큐베이터에 5일 동안 혼자 두면서 매일 철분과 비타민을 보충하고 진통제를 투여하고 처음 2일 동안은 젤 다이어트 식품을 무료로 제공합니다. 수술 후 3일째에는 동물의 식단에 고형 음식을 다시 도입하십시오. 임상시험계획서 전반에 걸쳐 수술 후 생존율의 점진적인 개선이 관찰되고 있으며, 이는 제한적 흡수 저하 비만 치료 또는 RYGB 수술 기법을 숙달하기 위해서는 집중적인 수술 훈련이 필요함을 나타냅니다.위소매절제술과 RYGB 마우스는 가짜 대조군에 비해 수술 후 14일 후에 상당한 체중 감소를 보였습니다. 위소매절제술 후 14일 동안 동물의 일일 음식 섭취량은 1/3 이상 감소하는 반면, 가짜 마우스와 RYGB 마우스 사이에서는 이러한 식욕 부진 효과가 관찰되지 않았습니다. 동물은 또한 두 가지 유형의 수술 후 포도당 내성이 개선되었습니다.또한, RYGB 마우스에서 관찰되는 중증 빈혈은 수술 후 최대 28일까지 철분 보충에 의해 개선됩니다. 이러한 기술을 숙달하면 제대로 수행되면 위소매절제술의 경우 50분 미만, 루엥와이(Roux-en-Y) 위 우회술의 경우 90분 이내에 완료할 수 있습니다. 이러한 절차를 시도하는 동안 수술 전후 관리 절차가 수술 기술만큼 중요하다는 점을 기억하는 것이 중요합니다.이러한 절차에 따라 담즙 전환 수술과 같은 다른 방법을 수행하여 비만 수술의 효과에 대한 담즙산의 예측 역할에 대한 추가 질문에 답할 수 있습니다. 개발 후 이러한 기술은 비만, 당뇨병, 고혈압 및 이상지질혈증 분야의 연구자들이 야생형 및 유전자 변형 마우스에서 유익한 대사 산물 기능의 메커니즘을 밝힐 수 있는 길을 열었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 마우스 모델에서 비만 수술을 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

techniques-sleeve-gastrectomy-modified-roux-en-y-gastric-bypass

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

위장 연결 쥐 모델을 이용하여 많은 연구가 최근 Roux-EN-Y 위장 작업의 기본 생리 메커니즘을 밝히기 위해 실시되었습니다. 이 문서는 입증이 실험 도구의 장점과 한계를 이해하기 위해 우리의 출판 위장 바이패스 쥐 모델의 기술적 및 실험적 세부 사항을 논의하는 것을 목표로하고있다.

쥐에서 Roux-EN-Y 위장 바이패스 수술

이 비디오에서는 실험용 마우스 모델에서 수직 소매 위 절제술 절차가 수행됩니다. 이 절차는 더 큰 곡률을 따라 위의 상당 부분을 제거하는 데 도움이 됩니다.

쥐 수직 소매 위 절제술: 실험용 마우스 모델에서 위를 축소하는 수술 절차

이 비디오는 비만 수술 - Roux-en-Y 절차에 대해 설명합니다. 이것은 장의 중간 부분인 제주눔(jejunum)을 잘라 두 개의 장 팔다리를 생성하는 것을 포함한다. 담도사지(biliary limb)는 기존 장 루프에 부착되고 소화 사지(alimentary limb)는 위에 부착되어 위 우회를 만듭니다. 여기에 생성된 위 우회로는 영양소 흡수를 줄이고 체중을 효율적으로 줄이는 데 도움이 됩니다.

Roux-en-Y 위 우회 시술: 쥐 모델에서 위 절제술을 위한 비만 수술 절차

다음에서는 쥐에 수직 소매 위절제술의 성능을 설명합니다. 복 부의 약 70%의 제거를 포함 하는 체중 감소 수술의 유형입니다.

수직 소매 위절제술의 Murine 모델

당뇨병과 비만의 보급은 전 세계적으로 지속적으로 증가하고 있습니다. 당뇨병, 비만 및 그들의 관련된 사망 및 공동 병위 사이 기계장치는 추가 조사될 필요가 있습니다. 여기서, 우리는 비만 수술의 단순한 전임상 모델로 동물에 있는 소매 위절제술 (SG)를 위한 프로토콜을 제시합니다.

외과 클립을 사용하여 마우스에 소매 위절제술

Roux-en-Y 위 우회 (RYGB)는 비만과 당뇨병을 치료하기 위해 수행됩니다. 그러나, RYGB의 효능의 기본 메커니즘은 완전히 이해되지 않습니다, 연구는 동물 모델에서 높은 사망률로 이어지는 기술적 인 어려움에 의해 제한됩니다. 이 문서에서는 성공률이 높은 쥐에서 RYGB를 수행하는 방법에 대한 지침을 제공합니다.

선형 스테이플러를 사용하여 쥐의 Roux-en-Y 위 우회에 대한 프로토콜

단일 문합 십이지장-회장 우회술(SADI-S)은 중요한 대사 효과가 있는 새로운 비만 절차입니다. 이 기사에서는 마우스에서 SADI-S의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델을 제시합니다.

생쥐의 단일 문합 십이지장-회장 우회술(Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice)

쥐 실험 심근 경색을 유발하는 데 사용되는 외과 수술은 심장과 왼쪽 폐의 앞쪽 표면을 시각화하기 위해 세 번째와 네 번째 갈비뼈 사이의 왼쪽 thoracotomy로 시작합니다. 왼쪽 관상 동맥이 출혈도 잡았되어 가슴이 폐쇄되고 마우스가 저절로 복구 할 수 있습니다.

마우스의 관상 동맥 결합에 대한 수정 기술

비 침습적으로 위 비우는의 결정...

를 사용하여 비 비만 당뇨병 마우스의 위 비우는의 평가 [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-octanoic 산성 호흡 시험

우리는 orthotopic 대동맥 이식 모델 마우스에 슬리브 기술을 사용 하 여 현재. 혈관 질환의 연구에 사용할 수 있는 매우 빠른 문 합 방법 이다.

대동맥 이식-교육용 비디오의 마우스 모델에서 소매 기법을 사용 하 여

학습하세요 쥐 모델에서 소매 절제술 및 Roux-en-Y 위장 바이패스 기술을 이용한 비만 대사 수술의 분자 메커니즘과 대사 효과를 연구하는 방법을.

소매 절제술의 기술 및 쥐에서 Roux-EN-Y 위장 바이 패스를 수정

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