A Rapid Automated Protocol for Muscle Fiber Population Analysis in Rat Muscle Cross Sections Using Myosin Heavy Chain Immunohistochemistry

Konstantin D. Bergmeister; Marion Gr&#246;ger; Martin Aman; Anna Willensdorfer; Krisztina Manzano-Szalai; Stefan Salminger; Oskar C. Aszmann

doi:10.3791/55441

마이 오신 중쇄 면역를 사용하여 쥐의 근육 크로스 섹션에서 근육 섬유 인구 분석을위한 신속한 자동화 ...

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A Rapid Automated Protocol for Muscle Fiber Population Analysis in Rat Muscle Cross Sections Using Myosin Heavy Chain Immunohistochemistry

마이 오신 중쇄 면역를 사용하여 쥐의 근육 크로스 섹션에서 근육 섬유 인구 분석을위한 신속한 자동화 프로토콜

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05:57 min

March 28, 2017

DOI: 10.3791/55441-v

Konstantin D. Bergmeister^1,3, Marion Gröger², Martin Aman¹, Anna Willensdorfer¹, Krisztina Manzano-Szalai¹, Stefan Salminger¹, Oskar C. Aszmann¹

¹CD Laboratory for the Restoration of Extremity Function, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Department of Surgery,Medical University of Vienna, ²Core Facility Imaging, Core Facilities,Medical University Vienna, ³Department of Hand, Plastic and Reconstructive Surgery, Burn Center, BG Trauma Center Ludwigshafen, Plastic and Hand Surgery,University of Heidelberg

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여기에서는 개선 된 염색 품질함으로써 자동 취득하고 자유롭게 사용할 수있는 소프트웨어를 사용 ImageJ에 섬유 집단의 정량화를 허용 빠른 근섬유 분석을위한 프로토콜을 제시한다.

이 방법의 전반적인 목표는 오픈 소스 플랫폼을 사용하여 자동적이고 사용자 독립적인 방식으로 전체 쥐 근육의 근육 섬유 정량화를 빠르고 안정적으로 안내하는 것입니다. 이 방법은 신경근 분야에서 노화, 질병 또는 골격근의 외상 결함에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 근육 섬유 집단을 안정적으로 분석하고 근육 단면의 고품질 이미지를 생성하는 데 사용할 수 있다는 것입니다.

충분히 해동한 후 Triton X 또는 PBST가 보충된 PBS에서 검체를 10분 및 5분 세척 1회 위해 조심스럽게 헹굽니다. 두 번째 세척 후 섹션을 2분 동안 자연 건조시킵니다. 그런 다음 소수성 펜을 사용하여 개별 단면을 둘러쌉니다.

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