2017년 10월 22일
우리는 orthotopic 대동맥 이식 모델 마우스에 슬리브 기술을 사용 하 여 현재. 혈관 질환의 연구에 사용할 수 있는 매우 빠른 문 합 방법 이다.
이 절차에서 기증자의 대동맥은 정형외과 위치에 놓이고 수유 용기에서 표재성 교합을 취합니다. 안면 마스크를 통해 1.5 부피 퍼센트의 이소플루란과 100% 산소의 혼합물로 마우스를 마취합니다. 누운 자세로 플랫폼에 마우스를 놓고 모든 다리를 수술대에 테이프로 붙입니다.
시술 중 건조를 방지하기 위해 눈에 안과 연고를 바르십시오. 반사 신경을 확인하고 뒷발을 꼬집어 마우스가 충분히 마취되었는지 확인합니다. 복부의 모든 털을 제거하십시오.
제모 크림을 바르거나 면도기를 사용하십시오. 멸균 상태에서 작업을 수행하십시오. 복부를 소독하십시오.
공여자의 대동맥을 제거하려면 복부 정중선을 절개하고 장을 수동으로 오른쪽으로 후퇴시킵니다. 파우더가 없는 장갑을 사용하여 장을 옆으로 부드럽게 수동으로 반사합니다. 식염수를 적신 거즈 조각에 장을 올려 촉촉하게 유지한다.
핀셋으로 둔기를 해부하여 주변 조직으로부터 복부 대동맥을 매우 조심스럽게 절개합니다. 핀셋으로 신장 동맥과 대정맥에서 분기점 사이의 대동맥 분절을 절개합니다. 11-0 모노필라멘트 단일 봉합사를 사용하여 이 세그먼트의 모든 작은 가지를 고정합니다.
대동맥을 제거하기 전에 헤파린 50단위가 함유된 식염수 0.5ml를 하대정맥에 주입합니다. 대동맥 분절이 제거되기 전에 기증 동물이 출혈하도록 합니다. 이식편을 식염수로 완전히 헹구고 그 후 즉시 얼음 차가운 식염수 용기에 넣으십시오.
수혜자를 준비하기 위해 안면 마스크를 통해 동물을 마취하고 털을 제거하고 위와 같이 소독한 후 메스로 xipoid에서 골반까지의 정중선을 절개합니다. 견인기로 복벽을 집어넣습니다. 식염수에 적신 거즈로 장을 싸서 동물의 오른쪽으로 아주 부드럽게 옮깁니다.
핀셋으로 신장 동맥 근위와 원위부 분기 사이의 대동맥을 자유롭게 절개합니다. 11-0 모노필라멘트 단일 봉합사를 사용하여 이 세그먼트의 모든 작은 가지를 고정합니다. 대동맥의 근위부와 원위부를 6-0 단일 실크 봉합사를 통해 고정합니다.
클램프 사이의 중간에 있는 대동맥을 나누고 절단된 끝 부분에 헤파린 식염수로 관개하여 내강을 플러시합니다. 이식편을 직교 위치에 놓습니다. 11-0 모노필라멘트를 사용하여 봉합사와 함께 슬리브 기술을 사용하여 문합을 수행합니다.
이 방법을 사용하면 공급 용기의 끝단이 수용 용기에 배치됩니다. infrarenal recipient 대동맥의 끝을 공여자 대동맥의 근위부 말단 내에 놓습니다. 같은 방법으로 원위 문합을 수행합니다.
기증자 대동맥의 원위부 끝을 수용자 대동맥의 원위부 말단 내에 놓습니다. 기증자와 수혜자 대동맥의 완벽한 정렬을 보장하여 대동맥의 비틀림을 피하도록 주의하십시오. 클램프가 해제되는 순간은 절차에서 매우 중요한 단계이며 매우 신중하게 수행해야 합니다.
문합이 정상인지 확인한 후 클램프를 해제합니다. 먼저 말단 클램프를 부드럽게 풀고 그 다음에 근위 클램프를 놓습니다. 이런 식으로 고압 측이 해제되기 전에 벽을 함께 고정하는 낮은 압력이 있습니다.
이식편은 즉시 관류되고 맥박이 보입니다. 실크의 잔여물을 부드럽게 제거합니다. 복부 내용물을 복강에 다시 넣고 3-0 폴리글리콜산 봉합사를 사용하여 상처를 봉합합니다.
마취를 종료하기 전에 마우스에 kg당 0.05mg의 부프레노르핀을 투여합니다. 이식 후 6주 후의 이식편과 초음파, 3차원 및 B 모드 뷰의 부검 사진을 제시합니다. 그림은 이식편의 개통을 보여줍니다.
이식편에 의해 표시되는 루멘 치수에는 변화가 없습니다. 또한, 협착증이나 동맥류 형성은 발견되지 않았습니다. 이식된 대동맥에서 조직학적 및 면역조직화학적 염색에 의한 유의미한 병변은 관찰되지 않았다.
핵은 DAPI에 의해 역염색되었습니다. 결론적으로, 이 매우 빠른 문합 방법은 유전자 조작 마우스의 혈관 질환을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.
본 논문은 빠른 문합이 가능한 슬리브 기법(sleeve technique)을 이용한 마우스의 정위 대동맥 이식 모델을 제시합니다. 이 방법은 혈관 질환 연구에 활용될 수 있습니다.
마우스의 정위성 대동맥 이식을 위한 슬리브 기법은 낮은 실패율과 함께 신속하고 재현 가능한 혈관 이식을 가능하게 하여, 혈관 생물학의 고효율 연구를 지원합니다. 이 모델은 전임상 혈관 질환 연구에서 기전적 위험 제거 및 표적 검증을 용이하게 하며, 유전적 및 약리학적 중재 방안을 평가하기 위한 견고한 플랫폼을 제공합니다. 조작의 간편함과 신뢰성 덕분에 이 기법은 심혈관 R&D의 포트폴리오 선별 및 중개 연구의 연속성 확보에 매우 가치가 있습니다.
이 마우스 대동맥 이식 모델은 기전 연구와 중개 검증을 연결함으로써, 혈관 질환 연구의 발견에서 전임상 단계에 이르는 연속 과정에 통합됩니다.