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DOI: 10.3791/54980-v
Snezana Vujicic*1,2, Lanfei Feng*1,2, Angelika Antoni3, Joyce Rauch4, Jerrold S. Levine1,2,5
1Section of Nephrology, Department of Medicine,University of Illinois at Chicago, 2Section of Nephrology, Department of Medicine,Jesse Brown Veterans Affairs Medical Center, 3Department of Biology,Kutztown University of Pennsylvania, 4Division of Rheumatology, Department of Medicine,Research Institute of the McGill University Health Centre, 5Department of Microbiology & Immunology,University of Illinois at Chicago
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines the determination of intracellular signaling events in viable cells that are induced by their physical interaction with adjacent dead or dying cells. It emphasizes receptor-mediated recognition rather than phagocytic uptake.
여기에서는 인접한 사멸 또는 죽어가는 세포와의 물리적 상호 작용에 의해 생존 가능한 세포에서 유도되는 세포 내 신호 전달 이벤트를 결정하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 프로토콜은 죽은 세포의 식세포 흡수 또는 용해성 매개체의 방출과 대조적으로 죽은 세포의 수용체 매개 인식에 의해 유도되는 신호 전달 이벤트에 중점을 둡니다.
이 절차의 전반적인 목표는 근처의 죽은 세포와의 물리적 상호 작용에 따라 유도되고 생존 가능한 반응 세포가 유발되는 신호 전달 이벤트를 식별하는 것입니다. 이 방법은 세포 생물학, 병리학 및 생리학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으며, 예를 들어 죽거나 죽어가는 세포가 살아있는 이웃에 미치는 영향과 같은 것입니다. 이 기술의 주요 장점은 간단하고 저렴하며 세포사멸을 겪는 이웃 세포와의 상호 작용에 따라 살아있는 세포에서 유도되는 생물학적 효과를 연구하는 데 적용할 수 있다는 것입니다.
이 기술을 시연할 사람은 제 연구실의 기술자인 란페이 펑(Lanfei Feng)입니다. BUNPT 세포를 100mm 진공 가스 플라즈마 처리된 조직 배양 접시에 전달한 후 이 절차를 시작하려면 배양 배지 A에서 배양 매체 A에서 5% 이산화탄소-대기를 결합하고 가습하여 섭씨 37도에서 성장시킵니다. 그 후, 부착 세포 단층을 배양 배지 B로 3 회 헹구고, 비선택적 단백질 키나아제 억제제 인 스타우로스포린을 함유 한 배양 배지 B에서 세포를 섭씨 37도에서 3 시간 동안 배양하여 세포 사멸을 유도합니다.
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