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Immunology and Infection
MicroRNAs 받 클래스 스위치 DNA 재조합 및 플라즈마 세포 차별화에 B 세포 유도에서 mRNAs의 게놈 넓은...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Genome-wide Analysis of HDAC Inhibitor-mediated Modulation of microRNAs and mRNAs in B Cells Induced to Undergo Class-switch DNA Recombination and Plasma Cell Differentiation

MicroRNAs 받 클래스 스위치 DNA 재조합 및 플라즈마 세포 차별화에 B 세포 유도에서 mRNAs의 게놈 넓은 분석의 HDAC 억제제 중재 변조

Full Text
6,575 Views
11:06 min
September 20, 2017

DOI: 10.3791/55135-v

Helia N. Sanchez1, Tian Shen1,2, Dawn Garcia1,3, Zhao Lai1,3, Paolo Casali1, Hong Zan1

1Department of Microbiology, Immunology and Molecular Genetics,University of Texas Long School of Medicine at San Antonio, 2Xiangya School of Medicine,Cental South University, 3Greehey Children’s Cancer Research Institute,University of Texas Long School of Medicine at San Antonio

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study investigates the epigenetic factors influencing B cell function, particularly focusing on antibody class-switching and plasma cell differentiation. By employing various techniques, including in vitro B-cell stimulation and high-throughput sequencing, the research aims to elucidate the modulation of gene expression in B cells.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Immunology
  • Epigenetics

Background

  • Epigenetic factors can modulate gene expression.
  • B cells play a crucial role in the immune response.
  • Understanding B cell differentiation is vital for immunological research.
  • HDAC inhibitors are known to affect gene expression in immune cells.

Purpose of Study

  • To analyze the epigenetic regulation of B cell functions.
  • To investigate the role of microRNAs in B cell differentiation.
  • To explore the effects of HDAC inhibitors on antibody class-switching.

Methods Used

  • In vitro stimulation of B lymphocytes.
  • Quantitative reverse transcription PCR (qRT-PCR).
  • High-throughput microRNA and mRNA sequencing.
  • Dissection and processing of mouse spleen samples.

Main Results

  • Identification of key microRNAs involved in B cell differentiation.
  • Demonstration of the impact of HDAC inhibitors on gene expression.
  • Insights into the epigenetic modulation of immunoglobulin class-switching.
  • Establishment of a method to study B cell functions effectively.

Conclusions

  • Epigenetic regulation is crucial for B cell function.
  • MicroRNAs play a significant role in antibody responses.
  • This study provides a framework for future research in immunology.

Frequently Asked Questions

What is the main focus of this study?
The study focuses on the epigenetic modulation of B cell functions, particularly in relation to antibody class-switching and plasma cell differentiation.
What methods were used in this research?
The research utilized in vitro B-cell stimulation, qRT-PCR, and high-throughput sequencing techniques.
Why are microRNAs important in this study?
MicroRNAs are crucial as they regulate gene expression and play a significant role in the differentiation of B cells.
What is the significance of HDAC inhibitors?
HDAC inhibitors are significant as they modulate gene expression and can influence B cell differentiation and function.
How does this study contribute to immunology?
This study provides insights into the epigenetic mechanisms governing B cell responses, which is vital for understanding immune responses.
What animal model was used in this research?
The study used specific pathogen-free C57BL6J mice for the experiments.

후 성적인 요소는 유전자 발현을 조절 하 고 B 세포 기능을 조절 하는 유전자 프로그램으로 작용할 수 있습니다. 결합 하 여 체 외에서 B 세포 자극, qRT-PCR, 및 높은 처리량 예측에 관한 시퀀스 및 mRNA 순서 접근, 우리 B 세포에서 miRNA 및 유전자 표현의 epigenetic 변조를 분석할 수 있습니다.

이 실험의 전반적인 목표는 B 림프구가 항체 클래스 전환 및 형질 세포 분화를 거치도록 유도하고 B 세포에서 HDAC 억제제 mRNA 및 microRNA의 발현에 의한 조절 및 후성유전학적 조절을 분석하는 것입니다. 이 방법은 면역글로불린 클래스 전환의 후성유전학적 조절 및 형질 세포 분화와 같은 B-세포 항체 반응 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 B 세포 기능을 조절하는 간단한 방법을 제공하고 후성유전학적 조절자에 의한 microRNA 및 mRNA의 변경을 정의하는 것입니다.

텍스트 프로토콜에 따라 특정 병원체가 없는 C57BL6J 마우스를 안락사시키고 피부를 살균한 후 오토클레이브 집게와 해부 가위를 사용하여 흉곽 바로 아래의 피부를 절단하여 복부 왼쪽, 간 바로 아래에 있는 비장을 시각화합니다. 장기를 적출하기 전에 비장을 부드럽게 고정하고 모든 연결 조직을 잘라냅니다. 그런 다음 비장을 1.5 밀리리터 마이크로 원심분리 튜브에 1, 000 마이크로리터의 완전한 RPMI 1640 배지가 들어 있는 튜브에 넣습니다.

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