Name: Unchelated 가돌리늄위한 앱 타머 기반 센서 (III) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: 학습하세요 형광 기반 분석법을 통해 수용액에서 독성 비킬레이트 가돌리늄(III) 이온을 검출하는 방법을. 아프타머 센서를 활용하여 아미크롤몰 농도에서도 높은 선택성으로 검출할 수 있습니다.

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귀중한 과학적 의견을 제시해 주신 뉴욕 컬럼비아 대학의 Milan N Stojanovic 박사님께 감사드립니다. 이 작업은 California State University East Bay(CSUEB)와 CSUEB Faculty Support Grant-Individual Researcher의 자금 지원을 받습니다. O.E., T.C. 및 AL은 CSUEB CSR(Center for Student Research) 펠로우십의 지원을 받았습니다.

참고 : 분자 생물학 수준의 물이 모든 버퍼 및 솔루션 준비에 사용됩니다. 모든 일회용 튜브 (마이크로 원심과 PCR) 및 피펫 팁 DNase-과의 RNase-무료입니다. 사용하기 전에 모든 화학 물질에 대한 물질 안전 보건 자료 (MSDS)를 참조하십시오. 적절한 개인 보호 장비 (PPE)를 사용하는 것이 좋습니다. 앱타 머는 재고 솔루션 1. 준비 <ol><li> 상업적으로 polydeoxynucleotide의 2 가닥을 구입합니다. 고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)로 정제와 두 가닥을 주문한다. 1 (GD-앱 타머를) 가닥 : 5 &#39;- / 56 FAM / AGGCTCTCGGGACGACCAGTTGGTCCCGCTTTATGTGTCCCGAG-3&#39; 스트랜드 2 (QS) : 5&#39;-GTCCCGAGAGCCT / 3Dab / -3 &#39; </li><li> 하나님 - 앱 타머 및 QS 100 μM 각각의 원액을 물에 각각의 가닥을 녹인다. </li><li> -20 ° C에서 이러한 솔루션을 저장합니다. 솔루션은 지금까지 3 년 동안 안정하다. </li><li> FREEZ을 최소화하기 위해전자 해동 사이클, 10 μL 씩의 주식 솔루션을 저장합니다. </li></ol> 2 배속 하나님 센서 솔루션의 2. 준비 <ol><li> 상기 분석 버퍼를 준비한다 (20 mM의 HEPES, 2 밀리미터의 MgCl 2, 150 mM의 염화나트륨, 5 mM의 KCl을). 수산화 나트륨과 염산으로 pH를에 ~ 7.4를 조정하고 0.2 μm의 PES 막으로 멸균 일회용 병 톱 필터를 통해 필터링합니다. 멸균 병에 보관합니다. 여과하고 (실온에서) 제대로 저장하는 경우, 버퍼는 지금까지 2 년 동안 안정하다. </li><li> 분석 버퍼 497 μL와 (단계 1.2)에 QS 원액의 2 μL (단계 1.2)에 하나님 - 앱 타머 주식 솔루션의 1 μL를 희석. 소용돌이를 사용하여 잘 섞는다. 배속 GD-센서 용액에서의 농도는 각각 200, 400㎚이다. 주 - 검량선 및 조영제 솔루션 3+ 하나님 7이 다양한 농도에서 제조 한 배 GD-센서 용액의 부피는 6을 테스트하기에 충분한 500 μL 인(단계 3). 각 샘플은 384 웰 플레이트에 중복 우물을 줄 것이다. <ol><li> 시험해야 하나님 3+ 솔루션의 수에 따라 2 배 GD-센서 용액의 양을 조정한다. </li></ol></li><li> 각 튜브에 50 μL로, 9 PCR 튜브에 2 배 하나님 센서 솔루션을 전송합니다. 열 자전거 타는 사람에 튜브를 놓습니다. </li><li> 95 ° C로 튜브 용액을 가열하는 열 자전거 타는 사람에 프로그램을 설정, 5 분 동안 유지 한 후 천천히의 속도로 (15 분 ~ 동안 25 ° C에 솔루션을 냉각 ~ 0.05-0.1 ° C / 에스). 가열 및 냉각 사이클은 하나님-앱 타머와 QS 사이의 최적의 하이브리드을 보장하는 것입니다. 불완전 담금질하고 센서의 높은 배경 형광 부분 혼성화 결과. 열 사이 클러를 사용할 수없는 경우, 대신에 뜨거운 물이 욕을 사용하여이 과정을 수행한다. </li><li> 일단 25 ℃까지 냉각하고, 즉시 용액을 사용하거나 할 준비가 될 때까지 (약 2 시간까지) 열 사이 클러에 보관익숙한. 수욕은 가열에 사용하는 경우에는 물을 서서히 실온으로 냉각대로 용기에 튜브를 떠난다. </li></ol> 3. 형광 교정 곡선을 구축하고 하나님 대비 에이전트의 솔루션에 3+ Unchelated 하나님의 존재를 감지 <ol><li> 상기 분석 버퍼 고체 GdCl 3 (단계 2.1에서와 같은 버퍼)에 녹인다. </li><li> 시리얼 희석 통해 검량선 (2 × 용액)에 대해 원하는 최종 농도의 100 배에 μL 마이크로 원심 튜브 6 다른 하나님 3+ 용액을 각각 준비한다. <ol><li> 예를 들어, 0에 대한 보정을 구성, 50, 100, 200, 400 (NO GdCl 3 만 버퍼링)하고 하나님 3+ 800 nM의 0, 100, 200, 400, 800 및 1600 nM의 함유 용액을 제조 이온의. 확인은 음성 대조군 0 nM의 하나님 3+와 &#39;빈&#39;을 항상 포함 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 시험 될 조영제 녹이고분석 버퍼에 에드. 일련의 희석을 통해 조영제 용액의 2 또는 3 개의 농도를 준비한다. 참고 : 조영제 솔루션의 3 가지 농도를 테스트하는 것이 좋습니다. 이것은 이러한 농도는 선형 범위 내에 있도록한다. 선형 관계를 표시하지 않은 시험 샘플은, 조영제의 농도를 감소하는 경우 사용된다. </li><li> 열 자전거 타는 사람 중 단계 2.5에서 2 배 하나님 센서 솔루션을 포함하는 PCR 튜브를 타고. </li><li> 2 배속 하나님 센서 솔루션을 포함하는 9 PCR 튜브 (6)에 단계 3.2에서 각각 하나님 3+ 용액 50 μL를 추가합니다. 로 pipetting 아래로 섞는다. 각 PCR 튜브는 이제 원하는 하나님 3+의 농도를 테스트 할, 100 nm의 하나님 - 앱 타머, 200 nm의 QS가 포함되어 있습니다. </li><li> 배속 GD-센서 함유 용액 나머지 PCR 튜브에 단계 3.3에서 조영제 용액 50 μL를 추가한다. 최대 피펫 팅에 의해 몇 번 아래로 잘 섞는다. </li><li> 의 S를 품어실온에서 약 5 분 동안 PCR 튜브에 olutions. 그들은 최대 30 분 동안 방치 될 수있다. </li><li> 384 웰 플레이트에 각 튜브의 45 μL를 전송합니다. 각 PCR 튜브 중복 우물을 줄 것이다. </li><li> 접시 리더에 각 웰의 형광을 기록합니다. 공급 업체의 웹 사이트에 나와있는대로 하나님 센서 설계에 사용되는 형광 물질 (FAM)는 각각 495과 520 나노 미터의 여기 및 방출 최대 값을 갖는다. 판 독자가 monochromator- 또는 필터 기반인지에 따라 적합한 여기 및 방출 파장 또는 필터를 선택합니다. </li><li> 하나님 3+의 농도에 대한 임의의 형광 단위 (AFU)에서 형광의 그래프를 플롯. </li><li> 하나님 3+의 농도에 대한 형광 배 변화와 그래프를 플롯. (하나님의 영 nM의 3 이상 포함) &#39;빈&#39;솔루션의 AFU 각 농도의 AFU을 나누어 형광 배의 변화를 계산한다. 형광 배의 변화는 N을 허용합니다결과 ormalization의 AFU 표시 일부주기 (다른 일 등)가 유사해야한다. </li><li> 이 0 ㎚ GdCl 3 (단 버퍼)를 함유하는 용액 인 조영제를 함유하는 용액과 &quot;빈&quot;의 형광 방출을 비교한다. 주 : GBCA 용액 높은 형광 조영제의 추가의 정제를 필요로 할 수있다 unchelated 하나님 3+의 존재를 의미한다. unchelated 하나님 3+의 양은 단계 3.10 3.11 구성된 검량선을 이용하여 추정 될 수있다. </li></ol>

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</ol>

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

앱타 머는 기반 GD-센서 관측 unchelated 하나님 3+의 농도에 비례하는 형광 방출의 증가 사용. 사용한 시료의 양을 최소화하기 위해, 분석은 웰 당 45 μL의 총 샘플 부피의 384 웰 마이크로 플레이트에서 실행될 수있다. 이 설계에서, 플루오 레세 인 (FAM) 및 dabcyl DAB ()의 선택은 주로 시약의 비용에 기초 하였다 발광 파장, 형광의 다른 쌍을 수정 및 소광 제 (11)를 사용할 수있다. 이것은 센서 최상의 결과를 얻을 것을 주목하는 것이 중요하다 중요한 단계 중 하나는 GD-앱 타머 및 QS 사이의 최적의 하이브리드 화를 달성하는 분석 완충액에서 95 ° C 및 서냉 (단계 2.4)에 대한 가열은 가닥. 이전의 프로토콜에서 언급 한 바와 같이 열 순환기를 사용할 수없는 경우, 95 ℃에서 항온 수조에서 수행 될 수있다. 제어하는 또 다른 주요 매개 변수는 t입니다그 버퍼 용액의 조성; 조영제를 용해 단계 ...

기술의 고유의 감도에 의해 제한된다 임상 진단에서 자기 공명 영상 (MRI)의 중요성이 증가는 신규 가돌리늄 계 조영제 (GBCAs 1)의 개발에 대한 연구의 빠른 성장을 가져왔다. GBCAs은 이미지 품질을 개선하기 위해 투여되는 분자이며, 그들은 일반적으로 여러 자리 리간드에 배위 3가 가돌리늄 이온 (하나님 3+)의 화학 구조를 갖는다. 이 복합체는 독성 3+ unchelated 하나님으로 매우 중요합니다; 이는 신장 질환 또는 장애이 일부 환자에서 신원 성 전신 섬유증의 발병과 연관되어있다. 따라서, 수성 자유 이온을 검출하는 GBCAs의 안전을 확보하는 수단이있다. GBCA 솔루션 unchelated 하나님 3+의 존재는 종종 리간드 및 이온 복합체의 해리 또는 displacemen 간의 불완전한 반응의 결과다른 생물학적 금속 양이온 (3)에 의한 t. 현재 하나님 3+, 융통성 및 적응성 (4)의 측면에서 크로마토 그래피 및 / 또는 분광 최고 순위를 의존들의 존재를 결정하기 위해 사용하는 여러 기술 중. 강점 중 높은 감도 및 정확도 (리스트를, 복수 하나님 3+ 복합체의 동시 정량 (인간 혈청 5 소변 헤어 6 폐수 7 및 조영제 제제 8 등) 다양한 시료 매트릭스를 분석하는 능력이다 연구의 2013 년 이전은 Telgmann 등.) (4)에 의해 종합적인 검토에 설명되어 있습니다. 유일한 단점은 이들 방법 중 몇몇은 몇몇 실험실에 액세스 할 수있다 (예 : 유도 결합 플라즈마 질량 분석)을 측정 장치 (4)를 필요로한다는 것이다. 연구 및 개념 증명 수준 AR에 참신한 GBCA 검색의 맥락elatively 더욱 편리하고 신속하고 비용 효율적인 분광 기반 방법 (예 : 비스 - UV 흡수 또는 형광 등) 유용한 대안이 될 수있다. 마음에 이러한 응용 프로그램으로, 수성 하나님 3+에 대한 형광 앱 타머 기반 센서 (9)을 개발 하였다. 앱 타머 (GD-앱 타머)는 지수 농축 (SELEX) (9)에 의한 리간드의 체계적인 진화의 과정을 통해 분리하여 염기의 특정 순서와 44 염기 길이의 단일 가닥 DNA 분자이다. 형광 센서에 앱 타머에 적응하기 위해, 형광 물질은 13 상보적인 염기 (도 1)를 통해 급냉 스트랜드 (QS)와 혼성화되는 가닥의 5 &#39;말단에 부착된다. QS는 3 &#39;말단에 어두운 소광 분자 태그입니다. 1 이루어지는 하나님 3+ 센서 (GD-센서)의 부재에있어서 : 각각 GD-앱 타머 및 QS 2 몰비 최소 형광 방출 인해 t있을 것이다소광에 형광에서 오 에너지 전달. 수성 하나님 3+의 첨가는 형광 방출 증가의 결과로, GD-앱 타머에서 QS를 대체 할 것이다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/55216/55216fig1.jpg" /> 형광 (형광)과 dabcyl 태그로 13베이스 긴 담금질 가닥 (QS) 태그로 44베이스 긴 앱 타머 (GD-앱 타머) (어두운 소광)로 구성되어 그림 1. 센서 (하나님 센서) . unchelated 하나님 3+의 부재에서, 센서의 형광이 최소이다. 하나님 3+의 첨가에 의해, QS의 변위가 발생하고, 형광 발광의 증가가 관찰된다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55216/55216fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 현재 존재 한 일반적으로 사용되는 광학적 기반 방법에 대한 검출수성 하나님의 3 이상을 보내고. 이 분석은 이온 10 킬에 따라 433 nm의 573에서 최대 흡수 파장의 변화를 겪는다 분자 크 실레 놀 오렌지를 사용합니다. 이들 두 흡수 최대 값의 비율은 unchelated 하나님 3+의 양을 정량화 할 수있다. 두 가지 방법은, 타겟 선택도, 정량 분석의 선형 범위 및 검출 양상 (예 : pH 및 사용되는 버퍼 용액의 조성과 같은) 상이한 반응 조건을 가지고, 상기 앱 타머 센서는 크 실레 놀 오렌지 분석에 대한 대안 (또는 보완 될 수있다)는 9.

<table><tbody><tr><td>Gd-aptamer</td><td>IDTDNA</td><td>입력 서열 및 형광단 변형 순서 형태</td><td>: 방출 파장이 다른 형광단을 사용할 수 있습니다. 압타머는 다른 회사에서 주문할 수도 있습니다.</td></tr><tr><td>담금질 가닥</td><td>IDTDNA</td><td>주문 형태의 입력 서열 및 담금질 변형</td><td>형광단과의 최적 에너지 전달을 위한 다른 담금질제가 사용될 수 있습니다. 압타머는 다른 회사에서 주문할 수도 있습니다.</td></tr><tr><td>분자 생물학 등급 물</td><td></td><td></td><td>특정 제조업체 없음, DEPC 또는 비 DEPC 처리 모두 똑같이 잘 작동합니다</td></tr><tr><td>가돌리늄 (III) 염화물 무수</td><td>스트렘</td><td>936416</td><td>독성</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP310-500</td><td></td></tr><tr><td>염화 마그네슘 무수</td><td>MP Biomedicals</td><td>0520984480 - 100g</td><td></td></tr><tr><td>염화나트륨</td><td>Acros 유기물</td><td></td><td></td>327300025</tr><tr><td>염화칼</td>륨 <td>Fisher Scientific</td><td>P333-500</td><td></td></tr><tr><td>수산화나트륨, 펠릿</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP359</td><td>부식성</td></tr><tr><td>염산</td><td>Fisher Scientific</td><td>SA49</td><td>독성 및 부식성</td></tr><tr><td>384웰 낮은 플랜지 검은색 평면 바닥 폴리스티렌 NBS 플레이트</td> 형광에 적합한 <td>Corning</td><td>3575</td><td>플레이트 독서가 필요합니다.</td></tr><tr><td>Nalgene Rapid-Flow 멸균 일회용 보틀 탑 필터</td><td>Thermo Scientific</td><td>5680020</td><td>보틀 탑에는 0.2 미크론 PES 멤브레인이 장착되어 있습니다</td></tr>. <tr><td>일회용 멸균 병 250 mL</td><td>Corning</td><td>430281</td><td>크거나 작은 병을 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>1.5 mL 마이크로 원심분리기 튜브</td><td></td><td></td><td>DNAse 및 RNAse가 없는</td></tr><tr><td>0.2 mL PCR 튜브</td><td></td><td></td><td>인 경우 특정 제조업체 없음DNAse 및 RNAse가 없는</td></tr><tr><td>Micropipets</td><td></td><td></td><td>특정 제조업체 없음</td></tr><tr><td>적절한 크기의</td><td></td><td></td> 특정 제조업체 Pipet 팁(비필터) <td>DNAse 및 RNAse가 없는</td></tr> <tr><td>한Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plate reader</td><td>Biotek Synergy H1</td><td></td><td>다른 제조업체의 플레이트 리더도 똑같이 잘 작동합니다</td></tr></tbody></table>

unchelated 가돌리늄위한 앱 타머 기반 센서 (iii)

An Aptamer-based Sensor for Unchelated Gadolinium(III)

수용액에서 킬레이트화되지 않은 3가 가돌리늄 이온(Gd3+)의 존재를 결정하는 방법이 시연됩니다. Gd3+는 종종 리간드와 이온 사이의 불완전한 반응의 결과 또는 해리 산물로 가돌리늄 기반 조영제 샘플에 존재합니다. 이온은 독성이 있기 때문에 검출이 매우 중요합니다. 여기에서는 Gd3+용 압타머 기반 센서(Gd-sensor)의 설계 및 사용에 대해 설명합니다. 센서는 이온 농도 증가에 대한 반응으로 형광 변화를 일으키며 나노몰 범위(신호 대 잡음비 3, ~100nM)에서 검출 한계가 있습니다. 분석은 384웰 마이크로플레이트의 주변 pH(~7 - 7.4)에서 수성 완충액에서 실행할 수 있습니다. 이 센서는 나트륨, 칼륨 및 칼슘 이온과 같은 다른 생리학적으로 관련된 금속 이온에 대해 상대적으로 반응하지 않지만, 유로퓸(III) 및 테르븀(III)과 같은 다른 3가 란탄족에 비해 Gd3+에 특이적이지는 않습니다. 그럼에도 불구하고, 란탄족은 조영제 또는 생물학적 시스템에서 일반적으로 발견되지 않으며, 따라서 센서는 수성 조건에서 킬레이트화되지 않은 Gd3+를 선택적으로 측정하기 위해 사용될 수 있습니다.

unchelated 하나님 3+의 존재 GD-센서 용액의 전형적인 형광 변화는도 2에 도시되어있다. 방출은 형광 배 변화 (그림 2A) 또는 임의의 단위로 읽기 원시 형광 (그림 2B)로 나타내 어질 수 (AFU). 두 플롯&gt; 3 μM에서 신호의 1 μM 및 채도 아래 하나님의 농도에 대한 선형 범위 3+와 매우 유사 교정 곡선을 얻었다. 검출 한계는 3 신호대 잡음비와 ~ 100 ㎚이다. 관심 GBCA를 함유하는 용액에서 unchelated 하나님 3+의 존재는 &quot;빈&quot;솔루션에 비해 센서의 형광의 증가로 변환된다. 하나님-DOTA 단지, 다른 것보다 더 높은 순도의 하나의 2 개의 다른 배...

수용액에서 킬레이트화되지 않은 가돌리늄(III) 이온을 감지하기 위한 폴리데옥시뉴클레오티드(44-mer aptamer) 분자의 사용에 대해 설명합니다. 이온의 존재는 센서의 형광 방출의 증가를 통해 감지됩니다.

Unchelated 가돌리늄위한 앱 타머 기반 센서 (III)

A method for determining the presence of unchelated trivalent gadolinium ion (Gd3+) in aqueous solution is demonstrated. Gd3+ is often present in samples ...

이 형광 기반 분석법의 전반적인 목표는 자기공명영상(MRI) 조영제가 포함된 수용액 내에서 독성 비킬레이트 가돌리늄 이온의 존재를 검출하는 것입니다. 이 방법은 합성된 조영제의 높은 순도를 보장하는 수단을 제공함으로써 가돌리늄 기반 MRI 조영제의 활용을 촉진할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 다른 생물학적 금속 양이온에 비해 상대적으로 높은 선택성을 가지며, 서브마이크로몰 농도의 독성 비킬레이트 가돌리늄을 검출할 수 있다는 점입니다.이 절차를 시작하려면 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 분석 버퍼를 준비하십시오. 수산화나트륨과 염산을 사용하여 pH를 7.4로 조정합니다. 그런 다음 0.2 micron PES 막이 장착된 멸균 일회용 보틀탑 필터로 버퍼를 여과하십시오.다음으로, 497 µL의 분석 버퍼를 새로운 미세 원심분리 튜브로 옮깁니다. 준비된 가돌리늄 압타머 스톡 용액 1 µL와 준비된 QS 스톡 용액 2 µL를 추가합니다. 이 2X 가돌리늄 센서 용액 50 µL를 9개의 PCR 튜브에 각각 나누어 넣습니다.그 후, 튜브를 열 순환기(thermal cycler)에 넣습니다. 열 순환기를 설정하여 샘플을 95 °C에서 5분 동안 가열한 다음, 15분에 걸쳐 용액을 25 °C까지 천천히 냉각합니다. 가돌리늄 이온 용액을 추가하기 전에 2X 가돌리늄 센서 용액을 95 °C로 가열한 후 실온까지 천천히 냉각하는 것이 중요합니다.먼저, 고체 염화 가돌리늄을 분석 완충액에 녹여 원하는 농도의 가돌리늄 3 표준 용액을 만듭니다. 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 연속 희석법을 사용하여 100 µL의 가돌리늄 3 용액 6종을 준비합니다. 그 후, 테스트할 조영제를 분석 완충액에 녹입니다.단계별 희석을 통해 세 가지 다른 농도를 준비합니다. 그런 다음, 2X 가돌리늄 센서 용액이 들어 있는 PCR 튜브를 열 순환기에서 꺼냅니다. 각 가돌리늄 용액 50 microliters를 각각 다른 PCR 튜브로 옮깁니다.각 용액을 여러 번 파이펫팅하여 혼합합니다. 다음으로, 각각의 대조제 용액 50 µL를 남은 PCR 튜브에 각각 분주합니다. 여러 번 파이펫팅하여 혼합합니다.9가지 모든 용액을 실온에서 5분 동안 배양합니다. 그 후, 각 용액 45 µL를 384-웰 플레이트에 이중으로 분주합니다. 그런 다음, 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 형광 데이터를 기록하고 분석합니다.본 연구에서는 형광 기반 방법을 사용하여 수성 용액 내의 비킬레이트된 3가 가돌리늄 이온을 검출합니다. 형광 센서는 압타머에 형광체를 부착하여 개발되었습니다. 이후 이 센서를 다크 퀀처 분자가 표지된 소광 가닥과 혼성화시킵니다.gadolinium three를 첨가하면 퀀칭 가닥이 압타머에서 밀려나며 형광 방출이 증가합니다. 100 nanomolar gadolinium 압타머와 200 nanomolar QS를 사용하여 검정 곡선을 얻고, 가공되지 않은 형광 값 또는 형광 배수 변화로 플롯합니다. 두 곡선 모두 gadolinium three 농도가 1 micromolar 미만인 구간에서 선형 범위를 보이며, 3 micromolar 이상의 농도에서는 신호 포화 상태가 됩니다.그 후 두 개의 서로 다른 gadoteric acid 배치를 0 millimolar에서 20 millimolar 범위의 농도로 분석합니다. 고순도 샘플의 형광 방출은 이 범위에서 눈에 띄게 증가하지 않는 반면, 5 millimolar만큼 낮은 농도에서도 킬레이트화되지 않은 gadolinium 세 가지를 포함하는 샘플에서는 상당한 변화가 관찰됩니다. 이 절차를 수행할 때, 마이크로플레이트의 웰에 기포가 없도록 하는 것이 중요한데, 기포가 있을 경우 형광 측정값이 달라질 수 있기 때문입니다.이 절차를 통해 조영제가 포함된 용액 내에서 계산된 소량의 가돌리늄 이온까지 검출할 수 있을 것입니다. 이는 조영제의 순도를 결정하는 유용한 방법이 될 것입니다. 화학 물질을 다루는 것은 위험할 수 있으므로, 이 절차를 수행하는 동안 개인 보호 장비를 착용하는 것과 같은 예방 조치를 취하는 것이 중요합니다.

an-aptamer-based-sensor-for-unchelated-gadolinium-iii

Research

연구

JoVE Journal

Chemistry

화학

우리는 metalation, 정화 및 란탄족 단지의 특성을 보여줍니다. 여기에서 설명한 단지는 자기 공명 영상을 사용하여 이러한 분자의 추적 활성화 macromolecules하는 복합 수 있습니다.

자기 공명 영상 준비, 정화하고, 명암 요원 이용 란탄족 단지의 특성화

쥐 전립선 암 모델에서 종양 침윤에 응고 된 혈장 단백질에 특정한 MRI 조영제를 대상으로 작은 펩티드와 암 MR 분자 이미징을 입증.

작은 분자 CLT1 펩타이드 표적 조영제와 전립선 암의 MR 분자 영상

조정 가능한 엄격성 마그네틱 비드 선택 방법을 기반으로 저분자 타겟에 대한 구조 스위칭 압타머를 선택하기 위한 프로토콜이 제공됩니다. 구조 스위칭 특성으로 선택된 Aptamers는 설명된 금 나노입자 분석과 같이 표적의 존재를 알리기 위해 구조적 변화가 필요한 분석에 유용합니다.

색채 금 나노 입자 분석에 적용 구조 전환 앱 타머를 선택하는 방법

이 프로토콜은 생체 기능화된 프러시안 블루 나노 입자의 합성과 다중 모드 분자 이미징 에이전트로서의 사용을 설명합니다. 나노 입자는 나노 입자 코어 내의 가돌리늄 또는 망간 이온이 MRI 대비를 생성하는 코어 쉘 설계를 가지고 있습니다. 생체 기능 쉘에는 형광 이미징을 위한 형광단과 분자 표적화를 위한 표적 리간드가 포함되어 있습니다.

멀티 모달 분자 이미징 애플리케이션을위한 Biofunctionalized 프 러시안 블루 나노 입자

MRI 호환 주문 설계된 레이저 기반의 가열 장치는 특히 종양 영역에서 감온 리포좀 제제로부터의 방출을 활성화하기 위해 피하 종양 국소 가열을 제공하기 위해 개발되었다.

자기 공명 이미지 지침에 열성 리포좀에서 시스플라틴의 트리거 된 릴리스를위한 맞춤 설계 레이저 기반의 가열 장치

인 - 필드 응용을위한 작은 분자 검출하는 앱 타머 - 금 나노 입자의 비색 분석의 디자인 및 개발 평가 하였다. 또한, 스마트 디바이스 측색 프로그램 (APP)이 유효하고, 분석의 장기 보존이 분야에 사용하기 위해 설립되었다.

인 - 더 - 필드 응용 프로그램에 대한 설계 및 앱 타머 - 금 나노 입자 기반 비색 분석법 개발

EOB-DTPA의 분리 및 후속 착화 천연의 Ga (III) 및 (68)의 Ga 명세서 제시뿐만 아니라 표지 효율 모든 화합물 및 조사의 철저한 분석 시험 관내 안정성 및 N- 옥탄 올 / 물하는 수순 방사성 표지 복합체의 분배비.

EOB-DTPA와의 조지아 (III) 단지에 대한 조사 그것<sup&gt; (68)</sup&gt; 조지아 방사성 표지 된 아날로그

이 프로토콜은 상자성 가돌리늄 이온을 배위 cyclen 계 마크로 킬레이트를 운반하는 덴드리머 자기 공명 영상 (MRI) 조영제의 제조 및 특성을 설명한다. 시판되는 모노머 아날로그에 비해 시험 관내 MRI의 일련의 실험에서이 에이전트는 MRI 증폭 신호를 생성했다.

준비 및<em&gt; 체외</em&gt; 자기 공명 영상에 대한 덴드리머 기반 대조 대리인의 특성

생체 외에서 선택 및 그룹 관련 phthalic 산 에스테 르-바인딩 DNA aptamers의 특성화에 대 한 프로토콜 제공 됩니다. 전기 aptasensor에서 선택 된 aptamer의 응용 프로그램이 포함 되어 있습니다.

Phthalic 산 에스테 르-바인딩 DNA Aptamer 선택, 특성, 및 전기 화학 Aptasensor 응용 프로그램

여기, 우리 제시를 프로토콜68가 코어 첨가 산화 철 나노 입자를 통해 빠른 전자 레인지 기반 합성. 애완 동물을 렌더링 하는 방법론/radiolabeling 90%와 99 %20 분 합성에서의 방사선 화학 순수성 보다 높은 효율성을 (T1) MRI 나노 입자.

이중 양전자 방출 단층 촬영에 대 한 68가 코어 첨가 산화 철 나노 입자의 합성 / (T1) 자기 공명 이미징

이 연구는 섬유아세포 활성화 단백질의 PET 이미징을 위해 GAIA V2 신디사이저를 사용한 [68Ga]Ga-3BP-3940 생산을 위한 자동화 프로세스를 설명합니다. 3개의 테스트 배치에 대해 수행된 품질 관리 테스트의 결과도 제공됩니다.

종양 미세환경의 PET 이미징을 위한 합성 모듈에서 [68Ga]Ga-3BP-3940의 자동 제조

학습하세요 형광 기반 분석법을 통해 수용액에서 독성 비킬레이트 가돌리늄(III) 이온을 검출하는 방법을. 아프타머 센서를 활용하여 아미크롤몰 농도에서도 높은 선택성으로 검출할 수 있습니다.

Unchelated 가돌리늄위한 앱 타머 기반 센서 (III)

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