Name: 생선 기름 보충제의 지질 프로필의 신속한 평가를위한 강력한 도구로 NMR 분광학 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-01T11:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: 배우세요 생선 기름 보충제의 지질 프로필 분석을 위한 고분해능 1H 및 13C NMR 분광법을 사용하는 방법입니다. 이 기술은 분리 및 정제 단계 없이 빠르고 강력한 정량 및 정성 분석을 제공하여 영양학 연구에 유용한 정보를 제공합니다.

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이 작품은 오하이오 주립 대학의 건강 검색 테마에 대한 식품 및 오하이오 주립 대학의 식품 과학 기술의 부에 의해 지원되었다. 저자는 오하이오 주립 대학의 NMR 시설 및 펜실베니아 주립 대학의 NMR 시설을 감사드립니다.

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</ol>

저자가 공개하는 게 없다.

문제 해결에 대한 수정 및 전략 스펙트럼 품질. NMR의 신호에 따라서 NMR 스펙트럼 해상도의 선폭은 자기장의 균일 성을 최적화하는 처리 인 shimming에 크게 의존한다. 일상적인 분석을 위해, 1 차원 shimming 적절한 차원이고 shimming는 그것을 정기적 NMR 요원에 의해 수행되는 것을 고려할 필요는 없다. O (90:10) 2 D : 그렇지 않은 경우, 3 차원 shimming는 H 2 O 0.6 mL를 함유하는 샘플을 사용하여 분석 전에 수행되어야한다. A는보다 빠르고 shimming 달성하기 위해, 샘플은이 자석 구멍에 배치되기 전에 경사 깊이 게이지를 사용하여 무선 주파수 (RF) 코일의 여기 / 검출 영역의 중심으로 할 필요가있다. shimming에 영향을 미치는 또 다른 요인은 10 ~ 20 Hz의 회전 속도로 샘플을 회전합니다. 이 스핀 속도로 샘플을 회전하는 반경 방향 쐐기 향상...

다이어트 N -3 지방산의 섭취는 심장 질환 1, 2, 3, 4 및 염증 질환, 당뇨병 (5)와 같은 여러 조건에 대해 유익한 것으로 입증되었다. 서양 다이어트를 n -3 지방산 가난한 간주되며, 따라서 생선 기름 보충제의 소비가 N을 개선하는 것이 좋습니다 10-6 / N -3 소비자의 영양 1 균형. 생선 오일 보충 소비 최근의 증가에도 불구하고, 질문이 일부 제품의 안전성, 신뢰성 및 품질에 대해 남아있다. 생선 기름 보충제의 신속하고 정확한 성분 분석이 제대로이 상용 제품의 품질을 평가하고 소비자의 안전을 보장하기 위해 필수적이다. 생선 오일 보충의 평가를위한 가장 일반적인 방법S는 가스 크로마토 그래피 (GC) 및 적외선 분광법 (IR)이다. 이들은 매우 민감한 방법이지만, 그들은 몇 가지 단점 6에서 고통 받고 있습니다. GC 분석은 개개의 화합물의 분리 및 유도체 7 요구되며 지질 산화가 분석 8,9 중에 발생할 수 있기 때문에 시간 소모적 (4-8 시간)이다. IR 분광법은 정량적 일 수 있지만, 예측 모델은 IR 대역은 단일 화합물 (10)에 기인 할 수있는 예외가 있지만, 부분 최소 제곱 회귀 (PLSR)를 이용하여 구성 될 필요가있다. PLSR는 분석 11 시간을 증가 샘플들의 다수의 분석을 요구한다. 이러한 이유로, 생선 기름 샘플의 많은 수의 정확하고 빠른 분석을 수 있도록 새로운 분석 방법의 개발에 대한 관심이 높아지고있다. 같은 작정으로 조직건강 (NIH)과 식품의 약국 (FDA)의 국립 연구소에서 천연 보조제 (ODS)의 CE는 이러한 새로운 방법 (12), (13)을 개발하기 위해 공식 분석 화학자 협회 (AOAC)와 협력했다. 스크리닝 및 영양 보조제와 같은 다 성분 행렬의 평가를위한 가장 유망한 분석 방법 중 하나는, 핵 자기 공명 (NMR) 스펙트럼 (14) (15)이다. NMR 스펙트럼은 몇 가지 장점을 갖는다 : 그것은 비파괴 양적 기술은, 그것이없는 샘플 준비에 필요 최소한이며, 우수한 정확도 및 재현성을 특징으로한다. 이 용매의 소량을 사용하기 때문에 또한, NMR 분광법은 환경 친화적 인 방법입니다. NMR 분광법의 주요 단점은 다른 analyti에 비해 상대적으로 낮은 감도CAL 방법은, 그러나, 강력한 자기장, 다양한 직경의 극저온 프로브 향상된 데이터 처리하고 다양한 펄스 시퀀스와 같은 기술 장비의 최근 기술의 발전은 나노 미터 범위까지 감도가 증가하고있다. NMR 계측은 높은 비용이지만, NMR 분광계의 긴 수명 및 NMR의 많은 응용 프로그램이 장기적으로 분석의 비용을 절감. 상세한 영상 프로토콜 필드에 새로운 실무자 1 H 및 어유 보충제 13 개 C NMR 분광 분석과 관련된 함정을 방지하기위한 것이다.

<table><tbody><tr><td>Avance III 850 NMR 기기</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avance III 500 NMR 기기</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TCI 5mm 프로브</td><td>Bruker</td><td></td><td>헬륨 냉각 역 (양성자 디텍트) NMR 프로브 3 개의 독립 채널 (1H, 13C, 15N)</td></tr> <tr><td>BBO 신동 5mm 프로브</td><td>Bruker</td><td></td><td>질소 냉각 관찰 (X-핵 검출) 프로브, 두 개의 채널을 특징으로합니다. 하나는 1H 및 19F 검출을 위한 것이고 다른 하나는 X-핵(15N에서 31P)를 커버</td></tr>하는 스피<tr><td>너 터빈</td><td>Bruker</td><td></td><td>NMR 스피너는 고분자 재료로 만들어지며 NMR 튜브를 제자리에 단단히 고정하기 위한 고무 O-링이 있습니다</td></tr>. <tr><td>Topspin 3.5</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>중수소화 클로로포름</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp; 865-49-6</td><td>99.8 원자 % D, 0.03 TMS</td></tr><tr><td>2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>를 포함합니다. 128-37-0</td><td>순도 >99%</td></tr><tr><td>생선 기름 샘플</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NMR 튜브</td><td>New Era</td><td>NE-RG5-7</td><td>5mm OD 루틴 " R&rdquo; 시리즈 NMR 샘플 튜브</td></tr><tr><td>BSMS</td><td>Bruker</td><td></td><td>Bruker 시스템 관리 시스템; 제어 시스템 장치</td></tr></tbody></table>

생선 기름 보충제의 지질 프로필의 신속한 평가를위한 강력한 도구로 nmr 분광학

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

서쪽 다이어트 때문에 생선 기름 보충제의 섭취가 이러한 필수 영양소의 섭취를 증가하는 것이 좋습니다, n은 -3 지방산에 좋지 않습니다. 이 연구의 목적은 고해상도 1 H NMR 및 두 개의 다른기구를 이용하여 13 C NMR 스펙트럼을 사용하여 캡슐화 어유 보충제의 정성 및 정량 분석을 설명한다; 500 MHz와 850 MHz의 악기. 양자 모두 (1 H)와 탄소 (C 13) NMR 스펙트럼 어유 보충제의 주요 성분의 정량에 이용 될 수있다. 어유 보충제의 지질 정량 관련 1D 스펙트럼에서 해당 NMR 신호의 통합을 통해 달성된다. 1 H, 13 C NMR에 의해 얻어진 결과는 두 핵 두 기기 사이의 해상도와 감도의 차이에도 불구하고, 서로 잘 일치한다. 1 H NMR 쿠폰스펙트럼 1 시간 10 분간 지속에서 13 개 C NMR 분석 달리 1 분 미만에 기록 될 수있는 SA보다 신속한 분석은, 13 C NMR 비교. 13 C NMR 스펙트럼은, 그러나, 더 유익하다. 그것은 개인 지방산의 더 많은 양이 많은 데이터를 제공 할 수 있고, 글리세린 골격에 지방산의 위치 분포를 결정하기 위해 사용될 수있다. 두 핵은 정제 또는 분리 단계의 필요없이 하나의 실험에 정량적 인 정보를 제공 할 수 있습니다. 자기장의 세기가 거의 인해 13 C NMR에 대하여 그 하부 해상도로 1 H의 NMR 스펙트럼에 영향을 미치는, 그러나, 더 낮은 비용 NMR 장비 효율적 식품 산업 및 품질 관리 연구소에 의한 표준 방식으로 적용될 수있다.

1 H, 13 C NMR 스펙트럼은 두 NMR 장비를 이용하여 시판 어유 보충제 회수하고; 850 MHz와 500 MHz의 분석 장치. 이러한 스펙트럼은 이러한 도코 사 헥사 엔 산 (DHA) 및 에이코 사 펜타 엔 산 (EPA), 예컨대 N과 같은 N -1 아실 체인 및 영양 중요한 지표뿐만 아니라 다른 화합물 생선 기름 성분의 정량에 이용 될 수 -6 / N 비 -3. 정량 심지어 내부 표준을 사용하지 않고 수행 될 수 있지만, 정량적 인 결과를 상대 몰 백분율로 표현되어야한다. 데이터의 절대 값 (밀리그램 / g)로 표현 될 필요가있을 때, 내부 표준이 필요하다. NMR에 의해 얻어진 결과는 t에 따라, 0.3 % 내지 13 C NMR 분석을 위해 2 %, 0.5 % 내지 1 H NMR 분석을 2.5 % 범위의 상대 표준 편차 (RSD)를...

여기서, 고해상도 1 H, 13 C 핵 자기 공명 (NMR) 분광법은 캡슐화 어유 보충제의 정성 및 정량 분석을위한 신속하고 신뢰할 수있는 도구로서 사용되었다.

생선 기름 보충제의 지질 프로필의 신속한 평가를위한 강력한 도구로 NMR 분광학

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential ...

이 방법의 전반적인 목표는 핵자기공명(Nuclear Magnetic Resonance) 분광법을 이용하여 어유 보충제의 지질 프로필을 결정하는 것입니다. 이 방법은 어유 보충제의 지질 함량 및 글리세롤 골격에서 다양한 지방산의 위치 분포와 같은 지질 분석의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 분리 및 정제 단계 없이 한 번의 스냅샷으로 여러 가지 서로 다른 분자를 신속하고 견고하게 분석하는 것이 가능하다는 점입니다.양성자와 탄소 NMR 분석을 위한 시료를 준비하려면, 먼저 주사기를 사용하여 식이 캡슐에서 어유 약 110 mg에 해당하는 120 µL를 추출하여 4-mL 유리 바이알에 넣습니다. 어유의 무게를 기록합니다. 100 mg ± 10 mg의 어유를 용해시키기 위해 500 µL의 BHT 스톡 용액을 사용합니다.오일을 용해시킨 후, 용액 전체를 고품질의 5 mm NMR 튜브에 직접 옮기고 캡을 닫습니다. 시료 준비 후 24시간 이내에 분석을 수행하십시오. NMR 튜브를 스피너 터빈에 삽입합니다.스피너와 튜브를 단계별 깊이 측정기 위에 놓고, 튜브 하단이 측정기 바닥에 닿을 때까지 튜브 윗부분을 부드럽게 누릅니다. 그런 다음 NMR 튜브를 샘플 케이스의 빈 공간에 넣습니다. 샘플이 배치된 슬롯 번호를 기록하십시오.NMR 기기에 시료를 로드하려면 제어 컴퓨터로 돌아가 SX-번호를 입력하십시오. 여기서 번호는 시료 케이스 내 시료가 들어 있는 슬롯 번호입니다. 화면에 중수소화 클로로포름의 중수소 신호가 나타날 때까지 기다리십시오. 중수소 신호가 보이면 명령줄에 lock을 입력하고 용매 목록에서 중수소화 클로로포름을 선택하여 중수소 공명을 이용해 시료를 락(lock)하십시오.명령줄에 "bsmsdisp"를 입력하여 스피닝이 활성화되어 있지 않은지 확인하십시오. 스핀 버튼이 녹색인 경우, 버튼을 클릭하여 스피닝을 비활성화하십시오. 새로운 데이터 세트를 생성하기 위해 "new" 명령어를 입력한 후, name 탭에 데이터 세트 이름을 입력하고 EXPNO라고 표시된 실험 번호 탭에 실험 번호를 입력하십시오.PROCNO라고 명명된 프로세스 번호 탭에 숫자 1을 입력하십시오. TITLE 탭에 실험 제목을 작성하십시오. Experiment 탭에서 Select를 누르고 C13IG 파라미터 파일을 선택하십시오.그런 다음 editor에서 Set selected item을 누르고 OK를 클릭합니다. 현

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Research

연구

JoVE Journal

Chemistry

화학

미생물 planktonic 커뮤니티에서 신진 대사 추출을위한 방법을 설명하고있다. 전체 지역 사회의 샘플링 특별히 준비 필터로 여과에 의해 이루어진다. lyophilization 후 수성 - 용해 metabolites가 추출됩니다. 이 접근법은 자연이나 실험적인 미생물 커뮤니티의 횡단 omics 조사에 환경 metabolomics의 적용을 허용합니다.

핵 자기 공명 분광학을 사용하여 환경 Metabolomics를위한 낮은 밀도 Planktonic 커뮤니티에서 Metabolites의 농도

진보 식민 절차는 더욱 호스트 간장 대사에 미치는 영향을 평가하기 위해 설명되어 있습니다. 간장 신진 대사가 고해상도 매직 앵글 스피닝 (HR의 MAS) 그대로 생검의 NMR 프로 파일링에 의해 평가하는 동안 식민지는 NMR 기반의 신진 대사 프로 파일링 공동 metabolites 미생물의 비뇨기 배설을 평가하여 invasively 아닌 모니터입니다.

하여 세균없는 마우스 프로 그레시브 콜로니 동안 간장 신진 대사 변경 사항 평가 1 H NMR 분광학

기계적 세포 파괴, 용매 기반 지질 추출, 에스테르 교환 반응 및 정량 가스 크로마토 그래피를 사용하여 지방산의 식별에 기초하여 미세 조류의 지방산 함량 및 조성의 결정을위한 방법을 설명한다. tripentadecanoin 내부 표준 물질은 추출과 불완전 에스테르 교환시 가능한 손실을 보상하기 위해 사용된다.

미세 조류의 지방산 콘텐츠 및 조성 분석

나일 레드 염색 절차를 사용하여 조류 세포의 중성 지질 함량을 결정하기위한 간단한 프로토콜을 설명한다. 이 시간을 절약 할 수있는 기술은 기존의 중량 측정 기반 지질 정량 프로토콜에 대한 대안을 제공합니다. 그것은 모니터링 생물 공정 성능의 특정 애플리케이션을 위해 설계되었다.

형광을 사용하여 조류 세포에서 중성 지질을 측정하기위한 간단하고 빠른 프로토콜

포유류 뇌의 신경 화학은 많은 신경 및 전신 질환에서 변화합니다. 대뇌 대사 산물의 특징적인 프로파일은 뇌 조직의 미가공 추출물을 기반으로 효율적으로 얻을 수 있습니다. 이를 위해 고해상도 NMR 분광법을 사용하여 대사 산물 농도(대사체학)에 대한 상세한 정량 분석이 가능합니다.

조직 추출물의 고해상도 핵 자기 공명 분광법에 의한 쥐 뇌의 대사 체 분석

이 프로토콜 자연 유기 물질과 다른 생태계에서 미생물 단백질의 완전 한 쌍 특성에 culminating 보완 분석 및 omics 기술에 대 한 단일 처리량을 설명 합니다. 이 이렇게 강력한 비교 대사 경로 및 변환을 설명 하는 온실 가스 생산 및 환경 변화에 대 한 응답을 예측에 대 한 중요 한 식별 수 있습니다.

복잡 한 자연 유기 물질 혼합물을 특성화에 대 한 단일 처리량 보완 고해상도 분석 기법

이 기사에서는 지질학 및 전사학, 그리고 지질의 근본적인 염증 및 신경 활동, 막 지질, 다운스트림 메신저 및 mRNA 인코딩 효소/수용체를 대상으로 하는 신경 질환 마우스 모델의 혈장 지질학에 대한 모듈식 프로토콜을 제시합니다. 샘플링, 샘플 처리, 추출 및 정량화 절차가 설명되어 있습니다.

신경 질환의 리피도혈 및 전사학

자극라만 산란 (SRS) 현미경 검사법은 특정 화학 적 moieties의 선택적, 라벨없는 이미징을 허용하고 효과적으로 생체 내에서 지질 분자를 이미지하기 위해 사용되었습니다. 여기에서, 우리는 SRS 현미경 검사법의 원리에 대한 간략한 소개를 제공하고 Caenorhabditis elegans에있는 지질 저장에 그것의 사용을 위한 방법을 기술합니다.

자극라만 산란 현미경 검사를 사용하여 Caenorhabditis elegans의 지질 저장 역학의 라벨 프리 이미징

이 프로토콜은 해수 및 생물학적 표본에서 지질의 결정을 위한 것입니다. 여과류의 지질은 고체의 경우 클로로폼 또는 클로로폼및 메탄올혼합물로 추출됩니다. 지질 클래스는 화염 이온화 감지와 막대 얇은 층 크로마토그래피에 의해 측정되고 그들의 합계는 총 지질 함량을 제공합니다.

해양 샘플의 총 지질 및 지질 수업 결정

Shotgun 질량분석법 기반 지질체학은 다양한 설치류 조직에서 한 번의 측정으로 광범위한 지질 등급에 대한 민감한 정량적 스냅샷을 동시에 제공합니다.

설치류 조직의 산탄총 지질체

배우세요 생선 기름 보충제의 지질 프로필 분석을 위한 고분해능 1H 및 13C NMR 분광법을 사용하는 방법입니다. 이 기술은 분리 및 정제 단계 없이 빠르고 강력한 정량 및 정성 분석을 제공하여 영양학 연구에 유용한 정보를 제공합니다.

생선 기름 보충제의 지질 프로필의 신속한 평가를위한 강력한 도구로 NMR 분광학

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